目的 观察桃红四物汤对糖尿病大鼠心脏的保护作用,同时基于核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)通路探讨其作用机制.方法 腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病心肌病大鼠模型,将模型复制成功的大鼠分为模型组,桃红四物汤低、中、高剂量组,每组10只,另设10只正常大鼠作为对照组.比较各组大鼠血糖、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondial-dehyde,MDA)和B型利钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)、肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)水平.采用苏木精—伊红染色和Masson染色观察大鼠心肌组织病理变化.制备心肌组织匀浆,使用流式细胞术进行线粒体膜电位检测.Western blot法检测Nrf2、HO-1、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸酶1剪切体(cleaved-caspase-1)、消皮素D(gasdermin D,GSDMD)和消皮素D蛋白N端结构域(N-terminal gasdermin D-N,GSDMD-N)蛋白表达水平.结果 与对照组比较,模型组大鼠血糖升高,心肌纤维断裂、排列紊乱,炎症细胞浸润明显,胶原沉积明显;与模型组比较,桃红四物汤低、中、高剂量组大鼠心肌纤维化明显改善.与对照组比较,模型组SOD活性显著降低(P<0.05),MDA、BNP及cTnⅠ水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,桃红四物汤低、中、高剂量组SOD活性显著升高(P<0.05),MDA、BNP、cTnⅠ水平显著降低(P<0.05).与对照组比较,模型组心肌组织线粒体膜电位显著降低(P<0.05);与模型组比较,桃红四物汤低、中、高剂量组心肌组织线粒体膜电位显著升高(P<0.05).与对照组比较,模型组心肌组织中Nrf2、HO-1、NL-RP3、cleaved-caspase-1、GSDMD和GSDMD-N蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,桃红四物汤低、中、高剂量组心肌组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),Keap1、NLRP3、cleaved-caspase-1、GSDMD和GSDMD-N蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).结论 桃红四物汤改善糖尿病心肌病的机制可能与调节Nrf2-NLRP3途径,抗氧化应激及抑制细胞焦亡相关.

白内障是世界上主要的致盲眼病，其发生和发展的主要机制为晶状体的氧化应激损伤。大量抗氧化基因的表达受核因子E2相关因子2(Nrf2)调控，Nrf2氧化防御系统是机体抗氧化损伤的主要防御系统之一。Nrf2信号通路的活性受Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)调控，Keap1介导Nrf2蛋白降解使其通路的激活受到抑制——依赖Keap1的调控方式。不少研究提示Nrf2信号通路还受其他方式调控——非依赖Keap1的调控方式，例如Nrf2的磷酸化、乙酰化等蛋白修饰(PKC、PI3K/Akt、JNK和P300/CBP)以及表观遗传(启动子的甲基化、组蛋白修饰和微小RNA-144、－28和－34)。Nrf2及其下游抗氧化基因表达的减少在白内障的发生和发展中起重要作用。许多化合物，如桑色素、金丝桃苷、萝卜硫素、金樱子提取物、丁苯酞和乙酰左旋肉碱被证实可以通过激活Nrf2信号通路、上调其下游抗氧化基因的表达、抑制氧化应激反应，减轻晶状体上皮细胞的氧化损伤，从而达到抑制、减轻白内障的作用。本文就近年来关于Nrf2信号通路以及Nrf2激活剂与白内障的关系研究进行综述，以期为白内障的防治提供理论依据。

目的:探讨Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1 （Kelch-like ECH-associated protein 1, Keap1 ）/核因子E2相关因子2 (nuclear factor-E2-related factor 2, Nrf2）/抗氧化反应元件（antioxidant response element, ARE）信号通路在脑缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R ）损伤中对线粒体分裂的调控。方法:将提取的大鼠原代海马神经元采用随机数字表法分为4组：正常组（C组）、氧糖剥夺再灌注（oxygen-glucose deprivation/reperfusion, OGD/R）组、OGD/R+Nrf2抑制剂组（OGD/R+N组）和OGD/R+赋形剂组（OGD/R+V组）。透射电子显微镜观察线粒体形态，蛋白免疫印迹法检测线粒体动力相关蛋白（dynamin-related protein 1, Drp1 ）、线粒体分裂蛋白1 （mitochondrial fission protein 1, Fis1）、Keap1、Nrf2的表达，免疫荧光技术观察Nrf2的核转位，流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率。结果:与C组比较，OGD/R组Keap1水平降低，Nrf2核内蛋白水平升高，Drp1、Fis1水平升高，免疫荧光观察Nrf2在OGD/R的过程中发生核转位，细胞凋亡率增加（ P<0.05）；与OGD/R组比较，OGD/R+N组Nrf2核内蛋白水平降低，Keap1水平升高，细胞凋亡率增加（ P<0.05）；OGD/R+V组与OGD/R组比较，Keap1、Drp1、Fis1、Nrf2核内蛋白水平及细胞凋亡率差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:在脑I/R中，Keap1/Nrf2/ARE信号通路能调控线粒体分裂、减少细胞凋亡、减轻脑损伤。

目的:观察老年脑卒中患者基质金属蛋白酶(MMP)-3启动子区-1612基因多态性和脑卒中发病风险及与炎性反应、氧化应激的相关性。方法:回顾性分析2019年3月至2021年3月本院诊疗的老年脑卒中发病患者129例作为研究组，同时选择110例健康体检者作为对照组，检测 MMP-3启动子区-1612基因多态性、炎性反应及氧化应激指标，并分析 MMP-3基因多态性与各指标的相关性。 结果:与对照组相比，研究组的高血压、糖尿病、吸烟史比例明显增高( χ2＝16.05、17.19、14.19，均 P<0.05)，且空腹血糖及低密度脂蛋白胆固醇、同型半胱氨酸水平也增高( t＝6.22，3.64，2.69，均 P<0.05)。与 MMP-3-5A/6A及6A/6A基因型患者相比， MMP-3基因5A/5A基因型患者血清炎症指标高迁徙率蛋白1(HM-BG1)、分形素趋化因子(FKN)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-17(IL-17)含量增高( t＝16.40、23.06、10.64、15.39、21.02；20.01、28.03、13.42、20.09、27.40，均 P<0.05)，同时血清氧化应激相关分子Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子(Nrf2)、抗氧化应答元件(ARE)、醌氧化还原酶1(NQO1)、血红素加氧酶-1(HO-1)表达也增加(均 P<0.05)，而上述指标在 MMP-3-5A/6A和6A/6A基因型患者之间无明显差异( P>0.05)。5A/5A基因型和6A/6A基因型分别仅含970bp 1个条带和120bp 1个条带，而5A/6A基因型含97bp、120bp 2个条带；研究组中的5A/6A基因型数目与对照组差异无统计学意义( P>0.05)，研究组中的5A/5A基因数目高于对照组[69(53.49%)比35(31.82%)， χ2＝11.34， P<0.05]。 MMP-3基因的多态性与脑卒中发生之间呈正相关( r＝0.25， P<0.05)。 MMP-3-1612基因多态性( OR＝7.21，95% CI：1.13~1.83， P＝0.01)及空腹血糖升高( OR＝1.27，95% CI：1.18~2.06， P<0.001)、高同型半胱氨酸( OR＝1.05，95% CI：1.07~1.58， P<0.01)、高血压( OR＝5.41，95% CI：1.14~4.46， P<0.01)、低密度脂蛋白胆固醇升高( OR＝4.03，95% CI：1.03~2.35， P＝0.02)、冠心病( OR＝1.17，95% CI：1.47~3.19， P<0.01)以及糖尿病( OR＝8.52，95% CI：1.32~4.71， P<0.01)等均可增加脑卒中发生风险。 结论:老年脑卒中患者 MMP-3启动子区-1612基因多态性和发病风险、炎性反应和氧化应激密切相关，MMP-3基因多态性是脑卒中发生的危险因素之一。

目的:探讨马尾松针提取物（PMNE）对人毛乳头细胞（HDPC）抗氧化应激的保护作用及机制。方法:以HDPC为研究对象，分别采用0（对照组）、0.1、0.2、0.4、0.8、1.0 mmol/L H 2O 2处理HDPC，建立体外HDPC氧化应激的最佳条件；在HDPC中转染核因子E2相关因子2（Nrf2）干扰片段siRNA1、siRNA2、siRNA3或过表达质粒pCMV6-XL5-Nrf2，实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测Nrf2 mRNA及蛋白的表达；H 2O 2条件下检测转染后各组细胞活性及凋亡率。常规培养HDPC并分组处理，对照组：正常培养，不予其他处理；双氢睾酮组：加入0.03 μg/ml双氢睾酮；原花青素组：加入0.03 μg/ml双氢睾酮和6.00 μg/ml原花青素B2处理；不同浓度PMNE组：加入0.03 μg/ml双氢睾酮培养液，同时分别给予1、5、25、100 μg/ml PMNE处理；分别检测各组细胞活性及凋亡率、细胞内活性氧（ROS）相对荧光强度和丙二醛（MDA）含量，Nrf2、醌氧化还原酶1（NQO1）、血红素加氧酶1（HO-1）、Kelch样ECH相关蛋白1（Keap1）、转化生长因子（TGF）-β1、Sma和Mad相关蛋白2/3（Smad2/3）、p-Smad2/3的表达水平。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:HDPC细胞活力为75% ~ 85%时，选择0.4 mmol/L H 2O 2作为体外HDPC氧化应激最适处理浓度。Nrf2-siRNA1、Nrf2-siRNA2、Nrf2-siRNA3组Nrf2 mRNA和蛋白表达均显著低于空白组和对照组（均 P < 0.05），细胞凋亡率（12.50% ± 0.05%、26.07% ± 0.05%、58.44% ± 1.03%）均显著高于空白组（10.38% ± 0.64%）和对照组（13.05% ± 0.12%），均 P < 0.05。Nrf2-siRNA2组的Nrf2蛋白表达量最低，选择Nrf2-siRNA2为最佳干扰片段进行后续实验。Nrf2过表达组Nrf2 mRNA和蛋白表达均显著高于空白组和对照组（均 P < 0.05），其细胞凋亡率明显低于空白组和对照组（均 P < 0.05）。0.4 mmol/L H 2O 2处理条件下，Nrf2过表达组细胞凋亡率显著低于过表达空载组（ t = 3.66， P < 0.001），细胞活性高于过表达空载组（ t = 40.40， P < 0.001）；Nrf2-siRNA2组细胞凋亡率显著高于对照组（ t = 13.13， P < 0.001），而细胞活性显著低于对照组（ t = 67.37， P < 0.001）。PMNE处理实验中，原花青素组和不同浓度PMNE组细胞活性均显著高于双氢睾酮组（均 P < 0.01），而细胞凋亡率显著低于双氢睾酮组（均 P < 0.01）；原花青素和不同浓度PMNE均能显著抑制双氢睾酮诱导的HDPC细胞内ROS和MDA的过度表达（均 P < 0.01）；原花青素组和5、25、100 μg/ml PMNE组Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达显著高于双氢睾酮组（均 P < 0.05），原花青素组和25、100 μg/ml PMNE组Keap1、TGF-β1蛋白表达及Smad2/3磷酸化水平显著低于双氢睾酮组（均 P < 0.05）。 结论:Nrf2在抵抗HDPC的氧化应激损伤中起重要作用，PMNE可能通过激活Nrf2抗氧化反应元件通路而对HDPC产生明显的保护作用。

脓毒症是感染导致机体宿主反应失调引起的危及生命的器官功能障碍，在全球有较高的发病率与病死率。脓毒症的重要特征是炎症反应，剧烈炎症反应产生的细胞因子会激活中性粒细胞，引起活性氧（ROS）的过量生成，从而造成组织器官损伤，并进一步发展为器官功能障碍和衰竭。铁死亡是近些年发现的一种铁依赖性的全新的细胞死亡方式，其主要机制为二价铁诱导的细胞内脂质过氧化与抗氧化体系〔谷胱甘肽（GSH）和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）〕表达量降低。最近众多研究表明，Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1/核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件（Keap1/Nrf2/ARE）信号通路可通过改善氧化应激来缓解脓毒症过程中的细胞铁死亡。本文对Nrf2抑制脓毒症过程中细胞铁死亡的有关分子机制研究进行综述，以期为干预脓毒症进展提供预防和治疗思路。

目的:探讨表儿茶素(EC)通过核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)通路对脊髓损伤(spinal cord injury，SCI)小鼠的抗炎和抗氧化作用。方法:采用改良Allen’s击打法制备小鼠脊髓损伤模型，采用随机数字表法将小鼠分为对照组(Sham组)、脊髓损伤组(SCI组)、表儿茶素处理组(EC组)，每组6只。通过称重受损脊髓含水量评价受损脊髓的水肿情况；通过小鼠Basso Mouse Scale (BMS)评分，评价损伤小鼠的运动功能；通过悬尾实验和糖水偏嗜试验评价小鼠的抑郁及焦虑状态；使用免疫荧光染色观察神经元的数量；使用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素(IL)-1β、IL-10的表达；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测Nrf2蛋白和Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)的表达。组间比较采用 t检验和单因素方差分析。 结果:SCI 3 d，EC组的脊髓含水量明显低于SCI组，差异有统计学意义[(73.91±0.95)%比(77.78±0.95)%， F＝8.611， P<0.05]；BMS评分表明，从第14天开始，EC组小鼠的运动能力改善优于SCI组，差异有统计学意义；SCI 28 d，EC组小鼠糖水偏嗜度高于SCI组，差异有统计学意义[(64.25±2.50)%比(51.98±3.27)%， t＝－7.316， P<0.05]。SCI 28 d，EC组小鼠不动时间明显低于SCI组，差异有统计学意义[(202.83±6.97) s比(260.50±10.62) s， t＝－11.123， P<0.05]；SCI 7 d，EC组胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞明显低于SCI组，差异有统计学意义(159.00±9.12比209.50±14.15， t＝7.347， P<0.05)，EC组NeuN阳性细胞数明显高于SCI组，差异有统计学意义(108.17±12.48比54.83±15.55， t＝－6.552， P<0.05)；SCI 7 d，EC组抑炎因子IL-10的表达量明显高于SCI组，差异有统计学意义[(596.48±13.30) pg/ml比(483.55±16.14) pg/ml， t＝13.224， P<0.05)]。同时，EC组促炎因子IL-1β的表达量明显低于SCI组，差异有统计学意义[(44.02±4.28) pg/ml比(87.00±5.75) pg/ml， t＝14.686， P<0.05)]；SCI 7 d，EC组小鼠脊髓组织中的Nrf2蛋白表达量高于SCI组，差异有统计学意义(1.08±0.14比0.78±0.10， t＝－4.245， P<0.05)，EC组小鼠脊髓组织中的Keap1蛋白表达量低于SCI组，差异有统计学意义(1.16±0.13比1.68±0.10， t＝7.650， P<0.05)。 结论:表儿茶素通过Nrf2/ARE通路发挥对脊髓损伤小鼠的抗炎和抗氧化作用。

巨噬细胞是重要的先天性免疫细胞，在炎症刺激下，巨噬细胞可以迅速应答并通过代谢重编程产生大量代谢物。衣康酸是源于三羧酸循环的免疫调节衍生物，具有抗氧化和抗炎作用。近年研究证实衣康酸可促进巨噬细胞由M1型向M2型转化，但其机制复杂，可能与烷基化Kelch样ECH相关蛋白1（Keap1）残基激活核因子E2相关因子2（Nrf2），阻止核转录因子-κB抑制因子ζ（IκBζ）翻译，抑制琥珀酸脱氢酶（SDH）和活性氧（ROS）生成以及下调有氧糖酵解水平等有关。本文就衣康酸的代谢途径与免疫应答之间的关系，及其对巨噬细胞炎症反应调控机制的最新研究进展进行阐述，以期为衣康酸的临床应用提供依据，并为与炎症相关疾病的治疗提供新思路和新策略。

目的:探讨银杏叶片调控核因子E2相关因子2（Nrf2）-Kelch样ECH联合蛋白1（Keap1）-抗氧化反应元件（ARE）信号通路在燃煤污染型地方性砷中毒（简称燃煤型砷中毒）大鼠肝损伤中的作用。方法:采用成组设计，30只Wistar大鼠按体重（80~100 g）采用随机数字表法分为5组，每组6只，雌雄各半。正常对照组常规喂饲4.5个月；银杏叶片对照组常规喂饲3个月后给予银杏叶片（25 mg/kg，6 d/周）1.5个月；饮水型砷中毒组和砷粮食污染组分别给予100 mg/L三氧化二砷（As 2O 3）水溶液和含砷100 mg/kg饲料3个月后，常规喂饲1.5个月；银杏叶片治疗组喂饲含砷100 mg/kg饲料3个月后给予银杏叶片（25 mg/kg，6 d/周）1.5个月。采用硫代巴比妥酸比色法检测5组大鼠血清丙二醛（MDA）含量，黄嘌呤氧化酶法检测血清铜锌超氧化物歧化酶（SOD1）活力，二巯双硝基苯甲酸还原法检测血清谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活力；荧光定量PCR、免疫组织化学及免疫印迹法检测5组大鼠肝组织Nrf2-Keap1-ARE信号通路指标基因的mRNA和蛋白表达；并采用Pearson相关分析指标间的相关性。 结果:饮水型砷中毒组、砷粮食污染组和银杏叶片治疗组血清MDA含量[（3.54±0.51）、（3.83±0.87）、（2.93±0.84）μmol/L]均高于正常对照组[（1.85±0.36）μmol/L， P均< 0.05]；SOD1[（68.21±4.37）、（64.53±9.96）、（73.09±5.43）U/ml]和GPx活力[（486.41±40.45）、（458.24±42.25）、（539.79±79.43）U/L]均低于正常对照组[（81.47±5.73）U/ml、（747.86±80.33）U/L， P均< 0.05]；与砷粮食污染组比较，银杏叶片治疗组MDA含量较低，SOD1和GPx活力均较高（ P均< 0.05）。饮水型砷中毒组、砷粮食污染组和银杏叶片治疗组肝组织SOD1和GPx1 mRNA表达均高于正常对照组（ P均< 0.05），银杏叶片治疗组均高于砷粮食污染组（ P均< 0.05）。砷粮食污染组肝组织SOD1蛋白表达低于正常对照组（ P < 0.05），饮水型砷中毒组、砷粮食污染组和银杏叶片治疗组肝组织GPx1蛋白表达均低于正常对照组（ P均< 0.05），银杏叶片治疗组SOD1和GPx1蛋白表达均高于砷粮食污染组（ P均< 0.05）。与正常对照组和砷粮食污染组比较，银杏叶片治疗组肝组织Keap1蛋白表达均较低（ P均< 0.05）。饮水型砷中毒组、砷粮食污染组和银杏叶片治疗组肝组织细胞质Nrf2、磷酸化Nrf2（pNrf2）蛋白表达均高于正常对照组（ P均< 0.05），银杏叶片治疗组pNrf2蛋白表达低于砷粮食污染组（ P < 0.05）。饮水型砷中毒组、砷粮食污染组和银杏叶片治疗组肝组织细胞核Nrf2、pNrf2蛋白表达均高于正常对照组（ P均< 0.05），且银杏叶片治疗组均高于砷粮食污染组（ P均< 0.05）。细胞核Nrf2、pNrf2蛋白表达与Keap1蛋白表达均呈负相关（ r=-0.523、-0.401， P均< 0.05），与SOD1、GPx1 mRNA表达均呈正相关（ r=0.658、0.530，0.555、0.603， P均< 0.05）；SOD1、GPx1蛋白表达与其酶活力也均呈正相关（ r=0.472、0.629， P均< 0.05）。 结论:砷能诱导氧化应激损伤肝脏，银杏叶片能降低Keap1蛋白表达，促进Nrf2核转位后增强SOD1和GPx1 mRNA表达及部分逆转砷对SOD1和GPx1的转录后调控作用，增加其蛋白表达和酶活力，从而改善燃煤型砷中毒氧化应激状态和肝损伤。

目的 研究乌梅丸调控Kelch样ECH相关蛋白1(Keap-1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠氧化应激损伤的抑制作用.方法 将40只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、低剂量实验组和高剂量实验组,每组8只.自由饮用2％DSS水溶液的方法复制UC模型.造模同时,正常组和模型组小鼠灌胃等体积0.9％NaCl,阳性对照组小鼠灌胃美沙拉嗪(5-ASA)溶液0.005 g·10g-1·d-1,低、高剂量实验组小鼠分别灌胃乌梅丸水煎液0.13、0.26 g·10 g-1·d-1,持续7d.评价小鼠疾病活动指数(DAI)和结肠长度变化;用实时荧光定量聚合酶链反应检测小鼠结肠组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、环氧酶2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达水平;用蛋白质印迹法检测小鼠结肠Kelch样ECH相关蛋白(Keap-1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白的表达水平.结果 正常组、模型组、阳性对照组和低、高剂量实验组第7天的DAI分别为0、2.62±0.33、1.87±0.35、1.87±0.35 和 1.58±0.35,结肠长度 分别为(8.16±0.47)、(5.98±0.24)、(7.58±0.38)、(7.33±0.24)和(7.48±0.51)cm,SOD mRNA 表达水平分别为 1.01±0.16、0.40±0.01、1.43±0.45、0.65±0.01 和 0.83±0.02,CAT mRNA 表 达水平 分别为 1.01±0.20、0.45±0.01、0.84±0.02、0.68±0.07 和 0.87±0.05,COX-2 mRNA 表达水平分别为 1.03±0.33、16.65±0.60、4.78±0.25、14.07±0.60 和7.39±0.15,iNOS mRNA 表达水平分别为 1.04±0.40、20.71±0.66、8.09±0.93、15.44±0.68 和11.66±0.06,Keap-1 蛋白表达水平分别为 1.22±0.16、1.10±0.05、1.18±0.05、1.94±0.08 和 1.17±0.08,Nrf2 蛋白表达水平分别为 1.12±0.16、0.76±0.15、0.65±0.13、0.70±0.16 和 0.82±0.18,HO-1 蛋白表达水平分别为1.34±0.15、1.00±0.12、0.89±0.10、1.50±0.18 和 1.40±0.13.模型组的上述指标与正常组比较,低、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).结论 乌梅丸对溃疡性结肠炎小鼠具有抗氧化应激损伤作用,其作用机制可能与调节结肠Keap-1-Nrf2/HO-1信号通路蛋白表达有关.