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氧化苦参碱对牙周膜干细胞干性标志物表达和成骨分化的作用
编辑人员丨3周前
背景:人牙周膜干细胞是牙周再生组织工程潜在的功能细胞,然而长期体外培养会导致牙周膜干细胞干性减低并发生复制性衰老,从而影响其治疗效果.目的:探讨氧化苦参碱在体外对牙周膜干细胞干性维持和骨向分化的影响,并寻找潜在的影响机制.方法:采用组织块酶消化法从人牙周膜组织中分离、培养得到牙周膜干细胞,并使用流式细胞仪进行间充质细胞表面标志物鉴定.用0,2.5,5,10 μg/mL氧化苦参碱孵育牙周膜干细胞,通过CCK8实验检测氧化苦参碱对牙周膜干细胞增殖活性的影响,筛选后续实验合适的药物质量浓度,采用Western blot检测牙周膜干细胞中干细胞非特异性蛋白SOX2和OCT4的表达,采用qRT-PCR、Western blot检测牙周膜干细胞中成骨相关基因和蛋白表达水平.结果与结论:①CCK8实验结果显示2.5 μg/mL氧化苦参碱对牙周膜干细胞增殖活性有显著增强作用,后续实验选用2.5 μg/mL氧化苦参碱进行干预;②与空白对照组相比,氧化苦参碱组牙周膜干细胞的干性标志物SOX2蛋白表达水平变化不明显(P>0.05),OCT4蛋白表达明显上调(P<0.05);③与成骨诱导组相比,氧化苦参碱+成骨诱导组牙周膜干细胞成骨相关基因ALP、RUNX2 mRNA表达及成骨相关蛋白ALP蛋白表达明显下调(P<0.05);④氧化苦参碱上调牙周膜干细胞干性标志物表达,抑制牙周膜干细胞骨向分化,高通量测序结果表明可能与WNT2、WNT16、COMP、BMP6有关.
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编辑人员丨3周前
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苦豆子提取物指纹图谱建立及其抗炎作用谱效关系研究
编辑人员丨1个月前
目的:建立苦豆子总黄酮、总生物碱、总多糖配伍后的指纹图谱,研究不同配伍的化学成分与细胞活力以及抗炎之间的关联性,明确不同配伍对细胞活力的影响以及抗炎作用的物质基础.方法:采用高效液相色谱(HPLC)建立苦豆子总黄酮、总生物碱、总多糖配伍后的指纹图谱,以 LPS 刺激 RAW 264.7建立炎症细胞模型,对不同配伍组合对炎症细胞模型肿瘤坏死因子(TNF-α)水平以及以细胞活力进行检测,采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究苦豆子化学成分与抗炎作用的谱效关系,筛选苦豆子抗炎作用的物质基础.结果:苦豆子生物碱类成分HPLC 指纹图谱共有峰有8个,指认出5个共有峰,分别是槐果碱、槐定碱、苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱;黄酮类成分HPLC 指纹图谱共有峰有15个,指认出3个共有峰,分别为槲皮素、紫铆因和芹菜素.相关性分析结果表明,槐果碱、槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱与脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞(RAW 264.7)细胞释放的炎症因子TNF-α 水平呈显著负相关,槲皮素与细胞活力呈负相关,紫铆因、芹菜素与细胞活力呈正相关,槐定碱、氧化苦参碱与细胞活力呈负相关,苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱与细胞活力呈正相关.结论:槐果碱、槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱可能是苦豆子抗炎的物质基础,可为挖掘苦豆子的质量标志物以及药材质量控制提供参考.
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编辑人员丨1个月前
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黄连-苦参不同配比中特征性成分的量-质变化相关性研究
编辑人员丨1个月前
目的 分析不同配比"黄连-苦参"药对的特征性成分量-质变化相关性,为该药对的量-效相关性及临床应用提供合理的用量比例参考.方法 采用HPLC法,建立不同配比9批"黄连-苦参"药对(5∶1、4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5),建立药对HPLC特征指纹图谱及其特征性成分含量测定方法,分析9组样品成分的差异性与相关性.结果 9种配比的黄连-苦参药对共确定16个共有峰,指认苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、木兰花碱、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱共10个共有峰.含量测定结果显示,黄连-苦参配对后相比黄连药材及苦参药材,特征性成分均有显著性差异.黄连-苦参(5∶1)时苦参碱、槐定碱、木兰花碱含量为各比例最高,相比单药材提取具有显著性差异;黄连-苦参(4∶1)时,非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱含量为各比例最高,相比单药材提取具有显著性差异,且黄连总生物碱溶出最高;黄连-苦参(1∶1)时苦参总生物碱含量最高,且药根碱含量为各比例最高;黄连-苦参(1∶3)时氧化苦参碱含量为各比例最高.结论 黄连-苦参不同配比时,以特征性成分个数与含量为标示的"质"与配伍用"量"之间的相关差异性较明显,显示出一定的成分相互促溶作用.苦参中3种成分的溶出量随黄连比例的降低呈现"U"型分布,而黄连中7种成分溶出量随黄连比例的降低整体呈现降低趋势.与黄连、苦参各药材单提相比,各比例下苦参中总生物碱类成分的溶出均有不同程度的提升,黄连中总生物碱类成分在黄连-苦参(5∶1)及(4∶1)比例下溶出表现为提升,其他比例表现为降低.药对中生物碱类成分的溶出规律与临床验方中药对的使用配比成正相关.为进一步开展该药对的量-效关联性分析确定了物质基础,也为临床潜方时确定适宜用量提供参考.
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编辑人员丨1个月前
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苦参化学成分和药理作用研究进展
编辑人员丨2024/2/3
苦参始载于《神农本草经》,临床应用历史悠久.笔者通过综述相关文献,发现苦参中主要含有生物碱、黄酮、苯丙素、二苯甲酰基衍生物、萜类、甾体、有机酸、脂肪酸和挥发油等化学成分,其中生物碱类和黄酮类含量最高,生物碱中的苦参碱和氧化苦参碱是发挥苦参药效的主要物质基础.具有抗癌、抗肝损伤、抗纤维化、抗炎、抗病毒、抗菌、调节免疫和减少放射性损伤等作用,且主要作用在MAPK/ERK、JAK2/STAT3、PI3K/Akt、p38MAPK/Akt、FXR/CYP7A1/FGF19、Keap1/ARE、Notch、ROS/TLR4、PERK/ATF4/CHOP、TGF-β1/Smads和NF-κB/TNF-α等信号通路.
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编辑人员丨2024/2/3
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复方苦参注射液生物碱类成分及血中移行成分的分析
编辑人员丨2023/9/16
目的 利用超高效液相色谱—电喷雾离子化—四极杆飞行时间质谱(ultra-high-performance liquid chroma-tography-electrospray ionization-quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UHPLC-ESI-QTOF/MS)结合 UNIFI构建靶向筛查策略分析复方苦参注射液(Compound Kushen Injection,CKI)的生物碱类成分及血中移行成分.方法 首先,采用ESI-QTOF/MS的全信息串联质谱技术采集经UHPLC分离的CKI样品及其空白样品、CKI给药后的大鼠血浆样品及空白血浆样品的信息;然后,建立CKI生物碱化学成分数据库,与MSE数据一同导入UNIFI进行靶向筛查;依据母离子、碎片离子的精确质量对筛查出的化合物进行识别;最后,使用MassLynx 4.1工作站对UNIFI输出的结果进行核实.结果 本实验共分离、鉴定了 20种CKI生物碱,其中17种生物碱能在大鼠血浆中被检出.结论 该方法能够快速分析CKI生物碱类成分及其血中移行成分,可为CKI的质量控制及药效物质研究提供参考.
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编辑人员丨2023/9/16
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豆科3种植物的抗氧化活性比较
编辑人员丨2023/8/12
目的 比较豆科苦刺花、苦参与山豆根不同提取部位对不同自由基的抗氧化活性.方法 用系统溶剂法热回流提取,以获得不同极性部位(生物碱与黄酮类成分);用 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法、2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法与 3-氧代-2 苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-1 氧(PTIO)法自由基清除实验,对 3 种植物不同极性部位的抗氧化活性进行研究.结果 用 3 种方法测定的抗氧化活性结果基本相似,具有较高的可信度.不同极性部位均具有抗氧化作用,并呈现量效依赖关系.苦刺花的抗氧化性是甲醇提取部位大于二氯甲烷部位;苦参与山豆根的抗氧化性是二氯甲烷部位大于甲醇部位;DPPH、ABST、PTIO 3 种方法的自由基清除率IC50 值由小到大的排列顺序依次为山豆根(CH2 Cl2)<山豆根(METH)<苦刺花(METH)<苦参(CH2 Cl2)<苦参(METH)<苦刺花(CH2 Cl2),苦刺花(METH)<山豆根(CH2 Cl2)<山豆根(METH)<苦参(METH)<苦参(CH2 Cl2)<苦刺花(CH2 Cl2),苦刺花(METH)<山豆根(CH2 Cl2)<山豆根(METH)<苦参(CH2 Cl2)<苦参(METH)<苦刺花(CH2 Cl2);抗氧化活性大小顺序则相反.结论 3 种植物不同提取部位对 3 种不同自由基均具有较好的抗氧化作用,而且抗氧化作用与黄酮类、生物碱类成分的含量呈正相关,具有相互替代的开发潜能.这可能与其含有的共性结构生物碱和黄酮类化合物有关.
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编辑人员丨2023/8/12
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苦参化学成分及其生物碱抑菌活性研究
编辑人员丨2023/8/6
目的:研究苦参(Sophora tlavescenes Ait)总生物碱及其主要生物碱的抑菌效果,探究苦参开发消洗剂的可行性.方法:采用大孔吸附树脂柱色谱、硅胶柱色谱等技术手段对苦参干燥根进行分离纯化并通过波谱数据对化合物进行结构鉴定.采用药物二倍稀释法与茵落计数相结合法考察苦参总生物碱及其主要生物碱对金黄色葡萄球菌、大肠埃希杆菌、铜绿假单胞菌、乙型溶血型链球菌和白色念珠茵的抑菌作用,并测定各成分用药时的抑菌浓度范围.结果:从苦参中分离了16个单体化合物,包括9个生物碱类成分和7个黄酮类成分.药敏结果显示,5个样品对所选菌株均具有一定抑茵活性;苦参总生物碱抑茵作用强于各单体生物碱;各单体对金葡球菌的抑菌效果强于其他4种菌;苦参碱和槐果碱对金黄色葡萄球菌的抑茵作用均强于自身氧化物.结论:苦参中总生物碱及其主要生物碱成分存在明显的抑茵作用,各单体间抑茵活性各有不同,且对各菌种的抑茵作用也不甚相同,可为苦参开发消洗剂的可行性奠定基础.
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编辑人员丨2023/8/6
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天然植物中生物碱类药物抗胰腺癌作用的研究进展
编辑人员丨2023/8/6
胰腺癌是常见的消化道恶性肿瘤,目前,全球胰腺癌的发病率呈逐年上升趋势,病死率极高,确诊时绝大多数患者已丧失手术治疗的最佳时机,全身化学治疗是治疗晚期胰腺癌的主要方法,但患者对化学治疗易产生耐药性,治疗药物受到一定限制,因此,寻找更加有效的抗胰腺癌新药是科学研究者的重要工作之一.随着生物碱类药物的问世,紫杉醇类生物碱等初步显示了较好的临床疗效,已经成为国内外抗胰腺癌治疗的研究热点.本文就紫杉醇类、苦参碱类、小檗碱类、喜树碱类、长春碱类以及其他类生物碱在抗胰腺癌应用中的研究进展作一综述.
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编辑人员丨2023/8/6
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HPLC法同时测定山豆根中4种生物碱及其含量
编辑人员丨2023/8/6
目的:对不同来源的山豆根提取物中苦参碱类生物碱成分进行定量测定.方法:采用HPLC法对山豆根提取物中苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱和N-甲基野靛碱4种成分含量进行测定.色谱柱:Agilent C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm);流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液[pH = 6.3] (20 : 80);检测波长:220 nm;流速:1.0 mL·min-1;柱温:37 ℃.结果:方法学验证结果显示,4种成分分离度良好,在各自浓度范围内呈现出良好的线性关系,r ≥ 0.9991,平均回收率在99.17% ~ 100.78%,RSD为1.61% ~ 2.20%(n = 6).含量测定结果显示,不同样品中生物碱成分含量具有显著性差异.广西省的4份山豆根样品中苦参碱类生物碱成分含量分别为39.375、59.247、40.398、53.13 mg·g-1,高于其他省份,四川省的山豆根样品中苦参碱类生物碱成分含量较低.结论:不同批次山豆根药材,内在质量存在较大差异,HPLC法可用于山豆根药材的多种成分同步测定,该方法简便、快捷、准确、重复性好,为山豆根质量评价和控制提供科学依据.
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编辑人员丨2023/8/6
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小檗碱等7种中药生物碱类化学成分的RC膜透过规律及机制初探
编辑人员丨2023/8/6
为解析不同生物碱的膜透过规律,以典型中药生物碱类化学成分为代表,选用7种具有不同母核和取代基结构的中药生物碱类化学成分——小檗碱、巴马汀、青藤碱、苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、汉防己甲素,配制成相同摩尔浓度的模拟溶液,进行RC1K膜和RC5K膜的过膜实验.以各物质过膜的动态透过率、总透过率和总吸附率的值为指标,结合过膜前后膜表面的扫描电镜(SEM)图,预测、分析不同生物碱类成分动态透过率差异的原因.结果表明不同结构的生物碱类中药化学成分过2种膜的动态透过率存在显著性差异,其对膜材料表面的污染程度也存在不同程度的差异,同一个化合物在RC5K膜的透过率均大于RC1K膜,在一定范围内,膜的孔径越小对中药化学成分的选择性筛分作用越好;膜材料表面的污染程度均较轻;不同物质在同一种膜上的透过率差异表现出与结构复杂度之间差异的正相关性,这为控污染膜材料的表面改性设计提供实验依据.膜改性材料设计时,可以通过枝接不同极性基团改善膜表面性质,从而改变膜表面对化合物的吸附特性,针对性设计孔径,实现相应化合物的高透过率和低污染的目标.
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编辑人员丨2023/8/6
