目的 探讨白藜芦醇对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响及对NOD样受体蛋白结构域相关蛋白3(NOD like receptor pyrin domain containing 3,NLRP3)炎性体轴的调节作用.方法 将50只大鼠随机分为假手术组、模型组和白藜芦醇低、高剂量组及地塞米松组,每组10只,除假手术组大鼠外,其余组大鼠通过牛黄胆酸钠逆行胰胆管注射制备SAP模型.手术结束5 min后,白藜芦醇低、高剂量组分别腹腔注射白藜芦醇30、60 mg·kg-1,地塞米松组大鼠腹腔注射地塞米松2 mg·kg-1,每日1次,连续给药3 d,假手术组和模型组大鼠腹腔注射等量生理盐水.检测大鼠血清中淀粉酶和脂肪酶活性,白细胞介素(IL)-1β、IL-18和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)含量,检测胰腺组织病理损伤并进行病理评分,胰腺腺泡细胞凋亡指数以及NLRP3、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 1(caspase-1)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的蛋白相对表达量.结果 假手术组大鼠胰腺组织结构正常,无水肿、充血或坏死;模型组胰腺间质水肿,肺泡间隔变宽,可见大量炎性细胞浸润,实质出现点状或片状出血或坏死;白藜芦醇低、高剂量组和地塞米松组胰腺组织病变程度均减轻.与假手术组比较,模型组淀粉酶和脂肪酶活性,IL-1β、IL-18和TNF-α含量,组织病理评分,细胞凋亡指数及NLRP3、caspase-1和Bax蛋白的相对表达量均升高,Bcl-2蛋白相对表达量降低(P<0.05);与模型组比较,白藜芦醇低、高剂量组和地塞米松组淀粉酶和脂肪酶活性,IL-1β、IL-18和TNF-α含量,组织病理评分,细胞凋亡指数及NLRP3、caspase-1和Bax蛋白的相对表达量均降低,Bcl-2蛋白相对表达量升高(P<0.05);与白藜芦醇低剂量组比较,高剂量组和地塞米松组淀粉酶和脂肪酶活性,IL-1β、IL-18和TNF-α含量,组织病理评分,细胞凋亡指数及NLRP3、caspase-1和Bax蛋白的相对表达量均降低,Bcl-2蛋白相对表达量升高(P<0.05);与白藜芦醇高剂量组比较,地塞米松组淀粉酶和脂肪酶活性,IL-1β、IL-18和TNF-α含量,组织病理评分,细胞凋亡指数及NLRP3、caspase-1和Bax蛋白的相对表达量均降低,Bcl-2蛋白相对表达量升高(P<0.05).结论 白藜芦醇可减轻SAP大鼠胰腺损伤,抑制胰腺腺泡细胞凋亡,其可能是通过阻碍NLRP3炎性体轴激活发挥作用的.

为研究低水温下鳜饥饿状态下的生理动态变化过程,选取体重(84.13±0.14)g的鳜270尾,随机分成6组,每组3个重复,每个重复15尾鱼,于低水温(13±1)℃下分别饥饿0、3d、6d、9d、12d和15d,每隔3d分别测定相关生理生化指标.结果显示:(1)随着饥饿时间延长,鳜体质量、肥满度、肝体比、脏体比、肌肉的蛋白和脂肪含量都呈逐渐下降趋势,其中体质量下降幅度较大,饥饿3d、6d、9d、12d、15d分别下降了3.03％、3.82％、5.55％、7.68％和8.39％.(2)鳜血液中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性随饥饿时间延长呈现先下降后上升趋势,饥饿3d时达到最小值.血糖含量在饥饿6d时显著上升(P＜0.05),随后维持在一定的水平范围.碱性磷酸酶活性、甘油三酯、总胆固醇、高、低密度脂蛋白胆固醇含量呈整体下降趋势.(3)鳜胃蛋白酶、胃H+-K+-ATP酶及肠道和幽门盲囊的胰蛋白酶、脂肪酶活性随饥饿时间的延长呈总体下降趋势,且均在饥饿15d时达到最小值,其中胃H+-K+-ATP酶活性下降幅度最为显著;而淀粉酶活性在饥饿前期稳定,后期下降.(4)鳜肝脏抗氧化能力随饥饿时间延长先上升后下降,并在饥饿15d时下降到最低值.研究表明:在低水温下,鳜短期饥饿出现体质量负增长、体型变瘦和肝脏相对变小现象;饥饿前3d优先利用肌肉脂肪供能,后期优先利用肌肉蛋白质供能;饥饿6d时鳜肝脏抗氧化能力有改善,但饥饿时间过长鳜的消化和抗氧化机能明显下降,并反馈性抑制胃酸的分泌,可能与胃黏膜的保护相关.

目的 探讨低氧预处理胎盘间充质干细胞(HP-MSCs)对小鼠重症急性胰腺炎(SAP)组织损伤的保护作用,并探索其可能机制.方法 分别于常氧(21%O2)和低氧(1%O2)培养 48h的胎盘间充质干细胞(P-MSCs),获得常压和低氧预处理胎盘间充质干细胞(N-MSCs 和 HP-MSCs),CCK-8 和 MTT 法检测 P-MSCs 活力与迁移能力;C57BL/6 雄性小鼠 32 只,分为假手术组(sham)、SAP组(胰胆管逆行注射 4%牛磺胆酸钠 0.1 mL/100 g)、常氧组(N-MSCs)和低氧组(HP-MSCs).造模结束后 6h,经尾静脉注射N-MSCs和HP-MSCs(1×106 个/100 g)干预SAP,每组 8 只.在造模后 12h收集血清和胰腺组织.HE染色评估胰腺组织损伤程度并进行病理评分;ELISA测定血清淀粉酶、脂肪酶活性及炎性因子水平;Western blot检测受体相互作用蛋白 3(RIP3)、MLKL、MLKL的磷酸化含量(p-MLKL)、NLRP3 在胰腺组织中的表达.结果 HP-MSCs在体外表现出较N-MSCs更好的活力、增殖能力;在小鼠体内,与SAP组相比,N-MSCs组中胰腺病理评分降低(P＜0.05),血清中淀粉酶、脂肪酶活性降低,IL-6、TNF-α水平降低(P＜0.05);与N-MSCs组相比,HP-MSCs组中胰腺病理评分降低(P＜0.05),炎性因子TNF-α、IL-6 水平降低(P＜0.05).在HP-MSCs中,RIP3、p-MLKL、NLRP3 在胰腺组织的表达中明显低于SAP 组与N-MSCs组(P＜0.05).结论 HP-MSCs 较N-MSCs更能显著减轻 SAP,其机制可能与抑制RIP1/RIP3-MLKL信号通路发挥其作用有关.

目的:探讨密花香薷粗提物体外对酶抑制的作用,初步阐明其对代谢综合征的药效物质基础.方法:体外测定密花香薷粗提物及其不同萃取部位对多种酶活性的抑制率,与阳性对照比较IC50值,高效液相色谱法测定密花香薷中主成分含量.分子对接计算主成分与酶抑制作用相关目标基因的结合能.结果:密花香薷粗提物对α-淀粉酶、黄嘌呤氧化酶、胰脂肪酶、乙酰胆碱酯酶均有一定的抑制作用,IC50值分别为0.199 mg/mL、0.254 mg/mL、0.258 mg/mL、0.057 mg/mL.密花香薷乙酸乙酯部分对酶抑制作用最强,其中含量最高为绿原酸57.40 mg/g和槲皮素37.51 mg/g.分子对接发现绿原酸、槲皮素与以上代谢综合征酶抑制作用相关目标基因结合作用良好.结论:密花香薷粗提物对代谢综合征相关多种酶有一定的抑制活性,初步认为密花香薷治疗代谢综合征的药效物质基础可能为绿原酸与槲皮素.

目的 探讨双氯芬酸钠对雨蛙肽诱导小鼠急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)的作用及可能机制.方法 采用C57 BL/6小鼠通过腹腔注射雨蛙肽方法建立AP模型,实验分为正常对照组、AP组、AP+双氯芬酸钠组.AP组小鼠雨蛙肽50μg/kg腹腔注射,1次/h,共7次;AP+双氯芬酸钠组小鼠在雨蛙肽注射前1h腹腔注射15 mg/kg双氯芬酸钠1次;正常对照组腹腔注射相同体积的生理盐水.留取血清采用比色法检测淀粉酶、脂肪酶活性,采用ELISA方法检测白介素(Interleukin,IL)-1、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)及非甾体类抗炎药激活基因-1(NSAIDs activity gene-1,NAG-1)水平,采用RT-PCR及Western Blot方法检测NAG-1mRNA和蛋白表达量;制备胰腺和肺组织匀浆,采用ELISA方法检测IL-1βκ、IL-6、IL-8、TNF-α及NAG-1水平,采用比色法检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性,采用RT-PCR和Western Blot方法检测NAG-1mRNA和蛋白表达量;测量胰腺、肺湿重与小鼠体重比;胰腺和肺组织HE染色观察病理学改变.结果 AP组血清淀粉酶及脂肪酶活性、胰腺和肺湿重与小鼠体重比均较正常对照组高(P＜0.05),AP+双氯芬酸钠组较AP组不同程度降低(P＜0.05).AP+双氯芬酸钠组胰腺和肺部病理炎症反应较AP组减轻,病理评分差异具有统计学意义(P＜0.01).AP组血清胰腺和肺匀浆IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平和胰腺和肺匀浆MPO活性均较正常对照组不同程度升高(P＜0.05),AP+双氯芬酸钠组上述指标较AP组不同程度降低(P＜0.05).三组血清中NAG-1表达的差别无统计学意义(P＞0.05).在胰腺和肺组织中,AP组NAG-1水平较正常对照组升高(P＜0.05),AP+双氯芬酸钠组较AP组升高(P＜0.05).在血浆、胰腺和肺组织中,AP组NAG-1mRNA和蛋白表达水平较正常对照组不同程度升高(P＜0.01;P＜0.05),AP+双氯芬酸钠组较AP组不同程度升高(P＜0.01;P＜0.05).结论 双氯芬酸钠可减轻AP小鼠炎症反应及肺损伤程度,机制可能与促进NAG-1表达、抑制炎症介质合成有关.

病例1 患者女,82岁.因"腹痛3 h"收入院.既往有胆囊结石、胆囊炎病史5年,10年来有多次胰腺炎发作病史,有高血压、腔隙性脑梗塞、高脂血症病史.入院查体:急性痛苦面容,巩膜无黄染,心肺(-),腹软,中上腹压痛,无反跳痛,肠鸣音减弱.入院后查血常规白细胞9.45×109/L,血红蛋白104 g/L,中性粒细胞百分比(N%)90.19%,肝功能正常,血淀粉酶1 198.9U/L,脂肪酶860.6 U/L.上腹部CT提示胆囊多发结石,慢性胆囊炎;慢性胰腺炎.MRCP 示胆囊多发结石并胆囊炎;慢性胰腺炎并主胰管明显扩张;完全型胰腺分裂症.临床诊断为慢性胰腺炎急性发作,胰腺分裂症.入院后给予禁食、胃肠减压、抑制胰酶分泌、抑制胰酶活性、抑酸、抗炎、补液等治疗,第6天行ERCP,术中未能发现副乳头及开口,遂经EUS引导下以19 G穿刺针穿刺胰腺尾部主胰管,造影证实进入主胰管后循穿刺针插入导丝,后者沿主胰管经副乳头进入肠腔,十二指肠镜下用圈套器捕捉导丝形成对接,ERCP 示背侧主胰管与腹侧主胰管无交通,行副乳头切开,取石球囊取出些许白色蛋白栓结石,后置入单猪尾胰管支架(7 Fr,15 cm)及鼻空肠管(图1A~图1F),术中诊断:1.胰腺分裂症(完全型);2.慢性胰腺炎,胰管泥沙结石.术后未出现胰腺炎、穿孔及出血等并发症,1周后患者症状完全缓解出院.术后至今随访14个月,患者症状无复发.

目的:考察新疆两色金鸡菊模拟茶饮水提取物清除自由基、胰脂肪酶活性抑制能力,并对其成分进行HPLC分析.方法:采用去离子纯净水煎煮两色金鸡菊获得模拟茶饮水提取物.对模拟茶饮水提取物进行DPPH、ABTS+·、·OH和NO·自由基的清除能力考察;同时考察模拟茶饮水提取物对胰脂肪酶活性抑制能力;使用HPLC法分析模拟茶饮水提取物中的主要物质成分.结果:模拟茶饮水提取物对DPPH自由基的清除能力(SC50)为(228.6±4.61) μg·mL-1;对ABTS+·自由基的清除能力(SC50)为(128.4±5.83) μg·mL-1;对·OH自由基的清除能力(SC50)为(22.41±1.13) μg·mL-1;对NO·自由基的清除能力(SC50)为(149.8±11.6) μg·mL-1;对胰脂肪酶活性抑制能力(IC50)为(366.4±8.12) μg·mL-1.经HPLC成分分析,模拟茶饮水提取物主要含有绿原酸、黄诺马苷、栎草亭-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、马里苷、异奥卡宁和奥卡宁等成分.结论:新疆两色金鸡菊模拟茶饮水提取物具有一定的自由基清除能力,同时具有一定的抑制胰脂肪酶活性的能力.

硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,Txnip)可通过与硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)相互作用产生二硫键抑制其还原酶活性,在调节细胞氧化还原平衡中起重要作用.近年来,Txnip因为在葡萄糖和脂肪代谢中的重要调节作用,以及与胰腺β细胞功能障碍和细胞凋亡的密切关系而受到广泛关注,Txnip也被认为是2型糖尿病防治的一个新的明星分子.本文拟就国内外有关Txnip与胰腺β细胞功能障碍和细胞凋亡的相关研究进展做一综述.

目的 探讨地参游离酚对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶活性的抑制作用.方法 采用福林-酚法测定地参游离酚的酚含量,并采用HPLC对其酚类化合物进行分析.通过体外实验,以抑制率为指标,测定地参游离酚对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶活性的抑制作用.结果 地参游离酚的酚含量为502.33～ 586.53μg GAE/mg EDW,主要酚类化合物是迷迭香酸,含量为319.70～ 400.46 μg/mg EDW;地参游离酚对α-葡萄糖苷酶及胰脂肪酶均有抑制作用,且呈现剂量-效应关系.地参游离酚抑制α-葡萄糖苷酶的IC50值范围为0.238 4～1.2818 g/L,抑制胰脂肪酶的IC50值范围为2.030 5～3.042 7 g/L.结论 地参游离酚对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶活性有抑制作用,可作为α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶抑制剂.

本研究旨在制备植物提取物微胶囊并将其与植物复合制备具有一定减肥效果的可用于紧身衣、塑身内衣等的缓释织物.采用界面聚合法以聚乙烯醇为壁材制备了植物提取物(PLE)微胶囊.通过直接涂层的方法将其与涤纶水刺非织造布复合.使用SEM、TG、紫外-可见分光光度计,PhabrOmeter风格仪等测试并评价了微胶囊形貌、耐热性、缓释性能、织物的形貌、服用性能、胰脂肪酶活性抑制率以及微缓释复合织物的最佳制备工艺.结果显示,微胶囊表面光滑圆整,具有较好的热稳定性、缓释性及脂肪酶活性抑制性能;在微胶囊质量分数为4％,热风烘干条件下制备的缓释复合织物具有较好的服用性能以及脂肪酶活性抑制效果,可作为贴衬用于紧身衣,塑身内衣等服装上,起到一定的辅助效果.