目的:探讨宏基因组二代测序（mNGS）在危重型不典型的立克次体感染者早期救治中的应用价值。方法:收集2020年1月至2022年8月在海南省人民医院住院治疗临床诊断危重症立克次体患者的临床特征、血生化结果、外斐反应结果、影像学资料及mNGS结果，进行回顾性分析，使用Fisher精确性检验比较mNGS和外斐反应的阳性率。结果:15例立克次体病患者中均有发热症状，头痛12例，但具有诊断意义的典型皮疹或焦痂仅为3例，发生脓毒症休克6例，多器官功能障碍15例；血液mNGS阳性15例，其中10例患者在血液中检测出普氏立克次体（恙虫病东方体），其余5例检测出莫氏立克次体，mNGS阳性率显著高于外斐反应（15/15比0， P<0.001）。所有患者在确诊后均被给予多西环素等治疗，其中14例好转出院，1例因病情危重、放弃治疗出院后1周死亡。 结论:mNGS能够提高常规检测结果为阴性的非典型立克次体的检出率，可为危重型立克次体病患者早期诊断、早期抗感染治疗提供参考。

流行性斑疹伤寒是由普氏立克次体引起的急性传染病。该病发作突然，临床表现不典型，易漏诊、误诊，病死率高。本研究报道1例以高热、头痛、乏力起病的患者，经验性抗感染治疗无效后，经血清学和宏基因组学第二代测序确诊为普氏立克次体感染，单用多西环素治疗后病情好转。

目的:建立及优化检测立克次体目中7种重要病原菌的TaqMan-探针实时荧光定量PCR（qPCR）方法，可同步检测并明确感染类型。方法:根据普氏立克次体、莫氏立克次体和斑点热群立克次体 ompB基因、恙虫病东方体 groEL基因、查菲埃立克体16S rRNA基因、嗜吞噬细胞无形体 gltA基因和贝氏柯克斯体 com1基因序列合成引物和探针，优化反应体系及反应程序至同一方案，对该方法灵敏度、特异性和重复性等进行评价，并使用该方法对模拟样本和实际样本进行检测。 结果:7种病原菌标准曲线的 Ct值与模板拷贝数均呈良好的线性关系（均 R2>0.990 0），所建立方法最低检测限均为1×10拷贝数/μl且具有良好的特异性。96份蜱虫核酸提取物样本中，1份样本检出贝氏柯克斯体，3份样本检出斑点热群立克次体；80份不明原因发热患者血标本DNA中，1份样本检出恙虫病东方体，2份样本检出斑点热群立克次体。 结论:本研究基于TaqMan-探针qPCR方法，将7种病原菌反应体系及反应程序优化至同一方案，克服目前不同立克次体目病原菌采用不同的反应体系和反应程序的缺点，可将临床样本中立克次体目的7种重要病原菌精确定位检测至种，明确感染病原菌类型并缩短检测时间，有助于对患者的精准诊治。

本文报告了淄博市周村区1982年鼠型斑疹伤寒疫源地的动态监测。发现本病的发病动态与鼠密度相一致。主要的传染源为家鼠而以褐家鼠为主。受染的人和动物均为鼠型斑疹伤寒。正常人群在流行后的3年，补体结合抗体阳性率由流行前的10.1%上升到61.5%，几何平均滴度也由1:11.07上升到1:18.75，已达到阻断鼠型斑疹伤寒流行的水平。曾患者莫氏立克次体抗体阳性率为77.8%，最高滴度为1:256，几何平均滴度为1:20.16，比患病期间阳性率下降22.2%，几何平均滴度下降1:29.64，但仍保持较高水平。普氏立克次体抗体阳性率由63%下降到11.1%，最高滴度为1:8，接近消失。结果证实该地存在鼠型斑疹伤寒疫源地。

本文报告以建立micro-IF法制成的立克次体病血清学诊断试剂盒，用于临床对立克次体病诊断，并与WF反应比较。二法共同检测斑疹伤寒病人双份血清6例，斑疹伤寒病人、Q热普查者、非立克次体病病人和健康献血员的单份血清209例。结果表明micro-IF能区分普氏和莫氏立克次体感染，能鉴别Q热、斑点热等感染，尤其检测IgM抗体能作早期诊断，并有较高的特异性和敏感性，WF仅可根据双份血清滴度升高来诊断斑疹伤寒及恙虫病。micro-IF与WF二法符合率85.0%（IgM）、83.8%（IgG）。

应用349份血清对斑疹伤寒微量凝集试验（MA）进行双盲法评价，其中斑疹伤寒患者双份血清34份，阳性率为88.2%，单份血清89份，阳性率为78.7%，健康人及非斑疹伤寒患者血清192份均阴性。阳性血清中莫氏立克次体抗体效价大于或等于普氏立克次体抗体效价4倍者占91.8%。不同批次抗原检测结果一致，抗原4℃贮存六个月效价及分型结果不变。结果表明MA方法可重复性好，为型特异性，敏感性效高。

用间接免疫荧光方法检查沈阳地区1005份正常人群血清，结果26份斑疹伤寒阳性，阳检率为2.6%；36份斑疹伤寒病人血清，33份阳性，其中25份莫氏立克次体抗体滴度高于普氏；350份人群血清北亚蜱传斑点热及恙虫病检查结果均为阴性。

作者设计合成一对恙虫病立克次体sta58基因的DNA引物，分别从恙虫病立克次体Karp、Gilliam及CMY株基因组中扩增出1 kb片段，普氏及莫氏立克次体、西伯利亚立克次体和贝氏柯克斯体则不能，表明该引物为恙虫病立克次体种特异。以含sta58基因片段的重组质粒为模板作敏感性鉴定，表明PCR可检测到10pg的靶DNA。用该引物作PCR检测实验感染恙虫病立克次体的小鼠血、腹水及脾标本均获满意结果。

我们使用聚合酶链反应（PCR）扩增鉴定斑疹伤寒立克次体DNA种别获得成功。选用普氏、莫氏立克次体（ R. prowazeki， R.p.； R.mooseri， R.m.）17kD蛋白基因序列的一对引物，在严格控制复性温度的条件下，能扩增 R.p.和 R.m.DNA，产生340 bp的产物片段，实验中使用的5种斑点热群立克次体DNA均不被扩增。选用 R.p. 169 kD蛋白基因序列引物，扩增以上立克次体DNA，只有 R.p.产生一条432 bp的核酸带。将两对引物在一次反应中同时使用时， R.p.可产生340 bp、432 bp两条带， R.m.只产生340 bp一条带。使用该技术，可检测到0.05ng水平的立克次体DNA。