目的:观察抗性糊精对高脂饮食诱导的小鼠肝脏脂肪沉积及肝脏AMPK通路的影响。方法:取4周龄雄性C57BL/6小鼠36只，随机分为3组，即正常对照组，高脂饮食组和高脂饮食＋抗性糊精组(10 g·kg －1·d －1)。第12周末处死小鼠，留取血清测定三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)水平；留取肝脏组织，测定TG含量，并予HE和油红O染色，观察肝细胞脂肪变性和肝脏脂肪沉积；实时荧光定量PCR检测肝脏组织脂肪酸合成相关基因SREBP1、ACC、SCD1 mRNA的表达水平，Western印迹检测肝脏pAMPK、SREBP1、Fasn、ACC蛋白的表达。 结果:与正常对照组相比，高脂饮食组小鼠体重增加更显著，空腹血糖(FBG)、血清TC、LDL-C、HDL-C、ALT水平均升高( P<0.01)，血清AST也升高( P<0.05)；肝脏油红O染色可见肝脏组织脂肪沉积明显，肝脏TG含量增加( P<0.01)；SREBP1、ACC mRNA水平升高；pAMPK蛋白水平表达下降( P<0.05)。与高脂饮食组相比，抗性糊精组小鼠体重增加较少，血清TG、TC、LDL-C、HDL-C、ALT水平较低( P<0.01)，FBG降低( P<0.05)；肝脏油红O染色可见肝脏脂肪沉积减少，肝脏TG含量降低( P<0.01)；SREBP1、ACC、SCD1 mRNA水平下降；pAMPK水平增加，Fasn蛋白水平下降( P<0.01)。 结论:抗性糊精可以改善高脂饮食诱导的小鼠肝脏脂肪沉积，这一作用可能与激活AMPK通路有关。

目的 探究抗性糊精对慢性不可预知温和应激大鼠肠道菌群的影响.方法 24 只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和抗性糊精组,大鼠基于慢性不可预知温和应激(CUMS)建立抑郁模型,3 周后进行糖水偏好实验和旷场实验检测.模型组筛选应激敏感大鼠,其他两组随机选择等数量大鼠利用 16S rRNA 测序技术检测其肠道菌群的组成和结构变化.结果 与对照组相比,模型组大鼠肠道菌群厚壁菌门[(0.92251±0.02838)vs.(0.82572±0.00761)]、阿克曼菌属[(0.01327±0.00076)vs.(0.00000±0.00000)]、乳球菌属[(0.00029±0.00010)vs.(0.00000±0.00000)]相对丰度显著降低(P＜0.05);拟杆菌门[(0.04671±0.00263)vs.(0.12341±0.03576)]、粪杆菌属[(0.00011±0.00004)vs.(0.00057±0.00005)]、Ruminococ-caceae_UCG_014[(0.01003±0.00384)vs.(0.10976±0.04364)]相对丰度显著升高(P＜0.05).与模型组相比,抗性糊精可对丰度发生变化的菌群显著回调(P＜0.05).结论 抗性糊精能够调节CUMS大鼠的肠道菌群,通过改善益生菌的相对丰度、降低致病菌的相对丰度促使肠道恢复动态平衡,为抑郁症的治疗提供实验基础研究.

目的 利用诱变结合抗性筛选方法选育多杀菌素高产菌株,并通过发酵培养基优化进一步提高多杀菌素产量.方法 分别确定链霉素、安普霉素和鼠李糖3种抗性的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),然后以S.s1-4为出发菌株,通过紫外(UV)结合链霉素、安普霉素、鼠李糖抗性因子诱变选育,在此基础上利用亚硝基胍(NTG)结合上述抗性因子诱变选育,并利用响应面实验设计对发酵培养基中葡萄糖、糊精、棉籽蛋白3种成分进行优化.结果 出发菌株经过紫外照射30s,涂布于抗性平板上,筛选得到S.s2-21,S.s2-21再用NTG处理30min,涂布于抗性平板上,最终获得1株遗传性状稳定的菌株S.s3-37,产量为78.26mg/L,提高了45.71％;发酵培养基优化后,其产量达83.00mg/L.结论 利用紫外和NTG结合抗性复合诱变选育获得多杀菌素高产菌株是有效的,通过发酵培养基优化,其产量较出发菌株提高了54.55％,获得良好的效果.

目的·观察抗性糊精对db/db小鼠胰岛素抵抗状态的影响,并初步探索潜在的分子机制.方法·取8周龄db/db小鼠10只,随机分为对照组和抗性糊精组,分别予蒸馏水和抗性糊精灌胃9周.每周检测小鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)及体质量,并于第8周行腹腔注射葡萄糖耐量试验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT),于第9周行胰岛素耐量试验(insulin tolerance test,ITT),处死小鼠后测定血清空腹胰岛素(fasting serum insulin,FINS)、三酰甘油(triacylglycerol,TAG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(lower density lipoprotein-cholesterol,LDL-Ch)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-Ch)的水平并计算稳态模型胰岛素抵抗(homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR)指数,实时荧光定量PCR检测肝脏组织胰岛素信号转导通路1r、Irs-1、Pi3k、Akt、Glut-2 mRNA相对表达量,Western blotting检测肝脏IRS-1、p-AKT、GLUT-2蛋白的表达.结果·与对照组相比,经抗性糊精灌胃处理9周后,抗性糊精组小鼠体质量降低,但差异无统计学意义(P=0.384);FINS有所下降但差异无统计学意义,HOMA-IR指数显著下降(P=0.032);胰岛素抵抗得到显著改善(均P＜0.05);血生化指标TAG、TC、LDL-Ch、HDL-Ch均降低,但仅LDL-Ch的差异具有统计学意义(P=0.034);Ir、Irs-1、Akt、Glut-2mRNA表达显著增加(均P＜0.05);IRS-1、p-AKT、GLUT-2蛋白表达量增加,其中IRS-1和GLUT-2表达量的升高具有统计学意义(P=0.026,P=0.039).结论·抗性糊精可能通过增强胰岛素信号转导改善db/db小鼠的胰岛素抵抗.

葡萄糖淀粉酶作为淀粉糖化的关键用酶之一, 广泛应用于食品、医药和发酵工业等行业.由于整个制糖过程都是在高温下完成的, 因此对葡萄糖淀粉酶的反应温度和热稳定性有较高要求.本研究从嗜热篮状菌Talaromyces leycettanus JCM12802中克隆到一个糖苷水解酶第15家族 (GH15) 葡萄糖淀粉酶基因 (Tlga15A) 并在毕赤酵母GS115中实现异源表达.重组葡萄糖淀粉酶TlGA的最适pH为4.5, 在75℃下表现出最高酶活.TlGA热稳定性好, 65℃条件下处理1 h剩余70％以上酶活力;70℃处理30min后仍有43％酶活力.TlGA有较强的离子抗性和宽泛的底物特异性, TlGA水解可溶性淀粉、支链淀粉、糖原、糊精和普鲁兰的比活力分别为 (255.6±15.3) U/mg、 (342.3±24.7) U/mg、 (185.4±12.5) U/mg、 (423.3±29.3) U/mg和 (65.7±8.1) U/mg.从葡萄糖淀粉酶TlGA的一级结构、二级结构和三级结构3个层面对其进行比较分析, 发现一级结构中较少的Gly组成和三级结构中较低的非极性基团溶剂可及表面积可能是维持葡萄糖淀粉酶TlGA温度稳定性的主要原因.综合其性质特点和对结构的分析, 葡萄糖淀粉酶TlGA在工业葡萄糖生产中有较大应用潜力.

目的 评价抗性糊精减肥、通便功能特性.方法 建立大鼠肥胖模型,经口给予2.5,5.0,7.5 g/kg BW的抗性糊精42 d,每周记录摄食量并称重1次,试验结束后,解剖取肾、睾丸周围脂肪,称重并计算脂/体比;小鼠经口给予5,10,15 g/kg BW抗性糊精7 d,经口给予复方地芬诺酯建立小鼠便秘模型,观察小鼠小肠墨汁推进率、排黑便时间、6 h黑便粒数及黑便重量.结果 与模型对照组相比,中、高剂量组给药第6周体重、体重总增重、体内脂肪重显著降低,高剂量组脂体比显著降低;与模型对照组相比,低、中、高剂量组小肠墨汁推进率均显著增加,高剂量组首粒排黑便时间显著缩短,中、高剂量组6 h内排黑便粒数显著增加,中剂量组6 h内黑便重量显著增加.结论 抗性糊精具有一定的减肥和通便作用.

抗性糊精作为一种重要的水溶性膳食纤维,能抵抗肠道淀粉酶的消化,对人体健康具有多重功效,对慢性疾病防治有积极作用,在食品饮料行业有广阔的应用前景.本文对近年来抗性糊精生理功效相关的研究进行综述,以期进一步发掘其潜在价值.