目的 探讨补中益气汤合清经散治疗围绝经期崩漏的临床效果.方法 选取 2021 年 12 月—2022 年11 月就诊的60 例围绝经期崩漏为研究对象,根据治疗方式分为对照组和观察组,每组 30 例.对照组给予黄体酮胶囊治疗,观察组在对照组基础上给予补中益气汤合清经散治疗.观察2 组近期止血疗效、临床疗效及不良反应发生情况,比较2 组治疗前后中医证候积分、子宫内膜厚度及血清性激素水平.结果 观察组止血天数短于对照组,近期止血总有效率及临床总有效率均高于对照组(P＜0.05).治疗后,2 组中医证候积分及子宫内膜厚度均较治疗前降低,且观察组降低程度大于对照组(P＜0.05).治疗后,2 组血清黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)水平均较治疗前下降,雌二醇(E2)水平均较治疗前上升;且观察组血清FSH、LH下降程度及E2 上升程度均大于对照组(P＜0.05).2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 补中益气汤合清经散能更好地改善围绝经期崩漏的出血症状,降低中医证候积分和子宫内膜厚度,调节性激素水平,提高临床疗效.

目的:建立经典名方清经散物质基准,并对其关键质量属性量值传递进行研究.方法:制备 15 批清经散对应实物,建立物质基准高效液相色谱法(HPLC)特征图谱,进行特征峰归属分析;建立物质基准指标性成分含量测定方法,对指标成分从饮片到对应实物的转移率进行分析研究.结果:物质基准HPLC特征图谱共指认了6 个特征峰,峰 1、2(S)、3、5、9、11 分别为芍药内酯苷、芍药苷、东莨菪内酯、毛蕊花糖苷、丹皮酚和盐酸小檗碱;共归属了 12 个特征峰,分别来自白芍(峰 1),白芍、牡丹皮(峰 2、6),地骨皮(峰 3、8、10),牡丹皮(峰 4、9、12),熟地黄(峰 5),青蒿(峰 7),盐黄柏(峰 11),芍药苷、东莨菪内酯、丹皮酚从饮片到对应实物的转移率分别为 67.57%～79.69%、57.29%～77.57%、68.13%～73.11%.结论:采用HPLC特征图谱结合多指标性成分含量测定对清经散物质基准进行量值传递研究,该方法科学合理,可为清经散物质基准的建立及复方制剂的研究开发提供参考.

目的:探究妇科名著《傅青主女科》77首方剂的用药特色.方法:以文成堂刻本《傅青主女科》77方为数据源,先用Pajek5.07工具进行可视化处理的复杂网络分析,以中药作为结点构建复杂网络图,并将"共同出现"的中药配伍关系连成网络结构,再行关联规则挖掘,最后对挖掘结果进行分析讨论.结果:傅氏用药频次>20的有6味,按照功能主治分为16类,对96味中药进行复杂网络分析,得到6个有意义的网络聚类组,如C1健脾益气;C2养阴清热;C3补益肾阳;C4偏清热凉血;C5清热泻火,补益阴津;C6温经补血,理气化瘀.高频中药之间二联121组,三联513组,四联867组,如五联的熟地黄、人参、白术、白芍和当归.结论:傅氏以补气养血、培补正气为主,补虚药以当归为首,常配伍人参,白术次之,重视补气健脾化湿.常用的核心中药有白术、人参、当归、白芍、熟地黄、山茱萸、柴胡、黄芪,核心方剂有异功散、四物汤、清经散、右归丸、完带汤,复杂网络结合关联规则在挖掘核心中药和方剂方面有一定优势,可视化效果较好.

目的 利用毕赤酵母系统表达人乳头瘤病毒52型(human papillomaviruses 52,HPV52)L1蛋白,并检测其病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的免疫原性.方法 采用同义密码子替换的方法对HPV52 L1蛋白的野生型基因进行密码子优化,并在体外构建多拷贝表达质粒,经转化和筛选获得在毕赤酵母系统中高表达的HPV52 L1 VLP菌种.采用15 L发酵罐大规模培养,菌液破碎上清经阳离子交换层析和分子筛排阻层析两步法纯化,获得HPV52 L1 VLP.动态光散射和透射电子显微镜观察HPV52 L1 VLP的大小和形态,假病毒中和试验检测HPV52 L1 VLP在小鼠及大鼠体内的免疫原性.结果 HPV52 L1 VLP在溶液中呈较均一的单一组分,水合粒径为91.37 nm;镜下观察呈均一的、直径约50 nm的球状空心颗粒,大小与HPV52天然病毒颗粒相近.HPV52 L1 VLP相对分子质量约56 000,纯度达95％以上,产量为3.6 mg/L,且可与小鼠抗HPV L1多克隆单抗发生特异性结合.HPV52 L1 VLP在小鼠体内的半数有效剂量(ED50)为0.010 μg,在大鼠体内诱导产生的中和抗体滴度高达106.结论 于毕赤酵母系统成功表达了HPV52 L1 VLP,且具有良好的免疫原性,为相关预防性疫苗的研发奠定了基础.

[目的]通过临床流行病学调查探讨排卵障碍性异常子宫出血(AUB-O)的证治特点.[方法]采用流行病学调查方法,收集2018年1月1日至2020年12月31日期间在广东省中医院妇科门诊就诊并明确诊断为AUB-O的病例183例,填写调查问卷,分析AUB-O患者的中医病性要素及中医证型分布情况、临床处方用药情况,并随访调查近期疗效(阴道流血停止时间)及远期疗效(月经周期恢复时间).[结果](1)从病性要素来看,AUB-O虚证(50.8％)出现频数高于实证(32.8％)、虚实夹杂证(16.4％);从中医证型分布来看,AUB-O患者前5位中医证型分别为肾虚证(19.1％)、脾虚证(9.3％)、肾虚血瘀证(8.2％)、肝郁气滞证(7.7％)、肝郁血热证(7.7％).(2)处方用药方面,肾虚证常用固阴煎加减、两地汤合二至丸加减、举元煎加减;脾虚证常用归脾汤、补中益气汤加减;肾虚血瘀证常用自拟方,方中常用海螵蛸、续断、白术、党参、甘草、墨旱莲、白芍、桑寄生、菟丝子、益母草等;肝郁气滞证常用逍遥丸加减;肝郁血热证常用丹栀逍遥丸、清经散及龙胆泻肝汤加减.(3)疗效方面,中西医结合治疗组患者的近期疗效(阴道流血停止时间)及远期疗效(月经周期恢复时间)与纯中医治疗组患者比较,差异均无统计学意义(P>0.05).[结论]本研究运用流行病学调查分析的方法,论证了AUB-O两大证治特点:虚则健脾补肾,实则疏肝解郁;标本兼顾,活用"塞流、澄源、复旧".

目的 筛选并确立流感病毒H1N1 A/Nebraska/14/2019血凝素(HA)的最佳蛋白疫苗策略.方法 分别构建HA全长、HA胞外区C端不同的突变体及共表达HA/M1的重组杆状病毒,感染昆虫细胞表达80 h后,收取培养上清,Western blot鉴定重组抗原的表达,同时采用血凝试验间接分析其免疫原性.然后大量表达HA/M1蛋白,Core700纯化后分析蛋白颗粒的理化性质、血凝活性及稳定性.结果 2种HA胞外区的C端突变体虽均以三聚体形式表达,但表达上清无血凝活性;HA全长三聚体具有较好的血凝活性,但为膜蛋白,纯化难度大.HA/M1共表达上清具有血凝活性,HA/M1表达上清经Core700纯化,透射电子显微镜分析显示为80 nm～150 nm病毒样颗粒(VLP).HA-M1?VLP的血凝效价高达26,动态光散射显示HA?M1?VLP在4℃保存3个月性质稳定.结论 HA?M1?VLP易于表达纯化、稳定性好,且血凝活性高,可用于流感病毒H1N1蛋白疫苗的研究.