目的:探讨抗核基质蛋白2（NXP2）抗体阳性幼年特发性炎性肌病（JIIM）患者的临床表现及骨骼肌的病理特点和治疗。方法:收集8例抗NXP2抗体阳性JIIM患者的临床资料，回顾性分析其一般情况、临床表现、辅助检查、肌肉病理改变和治疗效果，并结合国内外文献进行复习。结果:8例患者起病年龄为（6.1±3.8）岁，男女比为1∶3；均出现四肢近端肌无力，7例出现皮肌炎样皮疹，5例出现肌痛，4例出现皮肤钙质沉着，3例出现皮肤溃烂，2例出现皮下水肿，1例出现腹痛症状。5例血清CK升高，8例下肢肌肉磁共振显示肌肉，肌肉间隙，脂肪层异常信号，3例胸部高分辨CT显示间质性肺炎改变，1例腹部CT结果显示升结肠及近侧横结肠肠壁不规则增厚，水肿，伴周围炎性渗出。骨骼肌病理活检主要表现为束周肌萎缩，束膜内、小血管周围及肌纤维间隙可见有炎性细胞浸润，部分间质可见水肿、增生，坏死、溶解及再生肌纤维少见。8例患者均给予糖皮质激素联合免疫抑制剂治疗，1例合并肠道血管炎表现者联合使用戈利木单抗治疗，随访6个月5例完全缓解，3例恢复欠佳。结论:抗NXP2抗体多见于幼年型皮肌炎中，与肌无力、钙质沉着、皮肤溃疡和肠道血管炎有关，骨骼肌病理改变相对轻微，糖皮质激素联合免疫抑制剂治疗大部分有效。

目的:构建非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)患者经尿道膀胱肿瘤电切术(TURBT)后复发风险的定量预测模型并进行验证。方法:选取2014年12月至2019年12月在苏州大学附属张家港医院诊断为NMIBC且接受TURBT治疗的310例患者，随机将其分为模型组(170例)和验证组(140例)。同时将模型组分为复发组(90例)和未复发组(80例)进行亚组分析。首先采用欧洲癌症研究与治疗组织(EORTC)风险分层将模型组分为低风险组(21例)、中风险组(119例)和高风险组(30例)，应用Kaplan-Meier生存曲线比较各亚组间无复发生存(RFS)的差异；然后比较复发组与未复发组患者的临床资料、肿瘤特征(包括TNM分期、最大径、组织学分级)和生化标志物[包括膀胱癌特异性核基质蛋白4(BLCA-4)、膀胱肿瘤抗原(BTA)、核基质蛋白22(NMP22)、癌胚抗原(CEA)]；采用多因素logistic回归分析筛选主要危险因素，根据权重赋值建立新型定量评分系统，采用受试者工作特征(ROC)曲线分析评分系统在验证组中的诊断效能；最后根据评分系统的最佳临界值对模型组进行危险分层，再次比较RFS的差异性。结果:模型组基于EORTC风险分层的低、中、高风险组间RFS比较，差异无统计学意义( P>0.05)。单因素分析结果显示，复发组的年龄和家族史比例较未复发组显著升高，化疗药物膀胱灌注比例显著降低，T1期显著增多，肿瘤最大径显著增大，低分化比例显著增多，BLCA-4、BTA、NMP22和CEA水平均显著升高(均 P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示，家族史、化疗药物膀胱灌注、肿瘤最大径、低分化、BLCA-4、BTA、NMP22和CEA水平均是肿瘤复发的主要危险因素(均 P<0.05)。ROC曲线分析结果显示，评分系统预测验证组复发的准确性为0.865，临界值为3.8分(总分6~7分)，>4分为高风险，<4分为低风险。模型组中高风险患者的RFS明显低于低风险患者( χ2＝6.235， P＝0.003)；验证组中高风险患者的RFS明显低于低风险患者( χ2＝5.867， P＝0.007)。 结论:我国NMIBC患者的TURBT后复发风险应用EORTC的准确性欠佳，家族史、化疗药物膀胱灌注、肿瘤最大径、低分化、BLCA-4、BTA、NMP22和CEA水平可能是肿瘤复发的主要危险因素，构建的定量评分系统对预测肿瘤复发具有较好的准确性，对评估RFS也有较好的应用价值。

目的 探讨类风湿关节炎患者血清外泌体淀粉样蛋白A(SAA)含量与疾病活动度的相关性,并分析其是否具有免疫活性.方法 采用疾病活动评分DAS28-ESR将97例RA患者分为缓解期组(44例)和活动期组(53例).采用ELISA法检测各组血清SAA和基质金属蛋白酶3(MMP-3)的含量;差速超速离心法提取血清外泌体,Western blot和纳米颗粒示踪法鉴定提取的外泌体,BCA法检测外泌体蛋白质浓度,ELISA法检测外泌体中SAA的含量.采用Ficoll-密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞(PBMCs),ELISA法分别检测无外泌体刺激的PBMCs与外泌体刺激的PBMCs细胞培养上清液中IL-6及IL-8的浓度.结果 活动期组RA患者血清外泌体蛋白质浓度显著高于缓解期组(P＜0.01);活动期组患者血清外泌体SAA浓度显著高于缓解期组(P＜0.01);RA患者血清外泌体SAA与DAS28-ESR、ESR、CRP、SAA及MMP-3均具有正相关关系(ρ值分别为0.45、0.42、0.57、0.62、0.37,P均＜0.05).活动期组血清外泌体诱导PBMCs产生的IL-6水平显著高于缓解组与空白对照组(P均＜0.05);活动期组和缓解期组血清外泌体诱导PBMCs产生的IL-8水平显著高于空白对照组(P均＜0.05).结论 RA患者血清外泌体SAA水平与疾病活动度相关,具有评估RA患者疾病进程的潜能;RA患者血清外泌体具有免疫活性,其促炎效应与疾病活动性相关.

目的 筛选肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中预后相关免疫基因并解析其在乳腺癌中的预后价值.方法 获取癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库1 086 例乳腺癌样本和145 例正常样本的转录组数据和临床信息,排除无随访资料或随访时间＜1d的137 例样本后采用ESTIMATE算法计算免疫评分和基质评分;根据免疫评分和基质评分(高分组 vs.低分组)筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs);通过DEGs构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein in-teraction,PPI)网络,探究乳腺癌DEGs中的核心基因;通过单基因批量生存分析,明确核心基因与乳腺癌患者总生存期的相关性;通过RT-qPCR实验对数据库分析结果进行mRNA水平验证.结果 与N0 期比较,N1 期的患者免疫评分降低;与Stage Ⅰ期比较,Stage Ⅱ期、Ⅲ期患者免疫评分降低.Kaplan-Meier结果显示,与免疫评分低分组比较,高分组患者总生存期延长.筛选出免疫评分(高分组 vs.低分组)相关的200 个DEGs.基因本体论(gene ontology,GO)分析和京都基因与基因组百科全书数据库(Kyoto en-cyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析筛选出T细胞激活、激活免疫反应、MHC Ⅱ类蛋白复合物、T细胞受体信号通路等免疫相关通路.蛋白质互作(potein-protein interaction,PPI)分析找到Degree值排名前15 的核心(hub)基因,单基因批量生存分析从中筛选出 9 个与乳腺癌预后显著相关的基因.RT-qPCR实验结果显示,与恶性程度较低的乳腺癌细胞相比,上述9 个基因在恶性程度较高的三阴性乳腺癌细胞中表达水平下降.基因组富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)显示,免疫相关基因HLA-DRA的高表达水平与乳腺癌、雌激素信号通路显著相关.结论 乳腺癌肿瘤微环境中免疫评分高的患者总生存期显著延长.免疫相关基因HLA-DRA可能是预测乳腺癌患者预后的潜在生物标志物.

椎间盘退变是临床常见疾病,髓核与髓核细胞是椎间盘中主要的病变组织与细胞类型.髓核细胞受病理因素影响而加速衰老或出现代谢障碍时,髓核稳态被破坏,这导致了椎间盘退变的发生发展.自噬是细胞在病理环境下降解受损细胞器与异常蛋白质以维持正常生理功能的途径之一,能促进细胞自我调节以抵御致病因素影响.椎间盘退变时,髓核细胞处于应力失衡与代谢障碍的异常环境中,促进髓核细胞自噬可清除有害代谢产物累积、延缓细胞老化,这有助于维持髓核与椎间盘的健康生理状态.随着中医药治疗椎间盘退变疾病相关研究的不断深入,大量提取自传统中草药的单体成分被发现可以促进髓核细胞自噬以缓解椎间盘退变.根据最新的研究进展,讨论了髓核细胞的自噬与椎间盘退变的关联,共获取了 14种在促进髓核细胞自噬以缓解椎间盘退变领域展现出潜力的中药单体,并将其作用机制归纳为以下4种:促自噬抑制髓核细胞凋亡、促自噬拮抗髓核细胞氧化应激、促自噬抑制髓核细胞外基质降解和促自噬促进髓核细胞外基质大分子合成,以期为中药单体调节髓核细胞自噬从而缓解椎间盘退变的研究提供新的思路与参考.

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcD-NA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系.结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与si-HCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1.结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡.

肌少症是一种与年龄相关的疾病,其特征为肌肉质量减少与肌肉力量下降.肌少症会增加跌倒的风险,严重影响患者的生活质量,并可能与各种年龄相关的慢性疾病有关.晚期糖基化终末产物(AGE)是蛋白质、脂质或核酸等物质的游离氨基与还原糖的游离羰基经过缩合、重排、裂解和氧化修饰等一系列反应后形成的一类稳定糖基化产物.近期研究表明,AGE与肌肉质量、肌肉力量和肌少症之间都有相关性.AGE可以通过糖化交联导致骨骼肌细胞外基质硬化、与AGE受体结合导致炎症和氧化应激,进而造成肌肉质量和肌肉力量的下降,可在肌少症的发生和发展中发挥重要作用.本文对AGE在肌少症发病机制中的作用进行综述,可为深入探讨肌少症的发病机制提供理论支持.

目的 基于网络药理学方法探讨痹祺胶囊的配伍规律,阐释其治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的机制内涵.方法 按照痹祺胶囊及其单味药材的功效将其分为益气养血组、活血通络组、抗炎镇痛组,并分别选取药材中的特征成分,依据反向药效团匹配方法和TCMSP、Uniprot等数据库预测化合物作用靶点,与通过OMIM、DisGeNet、GeneCards等数据库收集RA相关靶点相互交互,将交互靶点借助Omicsbean、STRING等数据库平台对获得靶点进行基因本体功能和京都基因与基因组百科全书通路富集分析,利用Cytoscape软件构建"药材-化合物-靶点-通路-功效"网络.结果 通过网络药理学预测,得到益气养血组11个成分的67个潜在靶点,蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络分析发现白蛋白、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、造血前列腺素合成酶 D、丝裂原活化蛋白激酶 1(mitogen-activated protein kinase1,MAPK1)、雄激素受体、β2肾上腺素能受体等可能为关键核心靶点,主要通过神经营养信号通路、造血细胞谱系、破骨细胞分化、MAPK信号通路等40条相关通路,通过调控骨髓造血微环境、骨形成与代谢平衡、免疫调节等生物过程发挥益气养血作用;得到活血通络组20个成分的117个潜在靶点,进一步PPI网络分析发现蛋白激酶B1(protein kinase B1,AKT1)、基质金属蛋白酶 9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、肿瘤蛋白 p53(tumor protein p53,TP53)、纤连蛋白、信号转导子和转录激活子3、C-C基序趋化因子(C-Cmotifchemokine2,CCL2)、表皮生长因子受体、细胞间黏附分子1、IL17A等可能为核心靶点,并通过血小板激活、VEGF信号通路、IL-17信号通路等77条相关通路调控凝血和纤溶系统、血管增生、抗炎镇痛等生物过程发挥活血通络、止痛的作用;得到抗炎镇痛组8个成分的180个潜在靶点,进一步PPI网络分析发现TNF、AKT1、IL-6、TP53、IL1B、VEGFA、前列腺素G/H合成酶2、CCL4、CCL3等可能为潜在核心靶点,通过IL-17信号通路、T和B细胞受体信号通路、血清素能突触、趋化因子信号通路、核因子-κB信号通路、花生四烯酸代谢等77条通路干预中枢和外周敏化、抗原呈递、免疫细胞激活、炎症反应等生物过程发挥抗炎镇痛的作用.结论 痹祺胶囊中党参、茯苓、白术组成的益气养血组主要在造血系统、免疫系统和骨形成和代谢等方面发挥"固本"的作用,丹参、三七、川芎、牛膝、地龙组成的活血通络组主要在血液系统、炎症反应等方面发挥"活血化瘀"的作用,马钱子、甘草组成的抗炎镇痛组主要在免疫调控、炎症反应、中枢和外周镇痛等方面发挥"除湿止痛"的作用,各组之间的靶点和通路互有交叉,又各有侧重,充分体现了痹祺胶囊在治疗RA中多成分、多靶点、多通路的特点,为其配伍理论的深入研究奠定了基础.

目的 使用蛋白质组学技术研究高脂饮食诱导下小鼠肾脏组织蛋白质的差异性表达.方法 22只雄性C57BL/6小鼠分为对照组(正常饮食,脂肪供能占比10％)、高脂组(高脂饮食,脂肪供能占比60％),每组11只,连续饲养24周.处死小鼠并眼眶取血,检测TC、TG、血糖(BG)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)等指标.收集肾脏组织并采用HE染色、糖原染色(PAS)和电子显微镜观察病理改变.提取肾脏组织总蛋白,使用质谱仪检测并分析两组小鼠肾脏组织中的差异表达蛋白(DEPs),采用4D非标记定量蛋白质组学技术,以差异倍数＞1.5(上调)或＜1/1.5(下调)且P＜0.05为标准筛选DEPs,对DEPs作功能注释和富集分析,通过蛋白质互作网络分析筛选核心蛋白.结果 高脂组体质量、TC、TG、BG、Scr、BUN水平均显著高于对照组(均P＜0.05).与对照组相比,高脂组肾小球体积稍大,系膜细胞和基质节段性略多,鲍曼囊壁层增厚,肾小管上皮细胞空泡变性明显.电镜检查显示高脂组小鼠足突部分融合,线粒体明显肿胀、畸形、大小不一,溶酶体样结构增多并出现自噬体.两组共鉴定出93种DEPs,其中上调蛋白49种,下调蛋白44种;DEPs主要参与脂质及碳水化合物的运输和代谢途径,显著富集的通路有过氧化物酶体和溶酶体相关通路以及初级胆汁酸生物合成、类固醇激素生物合成、肾素-血管紧张素系统等.与高脂诱导肾脏损害发生、发展密切相关的蛋白质主要有酰基辅酶A氧化酶2、载脂蛋白a4、植烷酰辅酶A羟化酶2、α-甲基酰基辅酶A消旋酶、载脂蛋白e、二羟基丙酮磷酸酰基转移酶、含胰蛋白酶域1.结论 高脂饮食诱导小鼠肾脏组织蛋白质发生改变,主要包括过氧化物酶体相关基质酶代谢通路.本研究为揭示脂质肾毒性提供了有价值的线索.

目的:使用网络药理学方法分析黄芪治疗骨骼肌减少症的作用机制.方法:使用中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)筛选黄芪的活性成分并预测其作用靶点;筛选GEO与人类基因数据库(the human gene data-base,GeneCards)中有关骨骼肌减少症的相关基因并进行合并;使用STRING在线数据库将疾病与药物交集靶点进行蛋白相互作用分析,并使用Cytoscape 3.7.2软件对蛋白-蛋白互作网络(protein-protein interac-tions,PPI)进行拓扑学分析,确定核心靶点;使用Cytoscape软件构建"药物-活性成分-靶点-疾病"网络,使用AutoDockTools等软件对药物关键分子与疾病关键蛋白进行分子对接验证;最后利用DAVID数据库对潜在靶点进行基因本体论(gene ontology,GO)分析,探究黄芪治疗骨骼肌减少症的生物功能,通过京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析探究黄芪治疗骨骼肌减少症的主要信号通路.结果:共得到黄芪有效活性成分作用靶点155个,骨骼肌减少症相关基因靶点1057个,药物-疾病交集靶基因36个,主要包括Akt1、p53、VEGFA、TNF、ESR1等;"药物-活性成分-靶点-疾病"调控网络显示槲皮素、华良姜素、联苯双酯、7-O-methylisomucronulatol、异鼠李素等药物活性成分在治疗骨骼肌减少症中发挥作用;分子对接验证实现了5种主要活性成分与5种关键靶点蛋白的对接,结果发现其均具有较强的结合活性;GO分析结果显示,黄芪治疗骨骼肌减少症主要与调控炎症反应及凋亡过程的正调控、细胞对缺氧的反应、细胞衰老等生物学过程有关,并影响蛋白质结合、转运活性、过氧化物酶体增殖物激活受体结合、肌动蛋白结合、生长因子活性、蛋白磷酸酶抑制剂活性等分子功能;KEGG分析显示靶点基因主要富集在癌症、肿瘤坏死因子、低氧诱导因子-1、细胞凋亡等通路.结论:黄芪可能通过同时调控多个靶点基因及相关信号通路,发挥诱导细胞衰老和凋亡、改善局部微循环、降低细胞外基质降解速度、减轻慢性炎症及氧化应激损伤等作用,以延缓骨骼肌萎缩.