评价电子烟暴露对呼吸系统毒性作用以及空气净化器的干预效果。于2022年1至12月东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室开展经呼吸道染毒电子烟的随机对照实验研究。采用随机数字表法，利用8周龄雄性C57BL/6JGpt小鼠建立不同周期（0 d、3 d、7 d或14 d）的电子烟暴露模型以及清洁空气对照组。采用普通加热电子烟（200 ℃）和高温加热电子烟（280 ℃）对小鼠进行暴露。提取对照组和电子烟暴露组小鼠的肺总RNA进行转录组测序分析。利用流式细胞术检测活性氧（reactive oxygen species，ROS）、线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential，MMP）。酶标仪检测总超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性、超氧化物（superoxide，O 2-）水平。实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR，RT-qPCR）检测基因表达。利用过滤型净化器和负离子净化器干预电子烟暴露。数据以（ xˉ±s）表示，采用单因素方差分析或双因素方差分析对多组之间的差异进行比较。结果显示，RNA测序分析表明电子烟暴露诱导的差异表达基因显著富集在氧化应激（Fold enrichment=3.18）和线粒体氧化磷酸化（oxidative phosphorylation，OXPHOS）（Fold enrichment=5.74）通路。两种加热电子烟暴露均导致小鼠肺部肺泡炎评分显著升高（ F=10.8， P<0.001），内源性ROS水平显著增加（ F=16.8， P<0.001），MMP水平明显下降（ F=13.6， P<0.01）以及线粒体复合物I的编码基因的表达紊乱。与普通加热电子烟相比，高温加热电子烟的毒性作用更强（ F=2.9， P<0.05）。在缓解电子烟急性暴露导致的肺泡炎症方面，过滤型净化器的干预效果优于负离子净化器（ F=7.4， P<0.01）。空气净化器可部分缓解肺部氧化应激和线粒体功能障碍。综上，本研究提示电子烟的使用存在潜在的健康风险。空气净化器可部分逆转线粒体功能紊乱，但不能完全阻断电子烟的毒性作用，有效的干预措施仍有待研究。

新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)疫情引起包括中国在内的全世界各国人民密切关注。面对疫情，麻醉医师对于标准预防、消毒隔离、手卫生、环境物表卫生、无菌操作、职业防护等感染控制方面的专业知识和实践操作有待提高和规范。本文结合新冠肺炎疫情，针对中国麻醉感染控制存在的主要问题，梳理了相关的法律、法规、规范要求，提出如下建议。(1)在标准预防方面，在诊治疑似或确诊患者时，麻醉科医护人员应按照三级防护措施进行穿戴防护用具，包括戴N95医用防护口罩，护目镜或面屏，穿防护服等。(2)在手卫生方面，对新冠肺炎确诊或疑似病例进行麻醉时，应严格按照手卫生的规范要求进行洗手或卫生手消毒。在实施各类操作时，麻醉医师应戴双层手套；接触患者后，如需要碰触麻醉机等或其他区域，应脱掉并丢弃外层手套。(3)在环境物表卫生方面，对新冠肺炎疑似或确诊病例手术时，麻醉医师要对发生小面积的患者血液等污染及时清洁和消毒。手术后，严格执行《医疗机构消毒技术规范》，做好手术室(空气、物体表面、地面等)、医疗器械、患者用物等的清洁消毒，严格终末消毒，尤其不能忽略手频繁接触的物表。(4)在麻醉机消毒方面，面对新冠肺炎疫情，建议联合使用麻醉内回路消毒机与在呼气端及吸气端同时使用呼吸通路过滤器。首选高效低容量的疏水性过滤器，以使细菌和病毒清除率>99.999%，每3～4 h更换1次。(5)在隔离方面，新冠肺炎确诊或疑似病例应当在负压手术室进行手术。应有医务人员通知层流工程技术人员及时检查，必要时更换负压手术间高效过滤器。(6)其他方面，对新冠肺炎患者进行麻醉时，应谨慎处理麻醉操作中的锐器，防止刺伤，一旦发生应立即启动医源性职业暴露处理流程。

新型冠状病毒肺炎（COVID-19）主要通过呼吸道飞沫传播及密切接触传播，也可能会通过气溶胶传播。肺功能检查可增加医务人员和受检者发生COVID-19传播的风险，必须严格执行有效的预防和控制措施以防止院内感染。为了指导肺功能检查室医务人员做好防控工作，本文结合肺功能检查的特点，总结了当前疫情下肺功能检查在医务人员管理、检查流程管理和检查环境物品管理3个方面的要求及注意事项。文中强调在疫情流行期间，必须严格掌握肺功能检查的适应证，强烈建议COVID-19确诊病例或疑似病例在传染期内暂缓检查，其他病患如非病情急需也暂缓检查；肺功能室医务人员应严格执行标准分级防护措施；受试者应在单独区域进行隔离检查；检查时必须使用一次性呼吸过滤器；并重视肺功能检查环境和设备的清洁消毒。

肺功能检查是评估临床胸部、肺部疾病及呼吸生理的重要手段，已广泛应用于儿童呼吸系统和肺外疾病的辅助诊断及病情监测。肺功能检查过程中患儿用力呼气、咳嗽等有可能导致医源性感染。目前我国各地儿童肺功能室所采取的感染防控措施不尽相同，缺乏统一的策略和规范。因此，有必要明确肺功能检查过程中可能存在的感染风险，实施规范的感染防控措施，最大限度避免因肺功能检查而导致的感染。为此，由国内在儿童肺功能和感染防控方面经验丰富的肺功能、呼吸、感染等领域的专家共同制定本共识，从肺功能室环境管理、人员管理、日常检查过程管理、特殊患儿管理、肺功能仪器消毒、呼吸过滤器使用等方面阐释感染的防控，旨在降低儿童肺功能检查的感染风险，提供安全的工作和检查环境。

目的:基于生物信息学方法筛选鼻咽癌预后和免疫相关的细胞轨迹差异表达基因。方法:从基因表达综合（GEO）数据库下载鼻咽癌单细胞测序数据集（GSE150825）和转录组测序数据集（GSE102349）。GSE150825数据集包括11例鼻咽癌和3例鼻咽淋巴增生（NLH）组织共66 627个细胞的单细胞RNA测序结果，数据更新时间为2021年3月。GSE102349数据集包括113例鼻咽癌患者临床信息，数据更新时间为2017年。将GSE150825数据集中数据进行标化和重新聚类，并选取髓系细胞进行重新聚类，采用moncle2法进行拟时序分析。计算不同细胞状态的差异基因（细胞轨迹差异基因），并取并集得到并集基因。采用ClusterProfiler和ConsensusClusterPlus包对并集基因进行基因本体（GO）富集分析和临床分型。在GSE102349数据集中，根据细胞轨迹差异基因的并集基因，将患者分为两个亚组，分析两个亚组无进展生存（PFS）、临床分期、肿瘤免疫微环境的差异；CIBERSORT分析两个亚组免疫细胞浸润差异。使用LASSO回归构建预后预测模型。收集江苏省肿瘤医院2018年1月至2023年12月收治的经病理检查证实为鼻咽癌（14例）和正常鼻咽上皮（4例）的病理组织切片，采用免疫组织化学法检测筛选出的靶基因在正常鼻咽上皮和鼻咽癌肿瘤组织中的表达，并根据患者治疗前后核磁共振成像结果分析靶基因表达与鼻咽癌患者淋巴结治疗效果关系。结果:对单细胞测序数据集GSE150825数据进行过滤和质控，共64 312个细胞（48 604个来自鼻咽癌，15 798个来自NLH）进行后续分析。对质控后的细胞进行重新聚类分析，主要分为8种细胞类型：B细胞、T细胞、先天淋巴细胞、髓样细胞、成纤维细胞、肥大细胞和肿瘤细胞。髓样细胞特异性地分布在鼻咽癌患者中。拟时序变化的细胞轨迹差异基因主要富集在细胞质翻译、核糖体、局灶黏附、钙黏蛋白结合和细胞因子受体结合。在验证集GSE102349数据集中提取细胞轨迹差异基因并集并进行临床分型，亚组1、2的PFS比较差异有统计学意义（ P＝0.035）；亚组1预后较好，临床分期Ⅰ期患者比例大；亚组2预后较差，临床分期Ⅳ期患者比例大。亚组1微环境中免疫成分比例高，体现了较活跃的免疫活动；亚组2的肿瘤纯度高于亚组1，其肿瘤成分所占比例高；记忆B细胞在亚组2中低表达，T细胞滤泡辅助细胞、NK活化细胞、静息和活化树突细胞在亚组1中低表达。根据细胞轨迹差异基因构建预后风险模型，风险评分＝SDC3×1.588+ ODC1×1.122+ PSIP1×11.310+ P4HB×4.043。14例鼻咽癌组织中PSIP1蛋白H-score评分高于正常鼻咽组织[（96±11）分比（69±23）分， t＝-3.38， P＝0.004]，P4HB蛋白H-score评分高于正常鼻咽组织[（64±35）分比（17±9）分， t＝-2.65， P＝0.018]。在鼻咽癌患者中，以H-score评分的中位数为cut-off值（PSIP1为97分，P4HB为63分），PSIP1高表达（≥97分）患者活化T细胞比例高于低表达（<97分）患者[（21±7）%比（13±4）%， t＝-2.69， P＝0.020]，P4HB高表达（≥63分）患者NK细胞比例高于低表达（<63分）患者[（24±10）%比（14±6）%， t＝ -2.24， P＝0.040]。 结论:PSIP1和P4HB可能是预测鼻咽癌预后和治疗效果的生物学标志物。

目的:基于单细胞RNA测序（scRNA-seq）生物信息学分析的预后相关的差异表达基因构建膀胱癌预后风险模型并验证。方法:从基因表达综合（GEO）数据库中下载膀胱癌scRNA-seq数据集GSE135337、GSE129845，数据更新时间分别为2022年、2019年；下载常规转录组数据集GSE13507(数据更新时间为2020年)中165例膀胱癌样本的表达谱及其生存信息。从癌症基因组图谱（TCGA）数据库中下载414例膀胱癌样本和19例癌旁样本的表达谱数据及405例膀胱癌患者的临床信息。采用R 4.1.2软件对GEO数据库中的10例膀胱癌单细胞样本进行质量控制及降维聚类并对其进行细胞注释；采用CellChat分析GEO数据库中单细胞数据的细胞间通信。采用单因素Cox比例风险模型分析筛选与膀胱癌预后相关的差异表达基因，并使用LASSO-Cox回归分析构建预后风险模型，计算风险评分。根据中位风险评分，以TCGA数据集中膀胱癌患者为训练集，将患者分为低风险组和高风险组；采用GEO数据库GSE13507数据集为验证集进行验证，通过Kaplan-Meier分析比较训练集、验证集低风险组和高风险组患者的总生存情况。通过时间依赖受试者工作特征（ROC）曲线分析评估预后风险模型的预测效能；采用R 4.1.2软件构建预测患者1、3、5年总生存率的列线图。分析TCGA数据集中膀胱癌患者风险评分与相应临床病理特征之间的关系，并进行基因本体（GO）及京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析和基因集富集分析（GSEA）。结果:GSE135337和GSE129845数据集中，根据质量控制标准过滤后获得了50 263个细胞，其中43 519个细胞为尿路上皮细胞。尿路上皮细胞与成纤维细胞在膀胱癌微环境中具有更多的细胞交互作用，尿路上皮细胞主要通过中期因子信号通路发送信号。筛选出9个预后相关的差异表达基因（SPINK1、FN1、EFEMP1、ELN、PCOLCE2、TUBA1A、COL14A1、TCF4和TM4SF1）并构建预后风险模型，风险评分=-0.019×SPINK1+0.028×FN1+0.025×EFEMP1+0.023×ELN+0.098×PCOLCE2+0.004× TUBA1A+0.047×COL14A1+0.004×TCF4+0.096×TM4SF1。根据风险评分中位值（1.350），训练集、验证集高风险组（≥1.350）患者OS较低风险组（<1.350）差。ROC曲线分析表明，在训练集与验证集中1、3、5年总生存率的曲线下面积（AUC）均>0.65。根据年龄、分期和预后模型风险评分构建预测患者1、3、5年总生存率的列线图，其校正曲线接近理想曲线。风险评分在>60岁患者，M分期为M 1，N分期为N 1、N 2、N 3，TNM分期为Ⅲ、Ⅳ期时均升高，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。富集分析发现多个显著富集的基因与体液免疫应答、粒细胞趋化、细胞因子-细胞因子受体相互作用和B细胞介导的免疫等功能与通路相关。 结论:基于scRNA-seq数据构建的较为稳定的膀胱癌预后预测模型可为临床评估患者预后提供参考。

近年来，雾化吸入治疗越来越普遍地用于机械通气患者，而人工气道的建立改变了气溶胶输送环境和方式，目前已有《机械通气时雾化吸入专家共识》指导临床，但是由于雾化吸入步骤繁琐，药品繁多，很多呼吸机不支持雾化吸入治疗，同时雾化吸入的疗效受众多因素影响，如呼吸机模式选择、参数设置、加温湿化、人工鼻和过滤器的使用等，往往导致临床治疗效果不佳，甚至对呼吸机造成损坏。为规范机械通气雾化吸入技术的临床应用，避免操作中可能出现的诸多问题，河南省医学会重症医学分会呼吸治疗学组委员共同讨论，得出本临床路径，为机械通气雾化吸入的实际操作和给药提供临床参考。

放牧是草原生态系统最主要的人为干扰因素,也是草原群落构建的重要"外部"过滤因子.然而,关于放牧强度对草原群落构建的作用机制,尤其是在这一过程中种内性状分化和种间性状差异的相对作用目前的了解还比较有限.为此,该研究利用在内蒙古典型草原建立的长期放牧控制实验平台,采用土芯法(环刀)取样,系统分析了植物群落地上(株丛、叶片)和地下(根系)性状对放牧的响应.通过环刀-小区和小区-样地两个推绎尺度,研究了基于种内与种间性状变异的放牧强度过滤作用.研究结果表明:(1)随着放牧强度的增加,大多数地上性状的种内和种间变异呈增加趋势,而根系性状的种内和种间变异则显著降低.(2)随着放牧强度的增加,在环刀尺度上,基于地上性状的种内变异和种间差异的放牧过滤强度先增大后减小,在中度放牧时达到最大;然而基于地下性状的种内变异和种间差异的放牧过滤强度逐渐增加.在小区尺度上,基于地上性状的种内变异和种间差异的放牧过滤强度呈线性降低趋势;而基于地下性状种内变异的放牧过滤强度增加,基于种间差异的放牧过滤强度减弱.(3)随着空间尺度增大,放牧强度对草原群落构建的影响由基于种间性状差异的过滤作用逐渐转变为基于种内性状变异的过滤作用,此过程受土壤水分和养分的调控.这些研究结果为深入揭示放牧对草原群落构建的调控机制提供了科学依据,也为正确理解长期放牧导致的植被景观异质性和尺度效应评估提供了重要参考.该研究中叶片和根系性状主要考虑了结构性状,因此具有一定的局限性,未来研究可结合叶片和根系碳氮含量等化学性状指标,以全面理解放牧对植物地上、地下性状变异的调控机制.

目的 探讨在间充质干细胞上清液中分离纯化小细胞外囊泡的优化方法.方法 对比差速离心[differential(ultra)centrifugation,dUC]、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)沉淀和QIAGEN试剂盒法3种标准细胞外囊泡分离程序,并基于标准程序分别进行超滤浓缩、0.22μm滤膜过滤或0.45 μm滤膜过滤改良方案提取小细胞外囊泡,通过比较各分离方法的操作时长和简易程度,并分别用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析技术(nanoparticle tracking analysis,NTA)和Western blot评估小细胞外囊泡的形态结构、粒径分布和标志蛋白表达情况,分析各分离方法提取的小细胞外囊泡质量和效率.采用CCK-8实验和Transwell迁移实验评估改良方法提取的小细胞外囊泡对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响.结果 dUC法、PEG沉淀法和QIAGEN试剂盒法3种分离方法均可分离出小细胞外囊泡,其中QIAGEN试剂盒法操作时长最短,平均为48 min,添加超滤浓缩步骤后延长至93 min(P＜0.0001).PEG沉淀法的操作时间最长,平均为487 min,添加超滤浓缩步骤后延长至547 min(P＜0.0001).dUC法平均操作时间为217 min,添加超滤浓缩步骤后延长至274 min(P＜0.0001).各样本在透射电镜下均观察到典型的"茶托"样结构,粒径分布范围除QIAGEN试剂盒法在200 nm以上,其余均在30-200 nm之间,其中dUC+0.45 μm滤膜过滤组一个视野中观察到的小细胞外囊泡典型结构最多且最完整.Western blot检测结果显示各方法提取的样本中均有阳性标志蛋白CD9、CD63、TSG101表达,不表达阴性标志物calnexin,但0.22 μm滤膜过滤后,各方法的小细胞外囊泡标志蛋白条带均变浅.NTA结果显示,dUC+0.45 μm滤膜过滤的小细胞外囊泡占比最高,达94.86％.不同方法提取的样本的粒径分布图显示,dUC法标准流程和dUC+0.45μm滤膜过滤组的NTA结果显示为单峰,曲线流畅.取dUC+0.45 μm滤膜过滤的样本进行乳腺癌细胞表型实验,结果显示,细胞增殖和迁移能力均增强(均P＜0.05).结论 dUC法是一种有效的间充质干细胞小细胞外囊泡分离方法,在进行超速离心前对细胞上清液进行0.45μm滤膜过滤,可以提高小细胞外囊泡的质量.

群落构建是生态学研究中的论题之一,对湿地植物进行群落构建研究将会对湿地植物的修复与重建工作具有重要意义.为探究城市沿江湿地植物群落构建主要驱动力,以闽江福州段湿地为例,选取四个典型城市沿江湿地公园,基于系统发育结合功能性状的方法,测定其样地植物地上、地下功能性状与土壤因子,并且构建系统发育树、检测系统发育信号、并计算系统发育指数.结果表明:(1)土壤因子与植物功能性状在四个湿地间都具有显著差异,土壤电导率与比根长的变异性最大.土壤含水量与是影响植物性状变异的主要因素.(2)除叶全氮含量外,其余7个功能性状未检测出明显的系统发育信号,植物功能性状表现为趋同.(3)甘蔗湿地与乌龙江湿地的系统发育结构趋于发散,群落构建的主要驱动力为环境过滤.塔礁洲湿地与闽江河口湿地的系统发育结构表现为聚集,限制相似性为主要驱动因素.总体而言闽江福州段湿地植物群落构建过程由生态位理论主导,环境过滤和相似性限制为主要驱动因素,土壤含水量作为主要的环境筛选影响着闽江福州段湿地植物群落构建过程.不同生境下生态位分化的驱动因素不同,植物功能性状的种间种内变异反映了植物对环境异质性的响应机制.