基质相互作用分子1（STIM1）是钙池操纵性钙内流（SOCE）的关键成分，通过感知内质网腔内存储Ca 2+含量以控制质膜Ca 2+通道的开放与关闭，进而影响细胞粘附、迁移、基因表达和增殖等过程。研究表明，在缺血性脑卒中（IS）的发生发展过程中，STIM1在神经元、内皮细胞和血小板等多种细胞中表达异常，在高血压调控以及促进血栓形成、激活细胞自噬、介导细胞凋亡和促进神经炎症的病理过程中发挥重要作用。本文对STIM1在IS发生发展和预后评估中的研究进展进行总结，力求为寻找IS的潜在治疗靶点提供理论参考。

CRISPR基因编辑技术的发展改变了我们对人类基因组的理解,推动分子和细胞生物学研究迈向新的领域,加速了生命科学和医学的进展.基于CRISPR的基因筛选工具凭借其高效和便捷的优势,广泛应用于多个生物学领域.衰老是一个受遗传和表观遗传等多种因素调控的复杂过程,解析衰老调控基因有助于理解衰老、开发衰老评估和干预策略.本文概述了 CRISPR筛选工具的进展及其在衰老研究中的应用,并展望其发展前景.CRISPR相关基因操纵工具有望成为延缓衰老和干预衰老相关疾病的重要手段.

目的:探讨钙库操纵的钙离子通道（store-operated calcium entry, SOCE）抑制剂SKF96365对百草枯（paraquat, PQ）致肝肾损伤的作用。方法:体外培养A549细胞，分为对照组（DMSO组、SKF 2 μmol/L组，SKF 10 μmol/L组)，PQ组（PQ+DMSO组、PQ+SKF 2 μmol/L组，PQ+SKF 10 μmol/L组）。采用荧光素酶报告基因技术检测A549细胞活化T细胞核因子（nuclear factor of activated T cells, NFAT）激活水平变化。构建PQ中毒的小鼠模型，分为对照组、SKF组、PQ组、PQ+SKF组。PQ组按照50 mg/kg腹腔注射PQ；SKF组按照10 mg/kg每天腹腔注射SKF96365，共注射3 d。PQ+SKF组按照50 mg/kg腹腔注射PQ一次，按照10 mg/kg每天腹腔注射SKF96365，共注射3 d。第4天处死小鼠取肝肾组织，苏木精-伊红（H&E）染色观察肝脏、肾脏组织病理学变化，TUNEL染色观察肝肾组织凋亡情况。正态分布计量资料多组间均数比较采用单因素方差分析，两组间比较采用LSD- t检验。 结果:荧光素酶报告基因技术检测结果显示PQ组NFAT明显被激活，给予SKF96365预处理后，NFAT激活明显下降，且具有剂量依赖性。HE染色提示PQ染毒组肝脏、肾脏组织轮廓结构不清、细胞肿胀，大量炎性细胞浸润；PQ+SKF组肝脏细胞肿胀减轻，炎性细胞浸润明显减少。TUNEL染色提示PQ染毒组肝脏、肾脏组织凋亡细胞增加，PQ+SKF组凋亡明显减少。结论:SOCE抑制剂SKF96365能够明显减轻PQ引起的肝脏、肾脏损伤。

帕金森病(PD)是世界上第二常见的神经退行性疾病，它的发病机制与线粒体功能障碍、氧化应激反应以及钙稳态失衡有关。近年来，PD与Ca 2+的关系成为研究热点，钙稳态失衡可通过不同的途径导致PD。细胞内Ca 2+水平取决于钙库操纵性钙内流(SOCE)，而SOCE由钙释放激活钙通道调节分子1(Orai1)、基质相互作用分子1(STIM1)及瞬时受体电位通道1(TRPC1)相互作用组成的功能复合体调节。常见的PD神经毒素可通过降低Orai1-STIM1-TRPC1复合体功能，损伤SOCE及其下游的信号通路选择性损伤多巴胺能神经元，并且Orai1-STIM1-TRPC1复合体可能通过作用于小胶质细胞以及内质网调控神经炎症、自噬现象以影响PD的发生发展。因此恢复Orai1-STIM1-TRPC1复合体表达及功能，维持钙稳态可能成为PD的有效治疗靶点。

目的:周围神经损伤是一种世界范围内的疑难病,治疗的首要策略是通过轴突的再生来桥接神经病损。物理因素对轴突再生的促进作用逐渐被关注,精确控制的机械力对轴突生长具有重要作用。但如何在体内对轴突施加一个远程、无创、精确、可控的机械力是一个挑战。生物纳米技术的兴起为这个设想提供了可能。通过将磁性纳米粒子（MNPs）整合到神经细胞内,将其作为磁性操纵的执行器,利用外部磁场来影响细胞行为,从而实现对神经再生的指导与操控。

钙释放激活钙调节蛋白1(calcium release-activated calcium modulator 1， ORAI1)基因编码基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1，STIM1)及ORAI1蛋白，二者在细胞膜上广泛表达， ORAI1基因的表达可通过影响二者的功能及结构，进而影响机体对于Ca 2+的存储及转运，最终导致机体免疫系统功能紊乱而发病，本文围绕近年来 ORAI1基因的表达及相关疾病的研究进展进行综述。

目的:研究副溶血弧菌群体感应(quorum sensing，QS)系统核心调控子OpaR对 pilABCD的转录。 方法:提取副溶血弧菌野生株(wild-type，WT)和 opaR突变株(Δ opaR)的总RNA，采用实时定量PCR(quantitative real-time PCR，qPCR)研究OpaR对 pilA( pilABCD首基因)的转录调控；将 pilABCD上游调控区DNA序列克隆入pHRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游，构建LacZ重组质粒，并将该重组质粒转入WT和Δ opaR中制备LacZ菌株，通过LacZ报告基因融合试验研究OpaR对 pilA的调控以及 pilA的时相表达。提取WT株总RNA，采用引物延伸试验研究 pilABCD的转录起始位点；PCR扩增 pilABCD上游调控区DNA序列，并纯化His-OpaR蛋白，通过凝胶阻滞试验(electrophoretic mobility shift assay，EMSA)研究His-OpaR与靶DNA片段是否有直接的结合作用，并进一步采用DNaseⅠ足迹试验分析其结合位点。 结果:qPCR和LacZ报告基因融合试验显示OpaR对 pilABCD的转录具有激活作用， pilA的表达水平随培养时间的延长而持续升高；引物延伸结果显示 pilABCD只有一个转录起始位点T(-155)；EMSA和DNaseⅠ足迹试验结果显示OpaR对位于 pilA的翻译起始位点上游-246~-197 bp和-181~-131 bp之间的DNA序列具有结合活性。 结论:OpaR对 pilABCD的转录具有直接的激活活性。

胰腺腺泡细胞异常钙信号是AP最早期的细胞内事件，在AP的发生和发展过程中起关键作用。腺泡细胞内钙信号的转导受细胞内钙信号元件严格调控，主要包括细胞内钙库上表达的钙释放通道如三磷酸肌醇受体和兰尼碱受体、细胞膜上的钙库操纵型钙内流通道以及参与回补胞内钙库的肌质网膜钙ATP酶和参与钙外排的胞膜钙ATP酶等。目前研究提示这些钙信号元件或可作为AP早期治疗的干预靶点。本文围绕钙库操纵型钙内流通道及钙信号下游效应分子开展了深入系统的研究，旨在探索靶向钙信号的新型AP早期治疗的药物靶点。

CRISPR/Cas是原核生物在进化过程中获得的一种免疫防御系统,用于抵抗外来遗传物质的入侵,近年来被开发成为高效的基因编辑、基因调控以及分子诊断工具.其可编程靶向机制揭开了利用该系统进行基因组操作的序幕,并允许在活性范围内实现动态调节和控制基因表达.作为现有基因修饰手段中灵活性最强和成本最低的技术之一,已被广泛应用于临床疾病治疗、工农业生产、可持续染料开发和化学品加工等领域.随着对CRISPR/Cas系统的不断深入挖掘和探索,大量研究报道了 gRNA工程改造及优化方法,包括改变间隔序列长度、调节恒定区和可变区的结构、向末端或中间延伸添加额外功能序列及化学合成修饰等,以期降低脱靶突变率,提高作用效率,充分激发CRISPR基因操纵工具在生物医学方面的潜力.基于此,本综述将介绍CRISPR/Cas9和CRISPR/Cas12系统中gRNA工程化设计方法及应用研究的最新进展,分析探讨了当前工程化gRNA技术面临的机遇和挑战,旨在为获得性能更加优异的gRNA提供思路和方向,从而提高利用CRISPR/Cas系统探测人类细胞基因组的能力,进一步为可编程生物学带来更多可能性.

[目的]谷氨酸棒杆菌是一种重要的工业微生物,挖掘可调控性元件可有效拓展谷氨酸棒杆菌研究和应用的广度和深度.[方法]在谷氨酸棒杆菌组成型强启动子PH10 上嵌入阻遏蛋白CymR结合的操纵序列CuO,构建了 4-异丙基苯甲酸(Cumate)为诱导剂的启动子PH10-CuO.[结果]绿色荧光蛋白作为报告基因的实验结果显示,无诱导剂时,谷氨酸棒杆菌工程菌相对荧光强度较低;以 25 μg/mL 4-异丙基苯甲酸诱导 12 h时,谷氨酸棒杆菌工程菌荧光强度达 62 000,证明PH10-CuO具有很好的严谨性和诱导表达强度.构建了以启动子PH10-CuO调控recET和Cas12a表达的谷氨酸棒杆菌基因编辑质粒,实现谷氨酸棒杆菌染色体上靶标基因的精准编辑和外源基因插入.[结论]诱导型启动子PH10-CuO具有表达强度高且渗漏表达低的特点,可用于谷氨酸棒杆菌中被其调控基因的时序性表达.