目的:分析秭归县日本斑点热患者的流行和临床特征，为提高日本斑点热的防治措施提供依据。方法:病例系列分析。研究秭归县人民医院2021年4月至2022年8月确诊并住院的18例日本斑点热患者，其中男7例，女11例；年龄60（54，68）岁。收集病历资料，分析其流行病学特征、临床特征、实验室检查及影像学特点。结果:18例日本斑点热患者，17例为农民，1例为教师，均有野外接触史。主要发病时间为4至10月，春秋季最多。患者首发症状一般为高热、头痛、乏力、全身肌肉酸痛；15例患者出现皮疹，12例出现焦痂，3例患者无皮疹和焦痂；患者中10例双下肢水肿，3例出现意识障碍等精神症状。实验室检查发现：15例患者白细胞正常或降低，11例血小板降低，C反应蛋白、降钙素原、D-二聚体、乳酸脱氢酶、α-羟丁酸脱氢酶均升高，17例白蛋白降低；13例丙氨酸转氨酶和14例天冬氨酸转氨酶升高；11例尿蛋白异常。结论:日本斑点热最常见的临床表现为高热寒战、乏力、头痛、全身肌肉酸痛，作为立克次体感染主要特征的焦痂与皮疹并非在所有患者中存在，因此增加了日本斑点热的诊断难度，造成患者病情的延误，甚至死亡。医疗工作者应在日本斑点热高发季节提高对有野外接触史的不明原因高热患者感染立克次体的警惕，结合患者临床表现、实验室检查结果、影像学资料等及早诊断并给予正确的抗菌药物治疗，控制病情。

日本斑点热是由日本立克次体感染、经蜱虫叮咬传播的一种自然疫源性疾病。本例患者表现为发热、皮疹、头痛、焦痂溃疡，病程中出现血小板急剧下降、凝血功能异常、低血压休克、急性呼吸窘迫综合征、肝肾功能损伤、意识障碍等严重并发症，宏基因组学第二代测序检出日本立克次体，结合患者实验室检查和临床表现诊断为日本斑点热，经多西环素抗感染及对症支持治疗后好转。

患者女性，72岁，因"反复发热伴纳差、乏力10 d"于2022-05-10收入江苏省中西医结合医院急重症医学科。患者入院前10 d无明显诱因出现恶寒发热，体温峰值38.9℃，伴纳差、乏力和全身酸痛，无其余不适。自服"头孢类"抗生素后无明显缓解，遂于2022-05-03至溧阳市戴埠镇中心卫生院就诊，查血常规：WBC 8.85×10 9/L、N 83.5%、PLT 214×10 9/L、Hb 117 g/L、CRP 13.9 mg/L；尿常规：酮体（-）、尿蛋白（-）、白细胞（+）；胸部正位片：两肺纹理增多增粗。考虑泌尿道感染，予"头孢唑肟、热毒宁"输液两天后仍反复发热，最高40℃，后于2022-05-05转至溧阳市人民医院，收住肾内科。2022-05-06复查血常规：WBC 8.15×10 9/L、N 89%、PLT 148×10 9/L、Hb 110 g/L、CRP 78.25 mg/L；生化：转氨酶及胆红素水平基本正常，SCr 51.6 μmol/L、Alb 31.9 g/L；尿常规：尿蛋白（+），微量白蛋白150 mg/L；降钙素原1.34 ng/mL；泌尿系彩超提示右肾结石；心脏彩超：EF 64%，左室舒张功能减退，轻度主动脉瓣、三尖瓣关闭不全。住院期间予"头孢匹胺"抗感染等治疗，但体温仍有反复，最高38.5℃左右，2022-05-10复查血小板计数降至51×10 9/L，BNP 3 690 pg/mL，胸部CT：双侧胸腔积液，考虑肺水肿。为进一步治疗转入本院急重症医学科。入科时，患者神清，精神萎，查体：体温37.2℃，心率82次/min，呼吸16次/min，血压145/98 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），SPO 2：97%。查体发现患者左腋下可见两处焦痂（图1A），患者否认疼痛和瘙痒。躯干及四肢可见散在多发出血性皮疹（图1B），无明显瘙痒。听诊双肺呼吸音粗，可闻及湿啰音；心律齐，未闻及杂音；腹软，无明显压痛、反跳痛和肌紧张，双下肢中度凹陷性水肿。神经系统查体无明显异常。当日复查血常规：WBC 9.26×10 9/L、N 87.5%、PLT 55×10 9/L、Hb 127 g/L、CRP 172.25 mg/L；生化：Alb 23.9 g/L、SCr 96 μmol/L；NT-proBNP 3 470 pg/mL；凝血：APTT 46.1 s、FIB 2.59 g/L、D二聚体10.09 μg/mL；降钙素原1.5 ng/mL。

患者，女，61岁，农民，籍贯河北省廊坊市，2021年7月14日左下肢出现一淡红色斑丘疹，其上有水泡，无疼痛及瘙痒，7月15日左腿见数个米粒大小红色皮疹。7月16日患者发热，体温40.0 ℃，晕厥3次，可唤醒。患者四肢及躯干可见红色皮疹，前胸后背为著，无瘙痒，伴乏力、肌肉酸痛、食欲下降，服用"连花清瘟颗粒"未缓解。7月17日体温38.9 ℃，就诊于廊坊市人民医院，化验WBC为2.89×10 9/L，中性粒细胞百分比为88.9%，嗜酸性粒细胞百分比为0，血小板(PLT)和血红蛋白正常，肺部CT示双肺少许慢性炎症，头颅CT未见异常，予退热治疗。1 d前患者发热伴寒战，体温38.9 ℃，伴咽痛、乏力、肌肉酸痛，再次就诊，化验WBC 5.8×10 9/L，中性粒细胞百分比为90.2%，PLT 41×10 9/L，嗜酸性粒细胞百分比为0，血红蛋白正常，ALT 50 U/L，AST 169 U/L，肌酸激酶(CK) 356 U/L，尿蛋白±，予头孢孟多酯钠2 g (每8小时1次)静脉滴注。复查PLT为32×10 9/L，ALB为22.9 g/L，尿蛋白+，潜血+，发现左下肢焦痂，医生建议转至首都医科大学附属北京佑安医院就诊。

日本斑点热(Japanese spotted fever)属于斑点热群立克次体属的传染性疾病,是日本立克次体感染引起的,以蜱类为传播媒介的急性热性发疹性疾病.日本斑点热的典型症状表现为被蜱叮咬2～8 d 后出现全身弥漫性红斑、手掌红斑、头痛、高热、寒战等症状.

目的 探讨关于斑点热立克次体的临床诊断及流行病学调查而进行的诊断方法学研究.方法 构建R.Japonica Anhui 120 strain OmpB原核表达质粒,表达、鉴定并纯化重组蛋白,用其作为抗原建立间接ELISA检测方法,检测120份临床样本中日本斑点热立克次体特异性IgG抗体,并评价方法的敏感性和特异性.结果 获得了高表达、高纯度的OmpB重组蛋白,建立的间接ELISA方法体系与美国食品和药物管理局认可的诊断试剂盒相比有良好的特异性和敏感性,两者的特异性为100％,敏感性为96.7％,符合率为99.2％,Kappa值为0.98.结论 OmpB重组蛋白具有很好的免疫反应性,能特异地检出斑点热立克次体IgG抗体,间接ELISA方法可作为临床诊断的技术储备及流行病调查和科学研究.

目的 调查东北地区蜱感染斑点热群立克次体(SFGR)情况及其种型分布.方法 2012-2014年5-6月,采用人工布旗法在东北3省9个市(县)和黑瞎子岛不同生境采集游离蜱以及家畜(牛、羊)体表寄生吸血蜱并鉴定;采用PCR方法对蜱种进行检测,对检出的阳性样本进行测序和序列分析,并建立分子系统进化树.结果 蜱的SFGR阳性率为11.43％,不同地区SFGR阳性率差异无统计学意义(χ2=7.683,P=0.566);不同蜱种SFGR感染率差异亦无统计学意义(χ2=6.354,P=0.174).5份嗜群血蜱标本及1份日本血蜱标本、1份森林革蜱标本与Rickettsia heilongjiangensis 054株(AF179362.2)和HL-93株(AF179364.1)聚为一支,同源性为99.30％～100％;3份长角血蜱标本与Candidatus R.hebeiii(QHD-3.HQ651817.1、TS-1.HQ651818.1、QHD-1.HQ651815.1)聚为一支,同源性为99.83％～100％;4份森林革蜱标本与R.sp.DnS14(AF009130.2)和吉林株R.sp.JL-02(AY093696.1)聚为一支,同源性为98.79％～100％.结论 东北地区蜱类SFGR感染普遍,存在感染SFGR蜱种的多样性和SFGR基因型多样性特点,提示该地区人群应重视对蜱传斑点热的防护,同时应加强患者症状的鉴别与诊断能力.

目的 了解吉林省延边朝鲜族自治州(延边州)图们江流域边境地区游离蜱携带斑点热群立克次体(SFGR)情况及基因型分布.方法 2017年4—9月,在延边州图们江流域边境地区的珲春、图们、和龙、龙井市用布旗法采集游离蜱进行分类鉴定;采用PCR方法检测蜱体内SFGR ompA基因,通过基因测序鉴定其种类,并进行系统进化分析.计算采用SFGR的组阳性率和最低感染率(MIR),比较不同特征蜱虫间组阳性率的差异.结果 本研究共采集蜱虫3 079只,共分成536个组, SFGR核酸组阳性率为39.7%(213组),MIR为6.9%.森林革蜱、嗜群血蜱、日本血蜱、长角血蜱、全沟硬蜱SFGR核酸组阳性率分别为80.4%(41/51)、14.0%(25/179)、20.2%(18/89)、78.9%(101/128)和25.9%(21/81)(P<0.001);MIR分别为19.4%、3.0%、3.4%、10.8%和5.9%.雌性成虫、雄性成虫、若虫和幼虫SFGR核酸组阳性率分别为36.4%(95/261)、34.2%(67/196)、56.3%(40/71)和7/8(P<0.001);而MIR分别为7.9%、7.7%、4.9%和3.5%.共鉴定5种SFGR基因型,分别为立克次体Candidatus Rickettsia longicornii、拉欧蒂立克次体、黑龙江立克次体、新塔拉塞维奇立克次体和立克次体Rickettsia monacensi ,其同源性均达到了98%~100%. Candidatus Rickettsia longicornii 、拉欧蒂立克次体、黑龙江立克次体、新塔拉塞维奇立克次体与已知种进化关系较近;Rickettsia monacensis进化关系较远.结论 图们江流域边境地区蜱类SFGR感染普遍,存在常见蜱种感染SFGR基因型多样性和携带SFGR蜱虫种类多样性.

目的 建立斑点热群立克次体(SFGR)TaqMan实时荧光定量PCR(qPCR)快速检测方法 .方法 根据日本斑点热立克次体外膜蛋白A(ompA)基因序列设计特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR检测方法,对其特异性、灵敏性、重复性进行检测,用建立的此检测方法和常规的巢式PCR方法同时对临床收集的80份患者血标本进行检测并比较两者结果 .结果 成功建立了检测SFGR的实时荧光定量PCR方法,标准曲线的循环阈值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(r>0.99),且在检测SFGR核酸样本时具有良好的灵敏度、特异性和重复性.结论 该研究建立了基于TaqMan探针检测SFGR的实时荧光定量PCR检测方法,为临床实验室快速确诊SFGR疾病提供了快速、有效的技术手段.

目的 对从我国临床患者血液中新发现和分离出的日本斑点热立克次体安徽120株ompB基因及其编码蛋白进行系统的结构与功能预测,为深入了解其在立克次体致病机制中的作用、研发斑点热临床诊断试剂和疫苗提供理论基础.方法 基于日本斑点热立克次体安徽120株ompB基因及其编码的氨基酸序列,应用生物信息学方法预测其信号肽、跨膜区、疏水性等性质和可能的B细胞抗原表位.结果 日本斑点热立克次体安徽120株ompB基因在3297～3311处存在连续15个碱基的缺失,除此之外,该分离株还有4个碱基突变.该基因编码的氨基酸数目为1651个,蛋白质分子量为167.69 ku,共由20种氨基酸组成,其中含量较多的氨基酸是Gly;理论等电点pI为5.15,消光系数为58805或58680,蛋白不稳定指数为7.15,脂肪指数为88.86,总平均亲水性(GRAVY)为0.06,为疏水性蛋白;Sig-nal peptide(Sec/SPI)Likelihood为0.5677,有信号肽序列;存在一个Pfam区域和自转运体区,分别与细菌黏附宿主和蛋白质转运有关;蛋白二级结构中以无规卷曲为主,其次为β-折叠和 α-螺旋,分别占到53.73％、30.83％和15.45％.同源模建蛋白的三级结构中,第1308～1651氨基酸部分在蛋白表面形成桶状结构,可能具有丝氨酸蛋白酶的作用;蛋白分子内抗原表位较丰富,共有159个可能的抗原表位,预测分数最高(0.94)的为1269～1284位序列.结论 成功分析和预测了日本斑点热立克次体安徽120株ompB基因及其编码蛋白的组成、蛋白质的二级结构、三级结构和B细胞抗原表位,为研究日本斑点热立克次体的致病机制、临床诊断试剂和亚单位疫苗的研发提供了理论支持.