目的:初步了解重组人tau441 (P301S)蛋白体外聚集、抗原性及免疫原性等生物学性质。方法:原核表达带His标签的tau441 (P301S)重组质粒，镍亲和层析纯化重组蛋白，BCA测定蛋白浓度，SDS-PAGE凝胶考马斯亮蓝染色确定蛋白的纯度；采用Western blot (WB)和负染透射电镜(transmission electron microscopy, TEM)鉴定；间接酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测所得蛋白的抗原性；以重组蛋白免疫小鼠，检测免疫血清特异性抗体滴度来分析其免疫原性。结果:所得重组人tau441 (P301S)纯度为70%，WB显示在相对分子质量(Mr.×10 3)64和更高相对分子质量处有特异性条带。TEM显示，tau441 (P301S)呈絮状团块聚集，团状面积显著大于tau441野生型蛋白(t＝6.439, P＝0.003)；4 ℃孵育9 d后，tau441 (P301S)形成明显的纤维状结构。间接ELISA结果显示，tau441 (P301S)能被tau单抗HT7(1∶80 000)识别；小鼠免疫血清tau特异性抗体滴度达到1∶128 000，且WB显示，免疫后血清识别阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)转基因小鼠脑裂解抽提物。 结论:重组人tau441 (P301S)蛋白具有体外聚集性增强的特性但其抗原性和免疫原性未改变。

为强化新的絮团形成菌伪杜擀氏菌YN12(Pseudoduganella eburnea YN12,YN)利用养殖尾水生成生物絮团效果,并将絮团制成饲料,探讨在胡子鲶(Clarisfuscus)饲养上的可行性.在生物絮团系统中,接种活性污泥(Activated sludge,AS)、伪杜擀氏菌YN12和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,BS)并配制成7组(AS、YN、BS、AS+YN、AS+BS、YN+BS和AS+YN+BS),分析絮团形态结构差异,评估出对模拟养殖尾水氮去除效果及微生物群落结构优势的最佳组合,最终收集最佳组合絮团烘干研磨成粉末添加到商业饲料制粒,分成对照组和絮团组两组,探讨对胡子鲶的生长性能、饲料利用率、肌肉营养成分及肝脏的消化酶和免疫酶活性的影响.结果表明:YN+BS组水质净化效果稳定,总氮去除效果(89.6％)良好,氨氮、亚硝酸盐和硝酸盐积累低,具有良好的絮团生成量(9.0 ml/L)及占据优势(47.5％)的反硝化菌群(包括Hydrogenophaga、Flavobacterium、Pseudoxanthomonas、Burkholderiaceae、Comamonas、Acinetobacter等).该组絮团粉以5％比例与商业饲料混合、研磨加工制粒后用于胡子鲶养殖,发现胡子鲶生长性能[包括存活率:(100±0.00)％＞(95±0.00)％;增重:(2.81±0.35)g＞(2.52±0.52)g;体长增加(1.68±0.36)cm＞(1.51±0.34)cm]和饲料系数55±0.03＞46±0.12均优于纯商业饲料的对照组,然而在淀粉酶等消化酶、免疫酶包括过氧化氢酶、总超氧化物歧化物、谷胱氨酸过氧化物酶等及肌肉营养成分包括谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸和甘氨酸等鲜味氨基酸上均低于对照组.YN+BS组絮团饲料在生长性能占据优势,然而在消化能力、免疫活性及肌肉营养成分上并未表现出明显优势,需要进一步调整水平絮团添加水平以优化胡子鲶饲养效果.

生物絮凝技术是一项具有降低饲料系数、提高养殖动物成活率和减少养殖污水排放等特点的先进水产养殖技术,已成熟应用于鱼虾的集约化养殖中.旨在探究生物絮凝技术在中华绒螯蟹扣蟹养殖上的适用情况.从摄食环境(曝气,水草)、摄食时间以及絮凝浓度3个角度探讨了适宜扣蟹摄食的絮凝水体环境,通过肠道饱满指数以及肠道充塞度来评估摄食差异.结果表明:絮凝浓度达到500~600 mg/L的絮凝即可满足扣蟹摄食;摄食2 h后,扣蟹肠道即可达到饱和;摄食相同时间情况下,絮凝水草组的摄食量显著高于絮凝曝气组和絮凝不曝气组(P<0.05).

本文报道一例因潜在的心脏病导致双胎妊娠缺血性脑卒中病例.孕妇孕25周,因“发热3d,肢体无力及吐字不清2d”入院.MRI提示脑梗死.超声心动图发现左心增大;主动脉瓣呈左右二叶瓣,左侧叶可见不规则絮状高回声团,主动脉瓣二叶式畸形,瓣膜赘生物及瓣周脓肿形成.临床诊断为脑梗死(属缺血性脑卒中),亚急性感染性心内膜炎,急性心功能衰竭,二叶式主动脉瓣畸形,瓣膜赘生物及瓣周脓肿形成.于孕28周行主动脉瓣生物瓣置换术,术后病理证实为主动脉瓣二叶式畸形,瓣膜赘生物及瓣周脓肿形成.综合考虑孕妇及胎儿情况于孕35周行剖宫产,娩出2个健康男婴.孕妇经过3个月康复治疗,语言及四肢肌力恢复正常.

为了解凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)育苗期水体中3种生物絮团的形成过程、水质净化效果、菌群结构及功能,实验通过测定各组絮团含量和水质指标并采用Illumina MiSeq高通量测序技术,比较葡萄糖组、淀粉组和蔗糖组生物絮团的不同特征.结果显示,各组形成的生物絮团可有效调节水质,降低水体中的氨氮和亚硝酸盐氮水平.在3个碳源添加组水样中氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮浓度显著低于对照组(P<0.05),在不同碳源组中淀粉组的氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的浓度显著高于葡萄糖组和蔗糖组(P<0.05);淀粉组的生物絮团沉降体积(BFV)显著低于葡萄糖组(P<0.05),蔗糖组BFV最高,3组粒径大小呈现:蔗糖组>葡萄糖组>淀粉组;3组样品分别测得553、515和542个OTU,菌群丰度指数Chao1、Shannon值葡萄糖组>蔗糖组>淀粉组.各组菌群在门水平中,以变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和浮霉菌门(Planctomycetes)为各组优势菌门,3个菌门在各组中占比分别达到91.7％、97.6％和88.7％.在属级水平中,葡萄糖组中Oceanicella属为优势菌属,占比最高为18.4％,淀粉组中丰度较高的Muricauda、Cyclobacterium属,占比分别为9.8％和5.9％,均高于葡萄糖组和蔗糖组.在蔗糖组中Rhodopirellula属具有较高占比,较葡萄糖组和淀粉组分别高1.8％和4.1％.通过Tax4Fun法在3组中检测到细胞新陈代谢、遗传信息加工和环境信息处理等基因功能.这些功能基因在葡萄糖组中的丰度均高于蔗糖组和淀粉组.各项结果表明,凡纳滨对虾育苗水体中生物絮团不仅可以净化水质,还能提高水体菌群多样性,其中以葡萄糖作为碳源效果最好,生物絮团技术对于维持水质与水体生态系统平衡具有重要意义.

孕妇,33岁,孕2产1,无家族遗传病史.产前血清学筛查正常.孕23周产前系统超声检查:胎儿各项生物学指标测值与孕周相符.右肾区未见正常肾形态和轮廓,见一大小3.5 cm× 2.1 cm包块,由多个大小不等的囊性无回声区构成,较大无回声区大小1.5 cm×1.5 cm,内透声可,囊与囊未见交通(图1).左肾大小1.9 cm×1.0 cm,形态结构及回声均未见异常.左侧输尿管内径0.3 cm.CDFI示右肾动脉细小,左肾动脉正常.反复探查胎儿肛门靶环征不清,较宽的结肠内径0.6 cm,可见絮状高回声肠内容物蠕动.胎儿左房室沟处见扩张的冠状静脉窦,大小0.4 cm×0.3 cm,肺动脉左侧见一直径0.2 cm血管,汇入冠状静脉窦,未见无名静脉声像.羊水指数12.8 cm.超声提示:胎儿右侧多囊性发育不良肾、永存左上腔伴无名静脉缺如、肛门"靶环征"不清、单脐动脉.后引产一女死婴.尸体解剖:脐带内见一条脐动脉和一条脐静脉,无肛门,右肾呈多囊性发育不良,为较多囊肿组成,呈葡萄串状,囊内液体淡黄色黏液;右肾动脉纤细,右输尿管下段稍膨隆连于膀胱.左肾呈团状,肾门处见两根输尿管连接膀胱.直肠连通于膀胱,向直肠内注水,水从尿道流出(图2).无子宫及阴道,双侧输卵管及卵巢可见.解剖诊断:右侧多囊性发育不良肾、左侧重复肾重复输尿管、肛门闭锁、直肠膀胱瘘、子宫及阴道缺如、单脐动脉.

比较分析投加不同微生态制剂的海水养殖系统硝化功能建立的过程,为实际应用提供依据.利用海水素构建4个海水养殖系统,通过投加硝化细菌、光合细菌、枯草芽胞杆菌3种微生态制剂以及纤维毛球作为生物膜载体,比较分析不同养殖系统硝化功能的建立过程及硝化强度差异.投加硝化细菌+光合细菌和硝化细菌+枯草芽胞杆菌系统硝化功能建立时间分别为108 h和96 h,氨氮初始质量浓度为6 mg/L时,氨氧化强度分别为1.69 mg/(L·d)和1.36 mg/(L·d);添加纤维毛球的生物膜系统与生物絮团系统硝化功能建立时间分别为96 h和120 h,氨氮初始质量浓度为6 mg/L时,氨氧化强度分别为1.36 mg/(L·d)和0.98 mg/(L·d);投加碳源系统和对照系统硝化功能建立时间分别为84 h和96 h,氨氮初始质量浓度为6 mg/L时,氨氧化强度分别为1.18 mg/(L·d)和1.36 mg/(L·d).硝化细菌+枯草芽胞杆菌系统硝化功能建立时间更短,但系统硝化强度低于硝化细菌+光合细菌系统;生物膜系统硝化强度高于生物絮团系统且硝化功能建立更快;添加碳源能够加快系统硝化功能建立过程,但降低了硝化细菌+枯草芽胞杆菌系统的硝化强度.

[背景]海科贝特氏菌(Cobetia marina)可产生大量具有絮凝活性的胞外产物,可视为一种新型的生物絮凝剂.高温栅藻(Desmodesmus sp.F51)是一种具有较高叶黄素含量的微藻,被认为是一种新兴的叶黄素来源,但利用该生物絮凝剂高效富集高温栅藻的相关研究迄今尚未见报道.[目的]以高温栅藻为对象,研究该新型生物絮凝剂的絮凝效率,并对絮凝机理进行初步探讨.[方法]探索在不同生长阶段微藻培养液添加生物絮凝剂、添加量、絮凝时间、pH对絮凝效率的影响,分析生物絮凝剂的功能基团,并测定在不同pH条件下添加生物絮凝剂前后高温栅藻的Zeta电位变化,以及在显微镜下分析藻细胞在添加生物絮凝剂前后的形态.[结果]在高温栅藻生长至稳定期(pH 8.0)添加2mL生物絮凝剂,絮凝15 rmin絮凝效果最佳,达82.1％.傅里叶红外光谱(fourier transform infraredspectroscopy,FTIR)显示了多糖及酰胺结构的特征吸收峰,由此推测生物絮凝剂主要是多糖的混合物,含有少量蛋白质.根据Bradford法测定絮凝剂中蛋白含量约为0.4％(质量比),通过苯酚-硫酸法测定总糖质量分数约为34.5％(质量比),与FTIR分析结果基本相符.生物絮凝剂在pH 4.0-11.0保持60％以上的絮凝效率,说明无论是酸性或是碱性条件下絮凝效率都较高,结合Zeta电位的分析表明,推测生物絮凝剂对高温栅藻的絮凝机理中占主导地位的可能是吸附架桥作用.[结论]该研究对微藻生物絮凝具有重要的理论和实践意义.

目的 分析慢性根尖周炎与慢性牙周炎患者根管内细菌定植情况.方法 选取50例牙周疾病患者作为研究对象,根据不同感染状态分为慢性根尖周炎组(21例)及慢性牙周炎组(29例).记录两组组织切片Brown&Brenn染色结果 ,比较两组根管内细菌定植阳性检出情况,并对比两组扫描电镜观察结果 .结果 慢性根尖周炎患者患牙根管内几乎全部有细菌定植,感染情况最严重部位为根尖1/3,牙本质小管内侧是感染集中区域,细菌侵入的最深深度几乎贯穿整个牙本质;慢性牙周炎患者组织切片Brown&Brenn染色结果 与慢性根尖周炎相反,其细菌定植主要集中在牙本质小管外侧,患者牙根表面可见紫染杆状菌、丝状菌聚集成团或成丛,有生物膜样结构形成;慢性根尖周炎组根冠1/3、根中1/3、根尖1/3牙本质小管内侧细菌定植阳性率均明显高于慢性牙周炎组,根冠1/3牙本质小管外侧细菌定植阳性率明显低于慢性牙周炎组,差异有统计学意义(P<0.05);慢性根尖周炎组细菌定植侵入深度整体明显高于慢性牙周炎组,差异有统计学意义(P<0.05);慢性根尖周炎组根冠1/3、根中1/3细菌定植深度明显低于慢性牙周炎组,根尖1/3明显高于慢性牙周炎组,差异有统计学意义(P<0.05);在各个部位不同感染状态组患者的各侵入深度细菌定植阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);经扫描电镜观察发现,慢性根尖周炎患者絮状无定形基质中可见大量杆菌、球菌镶嵌,根管壁上可见其以生物膜形式附着或直接侵入牙本质小管内部,或在管间牙本质内呈不规则分布;慢性牙周炎患者牙根表面暴露牙本质小管开口处可见不同形态细菌散布或簇集成团,牙本质小管内受到不同程度的侵入.结论 慢性根尖周炎与慢性牙周炎感染状态不同,二者牙本质小管内细菌定植情况也有明显差异,前者患牙有较高的细菌定植阳性率,且以生物膜形式集中于根尖1/3段,形成的感染区域清除难度大;后者细菌定植集中在牙本质小管外侧,且以根冠1/3为主,可经牙本质小管影响牙髓组织.临床治疗期间在控制牙周组织感染的同时,还应重视牙髓组织感染的控制.

从云南省泸西县的污水处理厂分离到一株菌胶团形成菌YN12,经过鉴定与象牙白伪杜擀氏菌(Pseudoduganella eburnea)10R5-21T模式株具有较近的亲缘关系,属于同一物种.为揭示该菌株与其他活性污泥细菌间菌胶团形成机制及碳源利用方面的异同,对该菌株进行全基因组测序、组装、注释及比较基因组学分析.结果表明:P.eburnea YN12株基因组大小约为5934 kb,G+C含量为63.9％,包含5313个蛋白质编码序列,具有与喜树脂动胶菌(Zoogloea resiniphila)MMB株、解叔丁醇水居菌(Aquincola tertiaricarbonis)RN12株及解壳聚糖松江菌(Mitsuaria chitosanitabida)XHY-A6株相似的胞外多糖生物合成途径、PrsK-PrsR双组分系统和PEP-CTERM胞外蛋白家族,共同介导和调控的菌胶团形成机制.与后者相比,菌株YN12中胞外多聚物(Extracellular polymeric substances,EPS)形成相关基因集中在大小约为72 kb的大型基因簇上,且能吸收利用的碳源特别是单糖、二糖和多糖更为丰富多样.同时,我们还从河流及养殖水体中也分离到象牙白伪杜擀氏菌,这些菌株可用于生物絮团技术(Biofloc Technology),改善水产养殖水质.