目的:比较细胞增殖相关基因 Twist1、SIRT1、FGF2、TGF-β3在胎盘、脐带和乳牙3种间充质干细胞中的表达差异，分析其对3种间充质干细胞的增殖调控作用。 方法:通过显微镜对不同传代次数的3种间充质干细胞的形态结构进行比较；经过体外传代培养，利用荧光定量PCR测定细胞增殖相关基因 Twist1、SIRT1、FGF2、TGF-β3的表达水平；采用MTT法检测并比较分析3种间充质干细胞的增殖及促增殖能力。 结果:Twist1、TGF-β3基因在胎盘间充质干细胞中表达水平最高， FGF2基因的表达水平最低， SIRT1基因在脐带间充质干细胞中的表达水平较高。随着传代培养进行，4种基因表达水平在不同代次的间充质干细胞中的表达水平各不相同。 Twist1、SIRT1、TGF-β3表达上调时3种间充质干细胞增殖能力增强， FGF2表达上调时3种间充质干细胞增殖能力减弱。 结论:Twist1、SIRT1、FGF2、TGF-β3在3种间充质干细胞中的表达水平存在一定差异； Twist1、SIRT1、TGF-β3对3种间充质干细胞的增殖表现为正调控作用；而 FGF2基因则相反表现为负调控作用。

间充质干细胞（Mesenchymal stem cells, MSCs）是起源于人体各种组织，如骨髓、脂肪组织、脐带、胎盘、牙髓的一类多能干细胞 [1]。MSCs的分泌组包括MSCs条件培养基、各种旁分泌/自分泌因子等以及称为细胞外囊泡（extracellular vesicles, EVs）的小泡分泌物 [2]。与MSCs一样，MSCs-EVs作为一种重要的信号传导介质，可以有效转运各种miRNAs、LncRNAs和蛋白质等至靶细胞内 [3,4]，发挥着炎症-免疫调节、抗凋亡、调控靶细胞的组织再生修复等作用，在脓毒症、创伤等急危重症中得到一定应用 [5,6]。

目的:探讨IL-6影响人胎盘间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells，hPMSCs)表面CD73的表达，以及调节其迁移、黏附和增殖的作用机制。方法:流式细胞术(flow cytometry，FCM)和Western blot分析外源性IL-6和hPMSCs分泌的IL-6对hPMSCs上CD73表达的影响。单克隆抗体阻断和Western blot方法检测IL-6对hPMSCs中信号转导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)磷酸化的影响。实时无标记动态细胞分析技术(real-time cellular analysis, RTCA)分析慢病毒转染后低表达CD73的hPMSCs和APCP(5′-α，β亚甲基-二磷酸腺苷)预处理后hPMSCs的迁移、黏附和增殖变化。结果:FCM与Western blot检测结果显示，外源性和hPMSCs分泌的IL-6均能促进CD73在hPMSCs上的表达( P<0.001, P<0.01)。IL-6R抑制剂处理后，hPMSCs上CD73表达明显下降( P<0.01)；IL-6可上调hPMSCs内STAT3磷酸化和CD73水平( P<0.05, P<0.01)，而加入STAT3抑制剂后，CD73表达下降( P<0.01)。RTCA分析结果显示，敲低hPMSCs上CD73的表达后，hPMSCs的黏附和增殖能力均明显降低( P<0.01, P<0.05)，迁移能力明显上升( P<0.05)。使用APCP抑制hPMSCs上CD73水解酶活性后，hPMSCs同样表现出黏附和增殖能力明显降低，而迁移能力增强( P<0.05)。 结论:IL-6能够通过JAK/STAT3通路增强hPMSCs上CD73的表达，进而影响其迁移、黏附和增殖能力。

目的:探究人胎盘源间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells，hPMSCs)通过CD73/核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2)途径抑制CD4 ＋IFN-γ ＋T(Th1)细胞分泌TNF-α减轻急性移植物抗宿主病(graft versus-host disease，GVHD)小鼠肝损伤的作用机制。 方法:流式细胞术分析GVHD小鼠外周血和肝组织中Th1细胞对TNF-α的表达以及CD4 ＋IFN-γ ＋TNF-α ＋T(TNF-α ＋Th1)细胞上PD-1的表达水平。采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色、马松(Masson)染色和免疫荧光染色观察各组GVHD小鼠肝组织病理变化，并进一步用HE染色观察各组GVHD小鼠皮肤和肺组织病理变化。体外建立非条件性外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)向Th1细胞诱导方案，检测TNF-α ＋Th1细胞比例以及其Nrf2和磷酸化细胞核内核因子-κB(phosphorylated nuclear factor-kappa B，p-NF-κB)的平均荧光强度(mean fluorescence intensity，MFI)。 结果:与正常对照组相比，GVHD发病高峰组小鼠外周血和肝组织中TNF-α ＋Th1细胞比例和TNF-α ＋Th1细胞对PD-1的表达明显升高( P<0.01)；hPMSCs干预可降低小鼠外周血和肝组织中TNF-α ＋Th1细胞比例( P<0.001)，促进小鼠外周血和肝组织中TNF-α ＋Th1细胞对PD-1的表达( P<0.01， P<0.001)，然而shCD73对小鼠外周血和肝组织中TNF-α ＋Th1细胞的干预效果明显减弱( P<0.05， P<0.01)。肝组织病理学分析结果显示，肝脏中TNF-α ＋Th1细胞比例分别与Suzuki′s评分、胶原面积和α-SMA的MFI呈正相关( P<0.001)。同样，皮肤和肺组织病理学分析结果也显示，外周血中TNF-α ＋Th1细胞比例分别与皮肤的Cetkovic-Cvrlje评分和肺的Qiao Shukai评分呈正相关( P<0.001)。PBMCs活化实验也显示hPMSCs能下调TNF-α ＋Th1细胞比例( P<0.01)，上调TNF-α ＋Th1细胞对PD-1的表达( P<0.05)；进一步分析发现hPMSCs可增强TNF-α ＋Th1细胞中Nrf2的MFI( P<0.05)，减弱p-NF-κB的MFI( P<0.01)。 结论:hPMSCs可能通过CD73/Nrf2途径上调PD1的表达，抑制TNF-α ＋Th1细胞形成，进而减轻GVHD小鼠肝损伤。

子痫前期是妊娠期常见的并发症，可增加母儿发病率和死亡率。子痫前期的具体发病机制仍然不明，针对其病理生理学改变尚无有效处理措施。目前认为胎盘血管的异常发育是子痫前期发生、发展的关键环节, 异常的子宫螺旋动脉重塑可能会导致胎盘缺血缺氧并产生过量的血管生成抑制因子和氧化应激因子，可能与子痫前期的病理进展过程有一定关系。而间充质干细胞（MSC）作为具有多分化潜能和分泌多种细胞因子的多能干细胞，已经在缺血性疾病研究中取得了一定的成果。MSC的特征可能会对子痫前期胎盘血流灌注不足以及免疫调节有改善作用，是子痫前期的潜在治疗方法。本综述着重于总结MSC的特征、功能，并阐述其应用于子痫前期可能的机制、存在的问题及解决方法。

目的:探讨IL-1β在人胎盘间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells，hPMSCs)调节类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)患者活化外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)向CD8 ＋IL-10 ＋T细胞亚群分化中的作用。 方法:应用CBA试剂盒检测RA患者血清IL-1β水平；酶消化法分离健康人hPMSCs；Ficoll密度梯度离心法分离RA患者和健康人PBMCs，分别应用PHA和CD3/CD28单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb)活化PBMCs，并与hPMSCs进行共培养。流式细胞术(flow cytometry，FCM)分别分析在程序性死亡配体1(programmed death ligand，PD-L1)和/或PD-L2 McAb阻断及IL-1β刺激条件下hPMSCs对活化PBMCs向CD8 ＋IL-10 ＋T细胞亚群分化的诱导能力；应用RT-PCR和FCM分析IL-1β刺激条件下，hPMSCs中PD-L1和PD-L2的表达水平。 结果:RA患者血清IL-1β水平明显升高。在PHA和CD3/CD28 McAb活化条件下，RA患者PBMCs中CD8 ＋IL-10 ＋T细胞亚群比例明显低于健康对照组，且hPMSCs共培养组CD8 ＋IL-10 ＋T细胞亚群比例明显升高；IL-1β处理后，hPMSCs对活化PBMCs向CD8 ＋IL-10 ＋T细胞亚群分化的诱导能力比未处理组明显增强。IL-1β能够上调hPMSCs对PD-L1和PD-L2的表达；阻断PD-L1和/或PD-L2的表达后，hPMSCs对CD8 ＋IL-10 ＋T细胞亚群的诱导分化能力明显减弱。 结论:IL-1β通过上调hPMSCs对PD-L1和PD-L2的表达，增强hPMSCs对RA患者CD8 ＋IL-10 ＋T细胞亚群分化的诱导能力。

子痫前期(PE)是一种产科疾病,可增加孕产妇出现脑出血、肺水肿、急性肾损伤、肝损伤、弥散性血管内凝血、子痫和胎盘早剥等风险,严重危及母儿生命安全.子痫前期的病理生理为多因素导致,研究表明胎盘功能障碍是导致子痫前期的主要原因.miRNA是一种单链非编码小分子RNA,研究证实子痫前期患者的miRNA表达失调,且miRNA在子痫前期中的功能和作用机制正逐渐被揭示.本综述总结了miRNA通过靶向下游靶蛋白在子痫前期中的主要作用,为miRNA在子痫前期预防和治疗中的作用提供证据.

目的 探讨人胎盘间充质干细胞外泌体(hPMSCs-Exo)对二氧化硅(SiO2)诱导小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)肺纤维化(PF)的作用机制.方法 采用差速超速离心法提取外泌体,采用蛋白质免疫印迹实验(Western blot)、透射电镜、纳米粒径追踪鉴定外泌体.用MTT实验检测 24h不同浓度SiO2 干预MH-S增殖细胞活力影响,结合实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测在MH-S细胞中胶原蛋白Ⅰ型(COL-Ⅰ)和α-平滑肌(α-SMA)的表达,选择SiO2 最佳刺激质量浓度进行后续实验.将 MH-S 细胞分为正常对照(Control)组、SiO2 组、SiO2+DMSO组、SiO2+PDTC组,SiO2+DMSO+hPMSCs组、SiO2+PDTC+hPMSCs组、SiO2+DMSO+hPMSCs-Exo组、SiO2+PDTC+hPMSCs-Exo组,采用RT-qPCR检测细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α相对转录水平;采用Western blot 检测各组 NF-κB信号通路及细胞凋亡相关蛋白表达.结果 SiO2 刺激 MH-S 细胞后 PF 相关基因COL-Ⅰ、α-SMA 表达增高,炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 表达增加,NF-κB通路被激活,其相关蛋白表达量上调,细胞凋亡因子表达量上调(P均＜0.01),促进了纤维化的发生;在加入抑制NF-κB信号通路抑制剂PDTC后,NF-κB通路被抑制,其相关蛋白表达量降低,炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 表达降低,PF相关基因COL-Ⅰ、α-SMA 表达减弱,细胞凋亡率降低(P均＜0.05),PF的发展被抑制.抑制NF-κB通路后移植hPMSCs细胞和hPMSCs-Exo,PF相关基因表达降低,炎症因子释放减少(P均＜0.05),抑制了细胞凋亡,PF的发生被有效干预.结论 hPMSCs-Exo可能通过调控NF-κB信号通路来抑制矽肺PF的进展.

目的 通过构建体外胎盘屏障模型,研究人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对传统胎盘屏障模型功能的影响及其可能的分子机制.方法 将hUC-MSC、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人滋养层细胞(HTR-8)共同培养于transwell中建立体外胎盘屏障模型,设置对照组(HUVEC+HTR-8)、forskolin 组(HUVEC+HTR-8+forskolin)、MSC 组(HUVEC+HTR-8+hUC-MSC)、MSC+forskolin组(HUVEC+HTR-8+hUC-MSC+forskolin),通过测量跨膜电阻值、荧光黄CH 的渗透性以及P-糖蛋白(P-gp)的活性,评估各组体外胎盘屏障模型的功能;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting检测各组体外胎盘屏障模型中P-gp、紧密连接蛋白5(Claudin-5)、闭合小环蛋白-1(ZO-1)、ZO-2、血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)的mRNA及蛋白表达水平;利用LC-MS/MS检测阿替洛尔、米诺地尔、美托洛尔3种渗透性工具药透过各组体外胎盘屏障模型的表观渗透系数(Papp),验证模型的功能完整性.结果 与对照组相比,forskolin、MSC、MSC+forskolin组的跨膜电阻值均显著增高(P＜0.05、0.001)、P-gp外排功能均增强、荧光黄的Papp值均显著降低(P＜0.05、0.01、0.001),且二者联用后作用效果尤为显著,表明该模型具备完整的屏障功能,且MSC+forskolin屏障功能最好;qRT-PCR和 Western blotting结果显示,与对照组相比,forskolin组P-gp、ZO-1、ZO-2、CD31 的表达显著增加(P＜0.05、0.01、0.001),MSC组P-gp、Claudin5、ZO-1和CD31的表达也显著增加(P＜0.05、0.01、0.001);联合应用后,各蛋白的mRNA及蛋白表达水平均更显著增加(P＜0.01、0.001),表明hUC-MSC增强传统胎盘屏障功能;与对照组相比,各实验组的Papp值均降低,MSC+forskolin组3个工具药均差异显著,美托洛尔差异最显著.结论 hUC-MSC通过增强传统胎盘屏障模型中紧密连接蛋白和外排蛋白的表达,进一步增强了传统胎盘屏障模型的屏障功能.

目的 研究间充质干细胞来源外泌体微小核糖核酸-3614-5p(miR-3614-5p)对模型大鼠先兆子痫(preeclampsia,PE)进展的调节作用及相关机制.方法 将36只SD大鼠(24只雌性和12只雄性)以雌雄比例2∶1合笼饲养自然受孕.24只妊娠大鼠随机分为假手术组(sham组)、PE模型组(PE组)和外泌体miR-3614-5p组(PE+exo组),每组8只.PE组通过皮下注射100 mg/kg的NG-硝基-L-精氨酸甲酯建立大鼠PE模型;PE+exo组构建PE模型,同时在第14天腹腔注射160 μg/ml的外泌体悬液(0.5 ml/只/天),连续6天,实验持续21天;sham组则给予等量生理盐水.在妊娠第0,7,14和21天测量血压和尿蛋白浓度.RT-qPCR检测miR-3614-5p水平及B细胞淋巴瘤病-2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)的mRNA水平;ELISA检测Caspase-3活性、活性氧(ROS)水平及丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和亚铁离子(Fe2+)含量;Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)蛋白水平.结果 与sham组大鼠相比,PE组大鼠的胎盘组织(0.43±0.05 vs 1.01±0.07)和外周血(0.51±0.07 vs 1.01±0.12)中miR-3614-5p表达显著下调,差异具有统计学意义(t=19.070,10.180,均P＜0.01).与上清液相比,源自MSCs的外泌体中miR-3614-5p显著富集.与sham组相比,PE组大鼠第21天的舒张压(175.43±6.02 mmHg vs 113.26±5.11 mmHg)、收缩压(123.57±5.63 mmHg vs 82.63±5.26 mmHg)及尿蛋白含量(175.48±13.21 mg/ml vs 67.65±5.76 mg/ml)显著升高(t=22.606,16.440,23.168,均 P＜0.01);与 PE 组相比,PE+exo 组舒张压(124.57±5.33 mmHg vs 175.43±6.02 mmHg)、收缩压(89.76±3.88 mmHg vs 123.57±5.63 mmHg)及尿蛋白含量(97.69±7.23 mg/ml vs 175.48±13.21 mg/ml)显著降低,差异具有统计学意义(t=18.493,13.577,16.713,均P＜0.01).与sham组相比,PE 组大鼠胎盘组织中 Caspase-3 活性(238.56％±13.22％vs 100.12％±5.93％)、Bax 水平(3.18±0.71 vs 1.01±0.11)、ROS 水平(387.65％±25.98％vs 100.51％±5.89％)、MDA 含量(33.21±3.17 nmol/mg vs 14.83±2.69 nmol/mg)和 Fe2+浓度(38.77±6.53 nmol/ml vs 17.51±3.15 nmol/ml)显著升高,而 Bcl-2 水平(0.47±0.08vs 1.01±0.12)、GSH 含量(4.12±1.22 nmol/mg vs 9.76±0.93 nmol/mg)、GPX4 蛋白(0.48±0.06 vs 1.01±0.24)和 SLC7A11 蛋白(0.51±0.11 vs 1.01±0.11)水平则显著降低(t=6.459～32.863,均P＜0.01);与PE组相比,PE+exo组胎盘组织中Caspase-3活性(117.35％±8.67％vs 238.56％±13.22％)、Bax 水 平(1.13±0.45 vs 3.18±0.71)、ROS 水平(128.73％±14.37％vs 387.65％±25.98％)、MDA 含量(18.13±3.89 nmol/mg vs 33.21±3.17 nmol/mg)和 Fe2+浓度(19.05±3.45 nmol/ml vs 38.77±6.53 nmol/ml)显著降低,而 Bcl-2 水平(1.04±0.11 vs 0.47±0.08),GSH 含量(7.86±1.07 nmol/mg vs 4.12±1.22 nmol/mg),GPX4 蛋白(0.98±0.14 vs 0.48±0.06)和 SLC7A11 蛋白(1.11±0.09 vs 0.51±0.11)水平则显著升高,差异具有统计学意义(t=6.093～29.633,均P＜0.01).结论 miR-3614-5p在PE模型大鼠的胎盘组织和外周血中显著下调.MSCs来源的外泌体miR-3614-5p通过抑制铁死亡改善大鼠的PE进展.MSCs来源的外泌体miR-3614-5p可能是PE治疗的一个新的潜在的生物标志物.