肿瘤的发生与发展是肿瘤细胞与其肿瘤微环境（TME）相互作用的结果，TME分布着多种基质细胞，其中以肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）最为丰富。根据巨噬细胞与其发生应答反应的辅助性T细胞类型，可大致将极化的巨噬细胞分为M1型和M2型巨噬细胞。在多数肿瘤中，M1型巨噬细胞参与抗肿瘤免疫，而M2型巨噬细胞主要发挥促肿瘤作用并与患者的不良预后相关。最近的研究表明，在肿瘤发展过程中，TAMs经历了从免疫刺激的M1样表型到免疫抑制的M2样表型的过程，该过程受多种因素影响并且可被逆转。这为肿瘤的免疫治疗提供了一种新思路，即通过TAMs的定向调控，逆转M2样巨噬细胞促肿瘤的微环境，发挥M1样巨噬细胞对肿瘤的抑制作用。该方案还有望与免疫检查点阻断（ICB）联用，增强ICB的治疗效果。小干扰RNA（siRNA）介导的基因沉默是一种安全可用于人类的基因调控方式，对TAMs的调控有得天独厚的优势；特异性抗体因其高选择性已被广泛应用于多种肿瘤的靶向治疗。抗体-寡核苷酸结合物（AOCs）正是结合了两者的优势，是实现TAMs中M2样巨噬细胞逆转的最佳方式。本文主要就TME中TAMs的作用及其调节机制进行综述，并探讨应用AOCs对TAMs表型进行定向调控，抑制肿瘤发展的可行性和应用前景。

目的:了解新设计的6组CpG分子在动物体内对新型冠状病毒（SARS-CoV-2）重组亚单位疫苗免疫效果的提升作用，以初步筛选出有潜力的新型CpG佐剂。方法:通过序列检索比对，确定人鼠同源的CpG基序，以不同的组合方式设计出6条不同的CpG寡聚脱氧核苷酸（CpG-ODN）序列，并人工合成相应6种CpG，分别与SARS-CoV-2重组亚单位疫苗联用，已上市的佐剂CpG1018作为阳性对照。以间隔2周的方式免疫BALB/c小鼠2次，免疫后每周取眼眶血检测IgG1和IgG2a指标。2针免疫后21 d处死小鼠，取眼球血检测结合抗体抑制率；取脾脏淋巴细胞进行酶联免疫斑点试验检测。结果:初次免疫后14 d，CpG6组小鼠血清IgG2a和IgG1水平分别为3.63±0.27和3.44±1.03，显著高于CpG1018组的2.06±1.30和2.06±0.39。加强免疫后14 d，CpG6组小鼠血清IgG2a水平为6.52±0.21，高于CpG1018组的6.33±0.40。在针对原型株的结合抗体抑制率指标上，初次免疫14 d、加强免疫21 d后，各组间差异存在统计学意义（ F=13.66、12.58、19.38和19.38， P均<0.001）。初次免疫14 d后，稀释10倍血清中CpG6组小鼠血清抑制率为（64.67±20.41）%，高于CpG1018组[（27.84±20.23）%]，差异有统计学意义（ t=2.70, P=0.031）；加强免疫21 d后，稀释1 000倍的血清中CpG6组小鼠血清抑制率针对原型株[（89.71±4.83）%]和Delta株[（79.04±6.32）%]的抑制率水平均显著高于CpG1018组[（70.84±17.20）%和（52.61±14.22）%] ，差异有统计学意义（ t=2.36, P=0.046； t=3.80, P=0.005）。酶联免疫斑点实验结果显示，CpG1018组针对SARS-CoV-2原性株敏感和Delta突变株敏感的特异性IFN-γ分泌细胞数与CpG6组相比，差异均无统计学意义（ t=0.76， P=0.469； t=0.78， P=0.459）；在特异性IL-2分泌细胞数上，两组差异亦无统计学意义（ t=0.70， P=0.503； t=0.90， P=0.395）。 结论:CpG6与SARS-CoV-2重组亚单位疫苗联用，能在疫苗初次免疫后更快速地在小鼠体内产生体液免疫应答，且加强免疫后体液免疫和细胞免疫效果均不弱于已上市的CpG1018佐剂。CpG6有望成为潜在的备选佐剂与疫苗联用。

细胞因子是由活化的免疫细胞或非免疫细胞合成并分泌的小分子蛋白质,其主要通过与特定受体结合并激活相应下游信号转导通路,在免疫调控以及免疫性疾病的发生、发展过程中发挥广泛的生物学作用.迄今为止,基于抗体的细胞因子和(或)细胞因子受体的靶向阻断在免疫性疾病的治疗中已取得令人鼓舞的效果,但其高昂的治疗费用给患者带来极大的经济负担.适配体又称化学抗体,是体外合成并经人工筛选获得的、能与诸多靶标分子特异并高亲和结合的寡核苷酸片段.与抗体相比,适配体有着成本低廉、低免疫原性和易于修饰等诸多优势.因此,功能化适配体在免疫性疾病靶向治疗中的潜在应用前景吸引了越来越多研究者的关注.文章综述了在免疫调控中发挥重要作用的 8 种细胞因子[IL-1α、IL-6、IL-17、TNF-α、转化生长因子-β、IFN-γ、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和IFN-α诱导蛋白 10]相关的特异性适配体的化学修饰及其在免疫和免疫相关性疾病治疗中应用的研究进展,并就未来适配体药物在临床特定免疫性疾病的精准靶向治疗中的潜在应用进行展望.

背景 针对IL-1或IL-6单克隆抗体开发的新型生物制剂药物对部分全身型幼年特发性关节炎(SJIA)患儿的疗效不佳.亟待通过进一步对发病机制的研究来探索新的治疗策略.目的 探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3炎症小体)及相关炎症介质在SJIA发病机制中的作用.设计 病例对照研究.方法 纳入活动期SJIA患儿,以同期在医院体检的健康儿童为对照.取SJIA患儿激素治疗前和治疗2周、8周时的外周静脉血标本,健康儿童采集体检时的外周静脉血标本,提取外周血单个核细胞(PBMCs).分别通过qRT-PCR、酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western免疫印迹法检测NLRP3及相关炎症介质的mRNA和蛋白表达水平.主要结局指标 NLRP3及相关炎症介质的表达水平.结果 病例组纳入33例SJIA患儿,年龄(8.2±3.7)岁;对照组纳入28例健康儿童,年龄(7.6±2.7)岁.与对照组比较,活动期SJIA患儿的NLRP3在mRNA水平无显著改变,但蛋白表达量降低,同时IL-1β、IL-18浓度升高;SJIA患儿治疗2周后IL-1β、IL-18、IL-2、IL-10、IFN-γ均降低,在治疗8周时IL-2、IFN-γ、IL-18仍低于治疗前水平;差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 SJIA中IL-1β和IL-18可能不是通过NLRP3炎症小体进行调控的.IL-1β和IL-18有潜力作为SJIA疾病活动的监测指标.

目的 制备耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a(PBP2a)抗原的卵黄抗体IgY,建立检测MRSA的酶联寡聚核苷酸吸附试验(ELONA)方法 . 方法 用大肠埃希菌原核表达并纯化PBP2a,采用胸部肌肉多点注射方式免疫产蛋母鸡,水稀释法粗提IgY,BCA法测定蛋白浓度,Western blot分析其特异性;以IgY抗体为捕获分子,以生物素标记的PBP2a特异性适配体为检测分子,建立检测MRSA的ELONA方法;对IgY包被量、生物素标记适配体用量及HRP标记链霉亲和素稀释度进行优化,测定该方法的灵敏度、特异性和重复性. 结果 成功表达和纯化PBP2a蛋白,Western blot显示IgY抗体能特异识别PBP2a蛋白.建立了检测MRSA的ELONA方法,其最佳包被用IgY稀释度为1∶1 600,生物素标记适配体用量为400 nmol/L,HRP标记链霉亲和素稀释度为1∶2 000.优化的ELO-NA对MRSA的检测限为2.87×102 CFU/ml;重复性试验的变异系数为4.7％.用该方法检测34株临床分离的金黄色葡萄球菌,与梅里埃VITEK2 Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统分析结果 一致性为100％. 结论 制备的抗MRSA PBP2a卵黄抗体具有较高特异性,基于该抗体建立的ELONA方法灵敏、特异、重复性好,可用于MRSA PBP2a的检测.

目的 检测SLE患者PBMCs中微RNA-223(miR-223)及核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)样受体家族蛋白3(NLRP3)炎性小体组分[NLRP3、凋亡相关的斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶(caspase)-1]mRNA表达水平,探讨其在SLE发病中的作用及临床意义.方法 实时荧光定量PCR技术检测35例初诊SLE患者、30名健康对照及20例治疗后SLE患者PBMCs中miR-223及NLRP3炎性小体组分mRNA表达量,采用x2和t检验进行统计学分析;采用Pearson检验分析SLE患者miR-223及NLRP3炎性小体组分mRNA表达水平与抗dsDNA抗体、抗核小体抗体(AnuA)、ESR、SLEDAI的相关性.结果 SLE患者PBMCs中miR-223、caspase-1 mRNA表达水平高于健康对照[(1.17±0.15)和(0.68±0.14),t=2.416,P=0.0186;(1.89±0.13)和(1.32±0.13),t=3.123,P=0.0027],NLRP3、ASC mRNA表达水平低于健康对照[(0.64±0.05)和(0.98±0.06),t=4.442,P<0.01;(0.98±0.08)和(1.32±0.12),t=2.391,P=0.0198];相关分析显示SLE患者PBMCs中miR-223 mRNA表达水平与NLRP3 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.7849,P<0.05),而与ASC、caspase-1 mRNA表达水平无相关性;SLE患者PBMCs中miR-223 mRNA表达水平与抗dsDNA抗体、ESR、SLEDA呈正相关(r=0.7035、0.6923、0.6873,P均<0.05),与AnuA无相关性;给予药物治疗后,SLE患者PBMCs中miR-223、caspase-1 mRNA表达水平明显降低[(1.30±0.22)和(0.79±0.11),t=2.07,P=0.0453;(2.05±0.19)和(1.50±0.11),t=2.471,P=0.0183],NLRP3 mRNA表达水平明显升高[(0.69±0.08)和(0.94±0.07),t=2.445,P=0.0193];在LN患者与SLE无肾损害患者PBMCs中miR-223 mRNA表达水平差异无统计学意义.结论 miR-223、caspase-1在SLE患者PBMCs中呈高表达,NLRP3、ASC在SLE患者PBMCs中呈低表达,miR-223 mRNA表达水平与NLRP3 mRNA表达水平呈负相关,且SLE患者PBMCs中miR-223 mRNA的表达水平与疾病活动呈正相关,治疗后miR-223 mRNA表达水平明显下降,提示miR-223可能在SLE发病中扮演重要角色.

目的：:探讨降低鼠源性单克隆抗体（单抗）对人体的免疫原性。方法：:应用基因工程技术扩增出SZ-51重链和轻链可变区cDNA与连接肽（Gly 4Ser） 3的寡核苷酸片段进行拼接构建了表达载体pHEN1-51scFv，并导入大肠杆菌HB2151中进行表达。 结果：:其表达产物可折叠成可溶性并具有抗原结合能力的单链抗体（scFv，小分子肽）释放到细菌培养上清中。结论：:该分泌型小肽抗体能特异地与α-颗粒膜蛋白结合，具有与原鼠源单抗一致的抗原结合特性。

目的 观察核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎性小体信号通路相关分子在抗磷脂综合症(APS)中的表达水平,并初步探讨其临床意义.方法 选取50例APS患者作为研究对象,选取同期健康体检者50例为对照组,收集两组的血液样本,分离外周血单个核细胞,用实时荧光定量PCR方法检测NLRP3炎症小体的mRNA表达情况,用ELISA方法检测抗心磷脂抗体(aCL)、抗β2糖蛋白I抗体、白细胞介素-18(IL-18)和IL-1β的血清水平,同时检测两组血清中的补体、D二聚体及狼疮抗凝物(LA),并分析抗体滴度与NLRP3、下游炎症因子表达水平的相关性.结果 APS组患者C3、C4水平低于对照组,D二聚体水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).APS患者PBMC中的NLRP3 mRNA表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),ELISA法中NLRP3、半胱天冬酶1(caspase-1)、IL-18、IL-1β表达水平也高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).APS患者NLRP3 mRNA的表达水平与caspase-1呈正相关关系(r=0.921,P＜0.05);抗心磷脂抗体滴度与NLRP3炎症小体、IL-18、IL-1β呈正相关关系(r=0.598、0.521、0.428,P＜0.05).结论 NLRP3炎症小体信号通路相关分子参与APS的发病过程且表达水平与APS严重程度密切相关.

以聚合酶链反应（PCR）扩增单项抗乙型肝炎病毒核心抗原（HBc）阳性血清的乙型肝炎病毒（HBV） DNA。内外两对引物均选自adr、adw和ayw 3种亚型HBV基因组C基因区的共有序列，扩增产物分别长428bp和664bp，共含一个BglⅡ酶切点，酶切后前者产生299bp和125bp、后者产生406bp和254bp各一个限制性片段。以另一条基因位置处于内引物对之间的寡核苷酸制备 32P-5′末端标记的探针对之进行Southern转移杂交，鉴定了扩增产物的特异性。结果从单项抗HBc阳性的8/42例慢性肝炎和2/12例无症状受测者血清中检出HBV DNA，提示现症低水平病毒复制和潜在的传染性。

将分子生物学方法（聚合酶链反应和Digoxigenin标记的寡核苷酸探针打点杂交）、免疫学方法（单克隆抗体中和试验和蚀斑减数中和试验）及生物学方法（病毒Rct/40℃特征和D特征测定）相结合，用于Ⅰ型脊髓灰质炎病毒（PV）型内差异的综合鉴别诊断。分析比较了上述各方法区别野毒株与疫苗相关株，计算符合率的优缺点，为脊髓灰质炎病毒野毒株与疫苗相关株的鉴别诊断提供了依据。