目的:使用缺氧模型探究乙酰左旋肉碱(ALCAR)对人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞活力、形态完整性和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:第一组实验通过暴露ARPE-19细胞培养物于不同浓度确定最佳CoCl2剂量.建立五组ARPE-19细胞培养物,包括对照组,假手术组(200 μM CoCl2)和分别接受1、10、100 mM ALCAR 联合 200 μM CoCl2 组,以评估 ALCAR对细胞活力的影响.使用MTT法测量细胞活力.通过倒置相差显微镜观察细胞的形态特征.采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测ARPE-19细胞分泌VEGF和HIF-1α的水平.结果:ARPE-19细胞暴露于不同剂量的CoCl2中,以创建缺氧模型.然而,暴露于浓度为200μMCoCl2时,细胞活力显著降低至83％.ALCAR在1 mM和10 mM浓度下可增加细胞活力,而最大浓度(100 mM)没有额外效果.与假手术组相比,浓度为1 mM和10 mM ALCAR组的细胞活力显著更高(P=0.041、0.019).细胞活力和形态不受最大剂量ALCAR(100 mM)的影响.与假手术组相比,10 mM ALCAR组VEGF和HIF-1α水平显著降低(P=0.013、0.033).结论:ALCAR是可行的治疗选择,可为视网膜疾病开辟新的治疗途径,与年龄相关性黄斑变性(AMD)特别相关.然而,仍需开展进一步研究明确定义其确切机制,以期充分阐明ALCAR对抗视网膜疾病的应用潜力.

目的:探讨经肛门内镜显微手术(transanal endoscopic microsurgery，TEM)在不同特点的中低位直肠癌器官保留中的应用。方法:回顾性分析北京协和医院于2017年1月至2023年10月间收治的81例行TEM术或采用TEM平台行经肛全直肠系膜切除术(transanal total mesorectal excision, taTME)的直肠癌患者资料。结果:患者根据临床和病理特征被分为三组：早期直肠癌行TEM术组(A组)、进展期直肠癌新辅助治疗(neoadjuvant chemoradiotherapy，nCRT)后行TEM术组(B组)、进展期直肠癌采用TEM平台行taTME组(C组)。A组32例，临床分期cT1N0，均行TEM术；切除后具有高危因素者追加根治性手术或辅助放化疗。8例为肠镜切除后追加TEM术，术后病理均未见肿瘤。中位随访时间37.5个月(4～84个月)，无病生存30例(93.75%)。B组36例，nCRT后达到cCR或near-cCR，行TEM术。术后病理ypT0 21例(58.3%)、ypT1 4例(11.1%)、ypT2 10例(27.8%)、ypT3 1例(2.8%)。中位随访时间56个月(12～80个月)，无病生存26例(72.2%)。C组13例，临床分期为cT3＋NanyM0或cTanyN＋M0，所有患者nCRT后，采用TEM平台行taTME术。中位随访时间48个月(4～68个月)，无病生存11例(84.6%)。三组患者年龄、体质量指数(body mass index，BMI)差异无统计学意义(P＝0.818、0.934)。A、B组间肿瘤大小、距肛门距离、ASA差异有统计学意义(P＝0.011、0.015、0.001)。B、C组间肿瘤大小、ASA差异有统计学意义(P<0.001、P＝0.0276)。三组间5年无进展生存期比较，A、B组间差异有统计学意义(P＝0.034)，A、C组间差异无统计学意义(P＝0.053)，B、C组间差异无统计学意义(P＝0.534)。结论:TEM技术在中低位直肠癌保肛手术中具有重要作用，低危早期直肠癌可完整切除；对于有高危因素者，可在术后追加辅助放化疗。对于局部进展期直肠癌，如行nCRT后肿瘤退缩不明显，可以TEM为平台行taTME术，实现低位保肛，但并发症较多；如达到cCR或near-cCR且患者保肛意愿强烈，可考虑行TEM术，但可能牺牲无进展生存时间。

目的 建立光茎茜草质量标准.方法 采用性状、显微鉴别、薄层色谱(TLC)进行定性鉴别,采用2020年版《中国药典》方法检测其水分、总灰分、浸出物含量,HPLC法测定其甲基异茜草素含量.结果 显微鉴别特征明显,横切面依次可见木栓层、皮层、韧皮部、木质部;粉末可见木栓细胞、薄壁细胞、草酸钙针晶、具缘纹孔;TLC特征斑点分离清晰;10批样品水分、总灰分、浸出物平均含量分别为6.3％、8.5％、17.5％;甲基异茜草素在0.619～30.9500 μg内与峰面积线性关系良好(r=0.9996),平均加样回收率为98.3％,RSD为0.98％,平均含量为0.0546％.结论 初步制订的光茎茜草质量标准规定水分不得过10.0％,总灰分不得过12.0％,浸出物以40％乙醇为溶剂采用热浸法测定不得少于12.0％,甲基异茜草素含量按干燥品计不得少于 0.030％.

目的 提升藏药川西小黄菊的质量标准.方法 参照2020年版《中国药典》四部通则,以7批不同来源的川西小黄菊为研究对象,对其进行性状、显微、薄层色谱鉴别及水分、总灰分、浸出物和含量测定研究.结果 川西小黄菊在性状、显微和薄层色谱鉴别方面均具有专属性特征;水分含量为9.18％～12.00％,总灰分含量为6.48％～7.98％,酸不溶性灰分含量为1.28％～1.62％,热浸法水溶性浸出物含量为25.32％～34.05％,建议暂定药材中水分、总灰分、酸不溶性灰分含量分别不得过13.0％、8.0％、1.8％,热浸法水溶性浸出物含量不得少于24.0％.川西小黄菊中总黄酮在18.892～113.352 mg·L-1(r=1.000)内与吸光度线性关系良好;平均回收率(n=6)为97.6％(RSD=2.4％),方法准确度良好;建议暂定川西小黄菊含总黄酮以芦丁(C27H30O16)计不得少于2.5％.结论 该研究结果可为川西小黄菊药材的质量控制和标准提高提供参考.

目的 制备一种针尖层负载透明质酸(Hyaluronic acid,HA)修饰的盐酸青藤碱脂质体可溶性微针(HA-SMH-Lip-DMNs),对其进行表征,并考察其体外透皮性能、细胞摄取能力和体外抗炎能力.方法 采用两步浇铸法制备HA-SMH-Lip-DMNs,使用高效液相色谱(HPLC)法测定其载药量,通过扫描电镜、穿刺试验、Franz扩散池法等检测其形态、皮肤穿刺性能和体外透皮能力.以异硫氰酸荧光素脂质体(HA-FITC-Lip/FITC-Lip)代替HA-SMH-Lip,制备荧光微针(HA-FITC-Lip-DMNs/FITC-Lip-DMNs),并运用流式细胞仪和荧光显微镜观察炎症细胞对HA-FITC-Lip-DMNs/FITC-Lip-DMNs的摄取情况.利用ELISA试剂盒检测细胞培养上清中的炎症因子一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素 1β(IL-1β)和白细胞介素 10(IL-10)水平,评估HA-SMH-Lip-DMNs的抗炎作用.结果 制备的HA-SMH-Lip-DMNs形状大小均匀,阵列完整美观,每片平均载药量(114.01±1.04)μg,有良好的穿刺能力.体外透皮结果显示HA-SMH-Lip-DMNs 36 h的累积释放量为(101.47±2.91)μg·cm-2,其透皮能力优于 SMH 溶液组.体外摄取结果表明 RAW 264.7 细胞对HA-FITC-Lip-DMNs摄取较多(P＜0.01).与模型组相比,HA-SMH-Lip-DMNs组能显著降低TNF-α、IL-1β和NO的水平(P＜0.01),同时提高IL-10 的水平(P＜0.01).结论 该研究制备的HA-SMH-Lip-DMNs具备良好的形态特征、细胞摄取能力、体外透皮性能以及抗炎活性,有望成为一种新型的经皮给药系统.

为探究生长发育过程中板栗(Castanea mollissima)雌花解剖学特征及其细胞壁成分变化规律,以'燕山红栗'('Yanshan Hongli')为试验对象,通过石蜡切片观察内部形态变化并通过荧光染色观察细胞壁成分变化.依据内部显微结构变化确定所采集的雌花样品集中在4个最重要的发育阶段,即花朵原基分化期、柱头原基分化期、柱头伸长期和开花期.荧光染色结果表明,在发育时期推移过程中,雌花细胞壁中纤维素荧光强度逐渐增强.特别是在花柱伸长过程中,柱头部位与子房部位的纤维素荧光显著增强.此外,在所观察的发育阶段,酯化果胶荧光强度始终高于酸性果胶,并且柱头部位与子房周围的荧光强度也较其他部位更强.这些结果揭示了生长发育过程中板栗雌花细胞壁成分变化规律,为深入探究板栗生长发育机制提供了重要线索.

目的:探讨听神经瘤手术患者面神经功能预后的影响因素并构建预测模型。方法:回顾性分析2018年6月至2020年3月于中南大学湘雅医院神经外科行经乙状窦后入路手术的129例听神经瘤患者的临床资料。采用House-Brackmann(H-B)评分系统评估患者术前、术后即刻和术后6个月的面神经功能，采用logistic回归分析探讨术后即刻和6个月的面神经功能预后的影响因素，并构建术后面神经功能预后的数学预测模型。结果:多因素logistic回归分析结果表明，肿瘤的大小、术前面神经功能分级、TFIAC分级、年龄以及有无后组脑神经相关症状与术后即刻面神经功能的恢复程度可能有关(均 P<0.10)；纳入上述影响因素建立术后即刻面神经功能的预测模型，其训练集和测试集的受试者工作特征曲线的曲线下面积分别为0.830、0.713，预测精度分别为77%、71%。纳入影响术后6个月面神经功能恢复程度的logistic回归分析结果中有统计学意义( P<0.05)的因素(包括年龄、肿瘤的大小、术前面神经功能分级、有无小脑或后组脑神经相关症状)以及Samii分级，建立术后6个月的面神经功能预后预测模型，其训练集和测试集的受试者工作特征曲线的曲线下面积分别为0.861、0.894，预测精度分别为77%、78%。 结论:基于多因素logistic回归分析结果建立的听神经瘤经乙状窦后入路手术后即刻和6个月面神经功能预测模型有较高的预测精度，对临床个体化制定治疗方案具有一定的指导意义。

患者女，51岁。因"左下腹疼痛4个月余，加重1周"就诊。影像学显示腹壁巨大类圆形囊实性混杂密度肿块影，行肿块穿刺活检，诊断为滑膜肉瘤，化疗3个周期后行腹壁肿块切除术。显微镜下肿瘤细胞主要由横纹肌样细胞构成，胞质丰富，具有一个偏位核，灶性区混杂有束状梭形细胞，免疫组织化学CD99、bcl-2、波形蛋白、TLE1阳性，INI1弱阳性，SYT断裂探针检测结果阳性，病理诊断为腹壁伴横纹肌样特征的滑膜肉瘤。伴横纹肌样特征的滑膜肉瘤十分罕见，形态学上需与多种伴横纹肌样形态的软组织肉瘤鉴别，诊断需要免疫组织化学及分子病理学辅助检查。

目的:探讨巨噬细胞为适应肿瘤微环境(tumor micro-environment，TME)需要而在其自身极化层面上发生谱系变化模型的特征，为进一步研究TME中巨噬细胞的可塑性提供参考。方法:取绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)转基因并已建成近交系的Foxn1 nu.B6-CAG-EGFP/SU裸小鼠骨髓细胞，分别在巨噬细胞集落刺激因子1(colony-stimulating factor 1，CSF-1)、IFN-γ＋LPS、IL-4诱导下，培养出M0、M1和M2亚型，倒置荧光显微镜观察GFP。免疫细胞化学染色法检测巨噬细胞标志蛋白和极化蛋白，并进一步与人脑胶质瘤干细胞SU3共培养。 结果:倒置荧光显微镜下，原始骨髓细胞和条件培养基培养出的M0、M1和M2都发出强烈的绿色荧光。瑞氏-吉姆萨(Wright-Giemsa)染色后，普通显微镜下能观察到巨噬细胞固有的可塑性。免疫细胞化学染色检测CD11C和CD206标志蛋白表达都呈阳性，CD68只在M1巨噬细胞上为弱阳性，CSF-1和CSF-1R在各亚型细胞上都呈强阳性。在共培养的干细胞球体中观察到了绿色荧光细胞浸润，并发生了吞噬反应。结论:本研究建立了绿色荧光裸小鼠的髓源性巨噬细胞谱系模型，包含M0、M1和M2亚型，都有巨噬细胞固有的可塑性，表达共同的标志蛋白和极化相关蛋白，具有巨噬细胞固有的吞噬功能，可用于与肿瘤细胞之间相生相克表征的研究，特别是需要示踪研究时，可通过巨噬细胞发出的绿色荧光进行识别。

目的:探讨单纯椎管内硬脊膜外海绵状血管瘤的临床特点，以提高对该病的诊治能力。方法:回顾性分析襄阳市中心医院2013年1月至2022年11月7例单纯椎管内硬脊膜外海绵状血管瘤患者的临床资料。结果:7例患者中，男2例，女5例，平均年龄49.4岁。病变位于颈椎1例，胸椎5例，腰椎1例。单纯神经根症状1例，单纯脊髓病症状4例，既有脊髓病症状又有神经根症状2例。T 1和T 2加权像均呈等或稍长信号，增强扫描均为均匀强化。术前误诊为脊膜瘤1例，该患者术中未仔细辨认病变，误将病变当成手术操作导致的渗血而吸除；误诊为神经鞘瘤2例。患者均行术前定位，经后正中入路于显微镜下行硬脊膜外病变切除术，病变均实现全切，住院期间未见明显并发症。术前神经功能Frankel分级C级1例，D级3例，E级3例；患者随访1~117个月，最后一次随访时神经功能Frankel分级D级3例，E级4例，未见复发。 结论:单纯椎管内硬脊膜外海绵状血管瘤在影像学上极易误诊为神经鞘瘤、脊膜瘤，术前应认真阅片。建议术前病变节段棘突注射亚甲蓝并定位照片有助于术中精准定位。一旦考虑该病，术中打开椎板清除硬脊膜外脂肪时应格外注意，病变易出血，且误认为硬脊膜渗血而被吸引器吸除或连同硬脊膜外脂肪一起咬除。手术全切是有效的治疗方法，且应尽早治疗，避免病变急性出血影响预后。