目的:探讨外源性肿瘤坏死因子α(TNF－α)对三维环境下小鼠间充质干细胞向汗腺细胞分化的影响及其分子机制。方法:(1)取5只6～8周龄雌性C57BL/6小鼠，用烫伤仪在每只小鼠背部制成1个1 cm 2深Ⅱ～Ⅲ度烫伤创面。伤后1 d，取创面全层皮肤组织，采用酶联免疫吸附测定法检测组织中TNF－α浓度。(2)将0.9 g明胶和0.3 g海藻酸钠混匀后溶于30 mL磷酸盐缓冲液中制成水凝胶，取10只1 d龄雌雄不明C57BL/6小鼠足底全层皮肤研磨成真皮匀浆，从10只7 d龄雌雄不明C57BL/6小鼠股骨和胫骨中分离培养间充质干细胞。混合8 mL预热水凝胶、1 mL小鼠足部真皮匀浆、1 mL第2或3代终浓度为1.5×10 5个/mL间充质干细胞悬液，利用三维生物打印机在培养皿中打印出纵横交错的圆柱块共12块。打印块用25 g/L氯化钙溶液交联10 min，加入间充质干细胞培养基常规培养12 h后，按随机数字表法分为空白对照组和TNF－α处理组，每组6皿、6块。2组打印块均更换新鲜的汗腺诱导培养基培养，TNF－α处理组培养基中另加入终质量浓度为20 ng/mL的TNF－α。培养6 h，采用实时荧光定量反转录PCR法检测各组2皿打印块中间充质干细胞的多能性标志物Nanog mRNA的表达，采用蛋白质印迹法检测各组1皿打印块中间充质干细胞的Nanog蛋白表达，样本数均为3。培养14 d，采用实时荧光定量反转录PCR法检测各组2皿打印块中间充质干细胞的汗腺细胞标志物细胞角蛋白14(CK14)、CK18、钠钾ATP酶蛋白a1(ATP1a1)和水通道蛋白5(AQP5)mRNA表达，样本数为3；采用免疫荧光染色检测各组1皿打印块中间充质干细胞CK14、CK18、ATP1a1和AQP5蛋白表达分布。对数据行独立样本 t检验。 结果:(1)伤后1 d，小鼠烫伤创面组织中TNF－α质量浓度为(19±3)ng/mL。(2)培养6 h，TNF－α处理组打印块中间充质干细胞Nanog mRNA和蛋白表达量分别为0.39±0.04、0.36±0.03，均明显低于空白对照组的1.00±0.05、1.00±0.07( t＝16.51、14.56， P<0.01)。(3)培养14 d，TNF－α处理组打印块中间充质干细胞CK18、CK14、ATP1a1、AQP5 mRNA表达量分别为0.38±0.03、0.42±0.11、0.23±0.06、0.25±0.03，明显少于空白对照组的1.00±0.03、1.00±0.05、1.00±0.05、1.00±0.07( t＝25.31、8.31、17.07、17.06， P<0.01)。(4)培养14 d，空白对照组打印块中间充质干细胞CK18、CK14、ATP1a1和AQP5蛋白均广泛分布于细胞质，而TNF－α处理组打印块中间充质干细胞CK18、CK14、ATP1a1和AQP5蛋白在细胞质的分布较空白对照组明显减少。 结论:外源性TNF－α抑制三维环境下小鼠间充质干细胞向汗腺细胞定向分化，这可能与TNF－α抑制Nanog mRNA和蛋白水平的表达从而使间充质干细胞多向分化潜能下调有关。

烧烫伤是一种生活中常见的意外伤害，深Ⅱ度和Ⅲ度烧烫伤创面治疗常需涂抹磺胺类粉剂药物，目前涂药方法是将粉末状药物融于无菌溶液，应用大棉签或者刷子充分搅均成糊状后涂抹于患处。此种方法存在药物黏稠度不一、搅拌后剩余药物无法储存、搅拌粉末状药物刺激性强、对医护人员呼吸道有伤害等问题。为解决上述问题笔者设计一款药物搅拌涂抹一体机，现介绍如下。

目的:探讨前列地尔对深Ⅱ度烫伤大鼠早期创面愈合的作用。方法:取90只健康无特殊病原体级成年SD大鼠，雌雄各半，按随机数字表法分为假伤组、单纯烫伤组、前列地尔组，每组30只。假伤组模拟致假伤，其余2组大鼠背部造成30%体表总面积深Ⅱ度烫伤。3组大鼠伤后即刻行抗休克治疗；伤后2 h，假伤组、单纯烫伤组大鼠腹腔注射生理盐水1 mL，前列地尔组大鼠腹腔注射前列地尔注射液1 mL，每天1次，持续14 d。伤后3、7、14 d，每组取10只大鼠，观察创面大体情况并计算烫伤2组大鼠创面愈合率；每只大鼠取腹主动脉血2 mL，酶联免疫吸附测定法检测血清血栓素B2水平；取背部创面组织，苏木精－伊红染色观察病理形态学变化，免疫组织化学染色检测创面微血管密度(MVD)。对数据行析因设计方差分析、 t检验、Kruskal－Wallis H检验、Mann－Whitney U检验及Bonferroni校正。 结果:(1)假伤组大鼠无烫伤创面。伤后3 d，单纯烫伤组及前列地尔组大鼠创面形成干痂；伤后7、14 d，前列地尔组大鼠创面面积较单纯烫伤组明显缩小，且渗出更少。(2)伤后3 d，单纯烫伤组与前列地尔组大鼠创面愈合率相近( t＝1.167， P>0.05)。伤后7、14 d，前列地尔组大鼠创面愈合率明显高于单纯烫伤组( t＝8.657、33.050， P<0.01)。(3)伤后3、7、14 d，单纯烫伤组和前列地尔组大鼠血清血栓素B2水平分别为(541±22)、(607±47)、(688±21)，(326±25)、(271±21)、(135±27)pg/mL，明显高于假伤组的(17±6)、(16±4)、(16±4)pg/mL( t＝72.977、39.685、102.076，37.033、37.253、13.845， P<0.01)。伤后3、7、14 d，前列地尔组大鼠血清血栓素B2水平明显低于单纯烫伤组( t＝20.637、20.651、51.680， P<0.01)。(4)假伤组大鼠可见正常表皮、真皮等。伤后3 d，单纯烫伤组大鼠创面可见大量坏死组织、炎性细胞浸润，前列地尔组大鼠创面可见少许新生上皮形成及部分炎性细胞浸润。伤后7、14 d，前列地尔组大鼠新生上皮较单纯烫伤组明显增厚，并逐渐可见表皮形成。(5)伤后3、7、14 d，前列地尔组及单纯烫伤组大鼠创面MVD明显高于假伤组( Z＝－3.780、－3.781、－3.780，－3.780、－3.781、－3.780， P<0.01)。伤后3 d，前列地尔组与单纯烫伤组大鼠创面MVD相近( Z＝－1.965， P>0.05)；伤后7、14 d，前列地尔组大鼠创面MVD明显高于单纯烫伤组( Z＝－3.780、－3.780， P<0.01)。 结论:前列地尔早期干预能显著改善深Ⅱ度烫伤大鼠创面微循环，减少炎性细胞浸润，促进新生血管形成及创面愈合。

目的:建立一种稳定的大鼠皮肤热损伤模型，并探究热损伤对大鼠皮肤choke血管的影响。方法:雄性SD大鼠114只，采用随机数字表法分成3组，应用100 ℃沸水对位于大鼠背部的三血管体穿支区皮肤按实验分组接受10、15或20 s烫伤，每组38只。烫后应用激光散斑灌注成像技术监测皮肤血液灌注变化，采用明胶-氧化铅灌注观察皮肤血管网的密度变化，通过组织学验证各组的热损伤深度并观察其对皮肤choke血管的影响和血管再生情况。计量资料以 ± s表示，采用 t检验、单因素方差分析或重复测量的方差分析进行统计学分析。 结果:组织学染色验证了100 ℃沸水接触皮肤10、15、20 s分别对大鼠背部皮肤造成了浅Ⅱ度、深Ⅱ度和Ⅲ度的热损伤。激光散斑灌注成像显示，在烫后第7天，热损伤10 s组的血流灌注量恢复至烫前水平[皮肤血流散斑流速指数(SFI)：143.25±30.40 vs. 140.28±26.35， P＝0.828]，热损伤15 s组SFI较烫前略有减低，但差异无统计学意义(106.20±10.30 vs. 119.31±9.66, P＝0.072)，而热损伤20 s组SFI较烫前明显减低(67.49±19.93 vs. 136.37±18.96, P＝0.001)。明胶-氧化铅灌注显示，在烫后第14天，热损伤10 s组血管密度恢复至烫前；热损伤15 s组血管密度略高于烫前水平；热损伤20 s组血管密度明显低于烫前水平。组织学染色显示，在烫后第7天，热损伤10 s组微血管密度[(29.16±2.38) 条/mm 2 vs. (27.74±3.66) 条/mm 2, P＝0.696]和管径[(35.61±2.49) μm vs. (41.74±3.31) μm, P＝0.938]较烫前差异无统计学意义；热损伤15 s组微血管密度高于烫前[(36.68±4.65) 条/mm 2 vs. (27.74±3.66) 条/mm 2, P＝0.027]，而管径较烫前差异无统计学意义[(52.88±4.97) μm vs. (41.74±3.31) μm, P＝0.058]；热损伤20 s组与烫前相比微血管密度差异无统计学意义[(30.80±2.27) 条/mm 2 vs. (27.74±3.66) 条/mm 2, P＝0.407]，管径小于烫前[(37.57±5.33) μm vs. (41.74±3.31) μm, P＝0.001]。 结论:浅Ⅱ度热损伤对choke区血管无明显影响；深Ⅱ度热损伤刺激choke区血管新生，三血管体穿支区皮肤的血液灌注可恢复至近似正常水平；Ⅲ度热损伤严重损伤choke区血管，三血管体穿支区皮肤血液灌注无法恢复。

目的 观察矾冰纳米乳对兔耳增生性瘢痕组织环腺苷酸应答元件结合蛋白 3 样 1(CREB3L1)及炎症损伤的影响,探讨其预防增生性瘢痕的作用机制.方法 将 30 只新西兰大耳白兔随机分为空白组、模型组、积雪草苷组及矾冰纳米乳低、中、高剂量组(8.15、16.3、32.6 mg·mL-1).采用热力烫伤法进行造模,深Ⅱ度烧伤造模成功后第 14 天给予相应药物外用,空白组、模型组外用等量生理盐水,每日 2 次,连续给药至第 35 天.苏木素-伊红(HE)染色观察兔耳瘢痕组织病理学改变;马松(Masson)染色观察瘢痕组织胶原沉积情况;免疫荧光双标法检测兔耳瘢痕组织CREB3L1/α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)共表达情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测瘢痕组织白细胞介素 6(IL-6)、白细胞介素 10(IL-10)等炎性因子表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测 CREB3L1、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(COL-Ⅲ)、α-SMA mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western Bolt)检测 CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA的蛋白表达情况.结果 与空白组比较,模型组瘢痕增生指数明显升高(P＜0.01);病理学改变包括真皮层增厚,形成致密的网状纤维,伴见炎症细胞浸润;Masson染色可见真皮层增厚,蓝染的胶原纤维大量沉积排列紊乱;免疫荧光双标结果显示,瘢痕组织中CREB3L1 阳性表达增加,α-SMA阳性表达增加,IL-6 含量明显升高(P＜0.01),IL-10 含量明显降低(P＜0.01),兔耳瘢痕组织中的 CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA mRNA 相对表达量明显增加(P＜0.01),CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA 蛋白的表达明显增加(P＜0.01).与模型组比较,矾冰纳米乳中、高剂量组及积雪草苷组治疗后瘢痕增生指数均明显下降(P＜0.05,P＜0.01),病理改变可见真皮层变薄,炎性细胞均有不同程度减少,蓝染的胶原纤维减少,免疫荧光双染可见瘢痕组织中CREB3L1 阳性表达降低,α-SMA阳性表达降低,IL-6 含量明显降低(P＜0.01),IL-10 含量明显升高(P＜0.01),矾冰纳米乳中、高剂量组和积雪草苷组均能够明显下调CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA mRNA的表达(均P＜0.01),降低CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01).结论 矾冰纳米乳能够通过调节CREB3L1 及相关纤维化蛋白的表达,降低炎症水平,从而预防增生性瘢痕形成,丰富了中医"既病防变""治未病"思想的科学内涵.

目的 探索实验室中一种简便的大鼠烫伤模型制备的方法.方法 选取30 只SPF级雄性SD大鼠,随机分为6 组,每组各5 只,其中一组为空白对照组,其余5 组为实验组.以比色管、温度计和恒温电热水浴锅制作可控温度、固定压力和面积的大鼠烫伤装置,以致伤时间为唯一可变因素,在大鼠背部建立不同深度的烫伤模型.5 组实验组的烫伤部位所受压力、温度均一致,烫时间分别为5 s、10 s、15 s、20 s、25 s,形成直径为3cm的圆形烫伤面,并于烫伤24h后观察各实验组大鼠的皮肤创面及造模后创口形成深度.结果 大鼠在烫伤后10 s、15 s、20 s符合三度六分法对浅Ⅱ度、深Ⅱ度及Ⅲ度烫伤创面程度的划分,其中,烫伤10s后为浅Ⅱ度烫伤,烫伤15s后为深Ⅱ度烫伤,烫伤20s后为Ⅲ度烫伤.通过本实验所采用的烫伤模型制作方法,根据烫伤创面的评价标准可得大鼠后背皮肤烫伤深度与持续时间呈明显正相关.结论 以比色管、温度计和恒温电热水浴锅制作的可控温度、固定压力和面积的烫伤装置,并以致伤时间为唯一可变因素,可制作浅Ⅱ度、深Ⅱ度、Ⅲ度大鼠烫伤模型,操作方便、经济、卫生,容易控制烫伤深度和面积,而且重复性好,是比较理想的烧、烫伤动物模型.

烧烫伤是一种生活中常见的意外伤害,深Ⅱ度和Ⅲ度烧烫伤创面治疗常需涂抹磺胺类粉剂药物,目前涂药方法是将粉末状药物融于无菌溶液,应用大棉签或者刷子充分搅均成糊状后涂抹于患处.此种方法存在药物黏稠度不一、搅拌后剩余药物无法储存、搅拌粉末状药物刺激性强、对医护人员呼吸道有伤害等问题.为解决上述问题笔者设计一款药物搅拌涂抹一体机,现介绍如下.

目的 探讨苦瓜外泌体对皮肤深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响及机制.方法 超速离心法提取苦瓜外泌体;建立大鼠深Ⅱ度皮肤烫伤模型;将 42 只SD雄性大鼠随机分为莫匹罗星软膏组、莫匹罗星软膏+湿润烧伤膏组和莫匹罗星软膏+苦瓜外泌体组,每组 14 只,分别于创面外敷莫匹罗星软膏、莫匹罗星软膏+湿润烧伤膏、莫匹罗星软膏+苦瓜外泌体,1 次/d,连续给药 28 d并记录体重、毛发增长情况、瘢痕生长情况、创面面积.给药第 3、7、14、21、28 天留取创面皮肤组织制作冰冻切片,苏木精-伊红染色进行病理学分析,免疫组织化学染色观察创面角化蛋白(CK19)、血小板-内皮细胞粘附分子(CD31)含量变化.结果 莫匹罗星软膏+苦瓜外泌体组愈合率显著高于莫匹罗星软膏组和莫匹罗星软膏+湿润烧伤膏组,皮肤皱缩现象最轻;莫匹罗星软膏+苦瓜外泌体组皮肤组织的CK19 表达前期多于其他对照组,CD31 后期表达量多于其他组.结论 苦瓜外泌体通过增强血管内皮合成和促进损伤细胞恢复加速烫伤创面愈合,具有明显的促进深Ⅱ度烫伤修复作用,可成为潜在的烫伤治疗药物.

目的 探讨脐灸疗法发生低温烫伤的危险因素,为制定预防及处理对策提供依据.方法 选取2019年07月至2019年11月我院消化内科门诊及住院应用脐灸疗法的患者为研究对象,共391例,对其临床资料进行分析,通过多因素Logistic回归分析脐灸低温烫伤的危险因素,并制定预防及处理的对策,实施后再选取2020年05月至09月我院消化内科门诊及住院应用脐灸疗法的患者为研究对象,共206例,统计低温烫伤发生率.结果 391例脐灸患者发生低温烫伤95例(24.3％),其中Ⅰ度烫伤91例(95.8％),浅Ⅱ度烫伤3例(3.2％),深Ⅱ度烫伤1例(1.0％),经Logistic回归分析显示影响因素如下,患者热敏感度[OR=0.114,95％CI(0.048,0.272)]、艾柱大小[OR=21.846,95％CI(7.44,64.148)]、面碗成分[OR=0.061,95％CI(0.022,0.173)]、烤灯距离[OR=0.088,95％CI(0.030,0.259)]、点火位置[OR=4.318,95％CI(1.708,10.917)]、填塞药物松紧度[OR=0.066,95％CI(0.024,0.181)]、年龄[OR=2.798,95％CI(1.236,6.337)],实施对策后206例脐灸患者发生低温烫伤11例(5.3％),其中Ⅰ度烫伤11例(100％),浅Ⅱ度烫伤0例(0％),深Ⅱ度烫伤0例(0％).结论 患者热敏感度、艾柱大小、面碗成分、烤灯距离、点火位置、填塞药物松紧度、年龄为脐灸低温烫伤的独立危险因素,针对如上因素采取对策能有效降低低温烫伤发生率.

目的 探讨银离子敷料治疗皮肤深Ⅱ度烧烫伤创面的有效性及安全性.方法 自 2019 年 10 月至 2020 年 6 月,南宁市第二人民医院烧伤整形外科对 132 例皮肤深Ⅱ度烧烫伤创面患者进行治疗,根据治疗方法分为治疗组(65 例)和对照组(67 例),治疗组采用银离子敷料,对照组采用含银敷料Atrauman Ag.比较两组患者的总有效率、创面愈合率、创面愈合时间、创面分泌物细菌培养转阴率,并检测患者治疗前后的生命体征、实验室检查、心电图、综合评价及血银、尿银含量等,并记录治疗期间不良反应事件.结果 基于全分析集(full analysis set,FAS)和符合方案集(per protocol set,PPS),结果均显示治疗组的总有效率高于对照组(P<0.05).两组的创面愈合率、创面愈合时间,差异均无统计学意义(P>0.05).两组治疗前后创面分泌物细菌培养转阴率比较,差异无统计学意义(P>0.05).患者在治疗前后的生命体征、实验室检查、心电图、综合评价及两组间血银、尿银浓度比较,差异均无统计学意义(P>0.05).两组均未发生严重不良反应事件.结论 银离子敷料的有效性不劣于含银敷料Atrauman Ag.治疗期间两组均未发生严重不良反应事件,因此该银离子敷料是一种安全、有效的治疗皮肤深Ⅱ度烧烫伤创面的敷料.