目的 探讨热休克蛋白90α(heat shock protein 90α,Hsp90α)在结肠癌中的表达及潜在的临床价值.方法 采用生物信息学和免疫组化法分析结肠癌中Hsp90α的表达水平,及其与临床病理学特征、预后和免疫细胞浸润水平的关系;采用CCK-8细胞增殖实验和平板克隆实验检测敲除Hsp90AA1前后结肠癌细胞的增殖能力.结果 生物信息学分析结果显示,Hsp90AA1在结肠癌组织中异常高表达,其表达水平越高,患者预后越差;Hsp90AA1表达与CD4+T细胞(Th2)、CD8+T细胞、髓样抑制细胞、Tregs细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、M1巨噬细胞、M2巨噬细胞的浸润水平呈正相关;免疫组化结果显示结肠癌组织中Hsp90α表达明显高于癌旁正常组织,Hsp90α表达与患者性别、肿瘤大小、位置、分化程度、TNM分期、淋巴结转移、脉管癌栓、神经侵犯、远处转移等无关(P＞0.05),与结肠癌患者年龄具有相关性(P＜0.05).Hsp90α高表达是影响结肠癌患者预后的独立危险因素.细胞实验结果显示,敲除Hsp90AA1可抑制结肠癌细胞的生长及增殖能力.结论 Hsp90α在结肠癌中高表达,可能是结肠癌预后不良的潜在分子学标志物.

目的:应用网络药理学及分子对接的相关理论方法探究姜黄素治疗糖尿病视网膜病变(DR)的作用机制。方法:利用SEA及SwissTargetPrediction数据库在线预测化合物作用的靶点；通过CTD数据库提供与疾病相关的各种靶点；运用Venny数据库映射匹配不同基因，并取二者交集；采用GeneMANIA数据库构造出交集基因的蛋白互作网络图，采用Cystoscape软件进行更精确的分析和可视化，借助WebGestalt数据库进行富集分析，最后利用AutoDock Vina对核心靶点进行分子对接。结果:得到姜黄素作用靶点52个，DR对应的靶点1 599个，共同作用的靶点48个。核心靶点为丝氨酸/苏氨酸－蛋白激酶1(AKT1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、表皮生长因子受体(EGFR)、信号转导及转录激活因子3(STAT3)以及热休克蛋白90α家族A类成员1(HSP90AA1)。富集分析结果显示，这些靶点主要与EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性信号通路、缺氧诱导因子1(HIF-1)信号通路、白细胞介素-17(IL-17)信号通路以及晚期糖基化终末产物－晚期糖基化终末产物受体(AGE-RAGE)信号通路等有关。结论:姜黄素可能通过调控多条信号通路来抑制炎症反应和对抗氧化应激等过程，从而发挥治疗DR的作用。

目的:探讨肝癌细胞来源分泌型自噬体，即一群表达自噬标志LC3B的细胞外囊泡(LC3B + extracellular vesicles, LC3B +EVs)对CD8 +T细胞功能耗竭的影响及其作用机制。 方法:流式细胞术检测肝癌患者外周血和腹水中LC3B +EVs和PD-1 +CD8 +T细胞比例并分析二者之间的相关性；分离健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)，在αCD3/CD28和IL-2培养条件下加入LC3B +EVs或经热休克蛋白90α(heat shock protein 90α，HSP90α)封闭抗体封闭后的LC3B +EVs体外诱导培养72 h，流式细胞术检测PD-1 +CD8 +T细胞和IFN-γ +CD8 + T细胞比例以及上清中IL-2、TNF-α和IFN-γ的浓度。 结果:肝癌患者血浆和腹水中LC3B +EVs及表达HSP90α的LC3B +EVs比例显著高于健康对照组和非癌性腹水组，且与PD-1 +CD8 +T细胞耗竭比例均呈显著正相关，尤其是HSP90α +LC3B +EVs。另外，体外人肝癌细胞来源的LC3B + EVs可以诱导CD8 +T细胞耗竭，当采用HSP90α封闭抗体预封闭LC3B +EVs后，CD8 +T细胞耗竭比例显著降低。 结论:肝癌细胞来源LC3B +EVs通过膜结合型HSP90α诱导CD8 +T细胞功能耗竭。

目的:观察太极拳锻炼对乳腺癌术后患肢功能恢复的影响，并探讨其治疗机制。方法:采用随机数字表法将85例乳腺癌术后患者分为对照组(38例)及太极拳组(47例)。2组患者术后均给予常规康复训练，太极拳组于手术10 d后辅以24式太极拳锻炼，每天早、晚各锻炼1次，每次约20 min。于术后10 d、40 d及100 d时采用Constant-Murley量表(CMS)对患者肩功能恢复情况进行评定；同时于上述时间点抽取患者晨起外周血，检测T细胞亚群CD4 ＋、CD8 ＋以及热休克蛋白-90α(HSP-90α)和血管内皮生长因子(VEGF)含量。 结果:术后40 d时2组患者CMS各项目评分均显著改善( P<0.05)，并且太极拳组CMS关节活动度及日常生活能力评分[分别为(24.79±4.11)分和(10.23±3.49)分]均显著优于对照组水平( P<0.05)，术后100 d时太极拳组CMS各项目评分均显著优于对照组水平( P<0.05)。术后100 d时太极拳组CD4 ＋、CD4 ＋/CD8 ＋和HSP-90α检测结果[分别为(36.18±7.15)%、(1.40±0.18)和(46.23±9.78)ng/ml]均显著优于对照组水平( P<0.05)。 结论:太极拳锻炼适用于乳腺癌术后患者上肢功能康复，其治疗机制可能与太极拳拳理以及太极拳圆弧形、螺旋形动作特点有关。

目的:研究热休克蛋白（HSP）90α、HSP90β在结直肠癌组织和癌旁组织中的表达，探讨HSP90α、HSP90β与结直肠癌患者临床病理特征的关系，并分析两者的相关性。方法:选取2016年1月至2020年12月山东第一医科大学第三附属医院胃肠外科收治的117例结直肠癌患者的肿瘤组织及癌旁组织，采用免疫组织化学法检测HSP90α和HSP90β的表达水平，分析二者与患者临床病理特征的关系以及二者表达的相关性。结果:HSP90α在结直肠癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为74.4%（87/117）、12.0%（14/117），两组差异具有统计学意义（ χ2=92.83， P<0.001）；HSP90β在结直肠癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为61.5%（72/117）、10.3%（12/117），两组差异具有统计学意义（ χ2=66.86， P<0.001）。HSP90α的表达与肿瘤位置（ χ2=8.67， P=0.003）、血管侵犯（ χ2=8.68， P=0.003）、淋巴结转移（ χ2=8.52， P=0.004）、T分期（ χ2=21.07， P<0.001）、N分期（ χ2=11.94， P=0.003）、M分期（ χ2=5.37， P=0.020）、病理分期（ χ2=25.64， P<0.001）具有相关性；HSP90β的表达与淋巴结转移（ χ2=4.03， P=0.045）、T分期（ χ2=11.09， P=0.007）、N分期（ χ2=6.56， P=0.038）、M分期（ χ2=12.43， P<0.001）、病理分期（ χ2=17.34， P=0.001）具有相关性。两种蛋白在结直肠癌组织中的表达呈正相关（ r=0.42， P<0.001）。 结论:HSP90α、HSP90β在结直肠癌组织中的表达明显高于癌旁组织，并均与淋巴结转移和病理分期有关；二者表达呈正相关，可能共同参与了结直肠癌的发生发展，有望成为新的肿瘤标志物。

乳腺癌已成为全球最常见的恶性肿瘤。热休克蛋白90（heat shock protein 90，HSP90）是一类分子伴侣，可促进蛋白质折叠，并维持蛋白的稳定性。HSP90包括HSP90α、HSP90β、GRP94和TRAP1等4种亚型。研究发现，HSP90表达水平在乳腺癌等恶性肿瘤中明显升高，且与肿瘤的发生发展密切相关，同时针对HSP90这一靶点的抑制剂研究也备受关注。本文综述了4种HSP90亚型在乳腺癌中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系，讨论HSP90各亚型特异性抑制剂在乳腺癌中的相关研究进展，分析HSP90作为乳腺癌预后监测生物标志物和治疗靶点的应用前景。

目的:探讨血浆热休克蛋白90α（HSP90α）与肝细胞肝癌（HCC）患者经动脉化疗栓塞（TACE）治疗反应及长期预后的关系。方法:收集2017年8月至2018年12月在中国医学科学院肿瘤医院介入治疗科进行TACE治疗的96例HCC患者的病历资料，采用χ 2检验分析TACE治疗前血浆HSP90α水平与临床病理特征的关系，TACE治疗应答的影响因素分析采用单因素和多因素logistic回归分析，TACE治疗后患者无进展生存时间（PFS）的影响因素分析采用单因素和多因素Cox回归分析。 结果:96例患者TACE治疗前的血浆HSP90α水平为（99.70±66.61）ng/ml。高HSP90α组（30例）比低HSP90α组（66例）肿瘤更大、甲胎蛋白更高、血管侵犯阳性者更多、巴塞罗那临床肝癌（BCLC）分期更晚（均 P＜0.05）。TACE治疗4周后评估，应答组41例，无应答组55例。应答组与无应答组患者TACE治疗前后HSP90α水平差值分别为（-32.20±22.79）ng/ml和（7.20±51.94）ng/ml，差异有统计学意义（ P＜0.001）。多因素logistic回归分析显示，Child-Pugh分级（ OR=0.186， P=0.046）、血管侵犯（ OR=0.132， P=0.025）、TACE治疗后血浆HSP90α降低百分比（25%～50%： OR=5.061， P=0.013；＞50%： OR=86.831， P＜0.001）是HCC TACE治疗应答的独立影响因素。96例患者的中位PFS为8.7个月。多因素Cox回归分析显示，BCLC分期（B期： HR=2.804， P=0.008；C期： HR=4.628， P＜0.001）和TACE治疗后血浆HSP90α降低百分比（25%～50%： HR=0.569， P=0.051；＞50%： HR=0.198， P＜0.001）是TACE治疗后HCC患者PFS的独立影响因素。 结论:血浆HSP90α作为一种新的生物标志物，可用于预测HCC患者TACE治疗的疗效和预后。

目的:探究血浆热休克蛋白90α（Hsp90α）水平与脑小血管病患者脑白质高信号之间的关系。方法:以2021年3—8月期间郑州大学第一附属医院神经内科收治的并且磁共振检查诊断为脑小血管病脑白质高信号的患者为病例组，匹配同期于该院体检科就诊的，磁共振检查显示无脑白质高信号且没有神经系统疾病史的体检者为对照组，检测其血浆Hsp90α水平。采用Mann-Whitney U检验对比对照组与病例组中血浆Hsp90α水平是否存在差异，采用多因素logistic回归模型分析脑小血管病患者中脑白质高信号的相关因素。 结果:在183例研究对象中，对照组73例，男28例，女45例，年龄（54±10）岁。病例组110例，男71例，女39例，年龄（64±10）岁。病例组血浆Hsp90α水平明显高于对照组［ M（ Q1， Q3）］［53.33（35.33，70.09）ng/ml比35.02（18.51，54.95）ng/ml， P<0.001］。经过多因素logistic回归模型校正混杂因素后，血浆Hsp90α>58.34 ng/ml与脑小血管病脑白质高信号相关（ OR=5.931，95% CI：1.955~17.995， P=0.002）。 结论:较高的血浆Hsp90α水平与脑小血管病脑白质高信号相关。

目的:探讨严重创伤后小鼠腹腔巨噬细胞（PM）中芳香烃受体（AhR）的表达规律并分析增强创伤后PM的AhR表达对炎症因子水平和杀菌能力的影响。方法:采用实验研究方法。取40只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠（小鼠周龄、性别、品系下同），按随机数字表法（分组方法下同）分为对照组、创伤后2 h组、创伤后6 h组、创伤后12 h组，每组10只。将后3组小鼠构建骨折+失血的严重创伤模型，对照组小鼠不做处理。分别在未创伤和创伤后2、6、12 h时，提取对照组、创伤后2 h组、创伤后6 h组、创伤后12 h组小鼠原代PM（提取细胞下同），分别采用蛋白质印迹法和实时荧光定量反转录PCR法检测AhR的蛋白和mRNA表达，采用转录组测序分析AhR信号通路相关分子的基因表达。取20只小鼠分为对照组、创伤后6 h组，每组10只，提取PM后，采用免疫沉淀法检测AhR泛素化水平。取12只小鼠，分为单纯二甲基亚砜（DMSO）组、创伤后6 h+DMSO组、单纯MG-132组、创伤后6 h+MG-132组，每组3只，并行相应处理后，提取PM，采用蛋白质印迹法检测AhR蛋白的表达。取20只小鼠构建创伤后6 h模型并提取PM，分为空载腺病毒（Ad-NC）组和AhR过表达腺病毒（Ad-AhR）组，部分细胞转染相应腺病毒36 h后，采用蛋白质印迹法检测AhR的蛋白表达；将剩余Ad-NC组细胞分为单纯Ad-NC组、Ad-NC+内毒素/脂多糖（LPS）组，将剩余Ad-AhR组细胞分为单纯Ad-AhR组和Ad-AhR+LPS组，并行相应处理12 h后，采用酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达（样本数为6）。取20只小鼠提取PM并分为对照+Ad-NC组、创伤后6 h+Ad-NC组、对照+Ad-AhR组、创伤后6 h+Ad-AhR组，并行相应处理后，采用平板涂布法检测细胞内载菌量（样本数为6）。对数据行单因素方差分析、LSD检验、析因设计方差分析、独立样本 t检验。 结果:与对照组（1.16±0.28）比较，创伤后2 h组（0.59±0.14）、创伤后6 h组（0.72±0.16）、创伤后12 h组（0.71±0.17）PM中AhR的蛋白表达水平均明显降低（ P<0.05）。对照组、创伤后2 h组、创伤后6 h组、创伤后12 h组PM中AhR的mRNA表达量组间总体比较，差异无统计学意义（ P>0.05）。AhR信号通路相关分子包括 AhR、AhR抑制因子、细胞色素P450家族成员1b1、细胞色素P450家族成员11a1 、热休克蛋白90、芳香烃受体-相互作用蛋白、热休克蛋白70相互作用蛋白。除创伤后2 h组PM的热休克蛋白90表达水平较对照组高，其他分子的表达水平在创伤后变化不明显。与对照组比较，创伤后6 h组PM中AhR泛素化水平升高。与单纯DMSO组比较，创伤后6 h+DMSO组PM中AhR的蛋白表达量下降，单纯MG-132组PM中AhR的蛋白表达量无明显变化。与创伤后6 h+DMSO组比较，创伤后6 h+MG-132组PM中AhR的蛋白表达量上调。转染36 h，与Ad-NC组比较，Ad-AhR组PM中AhR的蛋白表达水平明显升高。处理12 h，与Ad-NC+LPS组比较，Ad-AhR+LPS组PM上清液中IL-6、TNF-α的表达水平均明显降低（ t值分别为4.80、3.82， P<0.05）。对照+Ad-NC组、创伤后6 h+Ad-NC组、对照+Ad-AhR组、创伤后6 h+Ad-AhR组1×10 6个PM的胞内载菌量分别为（3.0±1.8）、（41.8±10.2）、（1.8±1.2）、（24.2±6.3）集落形成单位。与创伤后6 h+Ad-NC组比较，创伤后6 h+Ad-AhR组PM的胞内载菌量明显减少（ t=3.61， P<0.05）。 结论:严重创伤后小鼠PM中AhR发生泛素化降解导致其蛋白表达降低，增强创伤后巨噬细胞AhR的表达可降低LPS诱导的炎症因子IL-6和TNF-α的表达，且提升创伤后巨噬细胞的杀菌能力。

目的:通过网络药理学挖掘和实验方法，考察麦冬五味子联用方抗动脉粥样硬化的作用，探讨其作用机制。方法:从TCMGeneDIT数据库系统中，挖掘麦冬、五味子靶点蛋白，构建麦冬-五味子多成分-蛋白网络，提取显著性差异的子网络中蛋白并进行信号通路映射。将ApoE-等位基因敲除小鼠按随机数字表法分成对照组，模型组，低、中、高剂量组和阿托伐他汀钙片组，每组6只。除对照组外，其余各组以H10540高脂饲料喂饲12周。第4周开始给药，阿托伐他汀钙片组灌胃阿托伐他汀钙片混悬液6 mg/kg，低、中、高剂量组灌胃麦冬五味子混煎液4.68、2.34、1.17 g/kg，1次/d，连续灌胃8周。采用油红染色观察动脉粥样硬化主动脉管壁病理学改变。采用Western blot法检测肝组织促分裂素原活化蛋白激酶p38(mitogen-activated protein kinases p38, p38)、ATP结合盒亚家族G成员1(ATP binding cassette subfamily G member 1, ABCG1)、Toll样受体4(toll-like receptor 4, TLR4)、热休克蛋白90α家族A成员1 (heat shock protein 90 alpha family class A member 1, HSP90AA1)、MMP-9和花生四烯酸5脂氧合酶(arachidonate 5-Lipoxygenase, ALOX5)蛋白表达，以及脑组织核因子E相关因子(nuclear factor related factor, Nrf2)和血红素加氧酶1(hemeoxygenase 1, HO-1)蛋白表达。结果:发现麦冬五味子联用方中有11个成分，与数据库中挖掘到的37个蛋白有匹配，构成48个结点、190条边界的成分-蛋白网络，提取显著性差异蛋白网络中 P<0.05的子网络1个。与模型组比较，低、中、高剂量组小鼠肝组织p-p38/p38 [(2.12±0.12)、(1.76±0.11)、(1.69±0.10)比(2.45±0.16)]、TLR4[(1.98±0.10)、(1.64±0.11)、(1.55±0.12)比(2.68±0.06)]、HSP90AA1[(1.79±0.10)、(1.66±0.09)、(1.59±0.11)比(2.06±0.07)]、MMP-9[(1.84±0.11)、(1.75±0.12)、(1.66±0.08)比(2.68±0.10)]蛋白表达降低( P<0.05)，ABCG1[(0.53±0.08)、(0.78±0.09)、(0.81±0.10)比(0.45±0.04)]、ALOX5[(0.59±0.04)、(0.67±0.09)、(0.88±0.07)比(0.47±0.02)]蛋白表达升高( P<0.05)，脑组织细胞质Nrf2[(1.62±0.12)、(1.32±0.09)、(1.14±0.06)比(2.12±0.08)]蛋白表达降低( P<0.05)，细胞核中Nrf2[(1.12±0.09)、(1.61±0.07)、(1.68±0.11)比(1.07±0.08)]蛋白表达升高( P<0.05)，HO-1[(1.16±0.09)、(1.73±0.11)、(1.82±0.08)比(1.05±0.04)]蛋白表达升高( P<0.05)。 结论:本研究采用网络药理学和分子生物学方法，阐释了麦冬五味子联用防治动脉粥样硬化的分子机制，并且在氧化应激诱导Nrf2途径上进行验证，为联用方的进一步研究提供参考。