目的:探究半乳糖靶向纳米探针Gal-OH-BDP(GOB)在近红外二区(NIR-Ⅱ)进行原位肝癌荧光成像的可行性和成像效果。方法:合成NIR-Ⅱ纳米荧光探针GOB，通过人源HepG2肝癌细胞构建BALB/c裸鼠原位肝癌模型，将12只裸鼠采用简单随机抽样法分为2组，每组各6只。使用GOB瘤内注射法进行NIR-Ⅱ成像的记为NIR-Ⅱ GOB组，使用吲哚菁绿(ICG)静脉注射法并先后进行近红外一区(NIR-Ⅰ)和NIR-Ⅱ成像，分别记为NIR-Ⅰ ICG组和NIR-Ⅱ ICG组。利用NIR-Ⅰ/Ⅱ相机进行体内成像试验。使用Image J软件对图片进行荧光图像处理，定量计算肝癌荧光图像的肿瘤-正常组织比(TNR)和肿瘤边缘分辨率，通过石蜡切片及苏木精-伊红染色法进行病理学验证。样本数据采用 t检验和方差分析。 结果:通过病理学成功验证了瘤内注射后GOB在肝癌组织内的靶向积累。NIR-Ⅱ GOB组的TNR高于NIR-Ⅱ ICG组和NIR-Ⅰ ICG组(5.61±0.98比3.35±0.63比2.01±0.54， F＝29.022， P<0.05)。对组成TNR的3项指标(肿瘤区域荧光、正常肝组织背景荧光和环境背景荧光)进行的亚组分析结果表明，在肿瘤区域荧光方面，NIR-Ⅱ GOB组高于NIR-Ⅱ ICG组(228.04±5.60比207.62±14.86， t＝3.149， P<0.05)；在正常肝组织背景荧光方面，NIR-Ⅱ GOB组低于NIR-Ⅱ ICG组(43.22±8.68比63.47±8.88， t＝－3.992， P<0.05)。通过计算跨越肿瘤边缘像素点的灰度值变化率来量化肿瘤边缘分辨率，NIR-Ⅱ GOB组高于NIR-Ⅱ ICG组和NIR-Ⅰ ICG组(170.01±30.92比98.96±23.99比36.82±10.19， F＝48.882， P<0.05)。 结论:通过瘤内注射Gal-OH-BDP纳米荧光团在NIR-Ⅱ窗口实现优于传统ICG介导的原位肝肿瘤荧光成像。

目的:评估缺氧缺血(HI)自我复苏的新生SD大鼠模型外周血微小RNA(miRNA)指标。方法:3只孕鼠所产幼鼠按窝别分为3组，A组为空白对照组，B组为HI组，C组备用。采用高通量深度测序方法比较对照组和HI组新生4日龄SD大鼠外周血中miRNA的表达谱。应用生物信息学分析研究这些差异表达的miRNA。采用基因本体论(GO)和京都基因与基因组学百科全书(KEGG)分析方法预测相关的细胞信号通路和功能。通过miRBD预测miRNA及与缺氧缺血性脑病(HIBD)相关的靶基因。应用HE染色观察脑组织病理变化。结果:经外周血深度测序后可得到成熟miRNA序列为1 049种。A组miRNA种类为525种；HI组miRNA种类为524种；其中A组有27种miRNA与HI组存在差异，且2组间miRNA种类呈高度相关。HI新生大鼠外周血中有38个miRNA表达异常，并存在显著差异表达(2 -ΔΔCt值>2.5， P< 0.05),其中21个miRNA显著过表达，17个显著低表达。KEGG通路富集分析和GO分析显示这些差异的miRNA与谷氨酸能突触通路、髓鞘脂类代谢、神经活性配体-受体相互作用和血管上皮生长因子(VEGF)信号通路与缺氧/缺血诱导的脑损伤有关，并且过度活化。2组间幼鼠脑组织未见皮质及胼胝体下白质病变、脑室扩大、灰质神经元排列紊乱和明显凋亡。 结论:HI自然复苏模型大鼠外周血中miRNA差异表达提示，miRNA对缺氧缺血有积极的应答。存在高度显著差异的miR-200家族、miR-471家族、miR-429、miR-216和miR-871，与神经系统损伤分子生物学机制有关，有望成为HIBD或HI新的生物学诊断指标，对HI新的治疗靶点的研究探索是有益的。

目的:构建基于 O-(2- 18F-氟代乙基)- L-酪氨酸( 18F-FET)PET图像影像组学特征的回归分析模型，探讨其对未经治疗的脑胶质瘤患者异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)基因表型的预测效能。 方法:回顾性分析2017年11月至2019年2月间复旦大学附属华山医院经病理学证实的58例脑胶质瘤患者[男36例、女22例，年龄(41.8±15.1)岁]的 18F-FET PET/CT脑显像数据，应用PyRadiomics软件包提取105个影像组学特征，使用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)回归构建预测模型，计算每个病灶的影像组学评分(RS)，使用受试者工作特征(ROC)曲线量化模型RS的预测效能，并与 18F-FET半定量参数{肿瘤靶本比[TBR，包括最大TBR(TBR max)、TBR峰值(TBR peak)和平均TBR(TBR mean)]、肿瘤代谢体积(MTV)及病灶总代谢摄取(TLU)}对IDH1基因表型的预测效能进行对比(Delong检验)。 结果:LASSO回归模型共纳入7个影像组学特征，分别为最大二维切片直径、一阶最大特征值、一阶灰度值范围、灰度共生矩阵_能量、灰度共生矩阵_反差方差、灰度相关矩阵_熵、灰度相关矩阵_大相关低灰度级增强。构建的LASSO回归模型对IDH1基因表型(突变型20例，野生型38例)的预测效能准确性为81.0%(47/58)，灵敏度为65.0%(13/20)，特异性为89.5%(34/38)，曲线下面积(AUC)为0.842； 18F-FET半定量参数中TLU诊断效能较优，其诊断准确性为60.3%(35/58)，灵敏度为85.0%(17/20)，特异性为47.4%(18/38)，AUC为0.661；LASSO回归模型对IDH1基因表型的诊断效能优于传统参数( z＝3.426， P<0.01)。 结论:基于 18F-FET PET脑显像的影像组学分析可提高对未经治疗的脑胶质瘤患者IDH1基因表型的预测效能。

目的:研究骨显像剂 99Tc m-亚甲基二膦酸盐(MDP)在骨损伤修复不同阶段的分布状况。 方法:用电钻股骨凿孔的方法，制作兔股骨损伤模型共30只，根据骨损伤修复的不同阶段(第1、2和3周)分成A、B和C组，每组10只。在骨损伤修复不同阶段的最后1 d行股骨SPECT/CT显像，得到实验侧和对照侧感兴趣区(ROI)放射性计数，计算靶/本底比值(T/B)。应用磷屏成像分析3组模型标本光强度，放射自显影观察 99Tc m-MDP在骨细胞的具体分布情况。采用单因素方差分析和配对 t检验分析数据。 结果:SPECT/CT显像示A、B和C组的放射性计数T/B分别为1.16±0.14、1.39±0.23和1.18±0.10，差异有统计学意义( F＝5.83， P<0.01)。A、B和C组实验侧(50.00±12.45、59.50±12.83和55.10±9.26)的最大放射性计数均高于对照侧(43.20±9.57、50.00±12.30和44.30±6.50； t值：3.24，2.28和5.77，均 P<0.05)。磷屏成像示A、B和C组股骨标本的光强度差异有统计学意义(37 324.67±6 481.50、60 950.33±9 781.72和43 905.00±4 957.92； F＝8.25， P＝0.02)。放射自显影观察到在骨修复的不同阶段， 99Tc m-MDP在骨细胞和成骨细胞的细胞内和细胞外均有分布。 结论:在骨损伤修复的不同阶段， 99Tc m-MDP均有显著的分布浓聚，提示其在骨组织中浓聚机制除与羟基磷灰石的化学吸附作用外，还存在其他途径。

目的:探讨高压氧协同靶向水通道蛋白-4(aquaporin 4，AQP-4)的RNA干扰(RNA interference，RNAi)技术对改善脑创伤(trauma brain injury，TBI)大鼠认知功能的作用，并探讨其机制。方法:将112只成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、AQP-4 RNAi组、高压氧组和联合治疗组，每组28只。采用液压打击法建立大鼠TBI模型，构建靶向AQP-4的RNAi质粒；大鼠按照分组给予相应方式的干预后，于术后7 d、21 d对大鼠进行改良神经功能缺损评分(modified neurological severity scores，mNSS评分)；术后21～25 d进行Morris水迷宫实验，记录大鼠目标象限停留时间百分比和每日逃避潜伏期；Evans蓝法测定血脑屏障通透性，干/湿比重法检测脑组织含水量；术后7 d用Western blot法检测AQP-4、半胱天冬酶-3 (caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2，MMP-2)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)蛋白表达水平；RT-PCR法检测脑组织AQP-4的mRNA表达水平；TUNEL法及Annexin V法检测脑细胞凋亡率。采用SPSS 23.0及Graphpad Prism 7.0进行数据分析，组间多样本行单因素方差分析，Morris结果采用重复测量方差分析，两两比较用LSD- t检验。 结果:mNSS评分结果显示，术后7 d，21 d，各组间mNSS评分差异有统计学意义( F＝4.89，7.59，均 P＝0.01)，各治疗组评分均低于对照组，以联合治疗组效果最理想(7 d： t＝3.98，-7.75；21 d： t＝47.82，7.94，均 P<0.05)。Morris水迷宫实验结果显示，大鼠的目标象限停留时间和逃避潜伏期的时间及组别交互作用均不显著( F＝1.83，8.42；均 P>0.05)，术后第24天和第25天，联合治疗组逃避潜伏期及目标象限停留时间百分比均好于其他各组(均 P<0.05)。Evans蓝染色显示，AQP-4 RNAi组、高压氧组、联合治疗组Evans蓝含量均较对照组低(均 P<0.05)，联合治疗组最低( t＝6.19， P<0.05)。干湿比重法结果显示，脑组织含水量以联合治疗组[(68.15±1.52)% ]最低( P<0.05)，AQP-4 RNAi组[(76.71±1.06)% ]低于高压氧组[(80.23±1.43)%]( t＝4.38， P<0.05)。Western blot结果显示，联合治疗组AQP-4、Caspase-3、MMP-2，MMP-9蛋白表达明显低于其他组(均 P<0.05)，而Bcl-2表达增加( P<0.05)。RT-PCR结果(灰度值比)显示，AQP-4 RNAi组(0.61±0.21)、高压氧组(0.83±0.12)及联合治疗组(0.22±0.05)的AQP-4 mRNA水平与对照组(1.31±0.25)比，均差异有统计学意义( F＝175.05， P<0.05)，AQP-4 RNAi组优于高压氧组( t＝5.25， P<0.05)，以联合治疗组降低最明显( t＝58.94， P<0.05)。TUNEL及Annexin V法检测结果显示，各治疗组较对照组均有效抑制神经细胞凋亡，尤以联合治疗组最为明显( P<0.01)。 结论:靶向AQP-4 RNAi技术联合高压氧可有效促进认知功能损害的恢复，其机制可能与保护血脑屏障完整性、减轻TBI后脑水肿并抑制神经细胞凋亡有关。

目的:探讨MLN4924抑制乳腺癌细胞增殖的作用及其机制。方法:以人乳腺癌细胞MCF-7为模型细胞，采用细胞毒性和细胞的克隆形成实验探讨MLN4924对MCF-7细胞增殖的抑制作用。细胞实验分组：对照组，MLN4924浓度分别为0.1、0.3和1.0 μmol/L的实验组。动物实验分组：对照组，给MLN4924药物2.5、5.0及10.0 mg/kg的实验组。通过蛋白质印迹法(Western blot)和免疫荧光考察MLN4924对neddylation修饰的抑制作用、细胞凋亡和DNA损伤。采用GraphPad Prism 8进行统计学分析，通过 t检验评价两组数据之间的差异。 结果:MLN4924显著抑制MCF-7细胞的增殖能力，实验组的细胞集落数量显著少于对照组，可有效抑制cullin-1蛋白的neddylation修饰，实验组NEDD8的表达显著低于对照组(相对灰度值0.42±0.16比1.13±0.22， t＝8.03， P<0.01)，差异有统计学意义，诱导细胞DNA损伤，实验组γ-H2AX的表达显著高于对照组(相对灰度值0.16±0.03比0.04±0.01， t＝9.15， P<0.01)，差异有统计学意义，显著上调cleaved Caspase-3的表达，诱导肿瘤细胞凋亡，在体内可有效抑制MCF-7裸鼠移植瘤的增殖，并表现出较低的不良反应。 结论:靶向neddylation能显著抑制乳腺癌细胞的增殖。

目的 探讨黄芩素(BAI)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的神经保护作用和其对中枢神经系统(CNS)脊髓组织中自噬水平和小胶质细胞(MG)激活、极化的影响.方法 将 50 只SPF级雌性C57BL/6 小鼠采用随机数字表法分为正常对照组、EAE模型组及BAI低、中、高剂量组,每组10 只.EAE模型组及BAI各剂量组诱导建立EAE模型,正常对照组不做干预.自建模日起,BAI低、中、高剂量组每日分别给予BAI 75、150、300 mg/kg灌胃,其余两组给予等体积等渗盐水灌胃,连续14 d.观察小鼠的神经功能缺损和脊髓组织炎性浸润情况.采用免疫印迹法检测小鼠脊髓组织中自噬相关蛋白:哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、微管相关蛋白 1 轻链 3(LC3)及核孔糖蛋白 62(p62)的表达情况.免疫荧光染色法检测小鼠脊髓组织离子钙接头蛋白 1(Iba-1)阳性MG的活化情况和形态变化.结果 正常对照组小鼠未见发病,其余各组小鼠均有发病,但未出现死亡.与EAE模型组比较,BAI各剂量组小鼠发病潜伏期延长,进展期缩短,神经功能缺损评分降低(P＜0.05),脊髓组织炎症浸润程度减轻,mTOR蛋白表达增加,p-mTOR蛋白表达减少,自噬标志物LC3II/LC3I灰度比值增大,p62 蛋白表达减少(P＜0.05),随着BAI干预剂量增大,效果越明显.并且,显微镜下观察正常对照组荧光图中可见少许绿染的Iba-1阳性MG细胞散在分布,其胞体较小可见分枝状轴突,与正常对照组Iba-1 的IOD值(332.99±64.07)及Iba-1阳性MG计数(4.33±0.58)相比,EAE模型组Iba-1的IOD值(8725.87±817.70)明显升高(P＜0.05),Iba-1阳性MG计数(32.33±2.52)明显增多(P＜0.05),细胞形态表现为胞体较大,轴突缩短.与EAE模型组相比,BAI低、中、高各剂量组Iba-1的IOD值(5773.02±830.07、2307.99±255.90、1304.43±229.51)逐渐降低,MG计数(25.33±3.51、14.33±1.53、8.67±1.10)逐渐减少(均P＜0.05),细胞胞体变小,胞突伸长.结论 BAI对EAE小鼠发病具有神经保护作用,且呈剂量依赖性,其可能的机制为BAI可通过抑制mTOR通道蛋白激活,诱导自噬增强,抑制MG过度活化,促进MG向M2 型极化,从而抑制炎症反应,对EAE小鼠产生神经保护作用.

目的 基于p38 丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路探讨瑶医除闷汤药浴治疗膝骨关节炎(KOA)模型大鼠的效果与作用机制.方法 在 60 只 8 周龄雄性SPF级SD大鼠(体重 200～220 g)中随机选取 10 只作为空白组,在实验第 1、4 天,于空白组右膝关节腔内注射 0.1 ml生理盐水,其余大鼠注射 0.1 mlⅡ型胶原蛋白酶与弗氏完全佐剂的混合乳剂(质量浓度为0.5 mg/ml).第 7天根据大鼠膝关节情况评估造模结果,将 50只造模成功的大鼠按照随机数字表法分为模型组、双氯芬酸钠组及除闷汤高、中、低剂量组,每组 10 只.实验第 8 天,对除闷汤高、中、低剂量组进行药浴干预(浓度分别为 49.00、24.50、12.25 g/L),模型组进行温水泡浴,双氯芬酸钠组于造模部位予 0.01 g的 1%双氯芬酸钠凝胶,空白组常规饲养,连续干预 4周,干预期间观察各组一般情况.干预后观察各组膝关节解剖学情况,测量膝关节直径,采用苏木精-伊红(HE)染色观察膝关节软骨组织形态学改变.采用酶联免疫吸附试验检测各组血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-10 含量;采用免疫组织化学染色检测各组软骨组织中p38MAPK、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达水平.结果 药物干预期间,空白组一般情况正常;模型组强迫运动时跛行,伴膝关节屈伸功能障碍;除闷汤各剂量组膝关节屈伸功能与步态逐渐恢复,双足跛行状态减少.干预后,空白组膝关节解剖可见滑膜平滑半透明,软骨透明光滑,关节面完整,HE染色可见软骨细胞排列规则清晰;模型组膝关节解剖可见滑膜增厚糜烂,软骨表面粗糙磨损,色泽灰暗,HE染色可见软骨基质减少甚至消失,软骨细胞大量减少,形态不规则;除闷汤各剂量组膝关节解剖及HE染色可见膝关节软骨有不同程度改善.模型组膝关节直径大于空白组,血清IL-1β、IL-6 及软骨p38MAPK、p-p38MAPK、MMP-13表达均高于空白组,血清IL-10低于对照组(P＜0.05).除闷汤各剂量组膝关节直径小于模型组,血清IL-10高于模型组,软骨p-p38MAPK、MMP-13表达均低于模型组(P＜0.05).除闷汤高、中剂量组血清IL-1β、IL-6及软骨p38MAPK低于模型组和除闷汤低剂量组,IL-10高于除闷汤低剂量组(P＜0.05).除闷汤高剂量组膝关节直径小于除闷汤低、中剂量组,软骨p-p38MAPK、MMP-13 表达低于除闷汤低剂量组,血清IL-10高于除闷汤低、中剂量组,软骨MMP-13 表达低于除闷汤中剂量组(P＜0.05).结论 瑶医除闷汤可能通过靶向抑制p38MAPK通路表达,减轻KOA大鼠的炎症反应,改善软骨退变.

细胞衰老是一种涉及多种生物学途径的细胞应激和损伤反应,如DNA损伤反应、细胞周期阻滞、衰老相关的分泌表型(SASP)、衰老相关的线粒体功能障碍、自噬功能障碍、营养和应激信号等.在AD患者额叶灰质中可检测到小胶质细胞的SA-βGal活性增加、p16 INK4和IBa1共定位的荧光信号增强,前额皮层中CDKN2A及p16INK4表达升高,NeuN与p16INK4共定位荧光信号增强.对AD患者进行穿刺活检并纯化神经元SA-βGal染色,结果为阳性.APP/PS1转基因小鼠星形胶质细胞分泌SASP、SA-βGal活性增加、p16INK4 与GFAP共定位荧光信号增强,少突胶质细胞祖细胞p21CDKN1A、p16INK4 和 CDKN2A 表达升高,SA-βGal活性上调.Aβ42处理成年小鼠海马神经干细胞可导致神经球数量减少、细胞形态增大且扁平、SA-βGal染色为阳性、p16INK4蛋白表达升高.说明AD患者及模型脑中存在多种神经细胞如小胶质细胞、神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞祖细胞、神经干细胞的衰老,这种衰老在AD的发病机制中发挥重要作用,开发靶向神经细胞衰老的药物对防治AD具有重要意义.

自从2017年Transformer架构发布以来,以大语言模型(large language model,LLM)为代表的大模型(foundation model,基础模型)得到了蓬勃发展.2023年3月14日发布的ChatGPT4的走红更是让生成式人工智能(AI)在一夜之间为世人所关注,与以往的版本相比,它除了正确度提高了40％,具备整理和搜寻线上资讯功能,还支持视觉输入、具有图像辨识等多种能力.以大模型为基础的生成式AI已在包括医学的许多行业展现出颠覆式创新的巨大潜力,已在医学成像与诊断领域发挥了重要的作用.作为医学领域中的一员,中医药领域同样在竭力推进现代化研究,随着与大数据、云计算、物联网、人工智能等新技术深度融合,中医药的现代化走上新赛道.但由于人类的机体是一个高度复杂的系统,呈现极强的鲁棒性与自组织性;而中医治疗采用的复方中药同样是高度复杂的系统,表现在药物化学、代谢、分布等多种层面;同时传统的中医理论体系复杂,中药质量控制难度高,中药及方剂的药理机制基础研究不足等挑战,中医药的现代化之路仍有巨大的困局待解.以复杂性科学的视角分析,中医药的诊疗实质上可以看作一个复杂系统对另一个复杂系统的控制过程.它应用一种药物复杂系统对另一个生命复杂系统进行"合理的"调控,使后者从疾病状态下的"稳态"向健康状态的"稳态"迁移,其复杂程度远远高于经典药理学的研究对象.伴随着计算机领域的发展,中医诊疗研究进入了新进程[1-2].一直以来,中医诊、疗的现代化研究相对独立:对于中药治疗的研究遵循"方剂-中药-组分-靶标"的思路发现药理机制,而在诊断上往往沿着"证候/疾病-表型-靶标"的路线突破其病理机制,二者虽然能够在分子层面存在交集,但往往关联起来的结果不能还原方剂的疗效.而逐渐兴起的大模型则对中医药现代化而言提供了一种新型的有效手段,其强大的建模能力不仅能将临床表现与中医处方进行直接关联,也可以打开生命的"黑箱",对其内部节点进行一定程度的模拟,从而再现其药理机制.本文将从"诊-疗"关联(输入-黑箱-输出)与"诊断-生理系统-药理系统-治疗"(输入-灰箱-输出)两种状况综述大模型在中医药研究的应用及可能性.