目的:本研究利用单细胞RNA测序分析技术(scRNA-seq)初步探索乳腺癌4T1细胞表达淋巴细胞抗原6复合物E(Ly6E)调控肿瘤免疫微环境(TIME)的潜在机制.方法:利用CRISPR-Cas9技术构建Ly6e基因敲除小鼠乳腺癌4T1细胞(Ly6E-KO),观察其和野生型细胞(Ly6E-WT)体外增殖和体内生长能力的差异.流式细胞术分选两类肿瘤组织中的CD45阳性细胞,再进行scRNA-seq分析.对于测序结果,首先利用Seurat软件包筛选差异表达基因谱,根据标记基因进行注释;再利用Cellchat和Monocle2软件分析细胞互作关系和特定免疫细胞的演化轨迹.结果:与Ly6E-WT相比,Ly6E-KO体外增殖能力无显著差异,但体内生长能力显著降低(P<0.001).ScRNA-seq分析显示,Ly6E-KO移植瘤浸润DC比例显著高于Ly6E-WT,且DC处于更加活跃的增殖和分裂状态;三种DC亚群(pDC、cDC1和cDC3)与T细胞均存在显著的互作关系.同时发现,Ly6E-KO肿瘤中浸润T淋巴细胞增殖、活化及效应相关的基因表达水平均升高,提示Ly6E-KO具有更强抗肿瘤能力.最后,本研究对人类乳腺癌队列的scRNA-seq数据进行了分析,进一步证实了上述发现.结论:肿瘤细胞Ly6e基因敲除后可通过增加TIME中DC活化及浸润,继而增强机体抗肿瘤免疫应答.

心血管疾病危险因素从儿童期到成年期存在“轨迹”现象，成年期心血管疾病起源于儿童期。国内外建立了多个儿童心血管随访队列，且已随访到中年或老年早期，为成年期心血管疾病的预防提供了证据支持。但是，我国居民当前正处于营养转型期，考虑到我国新的社会经济背景和我国当代儿童的生长发育模式有别于国外儿童，也有别于20世纪90年代的儿童，亟需建立新的有中国特色的儿童心血管随访队列，为我国成人心血管疾病的预防提供新的循证依据。

孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder，ASD)全球患病率为1%~1.5%，美国最新患病率为1.7%，成为全球患病数增速较快的疾病之一。近十年国内外学者关注到缺氧可以调节胎儿生长轨迹，增加包括ASD在内的多种神经系统疾病的发病风险。该文通过分析缺氧在ASD流行病学中的研究、缺氧的神经生物学与ASD的一致性、缺氧与ASD关联的可能机制，总结围生期缺氧与ASD患病情况的相关性。围生期缺氧可能从表观遗传学、多巴胺、炎症因子、氧化应激、类固醇多个方面影响患儿神经系统的发育与发展，最终增加ASD的患病风险。为评估孕期监护指标和制定干预提供重要参考，提前评估风险。通过早期诊治，改善患儿预后。

2岁以内婴幼儿生长减缓是临床常见问题，尤其是在低收入贫困地区。临床对生长减缓的婴幼儿要尽早识别、评估和诊断，积极消除病因，通过监测、营养管理、喂养行为指导让生长减缓婴幼儿实现适宜的追赶生长，回到原来的生长轨迹上。

目的:利用MRI磁敏感加权成像（SWI）测量中晚孕周胎儿椎体骨化中心形态学参数，探讨椎体的生长发育轨迹。方法:前瞻性连续纳入2015年12月至2021年12月山东第一医科大学附属省立医院中晚孕周正常发育的胎儿并行胎儿脊柱SWI扫描。分析胎儿椎体骨化中心影像表现并测量第4颈椎（C4）、第6胸椎（T6）、第3腰椎（L3）、第1骶椎（S1）椎体骨化中心的矢状径、横径、高度、横截面积，计算体积。利用线性或非线性回归分析法确立回归方程并拟合生长轨迹曲线。结果:112例胎儿纳入本研究，均为单胎，孕周21~39（29.4±3.9）周。其中，包含C4椎体骨化中心30例，T6 58例，L3 92例，S1 62例。SWI显示宫内胎儿脊柱整体曲度后凸，呈现2个原发性弯曲（胸椎和骶椎后凸）。C4椎体骨化中心的形态学参数矢状径、横径、高度、面积和体积在孕25~38周期间生长轨迹遵循二次多项式规律（R 2=0.938、0.943、0.952、0.957、0.982）；T6椎体骨化中心的矢状径、横径、高度在妊娠21~38周期间生长轨迹遵循指数生长规律（R 2=0.915、0.923、0.849），面积和体积增长遵循二次多项式生长规律（R 2=0.943、0.961）；L3椎体骨化中心的形态学参数在妊娠21~39周期间生长轨迹遵循二次多项式规律（R 2=0.910、0.916、0.914、0.942、0.948）；S1椎体骨化中心矢状径、横径、高度在妊娠23~39周期间遵循线性生长规律（R 2=0.905、0.911、0.922），面积和体积遵循二次多项式生长规律（R 2=0.930、0.964）。 结论:孕中晚期，胎儿C4、T6、L3、S1椎体骨化中心的生长发育与孕周呈良好的相关性，胎儿椎体骨化中心前期增长缓慢，而随着孕周的增长，椎体的生长速度加快。

儿童青少年生长发育存在一定的阶段性和连续性，在某些因素诱发下，其生长发育偏离正常规律和轨迹，可能会出现各系统不平衡的现象，甚至可导致重要共病的发生。儿童生长发育不平衡可能是导致儿童青少年肥胖、近视和心理问题等重要共病发生的内部因素，而环境改变与生长发育不匹配可能是其发生的外部因素。因此，需要在定期监测儿童青少年生长发育各项指标的基础上，找到其生长发育不平衡的影响因素，改善致病环境，揭示致病机制，从根本上预防重要共病的发生。

目的:探讨基于直方图参数量化0~5岁正常儿童常规脑部MRI中侧脑室前后角层面脑发育轨迹的价值。方法:回顾性收集2014年4月至2021年11月在南京医科大学附属儿童医院接受MRI检查的300名0~5岁儿童的三种常规脑MRI数据［表观扩散系数（ADC）图、T 1加权成像（T 1WI）及T 2加权成像（T 2WI）］，男154名，女146名，年龄［ M（ Q1， Q3）］35.57（17.98，50.66）月。以8∶2的比例按照随机序列产生方法分成训练集240名及验证集60名。训练集按年龄分为6组：≤0.5岁组，24名；>0.5~≤1岁组，21名；>1~≤2岁组，31名；>2~≤3岁组，44名；>3~≤4岁组，42名；>4~≤5岁组，78名。用MRIcron软件勾画三种MRI数据中侧脑室前后角层面的全脑作为感兴趣区，获得灰度直方图及其参数［包括平均值、最大值、最小值、偏度、峰度、众数、方差及10%~95%每间隔5%的百分位数（10th~95th）］。采用组内相关系数（ICC）评价观察者内部及观察者间测量一致性。通过Spearman相关分析及曲线拟合筛选出代表性参数。线性回归系数β表示不同年龄段发育速度。将筛选出的曲线回归模型应用于验证集，用准确率评价模型的可靠性。 结果:观察者内部及观察者间直方图参数整体一致性好（ICC>0.800，均 P<0.001）。直方图参数ADC 10th~65th，T 1WI 55th~80th及T 2WI 10th~45th与年龄相关性较高（∣ r∣分别≥0.700、0.600、0.600，均 P<0.001）。ADC 30th及T 2WI 10th的拟合优度（ R2=0.871、0.873，均 P<0.001）最大。脑发育趋势图显示ADC 30th及T 2WI 10th随年龄增长而下降，ADC 30th在2岁前变化较快，以6个月内下降最为明显，2岁后下降速度变缓；T 2WI 10th在1岁内快速减低，1岁后速度趋缓。ADC 30th与T 2WI 10th的曲线回归模型在验证集中具有较高的准确率［分别为93%（56/60）、95%（57/60）］。 结论:直方图参数可以量化0~5岁正常儿童常规脑部MRI中侧脑室前后角层面的脑发育轨迹，并获得反映该年龄段该层面的脑发育生长曲线。

目的:探讨生物强度电场对人表皮细胞株HaCaT和小鼠表皮细胞运动性及CD9表达的调节作用。方法:采用实验研究方法。取对数生长期人永生化表皮细胞株HaCaT细胞及分离自16只1～3 d龄雌雄不拘BALB/c小鼠的原代表皮细胞进行实验。将HaCaT细胞分为200 mV/mm电场强度处理3 h的加电组和模拟处理的假电组，在活细胞工作站中观察细胞迁移(运动方向、位移速度、轨迹速度，加电组样本数为46、假电组样本数为34)及排列，免疫荧光法检测CD9蛋白的分布及表达。将HaCaT细胞与小鼠表皮细胞均分为假电组(模拟处理)和进行相应电场强度处理3 h的50 mV/mm组、100 mV/mm组、200 mV/mm组、400 mV/mm组，将HaCaT细胞与小鼠表皮细胞均分为未行处理的空白对照组和用200 mV/mm电场强度分别处理相应时间点的1 h组、3 h组、6 h组，蛋白质印迹法检测CD9的蛋白表达(样本数为3)。对数据行Mann-Whitney U检验、单因素方差分析、独立样本 t检验及LSD检验。 结果:处理3 h内，加电组HaCaT细胞明显趋向负极移动，假电组HaCaT细胞围绕原点随机运动；与假电组比较，加电组HaCaT细胞方向性显著增强，位移速度、轨迹速度显著加快( Z＝-3.975、-6.052、-6.299， P<0.01)。处理3 h后，加电组HaCaT细胞长轴与电场方向垂直，假电组HaCaT细胞呈任意取向排列。处理3 h后，加电组HaCaT细胞CD9蛋白(均位于细胞膜上)相对表达量明显低于假电组( t＝4.527， P<0.01)。处理3 h后，假电组、50 mV/mm组、100 mV/mm组、200 mV/mm组、400 mV/mm组HaCaT细胞、小鼠表皮细胞CD9蛋白表达量分别为0.332±0.021、0.283±0.032、0.254±0.020、0.231±0.041、0.212±0.031与0.565±0.021、0.453±0.022、0.389±0.020、0.338±0.021、0.233±0.011。对于2种细胞而言，与假电组比较，电场处理4组细胞CD9蛋白表达量均明显降低( P<0.01)；与50 mV/mm组比较，另外3个电场强度处理组细胞CD9蛋白表达量均明显降低( P<0.01)；与100 mV/mm组比较，200 mV/mm组、400 mV/mm组细胞CD9蛋白表达量均明显降低( P<0.01)；与200 mV/mm组比较，400 mV/mm组细胞CD9蛋白表达量明显降低( P<0.01)。空白对照组、1 h组、3 h组、6 h组HaCaT细胞、小鼠表皮细胞CD9蛋白表达量分别为0.962±0.031、0.784±0.020、0.531±0.021、0.409±0.011与0.963±0.031、0.872±0.031、0.778±0.040、0.591±0.041。对于2种细胞而言，与空白对照组比较，1 h组、3 h组、6 h组细胞CD9蛋白表达量均明显降低( P<0.01)；与1 h组比较，3 h组、6 h组细胞CD9蛋白表达量均明显降低( P<0.05或 P<0.01)；与3 h组比，6 h组细胞CD9蛋白表达量明显降低( P<0.01)。 结论:生物强度电场可使HaCaT细胞发生定向迁移和排列，可下调HaCaT细胞和小鼠表皮细胞中CD9的表达，且呈电场强度与处理时间依赖性。

目的:探讨年龄和性别标准化BMI-Z值（BMI-Z）轨迹与青春晚期（16~18岁）血压偏高的关系。方法:基于苏州市儿童和青少年健康监测项目（HPPCA）2012-2019年的数据，以2019年的监测数据为结局，将末次监测年龄为16~18岁且总监测次数≥4的11 812名儿童青少年纳入研究。运用潜变量生长混合模型分析不同性别儿童成长过程中的BMI动态变化（BMI-Z变化轨迹），采用多因素logistic回归分析BMI动态变化与青春晚期血压偏高的关系。结果:在男、女生中各确定了6条BMI-Z变化轨迹，分别为较瘦组、略瘦组、标准组、下降组、超重组和肥胖组。与标准组相比，男生肥胖组在青春晚期发生血压偏高的风险增加94.0%（ OR=1.94，95% CI：1.43~2.63），而女生肥胖组则增加107.0%（ OR=2.07，95% CI：1.33~3.22）。男女生中下降组与青春晚期血压偏高发病均没有显著关联。 结论:儿童持续性肥胖会增加青春晚期罹患血压偏高的风险；若对肥胖儿童及时采取干预措施，使其在青春晚期恢复正常体重，或许能降低血压偏高的风险。

森林景观模型(forest landscape model,FLM)已成为模拟森林景观动态的重要工具,模型预测的有效性将决定FLM在森林管理应用中的广度和深度.有限的调查数据是制约模型验证的主要原因,选择合适的方法来弥补数据的空缺并解决数据匮乏地区的模型验证问题可促进FLM得到更广泛的应用.本研究基于多源数据和时空代替法在森林调查数据匮乏的区域建立模型验证框架,并以LANDIS PRO森林景观模型模拟青藏高原未来森林景观动态为例说明该框架的适用性.具体的验证框架为:首先,使用森林调查数据校验模型参数;其次,利用多源数据(森林调查数据、遥感产品和已有研究结果)对模型结果进行短期验证;最后基于时空代替法和已有研究验证模型的长期结果.验证结果表明:初始模拟结果能够准确表征真实的森林属性信息;基于多种指标的LANDIS PRO短期模拟结果在样地和景观尺度上与验证数据差异较小(RMSE＜80 t·hm-2、SD＜80 t·hm-2、R2=0.81);长期林分动态特征与先前研究一致,模型预测的森林组成、结构和演替轨迹与该区原生林生长轨迹一致.这表明本研究基于森林资源数据匮乏条件建立的森林景观模型验证框架能够较好地对森林景观的模拟结果进行验证.