目的:研究昆仑雪菊干预小胶质细胞功能的作用机制.方法:采用CCK-8 法检测昆仑雪菊总黄酮对BV2 细胞的增殖抑制活性,Griess法和ELISA检测细胞炎症因子一氧化氮(NO)、白细胞介素-6(IL-6)的分泌.借助自建昆仑雪菊成分-靶点数据集对昆仑雪菊中 9 个主要黄酮成分和相关作用靶点进行筛选.通过GeneCards、GENE、STRING数据库及R语言收集并筛选小胶质细胞功能靶点,筛选昆仑雪菊改善小胶质细胞功能的靶点,构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并用Cytoscape软件的NetworkAnalyzer功能筛选核心靶点.利用基因集富集分析(GSEA)软件对分子特征数据库MSigDB中的相关靶点进行Hallmark基因分析.使用Bioconductor数据库进行基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.结果:昆仑雪菊黄酮类提取物在 4 μg·mL-1 时可以显著抑制小胶质细胞激活分泌NO和IL-6.昆仑雪菊黄酮类成分可能作用于蛋白激酶B(Akt)、肿瘤坏死因子(TNF)、IL-6、TP53、酪氨酸激酶C(SRC)、表皮生长因子受体(EGFR)、JUN、信号转导和转录激活因子 3(STAT3)、丝裂原活化蛋白激酶 3(MAPK3)、CTNNB1 等靶点干预小胶质细胞的功能.涉及的通路包括磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)-Akt信号通路、MAPK信号通路、TNF信号通路、信号转导子和转录激活子(JAK)-STAT信号通路等.结论:昆仑雪菊黄酮类成分可能通过参与调控PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、TNF信号通路、JAK-STAT信号通路等的相关靶点,实现调节胶质细胞活化的作用.

目的 研究昆仑雪菊多糖(KSCP)对急性及免疫性肝损伤小鼠的保护作用及机制.方法 将健康雌雄各半的昆明(KM)小鼠36只随机分为正常对照组,急性肝损伤模型组,KSCP低、中、高(0.3,0.6,1.2 mg/10 g)剂量组,阳性药联苯双酯滴丸(1.5 mg/10 g)组,连续灌胃10 d.采用四氯化碳(CCl4)诱导建立急性化学性肝损伤模型.另取健康雌雄各半的昆明(KM)小鼠36只随机分为正常对照组,免疫性肝损伤模型组,KSCP低、中、高(0.3,0.6,1.2 mg/10 g)剂量组,阳性药联苯双酯滴丸(1.5 mg/10 g)组,连续灌胃10 d.除了正常对照组之外,其它组采用腹腔注射卡介苗联合脂多糖(BCG+LPS)建立小鼠免疫性肝损伤模型.检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷酰转肽酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的水平和肝匀浆中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化物(SOD)的含量,考察KSCP对小鼠肝重和脾重的影响,肝组织HE染色作病理切片分析.结果 在急性肝损伤和免疫性肝损伤实验中,与模型组比较,KSCP低、中、高剂量组和阳性药组肝指数、脾指数、MDA、ALT、AST、TNF-α和IL-6含量和水平均下降,SOD活性逐渐增高,肝细胞水肿、变性等损伤程度明显减轻.结论 低、中、高剂量KSCP对CCl4诱导的急性肝损伤及BCG+ LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤均有一定肝脏保护作用和显著的抗炎活性.

目的 研究青海昆仑雪菊对糖尿病(DM)大鼠血糖的影响,初步探讨其降血糖作用机制.方法 采用高脂饲料喂养加链脲佐菌素(STZ)注射的方法建立2型糖尿病(T2DM)模型大鼠,以血糖≥16.7 mmoL/L界定造模是否成功,将造模成功的大鼠随机分为DM组、二甲双胍组、雪菊水提组、甲醇组及乙醇组,另设对照组.分别用二甲双胍片溶液、青海昆仑雪菊水、甲醇、乙醇提取液对大鼠连续灌胃4 w,DM组、对照组用生理盐水灌胃.每周大鼠尾尖测血糖,4w后腹主动脉取血检测血清谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、胰岛素(INS)及C肽(C-P)水平.结果 青海昆仑雪菊能显著降低T2DM模型大鼠血糖水平(P＜0.01),甲醇、乙醇提取液降糖效应优于水提液(P＜0.05);青海昆仑雪菊能明显增加血清GSH 、SOD 、INS、CP水平(P＜0.05),降低MDA水平(P＜0.05).结论 青海昆仑雪菊对T2DM模型大鼠有较好的降血糖作用,其作用可能与雪菊中黄酮类成分改善胰岛β细胞氧化应激损伤,增加血清INS水平有关.

目的 研究昆仑雪菊的遗传毒性,为其食用安全性提供科学依据.方法 试验受试物为昆仑雪菊浸泡浓缩液,每毫升相当于1 g昆仑雪菊干品.Ames试验和体外哺乳类细胞染色体畸变试验分别设昆仑雪菊浸泡浓缩液0.008、0.04、0.2、1、5 mg/皿组和1.25、2.5、5 mg/ml组,直接计数培养基上各菌株的回变菌落数和染色体畸变细胞数.微核试验、精子畸形试验和小鼠精原细胞或精母细胞染色体畸变试验均设昆仑雪菊浸泡浓缩液低、中、高剂量组(5、10、20 g/kg),各试验分别镜检计数每只动物1 000个嗜多染红细胞(PCE)、1 000个完整精子、100个中期分裂相细胞,记录有微核的嗜多染红细胞数量、畸变精子类型和数目、染色体畸变细胞数.结果 昆仑雪菊遗传毒性试验结果均为阴性.结论 本研究未发现昆仑雪菊有遗传毒性.

目的:明确昆仑雪菊中原花青素B2和绿原酸的含量,探讨昆仑雪菊对高脂饮食2型糖尿病小鼠血糖的影响.方法:采用RP-HPLC法,以流动相乙腈-0.01％磷酸溶液,检测波长315 nm,流速1 mL/min测定昆仑雪菊中原花青素B2和绿原酸的含量.将昆明种小鼠60只随机分为对照组、模型组、阳性组及昆仑雪菊高(4 g/kg)、中(2 g/kg)、低(1 g/kg)剂量组,对照组与模型组给予等容量生理盐水,其余各组灌胃给予相应药物,连续14天.在造模前后以及给药后7天和14天测定各组小鼠血糖值,并观察小鼠体质量和超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量.结果:昆仑雪菊中原花青素B2和绿原酸的含量分别为0.016、1.683 mg/g.昆仑雪菊能明显升高糖尿病模型小鼠体质量(P<0.05),降低糖尿病模型小鼠血糖(P<0.05),升高糖尿病模型小鼠SOD的活力,降低MDA含量.结论:昆仑雪菊对高脂饮食2型糖尿病小鼠有一定保护作用,其有效成分可能是原花青素B2和绿原酸.

饮茶已经成为全球范围内居民的生活行为和健康习惯,而花茶集茶味与特殊花香于一体,具有独特的保健功效成为老少皆宜的保健饮品.菊花是常见的花茶之一,有散风清热、平肝明目和解毒消炎等作用,为人体健康保驾护航[1-5].菊花在种植和加工过程中均有可能引入重金属.在享受花茶的保健养生功效的同时,也要对菊花质量品质进行监控,特别是对菊花中重金属含量的监测以及对饮用菊花茶汤时所存在的健康风险进行评估[6-8].菊花茶作为一种饮料,不能直接食用,而是饮用菊花茶汤.因此,本文在测定胎菊、贡菊、杭白菊、金丝皇菊、昆仑雪菊等菊花样品中砷、汞、镉、铅含量的同时,模拟日常饮用花茶的实际过程,测定不同浸泡时间对菊花茶汤重金属溶出率的影响[9-16].

昆仑雪菊学名两色金鸡菊(Coreopsis Tinctoria Nutt.),属菊科金鸡属,主要生长在海拔高2 000～3 000 m的昆仑山区,属高寒植物[1].在长期演化过程中,其结构特征逐步与耐旱的草本植物极为相似[2].昆仑雪菊在新疆比较广泛地作为一种花茶被饮用,在维吾尔民族医药中也作为一种维药材应用,具有清热解毒、燥热烦渴、调节血压、增进食欲和调理胃肠等作用.昆仑雪菊的化学成分主要含有黄酮、氨基酸、皂苷、多糖和挥发油等;昆仑雪菊的药理作用主要表现在抗血小板聚集作用、降血脂、降血压、抗癌、抑菌、抗衰老、提高免疫力和抗炎等方面[3-11].

目的 研究新疆昆仑雪菊水提物对小鼠肠道菌群的影响.方法 C57BL/6小鼠,雄性,8周龄,40只,分为4个组(每组10只):高、中、低三个剂量组和空白对照组,给药14 d,收集给药前后小鼠粪样,16S rDNA实时荧光定量PCR法测定粪样中肠杆菌、肠球菌、乳杆菌和产气荚膜梭菌水平.结果 与空白对照组比较,中剂量组小鼠肠道粪样中乳杆菌显著增多(t=-2.503,P＜0.05),低剂量组与高剂量组变化不显著;与空白对照组比较,其他组小鼠肠道中肠杆菌属、肠球菌属和产气荚膜梭菌水平均无显著变化.结论 参照《保健食品检验与评价技术规范—2003版》之“调节肠道菌群作用检验方法”,新疆昆仑雪菊水提物对小鼠肠道菌群具有一定的调节作用.

目的 探讨昆仑雪菊总黄酮对食管癌的抗瘤作用及可能的分子机制.方法 用不同浓度的雪菊总黄酮提取物与Eca 109细胞共孵育后,光镜观察Eca 109细胞形态的变化,噻唑蓝(MTT)法检测雪菊总黄酮对Eca 109细胞的生长抑制作用;应用中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)及在线枟人类孟德尔遗传枠(OMIM)数据库查找雪菊总黄酮成分 、靶点及食管癌的相关靶点信息,Cytoscape3.2.6软件进行网络构建 、分析及可视化工作,构建雪菊总黄酮-靶点-食管癌网络模型,通过DAVID网站进行关键靶点的日本京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.结果 光镜及MTT结果显示,雪菊总黄酮明显抑制了Eca 109细胞的生长;通过TCMSP数据库找到总黄酮2个主要活性化合物的78个靶点;通过OMIM数据库找到食管癌相关靶点并进行扩展,取高于2倍平均节点度的靶点共141个;将化合物及食管癌靶点映射交集后找到表皮生长因子(EGFR)、Bcl-2、TP53、GSK3B等13个关键靶点,KEGG通路富集分析显示,雪菊总黄酮对食管癌的抗瘤作用可能与影响细胞分裂增殖 、凋亡 、血管生成等生物学过程有关.进一步通过Western blot进行细胞实验的验证结果表明,雪菊总黄酮明显下调了Bcl-2的表达,诱导了细胞的凋亡.结论 雪菊总黄酮对食管癌的抗瘤作用是多靶点 、多途径的,PI3K/Akt信号通路可能发挥关键作用.

目的 优化新疆昆仑雪菊总黄酮的提取工艺,并对其抗氧化活性进行研究.方法 以单因素试验结果为依据,以雪菊总黄酮含量与浸膏得率为综合指标,采用响应面法,考察乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取温度的影响.通过测定总黄酮清除DPPH自由基能力、还原力及抑制自发性脂质过氧化的作用研究其抗氧化作用.结果 雪菊总黄酮最佳提取工艺为:乙醇体积分数为60％,料液比为1:67,提取温度为80℃,提取时间为21 min.雪菊总黄酮清除DPPH自由基的IC50为7.16μg/ml,雪菊总黄酮浓度为100μg/ml时吸光度为1.75,雪菊总黄酮浓度为200μg/ml时脂质过氧化抑制率为25.13％.结论 优选的提取工艺稳定可行,可以用于雪菊总黄酮的提取,体外抗氧化试验证明雪菊总黄酮具有较好的抗氧化性.