目的 为复方藤芷膏开发新剂型,并考察其透皮主要成分.方法 以凝胶贴膏剂基质的感官评价、初黏力、持黏力为综合指标,以NP-700、甘羟铝、EDTA-2Na、甘油、PVPK-90、酒石酸、纯化水的使用量作为课题的主要考察因素.依次采用单因素设计实验法和正交设计实验法在不同材料用量配比下优选凝胶贴膏剂的最佳基质配方.基于超高效液相色谱-电喷雾离子源-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-ESI-QTOF-MS/MS),采用垂直Franz扩散池法进行透皮实验,检测复方藤芷凝胶贴膏剂的透皮主要成分并确定.结果 复方藤芷凝胶贴膏剂的最佳配方为NP-700 4.0 g,甘羟铝 0.5 g,EDTA-2Na 0.2 g,二氧化钛 2.0 g,甘油 40 g,PVPK-90 5.0 g,酒石酸 0.7 g,纯化水50 g,载药含量10%.透皮结果初步鉴定出3个化合物,包括大黄素、盐酸小檗碱及欧前胡素.结论 研究所得复方藤芷凝胶贴膏剂膏体均匀,表面光滑,易于涂布.成型后具有优良的初始黏力和保持黏力,易剥离,无残留,保湿性好,对皮肤无刺激性和致敏性.透皮成分的确定为寻找其药效物质基础及进一步建立全面的质量控制方法提供了依据.

目的 建立羌活药材超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,并测定不同产地羌活药材阿魏酸、紫花前胡苷、异紫花前胡苷、羌活醇、异欧前胡素和挥发油的含量,为羌活药材的质量评价提供参考.方法 采用Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7 μm),以乙腈-0.02%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.25 mL/min,柱温25℃,检测波长330 nm,进样量2 μL.建立25批羌活药材UPLC指纹图谱,进行相似度评价和化学计量学分析,同时测定阿魏酸、紫花前胡苷、异紫花前胡苷、羌活醇和异欧前胡素的含量,并采用水蒸气蒸馏法测定羌活药材挥发油的含量.结果 指纹图谱共标定23个共有峰,指认出其中11个成分,聚类分析和主成分分析均将25批羌活药材大致分为3类,正交偏最小二乘-判别分析筛选出6种潜在差异性成分.含量测定结果显示,四川产地羌活药材的羌活醇和挥发油含量均高于甘肃和青海产地样品.结论 本研究建立的方法准确、可靠,可为羌活药材的质量评价和控制提供依据和参考.

目的 建立通便清火丸薄层鉴别和药效成分含量测定方法及提升质量标准.方法 采用薄层色谱法,以黄芩苷、欧前胡素和绿原酸作为对照品进行薄层鉴别实验.采用高效液相色谱法,以黄芩苷、欧前胡素和绿原酸作为指标成分进行定量分析.结果 薄层色谱法斑点清晰且分离度和专属性好.黄芩苷、欧前胡素和绿原酸的专属性好,分别在0.08～0.38 mg·mL-1、0.56～3.19 μg·mL-1、0.49～3.43 μg·mL-1范围内呈现良好的线性关系,重复性的RSD(相对标准偏差)分别为0.51％、1.22％、1.60％,平均加样回收率和RSD分别为101.10％、112.40％、99.74％,并且各供试品溶液在配置后的6 h内均呈现良好的稳定性.结论 本研究建立的方法快速简便、灵敏度高、准确性高、重复性好,可为通便清火丸质量标准提升提供一定的科学依据.

目的:通过星点设计-响应曲面法优化欧前胡素-聚氧乙烯氢化蓖麻油/甲氧基聚乙二醇聚乳酸[imperatorin micelles loaded with Cremophor? RH 60/monomethoxy poly(ethylene glycol)-block-poly(L-lactide),IMP-RH60/mPEG-PLLA]胶束的处方工艺.方法:在单因素考察的基础上,以RH60用量、药物与载体比例、水相体积为自变量,包封率和载药量为因变量,进行三因素三水平的星点设计-响应面法实验,分析结果得到IMP-RH60/mPEG-PLLA胶束的最优处方,并对胶束的释放和摄取进行评估.结果:确定最优处方工艺条件为:RH60的投药量为28 mg,IMP投药量为1.2 mg,mPEG-PLLA投药量为10 mg,水化体积为6mL,在此条件下得到的胶束粒径为(25.48±0.92)nm,Zeta电位为-(5.50±1.06)mV,平均包封率为(85.78±0.84)％,平均载药量为(2.66±0.03)％.体外评价结果表明胶束释放效果优于原料药,并增强了药物的摄取.结论:星点设计-响应曲面法所建立的模型精密度高,可用于IMP-RH60/mPEG-PLLA胶束的处方工艺优化.

目的:基于网络药理学方法和指纹图谱,分析预测经典名方羌活胜湿汤(QSD)的质量标志物(Q-marker).方法:采用高效液相色谱法建立QSD指纹图谱,对共有峰进行归属和指认,并基于可测性和可溯源性筛选活性成分;运用网络药理学筛选靶点和通路,构建 QSD 的成分-靶点-通路相互作用网络,预测 QSD 的Q-marker.结果:共标定了 20 个共有峰,通过对照品指认出升麻素苷、洋川芎内酯Ⅰ、蛇床子素、紫花前胡苷、甘草酸铵、藁本内酯、阿魏酸、异欧前胡素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、二氢欧山芹醇当归酸酯 10个色谱峰,相似度均大于 0.862;采用网络药理学方法对 6个活性成分进行成分-靶点-通路网络构建与分析,富集的通路包括癌症中的蛋白聚糖、癌症的途径、化学致癌作用-受体激活、内分泌抵抗等.根据成分、靶点及通路之间的连接度初步预测二氢欧山芹醇当归酸酯、升麻素苷、甘草酸铵、异欧前胡素、蛇床子素、5-O-甲基维斯阿米醇苷 6 个活性成分可能通过调节这些信号通路达到祛风、胜湿和止痛的作用.结论:通过建立QSD指纹图谱,基于网络药理学方法分析预测QSD中的Q-marker,进一步明确QSD质量控制标准,有利于提高其质量控制水平,也为后期深入研究QSD的作用机制提供参考.

目的:建立癣湿药水多组分定量检测方法,通过主成分分析法(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)联合熵权优劣解距离法(EW-TOPSIS)对多组分含量测定结果进行差异性分析,评价其综合质量.方法:采用高效液相色谱法,Global Chromatography C18色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,同时测定12批癣湿药水中柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、欧前胡素、蛇床子素、异欧前胡素、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、土荆皮丙酸、土荆皮乙酸、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素含量,通过化学计量学和EW-TOPSIS对定量结果进行分析.结果:13个成分在各自范围内线性关系良好(r>0.999),平均加样回收率为96.90%～100.09%(n=9,RSD<2.0%).PCA结果显示12批癣湿药水聚为3类;OPLS-DA结果表明蛇床子素、土荆皮乙酸、羟基-α-山椒素、升麻素、柠檬苦素和欧前胡素为癣湿药水差异特征标志物;EW-TOPSIS结果显示欧氏贴近度为0.188 7～0.692 0,不同企业间产品13个成分含量存在一定差异.结论:所建立方法操作便捷、结果准确,可用于癣湿药水质量的综合评价,多组分定量联合PCA、OPLS-DA及EW-TOPSIS亦可用于其他中药制剂检测及质量评价中.

当归作为"分根梢"理论的代表药材,其以不同药用部位分别入药起源于唐代,形成于金元,兴盛于明清;经历代医家临床实践总结,逐渐确立了归头止血、归身补血、归尾活血的作用功效.现代研究表明,当归中含有当归多糖、挥发油、有机酸、无机盐等药效部位及阿魏酸、绿原酸、欧前胡素、藁本内酯等药效成分;在当归头、当归身及当归尾等不同药用部位中,上述药效物质基础的种类分布均匀、区别不大,但含量及相关比例差异明显;多数学者认为,含量、比例差异可能是导致当归不同药用部位存在较大药理作用差异的主要原因.通过对相关文献的检索,梳理和总结近年来国内外对当归不同药用部位中药效物质基础分布情况及相关药理作用的研究,从当归不同药用部位中药效物质基础的种类分布和含量差异两个方面综合分析,并结合相关药效物质基础对应的药理作用研究,找寻当归不同药用部位间存在的"成分-效用"关系,以期为历代医家将当归按当归头、当归身、当归尾分别入药提供更强有力的佐证,同时为当归提出进一步研究的主要方向和思路.

为明确不同栽培型白花前胡的代谢差异,揭示质量形成机制,为前胡种质挖掘与利用提供参考依据.该研究基于超高效液相色谱-质谱联用技术(UHPLC-MS/MS),对同一产地、同一时期的6种栽培型前胡(YS、H、LZ、LY、LX、Z)进行非靶向代谢组学分析,利用主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析、单变量统计分析等方法筛选不同栽培型前胡的差异代谢物,根据质荷比、数据库KEGG、相关文献、相关性分析确定与质量形成相关的潜在标志代谢物,识别代谢途径,分析质量形成过程.结果表明,6种栽培型前胡代谢物存在明显差异,正、负离子模式下,分别得到571、465种差异代谢物.其中,与质量形成相关的潜在标志代谢物22种,涉及苯丙烷生物合成、植物激素的生物合成及苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成等9种潜在靶向代谢通路.与YS型相比,各栽培型前胡中与苯丙烷生物合成相关的补骨脂素、欧前胡素、鲁望桔内酯下降,7-羟基香豆素、秦皮乙素、二氢欧山芹素、茉莉酸升高;其他代谢途径的2-琥珀酰苯甲酸酯、独活属醇、L-酪氨酸下降,以Z、H型的变化最大.因此,合理调控苯丙烷生物合成途径是栽培型前胡质量提升的关键机制之一,Z、H型具有更优的质量形成代谢过程可用于前胡优质种质的筛选与挖掘.

目的:建立三化汤的指纹图谱,利用网络药理学方法筛选质量控制指标性成分.方法:建立15批三化汤的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012A版)进行相似度评价后确定共有峰;通过与对照药材、对照品比对,对峰进行归属和指认;并采用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对15批三化汤进行质量评价;利用网络药理学筛选三化汤的核心作用靶点和通路,通过分子对接将核心靶点与13个成分进行对接验证,筛选出三化汤质量控制的指标性成分.结果:三化汤物质基准的HPLC指纹图谱共标定17个共有峰,相似度均大于0.97;共指认13个色谱峰,分别为辛弗林、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、厚朴酚、和厚朴酚、紫花前胡苷、异欧前胡素,其中含量排名前4的成分为柚皮苷、新橙皮苷、辛弗林、紫花前胡苷;OPLS-DA将样品分为3类,通过变量重要性投影得出新橙皮苷、柚皮苷、紫花前胡苷、大黄酸对三化汤物质基准影响较大;网络药理学预测13个成分可能通过肿瘤蛋白P53(TP53)、蛋白激酶B1(Akt1)、90 kDa热休克蛋白 αA1(HSP90AA1)、非受体酪氨酸激酶(SRC)、磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α(PIK3CA)等38个核心靶点,作用于内分泌抵抗、脂质和动脉粥样硬化、前列腺癌、PI3K-Akt1信号通路、结直肠癌等157条主要通路发挥药效作用,度值前5位的成分为大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、和厚朴酚、厚朴酚.分子对接结果显示,13个成分均能与Akt1稳定地结合.结论:通过整合含量测定、化学计量学、网络药理学,共筛选出新橙皮苷、柚皮苷、紫花前胡苷、大黄酸、辛弗林、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、和厚朴酚、厚朴酚10个成分可能为三化汤的质量标志物.

目的:建立五虎口服液指纹图谱及多成分含量测定方法.方法:采用迪马钻石一代C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为 0.8 mL/min;检测波长为 254 nm;柱温为 35℃,建立 21 批五虎口服液指纹图谱,测定其中 8 个成分的含量.结果:21 批五虎口服液指纹图谱共标记了 18 个共有峰,指认了羟基红花黄色素A、夏佛塔苷、异夏佛塔苷、西红花苷、升麻苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、欧前胡素、异欧前胡素 8 个成分,样品相似度>0.900;经过方法学验证,上述 8 个成分均在一定浓度范围内线性关系良好,r>0.9990;精密度、重复性、稳定性试验结果均良好;21 批样品中上述 8 个成分的平均含量分别为 0.0573、0.0335、0.0322、0.0662、0.5041、0.7151、0.0464、0.0108 mg/mL.结论:该研究建立的方法可用于评价五虎口服液的质量.