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蛋白PTEN通过调节子宫内膜腔上皮细胞极性影响胚胎着床
编辑人员丨5天前
目的:探讨人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)对子宫内膜腔上皮细胞极性的调控及对胚胎着床的影响。方法:通过实时荧光定量PCR、Western blotting、细胞免疫荧光实验比较非容受态子宫内膜腔上皮细胞HEC-1A与容受态子宫内膜腔上皮细胞RL95-2之间PTEN的表达及定位差异;PTEN干扰质粒转染HEC-1A细胞,检测紧密连接相关蛋白质表达水平,透射电子显微镜检测紧密连接结构,Transwell实验检测细胞运动能力,与绒毛膜癌细胞JAR共培养检测HEC-1A细胞与JAR细胞之间的黏附水平;向体外培养的HEC-1A细胞分别加入二甲基亚砜、17β-雌二醇、孕酮、17β-雌二醇+孕酮,检测卵巢激素对PTEN表达的影响。结果:相较HEC-1A细胞,RL95-2细胞 PTEN基因及蛋白质表达水平均显著降低( P均=0.003);PTEN主要定位于RL95-2细胞核,而在HEC-1A细胞中,PTEN主要定位于细胞质;与质粒载体对照组相比,敲降 PTEN基因后,HEC-1A细胞紧密连接相关蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-4表达水平显著降低( P<0.001, P=0.038, P<0.001),细胞间紧密连接长度降低( P=0.046),迁移与侵袭能力增强( P均<0.001),与JAR细胞之间黏附率增强( P=0.016);与空白对照组(二甲基亚砜组)相比,17β-雌二醇组、孕酮组及17β-雌二醇+孕酮组的PTEN蛋白表达水平均显著降低( P均<0.001),17β-雌二醇+孕酮组的PTEN蛋白表达水平显著低于17β-雌二醇组和孕酮组( P均=0.001),孕酮组与雌二醇组的PTEN蛋白表达水平差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:不同容受状态的子宫内膜细胞PTEN表达存在差异,雌二醇和孕酮可能通过抑制PTEN在子宫内膜的表达,进一步调控子宫内膜上皮细胞间紧密连接结构及细胞极性,从而增强子宫内膜容受性。
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编辑人员丨5天前
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某大学医学人文学院老体制教师对人事制度改革的认识和态度及需求
编辑人员丨5天前
人事制度改革作为医学院校改革的重要组成部分,对于重构适应现代大学组织的新型教师群体具有重要意义。医学院校人事制度改革面向全体教师,而制定改革方案是新老体制融合的重要一步。本研究从某大学医学人文学院老体制教师视角,基于访谈法搜集数据,了解老体制教师对改革的认识、态度和需求,为人事制度改革方案的制订提供依据。调查结果表明,大部分教师赞同改革,提出学科定位、评审规则、学科建设、新老体制融合政策引导、老体制积极性保护等方面的需求。因此,管理者应当从完善制度设计、明确学科定位、加强团队建设、学科差异化调整、引导新老接轨、尊重历史贡献等方面,制订合理的人事制度改革方案,跟进相应的配套措施,确保改革取得实效。
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编辑人员丨5天前
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自制模拟教具结合翻转课堂在超声引导注射教学中的应用
编辑人员丨5天前
目的:探讨自制模拟教具结合翻转课堂的教学方式在超声引导肉毒素注射教学中的应用效果。方法:选取2017年4月至2019年3月在中山大学附属第三医院康复科学习的41名医师为研究对象,将其随机分为试验组( n=22)和对照组( n=19)。试验组采用自制模拟教具结合翻转课堂的教学方式,对照组采用传统课堂讲授教学方式。对两组医师的超声定位和穿刺注射操作进行考核,对试验组医师进行有关教学方式的问卷调查。 结果:试验组医师考核成绩总分[(14.68±4.75)分]高于对照组[(10.32±5.19)分],差异具有统计学意义( t=2.811, P<0.01)。其中,试验组医师在超声辨别方法[(2.41±1.18)分比(2.00±1.22)分]、辨识的肌肉数目[(2.50±1.01)分比(1.79±1.13)分]、检查用时[(2.41±1.14)分比(1.47±1.17)分]和熟练程度[(2.41±1.05)分比(1.32±0.75)分]方面的评分均高于对照组,差异均具有有统计学意义(均 P<0.05)。问卷调查表明,80%以上的医师认为,自制模拟教具结合翻转课堂的教学方式有利于知识点的理解、增加学习积极性、提高自学能力和操作技能以及增加实践机会。 结论:自制模拟教具结合翻转课堂的教学方式有助于医师超声引导肉毒素注射操作能力的培养。
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编辑人员丨5天前
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综合激励视角下全科医生薪酬激励机制探讨:基于英国经验
编辑人员丨5天前
优化全科医生薪酬制度,建立适应其行业特征的考核激励机制,是促进我国全科医生制度发展的有力抓手。英国以薪酬激励制度为发力点,有效提高了全科医生工作积极性以及初级医疗服务质量,加强了对医疗费用的控制。作者从薪酬模式和薪酬结构维度阐述英国全科医生薪酬激励机制,并介绍实施效果;基于罗宾斯综合激励理论视角揭示英国全科医生薪酬激励机制的内在逻辑;借鉴英国经验,针对我国全科医生薪酬激励机制中存在的问题,从确立与价值定位相符合的薪酬水平、优化薪酬结构、建立动态调整机制等方面提出建议,以期为优化我国全科医生薪酬激励机制提供参考。
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编辑人员丨5天前
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基于共同研究者项目探索中医药科教协同新模式
编辑人员丨1个月前
科教协同是新形势下提高创新人才培养和科技创新水平的重要途径.当前高校学生在科教协同培养过程中往往存在被动式学习、与教师关系不对等、与科研实践相脱节等问题,导致学生参与的主动性与积极性不高、获得感不强.天津中医药大学循证医学中心在前期循证课堂、科研志愿者活动的实践基础上,着重探索在"师与生""教与学""学与研"等多个环节建立平等合作的师生关系,激发学生参与科学研究的主动性,提升学生的实践获得感,提出了基于共同研究者项目的中医药科教协同新模式.共同研究者项目基于科研平台与教学实际,筛选出符合学生专业背景与学术基础的实践项目,赋予学生共同研究者的身份定位,使学生在科研过程中与教师身份对等、共同实施,深度参与科研实践,以此培养其创新思维,锻炼动手能力,提高学生综合素质.天津中医药大学以中医舌诊数据自主采集与分析为选题,启动共同研究者项目实践,转变学生在科研项目中的角色定位,充分激发学生参与科学研究的主动性,锻炼学生实践能力.实践证明,基于共同研究者项目的中医药科教协同新模式对培养具有科研素质创新型人才具有重要价值.
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编辑人员丨1个月前
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高磷诱导下肢血管平滑肌细胞成骨分化关键差异表达基因筛选及验证
编辑人员丨2024/7/27
目的:采用mRNA高通量测序技术筛选高磷诱导下肢血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化差异表达基因(DEGs),分析VSMCs钙化的关键基因及信号通路.方法:将人VSMCs分为对照组和模型组,模型组细胞中加入高磷培养基,对照组细胞采用含10%胎牛血清的DMEM培养基于相同条件下培养.调整 2组稳定转染VSMCs的状态,培养 12 d,倒置显微镜下观察细胞形态表现并拍照.采用Hisat2软件筛选DEGs,采用Stringtie软件从生物过程(BP)、分子功能(MF)和细胞成分(CC)3个方面进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析.Von Kossa染色法观察各组细胞钙化情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组细胞中碱性磷酸酶(ALP)、骨形态发生蛋白2(BMP2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肿瘤蛋白53(Tp53)、谷胱甘肽过氧化物酶 4(GPX4)、铁蛋白轻链 1(Ftl1)和糖基磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D1(GPLD1)mRNA表达水平.结果:与对照组比较,模型组共2 524个DEGs,其中1 368个DEGs表达上调,1 156个DEGs表达下调;2组细胞DEGs聚类分离明显.GO功能和KEGG信号通路富集分析表达上调的DEGs主要参与微管细胞骨架组织的调节、细胞极性、蛋白质定位和细胞周期调控等BP,构建细胞膜部分、微管组织、染色体和着丝粒区等CC,发挥与磷脂酰肌醇磷酸盐、Rho鸟苷酸三磷酸酶(GTPase)蛋白结合、参与跨膜转运和调节蛋白激酶活性等MF;表达下调的DEGs主要参与细胞质翻译、蛋白质膜定位、mRNA代谢和蛋白质内质网定位等BP,构建核糖体亚单位、细胞膜和自噬体等CC,发挥与单链DNA、核糖核蛋白复合物、生长因子结合、调节蛋白激酶活性和催化作用等MF.差异表达上调的基因富集7条信号通路,其中最为显著的是糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定的生物合成;差异表达下调的基因富集 18条信号通路,其中最为显著的是铁死亡.RT-qPCR法,与对照组比较,模型组细胞中GPX4、Ftl1和Tp53 mRNA表达水平明显降低(P<0.01),GPLD1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与对照组比较,模型组细胞中α-SMA mRNA表达水平明显降低(P<0.01),ALP和BMP2 mRNA表达水平明显升高(P<0.01).结论:钙化的VSMCs与正常细胞存在DEGs,铁死亡和GPI锚定的生物合成信号途径是高磷诱导下肢VSMCs钙化的关键信号通路,主要由GPX4、Ftl1、Tp53和GPLD1共同介导完成.
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编辑人员丨2024/7/27
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植物向重力反应中PIN-FORMED介导的生长素极性运输调控
编辑人员丨2024/4/27
植物的向性,即植物对光或重力等环境刺激信号产生的定向生长反应.在向重力性反应中,植物器官将重力感知为定向环境信号,来控制其器官的生长方向以促进生存.植物激素生长素及其极性运输在植物向重力反应中起着决定性的调控作用.质膜定位的生长素输出蛋白PIN-FORMED(PIN)通过动态的亚细胞极性定位,改变生长素运输的方向以响应环境刺激,由此植物器官间建立的生长素浓度梯度是细胞差异化伸长和器官弯曲的基础,来调控植物的形态建成和生长发育过程.本文主要讨论发生在植物重力感受细胞内早期重力感知和信号转导机制的最新研究进展、PIN介导的生长素极性运输、PIN的极性定位以及质膜蛋白丰度的调控机制等.
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编辑人员丨2024/4/27
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siRNA沉默α-TAT1对肝肺综合征中内皮细胞迁移行为的影响
编辑人员丨2024/3/16
目的 探究siRNA沉默微管乙酰化转移酶1(alpha tubulin acetyltransferase 1,α-TAT1)对肝肺综合征(hepatopulmonary syndrome,HPS)中内皮细胞迁移行为的影响.方法 通过在线数据库Tabula Muris分析肺组织各细胞亚群α-TAT1的表达.24只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组(Sham组,n=6)、胆管结扎组(HPS组,n=18).造模后在第2、4周分别取材HPS组大鼠,通过免疫荧光共定位检测2周和4周HPS大鼠肺血管内皮细胞中α-TAT1表达水平变化.收集Sham和HPS大鼠血清处理人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)12 h和24 h,之后进行小分子 RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰实验,分为 Sham 血清+siRNA NC 组、Sham 血清+siRNA α-TAT1 组、HPS 血清+siRNA NC 组、HPS 血清+siRNA α-TAT1 组.Western blot 检测各组HUVECs中α-TAT1、Ace-α-tubulin表达水平变化.免疫荧光观察各组诺考达唑(10 pmol/L)预处理后HUVECs中α-Tubulin微管聚合水平,评估微管的结构稳定性;细胞划痕实验联合细胞免疫荧光观察HUVECs的细胞迁移能力和高尔基体的定位.体外成血管实验检测HUVECs成血管能力.结果 体内及体外实验表明HPS中肺血管内皮细胞α-TAT1表达显著增加(P<0.01).siRNA α-TAT1干扰组中α-TAT1和Ace-α-tubulin表达量均显著下调,且微管稳定性减弱(P<0.01).另外,siRNA α-TAT1干扰组中GM130标记的高尔基体在核周细胞突出段方向的分布比例降低,且迁移能力下降(P<0.01).同时,成血管长度及网络水平显著减弱(P<0.01).结论 沉默α-TAT1可减弱HPS中内皮细胞迁移和成血管能力,其机制与减弱微管稳定性有关.
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编辑人员丨2024/3/16
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百年假说终获解析:穿梭的LAZY蛋白"唤醒"植物对重力的感应
编辑人员丨2023/12/30
植物感受到重力刺激后可通过重力反应协调自身各器官的生长方向.在植物重力反应过程中,重力感应和信号转导一直都是植物学领域关注的焦点.经典的"淀粉-平衡石"假说认为植物对重力的感应是通过淀粉体(富含淀粉的质体)沉降来实现.此外,研究发现LAZY蛋白通过调控生长素的不对称分布参与植物重力反应.然而,淀粉体沉降引发的重力信号转导及其与LAZY蛋白之间协作的分子机制仍不清楚.近期,清华大学陈浩东研究团队发现重力刺激能够诱导拟南芥(Arabidopsis thaliana)MKK5-MPK3激酶途径,进而对LAZY蛋白进行磷酸化,LAZY蛋白的磷酸化增强其与淀粉体表面TOC蛋白的互作,促进LAZY蛋白在淀粉体表面富集.淀粉体沉降引导LAZY蛋白在新的底侧质膜极性再定位.该研究深入解析了植物重力信号转导的分子机制,建立了植物重力感应与LAZY蛋白介导的生长素不对称分布之间的联系,是植物向重力性研究领域的重大突破.
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编辑人员丨2023/12/30
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翼状胬肉组织中ATP结合盒转运蛋白B5的表达变化及意义
编辑人员丨2023/8/6
背景 角膜缘干细胞(LSCs)缺乏可引起多种眼表疾病,如翼状胬肉等.ATP结合盒转运蛋白B5(ABCB5)是新发现的特异性LSCs标志物,研究ABCB5在翼状胬肉组织中的表达变化对于翼状胬肉的防治具有重要的临床意义. 目的 研究ABCB5在翼状胬肉组织中的表达变化,探讨其在翼状胬肉发生和发展中的作用.方法 收集2015年1-11月在解放军474医院行原发性翼状胬肉切除术的手术标本37例,同期收集年龄匹配的行斜视矫正术和视网膜脱离复位术患者的正常结膜组织22例.采用免疫组织化学法检测ABCB5在翼状胬肉组织标本中的表达和定位,分别采用Western blot和实时荧光定量PCR法检测翼状胬肉标本中ABCB5蛋白及其mRNA的相对表达量,并与正常结膜标本进行比较. 结果 ABCB5蛋白表达于所有22例正常结膜复层扁平细胞的细胞质和细胞核中,以基底层细胞中表达更为明显,呈现明显极性.在37例翼状胬肉标本中,可见ABCB5阳性表达者34例,占91.89%,ABCB5表达阴性者3例,占8.11%.正常结膜组和翼状胬肉组ABCB5蛋白相对表达量分别为0.90±0.31和0.59±0.41,ABCB5 mRNA表达量分别为1.01±0.26和0.65±0.32,翼状胬肉组ABCB5蛋白和mRNA的相对表达量均明显低于正常结膜组,差异均有统计学意义(t=-0.266,P=0.011;t=-4.560,P=0.000). 结论 LSCs标志物ABCB5的表达下调提示LSCs的减少和缺失与翼状胬肉的发生和发展有关,提示ABCB5检测可能作为翼状胬肉发生和发展、术后复发及疗效评估的观察指标之一,也可能成为翼状胬肉的治疗靶点.
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编辑人员丨2023/8/6
