本文从理论研究、临床应用、化学成分、药理研究、开发现状5 个方面系统综述了经典名方竹叶石膏汤近年来的研究进展,并进一步探讨了该方未来的研究思路.该方的理论研究主要在病机、方证方面,主治病证涉及肿瘤、呼吸、内分泌系统等,应用广泛,效果显著.药理研究表明该方具有抗炎、抗氧化、改善代谢等作用.目前针对竹叶石膏汤单味药物化学成分的微观研究较多,对全方的药效物质基础、作用机理、药物基源考证和物质基准的研究较少.本文指出应从中医理论与临床出发,运用现代科学技术揭示其作用机理,并完善相关信息考证,为经典名方的开发提供有力的文献支撑,以推动经典名方复方制剂的研发,保障经典名方复方制剂的安全性和有效性.

本文结合中药现代化发展方向探究网络药理学对中医药发展的启示作用.网络药理学通过多学科、多领域、大数据的关联分析,深入分析中药药效物质基础成分的分子效应,探索其生理学、循证学依据.网络药理学通过多途径、多角度构建中药药效物质基础的化学成分库,并通过多数据库的交叉关联分析探索中药各化学成分的分子生物学效应、中药协同配伍机制、毒副作用等.网络药理学通过分子层面阐释中药药效物质基础的潜在作用,对揭示中药药效物质基础的分子生物学作用、构建中医辨证理论微观化体系、揭示中药"七情"配伍、药对及复方药效物质基础等中药相互作用有积极意义.值得注意的是,中药药效物质基础的研究仍相对滞后,目前仅仅对质量分数相对较高的成分进行表浅研究,仍未能从分子作用层面解释其相互作用,无法构建"点—线—面"网络作用机制.网络药理学的大数据理论分析与中药临床应用实践探索仍有脱节,无法将提取出的"关键性"信号通路体现在临床用药指导方向.化学性质相反的多类型化学成分簇发生相互作用,反应产物发挥生理学活性,此类情况的网络药理学分析应以化学反应产物为基准,而不是单纯的分析饮片所含化学成分及其靶点信息.另外,中药的网络药理学分析流程未标准化,数据分析结果差异性较大,分析结果的可验证性较低,如何借助分子生物学的理论性分析阐释中药药效物质基础的生理学效应仍是后期需要深入研究的课题.

目的 建立经典名方黄芪桂枝五物汤(Huangqi Guizhi Wuwu Decoction,HGWD)物质基准;研究HGWD饮片-水煎液-浓缩液-冻干粉全过程量值传递规律,为含挥发性物质的经典名方基准样品的制备方法和科学评定提供借鉴.方法 根据国家发布的《古代经典名方关键信息表(25 首方剂)》制备 15 批HGWD水煎液;建立其多指标含量测定和特征图谱分析方法,开展特征峰归属及相似度评价;考察比较HGWD水煎液、冻干粉中多指标含量,分析其在水煎液-浓缩液-冻干粉制备过程中量值传递规律,科学合理确定基准样品的物理形态,并拟定 HGWD 基准样品中各成分的含量和转移率范围,建立HGWD物质基准.结果 HGWD中桂皮醛、肉桂醇在浓缩干燥过程中显著降低,其余指标成分在水煎液、浓缩液与冻干粉间能较完整地传递;15 批HGWD基准样品的特征图谱相似度均>0.9,确定8 个特征峰,分别来自于方中白芍、桂枝和生姜;出膏率范围8.0%～11.0%;指标成分黄芪甲苷含量为 0.04%～0.07%,转移率为 9.0%～18.0%;芍药苷含量为 1.5%～3.0%,转移率为 33.0%～62.0%;肉桂醇含量为 0.02%～0.04%,转移率为 25.0%～47.0%;桂皮醛含量为 0.02%～0.05%,转移率为 0.7%～1.5%;肉桂酸含量为 0.03%～0.06%,转移率为 17.5%～34.0%;6-姜辣素含量为 0.04%～0.08%,转移率为 7.0%～14.0%.结论 确定以水煎液作为HGWD基准样品物理形态,为含挥发性物质的经典名方基准样品物理形态的科学选择提供参考;建立了HGWD物质基准各项质量指标,并对其量值传递规律进行分析,为该经典名方复方制剂开发提供依据.

目的 建立同时适用于泽泻汤药材、饮片与基准样品的HPLC特征图谱检测方法,研究泽泻汤基准样品的物质群量值传递研究.方法 依据古代医籍记载的方法制备泽泻汤基准样品,采用HPLC-TOF/MS飞行时间高分辨质谱技术对泽泻汤化学成分进行鉴定和推导,初步阐述泽泻汤主要化学成分;建立基于HPLC-UV-ELSD的基准样品特征图谱方法,明确其特征图谱的相似度及峰归属,结合指标性成分 23-乙酰泽泻醇B、蔗果三糖的含量范围和转移率范围以及出膏率,进行基准样品制备过程中物质群的的量值传递相关性分析.结果 在基准样品特征图谱中,泽泻汤的基准样品中共指认 18 个特征峰,其中 10 个特征峰来自泽泻、5个特征峰来自白术;指标性成分 23-乙酰泽泻醇B质量分数为 0.06～0.11 mg/g,平均转移率为(5.11±1.53)%;指标性成分蔗果三糖质量分数为 4.29～7.41 mg/g,平均转移率为(71.11±21.33)%;15 批基准样品的出膏率控制在 13.00%～15.10%.结论 采用整体物质群控制的特征图谱方法、制备工艺过程中物质量值传递研究思路与技术经济指标评价相结合的模式,建立了科学合理的泽泻汤基准样品的评价方法,且明确了药材-饮片-基准样品的传递规律,为经典名方泽泻汤的进一步开发及相关制剂的质量控制提供依据.

该研究采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q/Orbitrap HRMS)结合分子网络技术快速分析了经典名方清骨散基准样品中化学成分.首先采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP18色谱柱(2.1 mm× 100 mm,1.7 μm),以乙腈-0.1％甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4mL·min-1,柱温30 ℃条件下,在加热电喷雾离子源正、负离子2种模式下采集质谱数据.随后将采集的清骨散基准样品质谱数据上传至全球天然产物社会分子网络(GNPS)平台进行计算分析,并运用Cytoscape 3.8.2软件构建可视化分子网络.在此基础上,根据对照品的裂解规律,结合保留时间、高分辨质谱精确相对分子质量、特征碎片离子、文献报道及数据库匹配等信息鉴定清骨散基准样品中的化学成分.最终从清骨散基准样品中共鉴定和推测出105个化学成分,包括19个环烯醚萜苷类、23个黄酮类、15个苯丙素类、11个三萜皂苷类和37个其他类化合物,其中2个成分为潜在的新化合物.该研究采用的方法不仅实现了清骨散基准样品中化学成分的快速、准确鉴定,为清骨散复方制剂的药效物质研究和质量控制提供科学依据,也为中药复方制剂中化学成分的快速鉴定提供参考.

目的:建立五味消毒饮UPLC指纹图谱,探究五味消毒饮物质基准制备过程中从中药饮片到物质基准之间关键质量属性量值传递关系.方法:水煎法制备15批五味消毒饮物质基准,并建立物质基准UPLC指纹图谱分析方法指认关键色谱峰,多波长同时测定绿原酸、秦皮乙素、菊苣酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸和蒙花苷的含量,计算转移率和出膏率.结果:15批物质基准指纹图谱相似度＞0.9,指认13个色谱峰,设定7个特征色谱峰.15批物质基准出膏率范围为28.72％～33.85％,绿原酸、秦皮乙素、菊苣酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸和蒙花苷转移率范围分别为35.39％～42.48％,49.72％～61.20％,28.47％～34.30％,28.96％～39.20％,20.09％～23.57％,81.13％～95.02％,30.33％～35.92％,未出现离散数据.结论:研究五味消毒饮UPLC指纹图谱分析方法及其关键质量属性量值传递规律对于其物质基准的开发与应用具有参考价值.

目的 建立附子汤物质基准特征图谱及多指标成分含量测定方法,阐明附子汤的关键质量属性.方法 制备15 批附子汤基准样品,建立附子汤高效液相色谱(HPLC)特征图谱,并进行特征峰归属和相似度分析;以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1 为指标性成分建立附子汤人参含量测定方法,以均值的 70%～130%为界限设定各质量控制指标的量值范围,并进行量值传递分析.结果 15 批附子汤基准样品特征图谱有 12 个共有峰,并指认没食子酸、儿茶素、芍药苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1 和白术内酯Ⅲ 7 个特征峰,相似度均在0.98 以上;15 批基准样品中指标性成分含量范围及转移率分别为人参皂苷Rg1 含量0.51～0.94 mg/g,人参皂苷Re含量0.34～0.62 mg/g,人参皂苷Rg1 与人参皂苷Re之和转移率 12.05%～26.91%;人参皂苷Rf含量0.14～0.27 mg/g,转移率 11.15%～43.71%;人参皂苷Rb1 含量 0.41～0.76 mg/g,转移率 10.53%～33.23%.结论 本研究建立的附子汤基准样品HPLC特征图谱及人参含量测定方法精密准确,重复性和稳定性良好,为经典名方附子汤基准样品及其制剂关键化学属性的质量评价奠定了基础.

目的:建立三化汤的指纹图谱,利用网络药理学方法筛选质量控制指标性成分.方法:建立15批三化汤的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012A版)进行相似度评价后确定共有峰;通过与对照药材、对照品比对,对峰进行归属和指认;并采用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对15批三化汤进行质量评价;利用网络药理学筛选三化汤的核心作用靶点和通路,通过分子对接将核心靶点与13个成分进行对接验证,筛选出三化汤质量控制的指标性成分.结果:三化汤物质基准的HPLC指纹图谱共标定17个共有峰,相似度均大于0.97;共指认13个色谱峰,分别为辛弗林、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、厚朴酚、和厚朴酚、紫花前胡苷、异欧前胡素,其中含量排名前4的成分为柚皮苷、新橙皮苷、辛弗林、紫花前胡苷;OPLS-DA将样品分为3类,通过变量重要性投影得出新橙皮苷、柚皮苷、紫花前胡苷、大黄酸对三化汤物质基准影响较大;网络药理学预测13个成分可能通过肿瘤蛋白P53(TP53)、蛋白激酶B1(Akt1)、90 kDa热休克蛋白 αA1(HSP90AA1)、非受体酪氨酸激酶(SRC)、磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α(PIK3CA)等38个核心靶点,作用于内分泌抵抗、脂质和动脉粥样硬化、前列腺癌、PI3K-Akt1信号通路、结直肠癌等157条主要通路发挥药效作用,度值前5位的成分为大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、和厚朴酚、厚朴酚.分子对接结果显示,13个成分均能与Akt1稳定地结合.结论:通过整合含量测定、化学计量学、网络药理学,共筛选出新橙皮苷、柚皮苷、紫花前胡苷、大黄酸、辛弗林、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、和厚朴酚、厚朴酚10个成分可能为三化汤的质量标志物.

[目的]建立清金益气方物质基准的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,为清金益气方物质基准质量标准的建立及清金益气方现代制剂的研究提供相关依据.[方法]文章采用HPLC建立清金益气方物质基准指纹图谱,并对 10 批清金益气方物质基准指纹图谱进行了峰归属和相似度评价.采用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)进行分析,进一步评价多批次物质基准间的质量差异.[结果]根据 10 批样品的指纹图谱,确定了13个共有峰,共有峰之间的分离程度较好.此外,10批清金益气方指纹图谱的相似度均大于 0.90,满足指纹相似度评价的基本要求,能够为整体评价清金益气方物质基准质量提供参考根据;对比对照品,指认出 7个成分;通过化学模式识别将 10 批样品分为两类,并找出导致分类差异的4个主成分.分析发现导致10批差异分析的成分主要归属于黄芩和马鞭草,因此要严格控制黄芩和马鞭草的质量以保证物质基准质量稳定性.[结论]建立了稳定可行的清金益气方物质基准指纹图谱方法,全面地反映清金益气方物质基准的化学成分信息;结合化学模式识别进行评价,使研究更加全面科学,为后续研究提供参考.

目的:建立芍药甘草汤(SGD)物质基准及对应实物薄层鉴别方法、超高效液相色谱(UHPLC)特征图谱,并对其进行多成分含量测定,研究量值传递规律,结合出膏率、水分等数据,探讨SGD质量标准.方法:制备18批SGD物质基准和对应实物.薄层鉴别使用1％NaOH制备的硅胶G薄层板,以乙酸乙酯∶甲酸∶冰醋酸∶水(15∶1∶1∶2)为展开剂,以10％的硫酸乙醇溶液为显色剂.使用超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UHPLC-DAD)法建立SGD物质基准及对应实物特征图谱,指认特征峰;对饮片、物质基准、对应实物进行多成分含量测定,分析指标成分从饮片-物质基准-对应实物的传递规律.结果:薄层鉴别显示色谱斑点清晰,阴性无干扰.SGD物质基准和对应实物特征图谱相似度均大于0.9,共匹配14个特征峰,指认出6个.指标成分含测结果为:芍药苷、甘草苷、甘草酸在物质基准中分别为0.48～0.83 mg/mL、0.13～0.32 mg/mL、0.31～0.60 mg/mL,在对应实物中分别为 2.21％～3.40％、0.64％～1.59％、1.56％～3.00％.饮片-物质基准的平均转移率分别为芍药苷51.15％、甘草苷36.65％、甘草酸37.03％;物质基准-对应实物的平均转移率分别为芍药苷100.19％、甘草苷99.55％、甘草酸100.49％.结论:通过各项研究结果能够较为全面地对SGD物质基准和对应实物的质量进行把控,实现了对经典名方SGD开发研究的全过程质量控制.