目的 对乳钙咀嚼片进行细菌回复突变试验,评价其是否有潜在的致突变性,并探索乳钙咀嚼片中组氨酸含量对自发回复突变菌落数的影响.方法 采用鼠伤寒沙门菌突变型TA97a、TA98、TA100、TA102进行试验,用肝匀浆作为体外代谢活化系统(+/-s9),同时设空白对照组、溶剂对照组和阳性对照组.乳钙咀嚼片设50,10,2,0.4,0.08 mg/ml 5个剂量,按平板掺入法进行试验.另设1000,500,250,125,62.5,31.25 μg/ml 6个剂量的组氨酸对照组.结果 游离组氨酸在一定剂量范围内时,4种菌株自发回变菌落数随组氨酸剂量升高而增加,组氨酸剂量继续增高,回复突变菌落数降低.乳钙咀嚼片各剂量组在加与不加S9条件下各菌株回变菌落数均未超过溶剂对照组菌落数的2倍,未观察到剂量反应关系,Ames试验结果阴性.结论 在本试验剂量范围内,乳钙咀嚼片Ames试验结果为阴性,提示该受试物无致突变性,同时排除了组氨酸成分对乳钙咀嚼片Ames试验结果的影响.

目的 研究一种多肽新型生物消毒剂杀菌效果及安全性.方法 采用悬液定量杀菌试验和动物毒性试验方法,对某多肽新型生物消毒剂的消毒相关性能进行观察.结果 用浓度为5 500 mg/L的该多肽生物消毒剂溶液作用10 min,对悬液内的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的杀灭对数值均>5.0,对白念珠菌的杀灭对数值>4.0.该消毒剂最高使用浓度5倍溶液对大鼠和小鼠急性经口毒性LD50值均>5 000 mg/(kg·bw),一次完整皮肤刺激试验为无刺激性;未见皮肤变态反应;V79细胞基因突变试验结果为阴性;小鼠精母细胞染色体畸变试验结果为阴性;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性;致畸指数<10.结论 该多肽生物消毒剂具有良好的杀菌效果,属于实际无毒级物质,无刺激性和致突变性.

目的:基于合成工艺梳理帕瑞昔布钠原料药生产过程中可能产生的有关物质,评估其致突变性和致癌性,确定杂质类别,为药物生产工艺的优化以及终产品的质量控制提供依据.方法:帕瑞昔布钠中51个有关物质的遗传毒性通过数据库及2种(定量)构效关系[(quantitative)structure-activity relationship,(Q)SAR]预测软件进行评估,根据风险评估结果对有关物质的遗传毒性进行分类,并根据ICH M7指导原则制定相应的可接受限度.结果:梳理出的51个有关物质中,综合评估结果为阳性有9个,需要按遗传毒性杂质控制;综合评估结果为阴性的有37个,按非遗传毒性杂质控制;还有5个预测结果模棱两可,不确定是否为遗传毒性物质.结论:为了保证药物质量与安全,经(Q)SAR评估为阳性的有关物质其最高限度不得超过18ppm,同时提示应针对帕瑞昔布钠中具有警示结构的9个潜在遗传毒性杂质建立科学、合理的质量控制方法.

在自然界中,植物会遭受各种环境或内源因素导致的DNA损伤,其中DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs)的影响最为严重,如果修复不当,将导致基因组不稳定、基因突变甚至细胞死亡.一方面,植物进化出了强大且有序的损伤修复机制,以确保其存活及正常繁衍;另一方面,基于修复过程的容错性及致突变性,T-DNA插入、基因编辑、物理诱变等技术广泛应用于动植物品种改良.相较于哺乳动物,植物DSBs修复通路及其分子机制报道较为有限.本文综述了植物对DSBs损伤的响应、主要修复途径及关键因子,介绍了通路机制尚未完全解析的替代末端连接(alternative end joining,Alt-EJ)的最新研究进展;此外,探讨了重离子束引起的植物DSBs修复特征和多途径选择,以及基于不同DSBs修复途径的基因编辑技术的研究进展,旨在为深入了解植物DSBs损伤响应及修复的分子机制和研发高效生物育种技术提供参考.

目的:探讨低误差第二代测序(next-generation sequencing,NGS)技术在肿瘤研究和药物致突变性评价领域的进展.方法:通过查阅文献、收集资料等方法,汇总近年来低误差NGS技术进展、优缺点以及在肿瘤研究和药物致突变性/致癌性评价的应用.结果:传统的NGS技术的背景误差率较高,限制其在低频率突变检测方面的应用.近年开发的多种低误差NGS技术(即校正测序错误的NGS,error-corrected next-generation sequencing,ecNGS)可将NGS的检测误差率降低至10-7～10-4或甚至更低,满足肿瘤临床监测和指导用药的需求.此外,HiFi-Seq和PECC-Seq等技术的最低误差率可降低至10-8,可检出药物短期暴露导致的细胞/组织的超低频突变,有助于在药物研发早期评估其致癌性风险.结论:ecNGS技术目前处于开发阶段,尚未标准化,且未在临床、毒理学、风险评估领域推广应用.然而,该方法可直接检出肿瘤早期病变组织中的突变和药物诱导的组织/细胞突变,有望取代或补充现有的致突变性试验方法,纳入相关指导原则,成为药物早期遗传毒性、致癌性筛查的金标准.

遗传毒性研究是药物非临床安全性评价的重要内容,与致癌性、生殖毒性研究密切相关.遗传毒性试验目的是检测受试物的致突变性,预测受试物的致癌性,对受试物的遗传毒性潜在性进行全面评价是药物进入临床试验及上市的重要环节.遗传毒性标准试验组合包含体内和体外试验,测试终点多样,本文从人员资质、实验室管理、给药制剂、实验系统、试验实施关键阶段等方面阐述遗传毒性评价研究的关注点,为遗传毒性研究实施提供借鉴.研究机构应严格遵循药物非临床研究质量管理规范(good laboratory practice for nonclinical laboratory studies,GLP)实施评价工作,不断提高遗传毒性试验质量.

目前国内外法规均要求对药物遗传毒性杂质进行控制,当缺乏致突变、致癌性数据时,制药企业大多以商业软件对杂质进行评估,评估费用高昂.FD A推荐了非商用的评估软件,并接受其评估结果,本文对非商用评估软件进行介绍,并以实例对商用与非商用软件预测结果进行对比评价,结果表明所测非商用软件预测结果具有一定参考价值,其参考使用或可节省成本.

雷公藤用药历史悠久,具有祛风除湿、活血化瘀、清热解毒等功效,常用于多种免疫系统疾病的治疗,疗效显著.作为一种传统有毒中药,其血液毒性也不容小觑,限制了其在很多领域的应用,也愈发受到广泛关注.通过综述雷公藤相关研究,梳理分析血液毒性表现特点发现,患者临床表现轻重不同,重者可能会产生骨髓抑制,但发生率低,且大多可逆.由于其所含化学成分复杂,不同成分致血液毒性产生的机制各异.对雷公藤所含有的主要毒性成分进行归类梳理,并从抑制细胞周期、影响转录调节、致突变及诱导细胞凋亡等方面总结其血液毒性作用机制,对雷公藤减毒的中西医防治措施进行整理与发掘,总结单味中药、中药复方及西药减毒机制,为其在临床的使用提供参考与依据.

目的 评价布美他尼杂质N-亚硝基布美他尼的体内致突变风险和肝细胞DNA损伤风险.方法 SD大鼠随机分为6组,分别为:溶媒对照组(溶媒为0.5%羧甲基纤维素钠),N-亚硝胺布美他尼100、300、1 000 mg·kg-1 剂量组,阳性对照组1[N-乙基-N-亚硝基脲(ENU),40 mg·kg-1]、阳性对照组 2[甲磺酸乙酯(EMS),200 mg·kg-1].2 个阳性对照组均为每组 6 只动物,其余每组 12 只动物.大鼠连续14 d经口灌胃给予受试物N-亚硝胺布美他尼.首次给药后约14 d和约 28 d后采集外周血用于Pig-a基因突变率检测,末次给药后约 3 h取肝细胞开展彗星试验.结果 试验期间给予N-亚硝基布美他尼未导致异常临床症状和动物体重及摄食量改变.100、300、1 000 mg·kg-1 剂量组动物肝细胞平均tail%DNA值(平均数/中位数)分别为2.90±0.38/2.34±0.46、3.58±0.27/2.87±0.51、3.45±0.59/2.21±1.44,与溶媒对照组相应数值相比未见差异,且无明显剂量效应相关性.首次给药后14 d,100、300、1 000 mg·kg-1 剂量组动物平均RBCCD59-和RETCD59-百万分之发生率(RBCCD59-百万分之发生率/RETCD59-百万分之发生率)分别为2.9±1.6/1.2±0.8、2.8±2.4/1.3±1.5、2.4±1.0/1.3±1.5;首次给药后28 d,100、300、1 000 mg·kg-1 剂量组动物RBCCD59-百万分之发生率/RETCD59-百万分之发生率分别为5.1±1.5/2.2±0.6、4.3±1.5/3.5±3.6、4.8±2.4/2.5±2.7.上述数值与相同时间点溶媒对照组相比均未见差异,且经统计学分析未见剂量效应相关性.结论 连续经口给予N-亚硝基布美他尼 14 d,SD大鼠的最大耐受量高于1 000 mg·kg-1,未检出外周血基因突变风险和肝细胞DNA损伤风险.研究数据可为药品中遗传毒性杂质的合理监管和含N-亚硝基杂质药物的安全使用提供数据支持.

目的 研究一种聚六亚甲基双胍果蔬消毒剂的消毒效果及安全性.方法 根据消毒产品卫生安全评价技术要求,对该果蔬消毒剂的pH值、重金属含量、聚六亚甲基双胍含量和稳定性等理化性能进行测定,通过中和剂鉴定、微生物杀灭试验、物体表面消毒现场试验对消毒效果进行评价,通过急性经口毒性、致突变、一次性完整皮肤刺激试验进行毒理安全评价.结果 该果蔬消毒剂的pH值(25℃)为7.08,砷含量＜0.01 mg/kg,汞含量＜0.002 mg/kg,铅含量＜1.5 mg/kg,有效成分聚六亚甲基双胍的含量为0.497 g/kg.37℃条件下存放3个月后,有效成分含量下降至0.492 g/kg,下降率为1.27%.该样品原液作用5 min,对悬液中大肠埃希菌的杀灭对数值均＞5.00,对30根黄瓜表面自然菌的平均杀灭对数值＞1.00;该果蔬消毒液急性经口毒性属实际无毒,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验无致微核作用,一次性完整皮肤刺激试验属无刺激性.结论 该果蔬消毒剂具有较好的消毒效果、稳定性和安全性.