目的 在锂-毛果芸香碱(Lithium-Pilocarpine)致痫大鼠模型中,检测炎症小体的激活,观察小胶质细胞的活化和异常新生神经元的形成,探索炎症小体激活小胶质细胞促进异常新生神经元形成在癫痫发生发展中的作用机制.方法 通过腹腔注射氯化锂和毛果芸香碱建立癫痫大鼠模型,将大鼠分为Sham组(生理盐水对照组,n=12)、Pilo组(锂-毛果芸香碱致痫组,n=20)和Pilo+MCC950组[锂-毛果芸香碱致痫后给予核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)抑制剂组,n=20],在急性期观察记录大鼠癫痫的行为学表现,通过病理切片确认脑组织损伤情况和细胞激活情况,借助分子检测确认炎症小体和其他分子的表达情况.采用体外细胞模型挽救实验验证炎症小体的作用.结果 Pilo组大鼠有6只出现V级,5只出现Ⅳ级,2只出现Ⅲ级的癫痫发作情况.相较之下,Pilo+MCC950组大鼠则没有出现Ⅴ级,6只出现Ⅳ级,8只出现Ⅲ级,2只出现Ⅱ级的癫痫发作情况.Pilo组强直痉挛发作的潜伏期短于Pilo+MCC950组,Ⅲ级以上癫痫发作的次数和持续时间大于Pilo+MCC950组.Pilo组NLRP3和pro-caspase-1的含量、4种促炎细胞因子的含量以及脑源性神经营养因子(BNDF)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)均高于Pilo+MCC950组.免疫荧光检测显示,Pilo组小胶质细胞大量活化,出现大量异常新生神经元.体外细胞实验后,ELISA结果验证了炎症小体的作用.结论 在锂-毛果芸香碱致痫大鼠模型中,炎症小体NLRP3接受外界炎症刺激而活化聚集,进而大量产生多种促炎细胞因子,使得小胶质细胞活化,分泌BDNF并激活ERK信号通路,调控异常新生神经元的形成和聚集等生物学行为,参与癫痫的发生发展.

目的 采用网络药理学、分子对接、代谢组学及实验验证探讨葛根汤对缺氧状态下癫痫发作的影响.方法 运用网络药理学筛选葛根汤、癫痫、脑缺氧的核心靶点,分子对接验证配体与受体之间的关联度,再采用动物实验验证.用氯化锂-毛果芸香碱法建立癫痫模型,结扎单侧颈总动脉并放置在氧气含量为 10%～15%的密闭箱中复制缺氧模型.60 只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药苯妥英钠(26 g·kg-1)组及葛根汤高、中、低(10.62、5.31、2.655 g·kg-1)剂量组.治疗结束统计各组大鼠癫痫发作次数,评估大鼠神经功能恢复及癫痫发作情况;HE染色观测各组大鼠海马CA1 区形态学改变;免疫组化法检测白细胞介素 6(IL-6)和白细胞介素 17(IL-17)的表达;靶向代谢组学检测分析大脑神经递质的改变.结果 网络药理学共获得葛根汤有效成分128 个,靶点 228 个;使用STRING构建药物-疾病蛋白互作(PPI)网络图,结果显示IL-6、STAT3、AKT1 为核心靶标;GO富集在生物过程(Biological Process,BP)涉及对外来刺激的反应、氧水平、缺氧和活性氧的代谢过程的反应等.细胞组分(Cell Component,CC)方面主要对细胞膜、蛋白激酶复合物等有影响;分子功能方面(Molecular Function,MF)对泛素蛋白和泛素样蛋白连接酶结合等影响较大.KEGG分析显示葛根汤治疗脑部缺氧诱发癫痫的关键通路主要涉及脂质与动脉粥样信号通路、IL-17 信号通路、Th-17 信号通路等.实验验证结果发现,葛根汤治疗组大鼠的癫痫发作次数较模型组明显下降(P＜0.01),大鼠海马区细胞形态结构均有不同程度改善,细胞空泡现象减少.各治疗组IL-17A、IL-6 表达较模型组降低,其中葛根汤中剂量组的差异具有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).脑部代谢组学检测,与模型组比较,葛根汤高剂量组单胺类神经递质 5-羟基色氨酸(5-HTP)、去甲肾上腺素(NE)升高,色氨酸代谢产物犬尿氨酸(Kyn)降低.结论 葛根汤可以降低癫痫大鼠缺氧状态下炎症因子IL-6、IL-17A水平,通过改善缺氧诱导的炎性反应,减少癫痫发作;升高单胺类神经递质 5-HTP、NE含量,抑制癫痫发作;降低色氨酸代谢产物Kyn含量,减轻色氨酸代谢通路毒素,减少癫痫发作.

目的:探讨1例多发先天性畸形-肌张力低下-癫痫综合征3型(MCAHS3)患儿的临床特点及遗传学病因，为其母腹中胎儿提供产前诊断依据。方法:选取2022年7月27日因"反复抽搐4年余"就诊于临沂市人民医院的1例女性MCAHS3患儿为研究对象，收集患儿的临床资料，抽取患儿及父母外周血样，提取基因组DNA进行家系全外显子组测序(WES)，采用Sanger测序对候选变异进行验证。并对其妊娠18周母亲进行羊水穿刺，提取胎儿DNA进行产前诊断。应用生物信息学软件分析构建蛋白模型变异位点的致病性。结果:患儿为4岁女性，频繁癫痫发作，面容特殊，肌张力低下，重度发育迟缓。基因检测提示患儿 PIGT基因上存在母源的c.1126del(p.H376Tfs*56)和父源的c.1285G>C(p.E429Q)复合杂合变异。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)变异评级相关指南，位点c.1126del(p.H376Tfs*56)为致病性变异(PVS1+PM2_Supporting+PM4)，位点c.1285G>C(p.E429Q)为可能致病性变异(PM2_Supporting +PM3+PM4)。同时胎儿携带 PIGT基因c.1126del(p.H376Tfs*56)和c.1285G>C(p.E429Q)复合杂合变异，考虑胎儿患病可能性大，引产胎儿。 结论:PIGT基因c.1126del(p.H376Tfs*56)和c.1285G>C(p.E429Q)位点复合杂合变异考虑为MCAHS3患儿的遗传学病因，经产前诊断避免了此类患儿的出生。

目的:探讨通过腹腔注射氯化锂-匹罗卡品后颅内注射匹罗卡品、卡巴胆碱两种方式建立的伴认知障碍的耐药性癫痫模型大鼠在行为学、脑电图和认知功能方面的差异。方法:成年雄性SD大鼠160只，按随机数字表法选择10只作为正常对照组，50只腹腔注射氯化锂和匹罗卡品制备癫痫模型（氯化锂-匹罗卡品组），剩余100只腹腔注射氯化锂和匹罗卡品后按随机数字表法分为2组，每组50只，分别颅内注射匹罗卡品和卡巴胆碱制备癫痫模型（匹罗卡品-匹罗卡品组、匹罗卡品-卡巴胆碱组）。使用视频监控系统观察大鼠自发性癫痫发作（SRSs）次数及发作持续时间，2周后腹腔注射苯巴比妥和苯妥英钠进行耐药性筛选。采用BL-420生物信号采集处理系统记录各组大鼠脑电图波幅及癫痫波的频率。采用新事物识别实验检测大鼠对新事物的探索，采用Y迷宫自由探索实验和新异臂实验检测大鼠的空间识别记忆能力，采用Morris水迷宫实验检测大鼠的空间记忆能力。结果:（1）氯化锂-匹罗卡品组大鼠存活24只（48.00%），匹罗卡品-匹罗卡品组存活25只（78.00%），匹罗卡品-卡巴胆碱组存活21只（65.62%），最终分别筛选出耐药癫痫模型大鼠7、9、8只。视频监测显示匹罗卡品-匹罗卡品组和匹罗卡品-卡巴胆碱组大鼠SRSs发作次数、发作持续时间均高于氯化锂-匹罗卡品组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。（2）匹罗卡品-匹罗卡品组、匹罗卡品-卡巴胆碱组大鼠脑电图波幅均高于氯化锂-匹罗卡品组，氯化锂-匹罗卡品组、匹罗卡品-匹罗卡品组、匹罗卡品-卡巴胆碱组大鼠脑电图癫痫波出现频率逐渐增高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。（3）正常对照组、氯化锂-匹罗卡品组、匹罗卡品-匹罗卡品组、匹罗卡品-卡巴胆碱组大鼠的鉴别指数、正确率、新异臂移动距离/总移动距离、新异臂停留时间均逐渐降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与正常对照组比较，匹罗卡品-匹罗卡品组、匹罗卡品-卡巴胆碱组大鼠穿越原平台区域次数较少，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与正常对照组、氯化锂-匹罗卡品组、匹罗卡品-匹罗卡品组比较，匹罗卡品-卡巴胆碱组大鼠目标象限活动距离较短，差异均有统计学意义（ P<0.05）。正常对照组、氯化锂-匹罗卡品组、匹罗卡品-匹罗卡品组、匹罗卡品-卡巴胆碱组大鼠进入目标象限次数逐渐减少，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:通过腹腔注射氯化锂和匹罗卡品后颅内注射卡巴胆碱建立的耐药性癫痫模型大鼠存活率高，SRSs发作率高，认知功能损伤程度更重，更适合用于伴认知障碍的耐药性癫痫相关机制的研究。

目的:探讨黑色素瘤相关抗原D2(MAGED2)在胶质瘤患者外周血清和脑脊液中异常表达的临床意义。方法:收集2020年1月至2022年12月广西医科大学附属肿瘤医院病理确诊的58例胶质瘤患者的脑肿瘤标本作为观察组，20例非肿瘤患者标本来源于癫痫患者的病灶切除及周围脑组织作为对照组。采用蛋白印迹法和免疫组织化学法检测两组标本中MAGED2的表达水平。采集两组患者的血清和胶质瘤患者术后脑脊液，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测样品MAGED2表达水平，并比较两组MAGED2表达水平的差异；对两组血清及脑脊液MAGED2的表达程度与肿瘤级别及患者预后作相关性分析，不同预后参数采用Cox比例风险模型进行多因素分析。结果:蛋白印迹法检测发现，胶质母细胞瘤(1.07±0.27)、弥漫性星形细胞瘤(1.05±0.19)、间变性星形细胞瘤(0.83±0.06)和少突胶质细胞瘤(0.68±0.07)的MAGED2蛋白表达量均高于非肿瘤脑组织组(0.39±0.07)，差异有统计学意义( F＝45.88， P<0.01)。免疫组织化学检测MAGED2蛋白主要染色在细胞质和细胞核中。ELISA检测术前血清MAGED2表达水平，观察组[(1 051.20±129.33) pg/ml]高于对照组[(207.62±23.39) pg/ml， t＝17.22， P<0.01]。观察组术后血清MAGED2表达水平(556.40±59.77)低于术前(1 051.20±129.33， t＝14.67， P<0.01)。手术后患者血清MAGED2表达水平[(556.40±59.77) pg/ml]仍高于对照组水平[(207.6±23.39) pg/ml]，差异有统计学意义( t＝6.144， P<0.01)。MAGED2在观察组患者术前血清、术后血清和术后脑脊液的表达上，两两之间均互为正相关( r＝0.19、0.33、0.46， P<0.01)。乘积极限(Kaplan-Meier)法结果显示，MAGED2蛋白高表达组的中位总生存期(OS)低于低表达组(50.00周比250.00周， χ2＝22.13， P<0.001)；术前血清MAGED2高表达组中位OS低于低表达组(94.00周比212.00周， χ2＝12.45， P<0.001)；术后血清MAGED2高表达组中位OS低于低表达组(150.00周比233.00周， χ2＝4.34， P<0.05)；术后脑脊液MAGED2高表达组中位OS低于低表达组(132.00周比250.00周， χ2＝10.53， P<0.01)。Cox比例风险模型进行多因素分析显示，MAGED2为胶质瘤患者的独立预后因素[风险比( HR)＝0.578，95%可信区间( CI)：0.182~0.927， P<0.05]。 结论:MAGED2有望成为评估胶质瘤进展、病理级别和预后的体液生物学标志物。

目的:探讨1例儿童低镁血症、癫痫和智力障碍(HSMR)综合征患者的分子遗传学病因。方法:选取2021年7月9日因"反复抽搐2个月"收治于山东大学附属儿童医院的HSMR综合征患儿作为研究对象，并收集其临床资料。采集患儿及父母的外周血样，提取基因组DNA，应用全外显子组测序技术进行基因检测，确定候选变异位点，Sanger测序家系验证。应用生物信息学分析软件SWISS-MODEL对蛋白质结构模型进行预测。结果:患儿为男性，就诊时为1岁7月龄，临床表现为癫痫发作、全面性发育迟缓，血清学检测提示低血清镁。基因检测结果提示患儿 CNNM2基因存在c.1448delT (p.Val483GlyfsTer29)杂合变异，考虑为新发变异。该变异使 CNNM2基因第1 448位核苷酸T发生缺失，导致第483位氨基酸由缬氨酸变成甘氨酸，且下游第29位氨基酸变为终止密码子。SWISS-MODEL软件分析提示该变异位点导致蛋白结构发生改变，产生截短蛋白。根据美国医学遗传学与基因组学学会遗传变异与分类指南，c.1448del T (p.Val483GlyfsTer29)评级为致病性变异(PVS1+PS2+PM2_Supporting+PP4)。 结论:CNNM2基因c.1448delT杂合变异考虑为HSMR综合征患儿的致病原因，该变异的发现丰富了 CNNM2基因表型-基因型。

心搏骤停后缺氧缺血性脑损伤与高发病率和病死率相关，停止生命维持治疗（WLST）是其常见的死亡原因。因此，准确预测心搏骤停预后至关重要。欧洲重症监护医学会的指南提出了一种结合临床检查、电生理学、脑成像和血清生物标志物的多模态预测方法，主要侧重于预测不良结果。目前仍需要准确识别具有良好康复机会的患者，以减少不确定性，安抚患者家属，并有效分配资源。已经确定的心搏骤停后缺氧缺血性脑损伤预后良好的几个指标，包括连续反应性脑电图（EEG）无癫痫样特征、脑核磁共振成像（MRI）无弥散加权变化、格拉斯哥昏迷评分运动反应≥3分和正常水平的血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）。然而，这些指标往往是单独描述的，它们在预测有利结果方面的敏感度有限。预测良好预后相关指标需要高敏感度，以确保不会遗漏具有良好康复潜力的患者。现有的心搏骤停预后指南主要集中在预测不良结果，较少关注预测良好预后。最近有瑞士学者进行了一项队列研究，分析了成人心搏骤停后昏迷患者的治疗数据，旨在确定心搏骤停后良好预后的预测因子，并结合这些预测因子开发一个多模态模型。研究纳入患者均接受36 ℃的目标温度管理（TTM）24 h，并使用外部冷却设备和特定的药物干预。在TTM期间和常温条件下进行EEG记录，评估脑电背景、连续性、反应性癫痫样活动；收集神经系统检查、体感诱发电位（SSEP）、血清NSE水平和瞳孔测量数据。研究人员还收集了与心搏骤停相关的各种变量，包括自主循环的初始节律和恢复时间。分析每个变量对有利结果的预测性能，使用多变量有序逻辑回归、受试者工作特征曲线和交叉验证，创建一个多模态预后评分。评分包括6种模式，每种模式1分：早期EEG（12~36 h）非高度恶性；早期EEG背景反应性；晚期EEG（36~72 h）背景反应性和连续性；48 h内血清NSE峰值≤41 μg/L；72 h内全面反应性量表（FOUR评分）得分≥5分。评分≥4分（满分6分）的敏感度为97.5%，特异度为77.5%。评分的结果与外部队列验证结果一致。该研究提出了一种多模态评分，该评分结合了心搏骤停后72 h内可用的临床、EEG和生物标志物。评分显示在识别早期昏迷心搏骤停幸存者方面的高性能，这些幸存者将在3个月内达到功能独立。该评分的表现得到了外部验证，支持其在心搏骤停患者早期良好预后预测中的有效性。

目的:系统性对比慢性硬膜下血肿(CSDH)患者钻孔引流术中选择骨膜下引流(SPD)与硬膜下引流(SDD)的临床疗效。方法:系统检索PubMed、Embase、Cochrane Library、ClinicalTrials.gov、中国知网、万方、维普以及中国生物医学文献数据库中关于SPD与SDD治疗CSDH的相关文献，检索文献的发表日期截至2021年3月。SPD组与SDD组提取的主要结局指标为血肿复发，次要结局指标为脑实质损伤、颅内感染、死亡以及术后癫痫。采用Cochran Q检验和 I2值评估研究异质性，异质性程度较高采用随机效应模型合并效应值，否则采用固定效应模型合并效应值。采用漏斗图和Egger检验评估研究是否存在发表偏倚。 结果:最终纳入10篇文献(共3 345例次手术，SPD组为1 602例次，SDD组为1 743例次)，其中随机对照和非随机对照研究各2篇，队列研究6篇。Meta分析结果显示，SPD组与SDD组比较，血肿复发率( RR＝0.90，95% CI：0.65~1.26， P＝0.55)、颅内感染率( RR＝0.88，95% CI：0.47~1.65， P＝0.70)、病死率( RR＝0.85，95% CI：0.71~1.03， P＝0.10)以及术后癫痫发生率( RR＝0.91，95% CI：0.52~1.58， P＝0.73)的差异均无统计学意义；而SPD组脑实质损伤的发生率较SDD组降低( RR＝0.14，95% CI：0.05~0.40， P<0.01)。 结论:CSDH钻孔引流术中选择SPD较SDD的脑实质损伤风险更低，而血肿复发率、病死率相似。

目的:探讨度普利尤单抗治疗特应性皮炎（AD）的临床疗效及安全性。方法:通过双向性研究分析2020年7月至2022年3月于中南大学湘雅二医院皮肤科接受度普利尤单抗治疗的123例AD患者的临床资料，评估度普利尤单抗的疗效及安全性。主要指标为治疗前、治疗4、8、12、16周的患者湿疹面积和严重程度指数（EASI）、瘙痒峰值数字评定量表（NRS）、以患者为导向的湿疹测量评分（POEM）和皮肤病生活质量指数（DLQI）评分，同时记录不良反应及不良事件。治疗前后各评分的比较采用配对样本 t检验或重复测量资料的方差分析；不同类型皮损及不同IgE水平患者疗效比较采用Mann-Whitney U检验；采用基于稳健标准误的多元回归模型分析疗效的影响因素。 结果:123例AD患者中，107例纳入疗效分析，85例（79.44%）完成了至少4周治疗，其中6例（7.06%）达EASI75，23例（27.06%）达EASI50，EASI、NRS、POEM、DLQI评分（10.41 ± 6.72、4.12 ± 1.74、8.60 ± 4.29、7.81 ± 4.38）均显著低于治疗前（18.08 ± 10.69、7.21 ± 2.01、16.88 ± 5.74、12.95 ± 5.95），均 P < 0.001。共47例（43.93%）完成了至少16周治疗，28例成人患者中23例（82.14%）、19例青少年及儿童中17例（89.47%）达EASI75及以上；治疗4、8、12、16周EASI、NRS、POEM、DLQI评分与治疗前相比差异均有统计学意义（均 P < 0.001），且第4、8、12、16周各评分均显著低于前一相邻时间点（均 P < 0.05）。治疗4周时，伴结节性痒疹的AD患者EASI评分改善率显著低于不伴者（ U = 151.00， P = 0.006），而伴与不伴干皮症的AD患者间EASI评分改善率差异无统计学意义（ P > 0.05）；治疗16周时，不同类型皮损患者间EASI评分改善率差异无统计学意义（均 P > 0.05）。基于稳健标准误的多元回归分析显示，第16周时EASI改善程度与皮疹类型无关（ β = 3.20， P = 0.075），和年龄（ β = -0.22， P = 0.030）、成年与否（ β = 9.54， P = 0.049）、直系亲属家族史（ β = 7.46， P = 0.017）具有相关性；NRS评分改善程度与皮疹类型（ β = 0.55， P = 0.032）、年龄（ β = -0.04， P = 0.033）、体重（ β = -0.05， P = 0.020）、成年与否（ β = 2.06， P = 0.003）、是否合并使用抗组胺药物（ β = -1.91， P = 0.001）具有相关性。不良反应：123例患者中，6例（4.88%）发生结膜炎，2例（1.63%）出现面部红斑。不良事件：1例右前额出现白癜风样改变，3例分别因过敏性紫癜、双上肢周围神经远端轴索损害、癫痫停药，与度普利尤单抗的相关性不确定。 结论:度普利尤单抗治疗AD疗效显著，总体安全性好，可作为传统治疗欠满意患者的治疗新选择。

大多数抗癫痫药物不会改变癫痫的病程，基本上是“对症治疗”，即使有多种新型抗癫痫药物不断问世，仍有超过30%的患者发展为药物难治性癫痫。因此，寻找新的治疗靶点和开发有效的药物来预防或逆转癫痫发生和进展，是临床和临床前研究的重要目标。基于目前的研究现状，实现抗癫痫发作向抗癫痫发生、疾病修正治疗的转变，不仅需要标准化的动物模型、能够预测癫痫发生或进展的生物标志物，而且需要足够且广泛的受试者群体、严谨的设计方案和前沿的分析方法，使得临床前研究成功向临床转化。毫无疑问，未来以各种神经损伤途径作为靶点来实现癫痫的预防和疾病修正治疗，或可成为治疗及预防癫痫真正有效的手段。