目的 基于网络毒理学方法和体内实验验证探讨槟榔对口腔黏膜下纤维化的影响及作用机制.方法 通过TCSMP和Swiss数据库筛选槟榔潜在活性成分对应靶点,利用GeneCards、Disgenet数据库得到口腔黏膜下纤维化(oral submucosal fibrosis,OSF)疾病相关靶点.将交集靶点上传至STRING数据平台构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,再采用Metascape数据平台进行基因本体(gene ontology,GO)功能和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析.采用槟榔水提取液低、中、高浓度干预大鼠口腔黏膜,大鼠开口度、病理形态学、免疫组织化学等检测对网络毒理学结果进行验证.结果 网络毒理学结果表明槟榔 52个成分中含有 587个相关靶点,OSF相关靶点 761个,二者交集靶点 72个.PPI网络分析结果显示,白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、细胞凋亡调节因子Bcl-2(apoptosis regulator Bcl-2,BCL2)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、细胞肿瘤抗原p53(cellular tumor antigen p53,TP53)可能是槟榔影响OSF的关键靶点.KEGG通路富集分析获得PI3K-Akt信号通路、AGE-RAGE信号通路、松弛素信号通路、EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药等信号通路.动物实验结果显示,中、高剂量组开口度值较对照组、低剂量组差异有统计学意义(P<0.05),HE染色、Masson染色表明中、高剂量组出现不同程度的纤维化病变,免疫组织化学结果提示槟榔水提取液上调IL-6、TNF-α等炎性因子,且呈一定的剂量相关性.结论 槟榔可能通过上调IL-6、TNF-α等关键炎性因子以介导炎症反应诱导口腔黏膜下纤维化的发生.

目的:探索碳黑纳米颗粒（CBNPs）对人支气管上皮细胞（16HBE细胞）的毒性效应，并根据全转录组高通量测序对差异表达的环状RNA进行筛选与鉴定，为CBNPs暴露的生物标志物研发与其在表观遗传毒理学的应用提供依据。方法:于2020年6月，用20、40和80 μg/ml浓度的CBNPs对16 HBE细胞进行染毒处理，以不加任何干预的16HBE细胞作为对照组，通过CCK8与乳酸脱氢酶（LDH）实验检测CBNPs细胞毒性。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）及ELISA法检测各浓度CBNPs染毒72 h后白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-8（IL-8）mRNA及蛋白水平改变，Western blot检测核因子-κB（NF-κB）相关炎性蛋白[Toll样受体4（TLR4）、磷酸化核因子-κB（P-NF-κB）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和天冬氨酸蛋白水解酶1（Caspase-1）]的表达水平；根据高通量测序结果筛选并通过qRT-PCR鉴定差异表达的circRNA，选择稳定差异表达且与NF-κB通路关联性最强的circRNA进行环状性能鉴定。结果:与对照组比较，40、80 μg/ml CBNPs暴露72 h后16HBE细胞细胞活力明显下降，20、40、80 μg/ml CBNPs暴露72 h后16HBE细胞LDH释放量明显上升（ P<0.05）。与对照组比较，不同浓度CBNPs暴露72 h后16HBE细胞IL-6、IL-8 mRNA表达水平均增加，IL-6、IL-8蛋白水平均增高，TLR4、P-NF-κB、ASC、Caspase-1蛋白水平均明显上调，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与对照组比较，共有492个差异性表达的环状RNA（|log 2 FC|>1），在验证出的5个差异表达（ P<0.05）的环状RNA中，选择circ_002642作为后续环状RNA研究对象，80 μg/ml CBNPs暴露72 h后16HB细胞的circ_002642明显高表达（ P<0.05）。 结论:CBNPs可引起16HBE细胞炎症反应并诱导炎症反应环状RNA的差异性表达。

急性中毒是急诊医学的组成部分，是临床毒理学关注的重点问题。近年来，随着工业化学品和药品研发飞快发展，急性中毒发病率不断上升。加强临床毒理学在急性中毒救治中的应用研究，识别少见与新品种毒药物，创造条件快速检测毒物，对提高中毒抢救成功率十分重要。我们就急性中毒的种类、流行病学特点、临床毒理学检测技术与意义、临床毒理学在急性中毒防治的作用及其应用价值进行综述。

随着我国现代急诊医疗救治体系的完善和突发中毒事件卫生应急的需要，三级综合医院急诊承担了大量急性中毒的临床救治工作和群体中毒事件的医学救援任务。众所周知，急诊医疗工作面广量大，急诊医生接受的培训也大多是通科性质的急救技能和理论的学习，如心肺复苏、创伤、卒中、心肌梗死等前期紧急救治。一旦遇到中毒这一类复杂的临床疾病，急诊医生就暴露了临床毒理学、毒物学、毒代动力学、毒物检测等专业知识的不足。这种不足，已经成为急诊人独立救治中毒的短板。近十年来，随着临床毒理学的快速发展，毒物检测能力的逐步提高，生命支持技术的不断进步 [1]，打造一支急性中毒专业化救治队伍刻已经不容缓。

目的:探讨低误差第二代测序(next-generation sequencing,NGS)技术在肿瘤研究和药物致突变性评价领域的进展.方法:通过查阅文献、收集资料等方法,汇总近年来低误差NGS技术进展、优缺点以及在肿瘤研究和药物致突变性/致癌性评价的应用.结果:传统的NGS技术的背景误差率较高,限制其在低频率突变检测方面的应用.近年开发的多种低误差NGS技术(即校正测序错误的NGS,error-corrected next-generation sequencing,ecNGS)可将NGS的检测误差率降低至10-7～10-4或甚至更低,满足肿瘤临床监测和指导用药的需求.此外,HiFi-Seq和PECC-Seq等技术的最低误差率可降低至10-8,可检出药物短期暴露导致的细胞/组织的超低频突变,有助于在药物研发早期评估其致癌性风险.结论:ecNGS技术目前处于开发阶段,尚未标准化,且未在临床、毒理学、风险评估领域推广应用.然而,该方法可直接检出肿瘤早期病变组织中的突变和药物诱导的组织/细胞突变,有望取代或补充现有的致突变性试验方法,纳入相关指导原则,成为药物早期遗传毒性、致癌性筛查的金标准.

目的 探讨毒物检测技术在毒蕈中毒临床诊治中的应用价值,分析江苏省确诊毒蕈中毒患者的临床特征.方法 本研究是多中心回顾性队列研究.共收集2020年6月至2023年7月入组参与队列研究的江苏省内10家医院行毒物检测鉴定的32例毒蕈中毒患者的毒检结果、暴露信息及临床特征,分析毒检阳性即检出毒素患者的临床特征,对毒检采样情况与检测结果进行统计分析.结果 本研究共纳入32例进行毒检鉴定的临床诊断毒蕈中毒或可疑中毒患者.收集32例血液样本、31例尿液样本、22例蘑菇样本及1例呕吐物样本.其中蘑菇样本的毒素检测阳性结果18例,占比59.38％,检出α-鹅膏毒肽等8类毒素;1例呕吐物样本检出烟碱;所有患者血液、尿液样本中均未检出常见毒素.结论 通过毒物检测鉴定常见毒蕈毒素种类,能够辅助毒蕈中毒诊断,有助于更迅速、精准的明确蘑菇分型及其所含毒素类别,便于指导临床救治.

[背景]慢性肾病(CKD)的全球疾病负担日益严重.环境因素是不明原因慢性肾病(CKDu)的诱发因素之一.然而,饮用环境高浓度多离子水和高温暴露对肾脏功能的影响尚无确凿毒理学证据.[目的]初步探究饮用环境高浓度氟钙钠溴离子水和高温暴露对小鼠肾脏功能的影响.[方法]将雄性ICR小鼠(8周龄)随机分组.以 3 mg·L-1 氟离子、250 mg·L-1 钙离子、400 mg·L-1钠离子和 1 mg·L-1 溴离子(模拟斯里兰卡CKDu高发地区地下水高浓度离子)及 32℃高温建立小鼠饮水暴露模型,分为氟钙钠溴离子与高温混合暴露组,各离子和高温单独暴露组,氟钙钠离子暴露组,氟钙钠溴离子暴露组.对照组动物给予一般纯净水,正常室温环境(23±2)℃.连续暴露 12周后,测定体重和肝(肾)脏器系数,通过苏木精-伊红染色法(HE)染色和病理评分评估肾组织病理学损伤.收集暴露 12周末的 24 h尿,测定肌酐(UCr)、白蛋白(ALB)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和β2-微球蛋白(β2-MG)水平.使用TUNEL法检测细胞凋亡.[结果]与对照组相比,氟钙钠溴离子与高温混合暴露组的小鼠体重显著下降,肾组织病理学损伤评分和尿β2-MG水平均显著升高(P<0.05).与对照组比较,氟钙钠溴离子暴露组(除β2-MG水平下降之外)和氟钙钠离子暴露组小鼠体重和尿中肾损伤指标差异无统计学意义(P>0.05),但肾脏组织病理学损伤评分增加(P<0.05).然而,与对照组比,各离子单独饮水暴露组和高温单独处理组动物的体重、肝(肾)脏器系数、肾组织病理学损伤评分均无统计学差异(P>0.05).氟钙钠离子暴露组与氟钙钠溴离子暴露组小鼠肾组织病理学损伤评分差异也无统计学意义(P>0.05).溴离子与氟钙钠离子对肾组织病理损伤的交互作用无统计学意义(P>0.05).TUNEL实验发现,氟钙钠离子暴露可诱导肾小管上皮细胞凋亡(P<0.05).[结论]环境高浓度氟钙钠离子饮水混合暴露可导致肾脏组织病理损伤,高温单独暴露不影响肾脏组织病理损伤,但与高氟钙钠离子饮水混合暴露时可加剧肾小管功能损伤.

目的 探究乌头生物碱及其代谢物在中毒家兔体内的死后弥散规律,为乌头生物碱中毒相关死亡案件生前服毒或死后染毒的判别提供参考依据.方法 将24只家兔经气管夹闭处死1 h后,以生川乌水煎液灌胃(以生川乌水煎液中乌头碱的LD50计算).灌胃后将家兔以仰卧位保存于25℃气候箱中,分别于0 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h随机各取3只进行解剖,取心血、外周血、尿液、心脏、肝、脾、肺和肾组织,采用高效液相色谱-串联质谱法对乌头生物碱及其代谢物在各生物检材中的含量进行检测.结果 灌胃后4 h,乌头生物碱及其代谢物在心血、外周血和主要器官组织中均可检出,且含量随保存时间的延长发生动态变化.其中,脾、肝和肺中乌头生物碱及其代谢物含量均较高,尤其距离胃较近的脾中乌头生物碱及其代谢物含量最高.灌胃后48 h,家兔脾中代谢物苯甲酰新乌头原碱的平均质量分数最高;肾中乌头生物碱及其代谢物含量均偏低;尿液中未检出乌头生物碱及其代谢物.结论 乌头生物碱及其代谢物在中毒家兔体内存在死后弥散现象,且从含量高的器官(胃)扩散到其他主要器官组织及心血中,其主要机制是顺浓度梯度的弥散,而尿液不受死后弥散的影响,可考虑将其作为乌头生物碱生前服毒和死后染毒的鉴别依据.

(四)毒理学2.遗传毒性 生物大分子一般不与DNA直接相互作用,ADC及其抗体部分通常无需进行遗传毒性试验.ADC潜在的遗传毒性来自于小分子化合物.如果荷载小分子化合物为全新化合物,需对其开展遗传毒性试验;对于机体中产生的新游离小分子化合物和/或新的连接子的情况,应基于ADC的理化性质、裂解特征和裂解物结构等因素评估确定需开展相关遗传毒性研究的目标检测物;若已有充分数据提示目标检测物具有遗传毒性,则无需开展遗传毒性研究.

评价复方精油吸嗅对小鼠提神醒脑的功效、作用机制及安全性.采用昆明小鼠经鼻吸嗅复方精油,通过自主活动行为学测试、戊巴比妥钠诱导睡眠实验综合评价复方精油提神醒脑的功效;采用酶联免疫法(ELISA)检测小鼠血、脑内神经递质多巴胺(DA)和谷氨酸(GLU)含量,Western blot研究复方精油对小鼠不同脑区多巴胺受体D1R蛋白水平的影响,阐明提神醒脑作用机制;单次高剂量吸嗅给药急性毒理学实验考察复方精油安全性,采用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)分析复方精油化学成分.动物实验结果表明,与对照组相比,复方精油低、中、高剂量组小鼠吸嗅3 d,每日均能显著提高运动距离(P＜0.01)、平均速度(P＜0.01),缩短休息时间(P＜0.01),显著提高小鼠自主活动;连续吸嗅精油3 d,能显著缩短睡眠总时长(P＜0.01),具有提神醒脑的作用.ELISA结果表明,与对照组相比,复方精油显著提高小鼠血、脑内DA、GLU的含量(P＜0.05,P＜0.05);Western blot结果表明,复方精油均显著上调小鼠海马、下丘脑、前额皮层和其他脑组织D1R蛋白水平(P＜0.05).单次高剂量吸嗅实验,复方精油对小鼠体重、血细胞相关指标、肝肾功能均无显著性影响,HE染色病理切片表明复方精油对脑、鼻、肺、肝、肾等组织无病理性损伤.GC-MS结果显示,复方精油中L-薄荷醇(24.54％)含量最高,其次为丁香酚(16.25％)、L-薄荷酮(7.78％)、冰片(7.30％)、L-石竹烯(5.29％)、1,8-桉叶素(3.40％).复方精油对小鼠具有提神醒脑的功效,同时吸嗅安全性较高,其作用机制可能与提高血、脑内DA和GLU含量,上调不同脑区D1R蛋白水平有关.