范可尼贫血（FA）是一组具有较高临床和遗传异质性的罕见先天性骨髓衰竭综合征，其发病率在欧美人群中约为5/100万。FA临床特征主要为儿童期进行性骨髓衰竭、多发性先天畸形（75%的患者可合并多指/趾、小头畸形、皮肤牛奶咖啡斑等异常）以及肿瘤易感等。细胞暴露于各种环境因素、化疗药物或细胞内源性代谢产物后可诱导DNA两条链间产生共价加合物并最终导致DNA链间交联（ICL）的形成 [ 1, 2] 。FA的致病基础是FA通路基因突变导致DNA-ICL修复受阻，从而引起基因组不稳定。患者体内细胞对各种内源、外源性DNA交联诱导剂高度敏感，异常染色体比例增加，大量细胞生长周期停滞在G 2/M期，并导致细胞生长受阻 [ 3] 。FA患者首次诊断年龄跨度较大，从未出生到50岁以上 [ 4] 。

目的:探讨抑制长链非编码RNA生长停滞敏感基因5(GAS5)对结肠癌细胞生物学特性的影响及其机制。方法:取结肠癌HCT116细胞，分为空白对照组(加入磷酸盐缓冲液)、阴性对照组(转染si-GAS5NC)、si-GAS5组(转染si-GAS5)和si-GAS5+miR-21抑制剂组(转染si-GAS5联合miR-21抑制剂反义寡核苷酸has-miR-21-5p)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测转染48 h后各组细胞中GAS5和miR-21的表达水平，荧光素酶基因报告实验验证GAS5与miRNA-21的结合位点，细胞计数试剂盒8法检测各组细胞的增殖情况，克隆形成实验观察细胞的克隆形成能力，Transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力，流式细胞术检测细胞周期和凋亡，Western blot检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白(Snail、N-cadherin、vimentin、E-cadherin)、干细胞相关因子(Sox2、CD44、Oct2)和磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)/Akt信号通路相关蛋白的表达情况。结果:转染后48 h，空白对照组、阴性对照组和si-GAS5组HCT-116细胞miR-21表达水平分别为1.00±0.10、1.00±0.10和1.80±0.20，吸光度分别为0.51±0.02、0.50±0.01和0.65±0.01，细胞克隆形成数分别为(90±4)个、(91±5)个和(200±8)个，侵袭细胞数分别为(118±3)个、(119±3)个和(150±4)个，迁移细胞数分别为(110±2)个、(108±2)个和(127±2)个，G 1期细胞比例分别为(49.3±2.1)%、(50.1±2.0)%和(42.2±1.1)%，S期细胞比例分别为(19.2±1.2)%、(20.2±1.1)%和(28.3±2.2)%，细胞凋亡率分别为(14.4±2.2)%、(14.5±2.1)%和(7.2±1.3)%，表明GAS5下调后HCT-116细胞miR-21表达水平升高，增殖、侵袭和迁移能力增强，G 1期细胞减少，S期细胞增加，细胞凋亡率降低(均 P<0.05)。GAS5下调后，HCT-116细胞中Snail、N-cadherin、vimentin、Sox2、CD44、Oct2和p-Akt的表达水平升高(均 P<0.05)，E-cadherin和PTEN的表达水平降低(均 P<0.05)。抑制miR-21后，可以逆转GAS5下调引起的PTEN/Akt信号通路相关蛋白表达水平的变化(均 P<0.05)。 结论:GAS5可作为miR-21的竞争内源性RNA，下调GAS5可通过激活miR-21/PTEN/Akt信号通路，促进EMT和肿瘤细胞干性的获得，从而促进结肠癌的发生发展。

目的 探索生长停滞特异基因1(GAS1)与乳腺癌患者免疫治疗及药物敏感性的关系.方法 利用TCGA数据库数据分析GAS1 在乳腺组织中的表达情况及与临床病理特征之间的关系;GSEA富集分析探索GAS1 与基因集的关系;CIBERSORT法分析22 种免疫细胞的比例,并探索GAS1 与免疫浸润细胞的关系;使用TCIA数据库评估GAS1 的表达与CT-LA4 和PD1 免疫表型评分的关系;利用GDSC数据库探索GAS1 与不同药物敏感性的关系.利用 2016 年 1 月—2017 年 12月在哈尔滨医科大学附属肿瘤医院乳腺外科接受手术治疗的乳腺癌患者的96 例癌组织及33 例癌旁组织资料进行GAS1 免疫组织化学染色验证.结果 TCGA数据库结果表明,GAS1 在乳腺癌组织中的表达量显著低于正常乳腺组织(P<0.001),GAS1 表达水平与年龄存在相关性(P =0.040).包括细胞黏附分子在内的多种通路主要在GAS1 高表达组中富集.GAS1高、低表达组间CD8 T细胞、滤泡辅助T细胞及巨噬细胞M1 差异有统计学意义(P<0.05).GAS1 高表达组ips_ctla4_neg_pd1_pos及ips_ctla4_pos_pd1_pos评分高于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05).GAS1 高表达组多西他赛、表阿霉素、顺铂、氟维司群、紫杉醇、帕博西利和奥拉帕利的IC50值小于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05).临床样本中,乳腺癌患者癌组织中GAS1 高表达者比例显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001).GAS1 的表达水平与分子分型是否为三阴性、组织学分级和CK5/6 状态有关(P<0.05).结论 GAS1 高表达的乳腺癌患者对免疫治疗药物PD1 及部分常见化疗药物更为敏感,可以使用GAS1 预测乳腺癌患者对这些药物的敏感性.

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种常见的妇科内分泌疾病,但其发病机制尚不清楚.长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的非编码RNA.一些针对PCOS患者的测序研究发现,PCOS患者的外周血白细胞、卵丘细胞和颗粒细胞中的lncRNA表达异于正常女性,如CTBP1-AS、甾体激素受体RNA激活物(SRA)、肿瘤低表达lncRNA(lncRNA-LET)和生长停滞敏感基因5(GAS5)等.进一步研究发现,这些差异表达的lncRNA可能通过参与类固醇的产生、增强类固醇受体的活性、肥胖和胰岛素抵抗(IR)等代谢过程,影响颗粒细胞的增殖、迁移和凋亡以及卵母细胞的发育,与PCOS发生、发展相关.现综述近年来lncRNA在PCOS中的研究进展,以期为PCOS的研究与治疗提供新思路.

目的 探讨长链非编码RNA中的生长停滞敏感基因5(GAS5) mRNA在肝细胞性肝癌组织中的表达及其临床意义.方法 回顾性收集2013年9月至2016年7月期间于重庆医科大学附属第一医院行根治性切除手术、术后病理学检查证实为原发性肝细胞性肝癌的120例患者的癌组织及其癌旁组织,应用实时荧光定量PCR (RT-PCR)法检测两类组织中GAS5 mRNA的表达,并分析其表达与肝细胞性肝癌患者临床病理学特征的关系,同时探索其对肝细胞性肝癌患者预后的影响.结果 肝细胞性肝癌组织中GAS5 mRNA的表达水平低于癌旁组织(P＜0.01).GAS5 mRNA的表达与肿瘤直径、肿瘤数量、术前甲胎蛋白(AFP)水平、淋巴结转移、TNM临床分期和肿瘤分化程度均相关(P＜0.05).Cox比例风险回归模型结果表明,GAS5 mRNA的表达与预后有关(P＜0.05).结论 GAS5 mRNA有望成为肝细胞性肝癌早期诊断和预后判断的标志物.

目的 探讨血清长链非编码RNA生长停滞特异基因5(LncRNA GAS5)水平与老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)在接受经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后出现支架内再狭窄的关系,并采用受试者工作曲线(ROC)评估血清LncRNA GAS5水平对老年冠心病PCI后支架内再狭窄的诊断价值.方法 选取2016年4月至2018年10月于解放军联勤保障部队第九六〇医院干部病房进行PCI的164例老年冠心病患者为研究对象,依据术后12个月冠状动脉(冠脉)造影复查结果分为两组,支架内、5 mm范围内血管内径狭窄<50％的无再狭窄组(91例),支架内、5 mm范围内血管内径狭窄≥50％的为再狭窄组(73例),再狭窄组根据再狭窄支数分为单支再狭窄组(28例),双支再狭窄组(32例),三支再狭窄组(13例).研究对象均采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测血清LncRNA GAS5水平.结果 与无再狭窄组相比,再狭窄组血清LncRNA GAS5水平较低(P<0.05);单支再狭窄组、双支再狭窄组、三支再狭窄组相比,血清LncRNA GAS5水平依次降低(P<0.05);Spearman相关分析显示,再狭窄组血清LncRNA GAS5水平与老年冠心病PCI后再狭窄支数呈负相关(P<0.05);ROC结果显示,血清LncRNA GAS5诊断老年冠心病患者PCI后支架内再狭窄的曲线下面积为0.866,截断值为1.099,对应的敏感度为86.30％,特异度为73.60％.结论 老年冠心病PCI后支架内再狭窄患者血清LncRNA GAS5水平较未发生再狭窄患者低,且与再狭窄支数呈负相关,对老年冠心病PCI后发生支架内再狭窄有一定诊断价值,可能为老年冠心病患者PCI后支架内再狭窄的治疗靶点提供新思路.

目的 探讨长链非编码RNA生长停滞特异基因5(LncRNA GAS5)、微小RNA-142-5p(miR-142-5p)在慢性心力衰竭(心衰)患者血清中的表达及临床意义.方法 选取2018年2月至2019年2月于济宁医学院附属医院心内科住院治疗的83例慢性心衰患者为慢性心衰组,同期选取健康体检者86例作为健康对照组.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清LncRNA GAS5、miR-142-5p水平,心脏超声测定左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)及左心室射血分数(LVEF);分析慢性心衰患者血清LncRNA GAS5、miR-142-5p水平与心功能指标的相关性及二者对慢性心衰的诊断价值;采用Kaplan-Meier法分析血清LncRNA GAS5、miR-142-5p表达与慢性心衰患者预后的关系.结果 慢性心衰组血清miR-142-5p水平、LVESD、LVEDD高于健康对照组,血清LncRNA GAS5水平、LVEF低于健康对照组(P<0.05).慢性心衰患者血清LncRNA GAS5与miR-142-5p水平呈负相关(r=-0.647,P<0.05),且LncRNA GAS5(miR-142-5p)与LVESD、LVEDD呈负(正)相关(P<0.05),与LVEF呈正(负)相关(P<0.05).血清LncRNA GAS5、miR-142-5p及二者联合诊断慢性心衰的曲线下面积(AUC)分别为0.873、0.896、0.914,特异性分别为82.6％、72.1％、79.1％,敏感度分别为84.3％、91.6％、92.8％.LncRNA GAS5低表达患者2年生存率(57.14％)低于LncRNA GAS5高表达患者2年生存率(85.37％),差异有统计学意义(P<0.05);miR-142-5p高表达患者2年生存率(58.14％)低于miR-142-5p低表达患者2年生存率(85.00％),差异有统计学意义(P<0.05).结论 血清LncRNA GAS5、miR-142-5p表达水平对慢性心衰患者早期诊断及预后评估均有重要作用.

目的 探讨急性心肌梗死患者外周血长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异性转录本5(GAS5)(ln-cRNA GAS5)水平与左心室结构、功能的相关性.方法 前瞻性选取2017年2月至2019年3月北京市大兴区人民医院收治的急性心肌梗死拟行经冠状动脉介入术(PCI)术治疗的149例患者,将其设为疾病组;另选取同期体检健康者91例,将其设为健康组.两组均行外周血lncRNA GAS5、lncRNA牛磺酸上调基因1(1ncRNA TUG1)、B型利钠肽(BNP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平及左心室结构、功能相关指标[左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室收缩末内径(LVESD)、左心室后壁厚度(LVPWTD)、左心室舒张末期室间隔厚度(LVSTD)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)、左心室射血分数(LVEF)、心排血量(CO)]检测.另对比左心室重构组与非左心室重构组各指标水平以及lncRNA GAS5、左心室结构与功能术前术后的变化率,并分析lncRNA GAS5水平与各指标的相关性,且分析lncRNA GAS5水平变化率与左心室结构、功能指标变化率的关系,另评估lncRNA GAS5水平变化率对左心室重构的预测价值.结果 疾病组入院后即刻的lncRNA GAS5、lncRNA TUG1、BNP、CK-MB、cTnT水平及LVEDd、LVESD、LVPWTD、LVSTD、LVEDV、LVESV均高于疾病组术后6个月及健康组,LVEF、CO水平均低于疾病组术后6个月及健康组,差异均有统计学意义(P＜0.05).疾病组发生左心室重构者56例,占37.58％(56/149).左心室重构组入院后即刻及术后 6 个月的 lncRNA GAS5、lncRNA TUG1、BNP、CK-MB、cTnT 及 LVEDd、LVESD、LVPWTD、LVSTD、LVEDV、LVESV水平均明显高于非左心室重构组,LVEF、CO均低于非左心室重构组,差异均有统计学意义(P＜0.05).经Pearson相关性分析,疾病组lncRNA GAS5水平与LVEF、CO呈负相关性(P＜0.05),与lncRNA TUG1、BNP、CK-MB、cTnT及LVEDd、LVESD、LVPWTD、LVSTD、LVEDV、LVESV均呈正相关性(P＜0.05).左心室重构组 ln-cRNA GAS5 及左心 室结构、功能各指标在术前术后的变化率均 小于非左心室重构组,差异均有统计学意义(P＜0.05).经Pearson相关性分析,疾病组lncRNA GAS5术前术后的水平变化率与左心室结构、功能各指标术前术后的变化率均呈正相关(P＜0.05);lncRNA GAS5水平术前术后的变化率预测左心室重构的敏感度为89.29％,特异度为86.02％,曲线下面积为0.819.结论 急性心肌梗死患者外周血lncRNA GAS5、lncRNA TUG1、BNP、CK-MB、cTnT表达水平均升高,lncRNA GAS5水平与lncRNA TUG1、BNP、CK-MB、cTnT水平密切相关,且lncRNA GAS5水平及术前术后变化率亦与患者左心室结构及功能关系密切.