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大发表的化学成分研究
编辑人员丨2024/6/15
目的 研究大发表Campylotropis trigonoclada干燥全株的化学成分.方法 利用HPD-100大孔吸附树脂、硅胶、反相RP-18、凝胶Sephadex LH-20、HPLC等色谱方法进行分离纯化,并运用MS、NMR等波谱方法鉴定化合物的结构.结果 从大发表中分离得到24个化合物,分别鉴定为(+)-儿茶酸(1)、芦丁(2)、槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷(3)、广寄生苷(4)、槲皮素-3-O-葡萄糖苷(5)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖苷(6)、木犀草素-7-O-β-龙胆二糖苷(7)、荭草素(8)、异牧荆素-2"-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、voilanthin(10)、染料木素(11)、bolusanthin Ⅲ(12)、二羟四氢黄酮-7-O-葡萄糖苷(13)、白皮杉醇4'-O-p-D-吡喃葡萄糖苷(14)、(Z)-虎杖苷(15)、二氢菜豆酸(16)、millettiaspecoside B(17)、七叶内酯(18)、交链孢酚(19)、邻苯二甲酸二丁酯(20)、邻苯二甲酸二辛酯(21)、2,4-二羟基-3,6-二甲基苯甲酸甲酯(22)、3,4-二羟基苯甲醛(23)和没食子酸乙酯(24).其中黄酮类化合物13个、二苯乙烯苷类化合物2个、倍半萜类化合物1个、苯酚苷类化合物1个、香豆素类化合物1个和其他芳香化合物6个.结论 除化合物11外,其余23个化合物均为首次从该属植物中分离得到.
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编辑人员丨2024/6/15
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土茯苓总苷中的非黄酮类化学成分研究
编辑人员丨2024/3/30
目的:研究土茯苓总苷中的非黄酮类化学成分.方法:采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶色谱及半制备液相色谱等分离技术,对土茯苓总苷中的化学成分进行分离纯化.结合理化性质,通过MS、NMR和CD等波谱数据鉴定化合物结构.结果:从土茯苓总苷中分离得到 28 个化合物,分别鉴定为:薯蓣皂苷元(1)、β-谷甾酮(2)、豆甾醇(3)、白藜芦醇(4)、咖啡酸(5)、5-O-咖啡酰莽草酸(6)、4-O-咖啡酰莽草酸(7)、3-O-咖啡酰莽草酸(8)、反式肉桂酸(9)、蝉翼藤糖酯 A(10)、华中冬青素(11)、(+)-南烛木树脂酚(12)、肉桂酸乙酯(13)、毛色二孢素(14)、糙叶败酱碱(15)、金色酰胺醇酯(16)、交链孢酚(17)、没食子酸(18)、豆甾-4-烯-3,6-二酮(19)、异细交链孢素(20)、3,4-二甲氧基咖啡酸(21)、thunberginol C(22)、3,5-二羟基香豆素-7-O-α-L-鼠李糖苷(23)、白皮杉醇(24)、原儿茶酸(25)、莽草酸甲酯(26)、甲基岩藻糖苷(27)、8-甲氧基蜂蜜曲菌素(28).结论:其中,化合物 15~17、19、20、22、23 和 28 为首次从菝葜属植物中分离得到,化合物 2、11、21 和 27 为首次从该植物中分离得到.
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编辑人员丨2024/3/30
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白皮杉醇对糖尿病肾病肾小管间质纤维化、肾小管凋亡及FoxO1表达的影响
编辑人员丨2023/9/16
目的 探究白皮杉醇(Pic)对糖尿病肾病(DN)肾小管间质纤维化、肾小管凋亡的影响及潜在机制.方法 选择雄性C57BL/6 小鼠40 只,随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、Pic低剂量(Low-Pic)组、Pic中剂量(Mid-Pic)组及Pic高剂量(High-Pic)组各8 只.除Control组外,其他组进行高糖高脂饮食,并配合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导构建DN小鼠模型.Low-Pic、Mid-Pic及High-Pic组DN造模成功后,分别给予Pic 10、20 及40 mg/kg灌胃2 w,Control组及Model组给予等量生理盐水灌胃.留取血清及肾脏组织,检测小鼠空腹血糖、血清肌酐、尿素氮及 24h尿总蛋白;采用Western印迹测定肾脏组织蛋白表达.体外培养人肾小管上皮细胞株(HK)-2,随机分为Control组、Model组、Low-Pic组、Mid-Pic组及High-Pic组.除Control组外,使用30 mmol/L D-葡萄糖对其他组处理72 h,对Low-Pic组、Mid-Pic组及High-Pic组分别给予Pic 10、20及40 μmol/L处理24 h,采用Western印迹测定细胞蛋白表达.结果 Model组空腹血糖、血清肌酐、尿素氮及24h尿蛋白总量显著高于Control组,Low-Pic、Mid-Pic、High-Pic组可呈显著剂量依赖性逆转(均P<0.05).在HK-2 细胞系中,与Control组相比,Model组细胞纤维化相关蛋白E-钙黏附蛋白(cadherin)表达降低,α-SMA表达升高,促凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3 及Bax表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05),而Low-Pic、Mid-Pic、High-Pic组可逆转上述变化,且呈显著剂量依赖性(均P<0.05).此外,Pic各组沉默调节蛋白(Sirt)1 和磷酸化叉头框蛋白(Fox)O1 蛋白表达水平均显著高于Model组,且随着Pic浓度升高,效果越明显(均P<0.05).结论 Pic可减轻DN引起的肾功能损伤,并抑制肾小管纤维化及凋亡,其发挥保护性作用可能是通过调节Sirt1/FoxO1 活化实现.
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编辑人员丨2023/9/16
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白皮杉醇扼制急性髓系白血病细胞恶性生物学特性的机制研究
编辑人员丨2023/9/16
目的:探讨白皮杉醇对急性髓系白血病(AML)细胞恶性生物学特性的影响及其分子机制.方法:使用不同浓度白皮杉醇干预HL60、U937及HL60/ADR、U937/ADR细胞,CCK-8法检测细胞增殖;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡、自噬及相关信号通路蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测耐药株中各耐药基因的表达变化.结果:白皮杉醇可抑制HL60、U937细胞活性,并诱导其凋亡.当白皮杉醇干预AML细胞24 h后,自噬标记物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值随药物浓度增加而升高(r=0.672,r=0.549),当白皮杉醇干预48 h后,可下调AML细胞中Bcl-2蛋白的表达并水解活化caspase-3,同时抑制Akt/NF-κB信号通路活化水平以诱发AML细胞程序性死亡.白皮杉醇干预AML耐药株后亦可下调MRP1的表达,能逐渐削弱白血病耐药株的化疗抗性,但对BCRP表达的影响微弱,对MDR1 基本无影响.结论:白皮杉醇能抑制AML细胞的增殖活性,并诱导其发生程序性死亡,其机制可能与抑制Akt/NF-kB信号通路激活、水解活化caspase-3并下调Bcl-2蛋白表达以及使部分耐药基因表达受抑等有关.
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编辑人员丨2023/9/16
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白皮杉醇调控miR-106b-5p/RUNX3轴对宫颈癌细胞迁移及侵袭的影响
编辑人员丨2023/8/26
目的 探究白皮杉醇(PIC)调控微小RNA-106b-5p(miR-106b-5p)/RUNT相关转录因子3(RUNX3)轴对宫颈癌(CC)细胞迁移及侵袭的影响.方法 使用不同浓度PIC(0、20、40、80和160μmol/L)培养液处理人CC Hela细胞,通过CCK-8法检测PIC对细胞增殖活力的影响,以确定PIC最佳使用浓度.将Hela细胞分为Control组、PIC组、PIC+NC mimics组、PIC+miR-106b-5p mimics组、NC inhibitor组、miR-106b-5p inhibitor组、miR-106b-5p inhibitor+si-RNA组及miR-106b-5p inhibitor+si-RUNX3组.实时荧光定量PCR检测各组Hela细胞miR-106b-5p表达水平;Transwell法检测各组Hela细胞迁移及侵袭能力;Western blot法检测各组Hela细胞中RUNX3、基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9蛋白表达水平;双萤光素酶报告基因实验检测miR-106b-5p与RUNX3靶向关系.结果 Hela细胞增殖活力随着PIC处理浓度的增高而呈现降低趋势(P<0.05),其中80μmol/L PIC对Hela细胞的抑制作用接近半数抑制浓度(IC50),故选择80μmol/L为后续研究的PIC浓度.与Control组相比,PIC组miR-106b-5p、MMP2和MMP9表达水平均降低,迁移和侵袭细胞数量减少,RUNX3表达水平增加(P<0.05);与PIC+NC mimics组相比,PIC+miR-106b-5p mimics组miR-106b-5p、MMP2和MMP9表达水平增加,迁移和侵袭细胞数量增多,RUNX3表达水平降低(P<0.05).双萤光素酶报告基因实验证实RUNX3为miR-106b-5p的靶基因.与NC inhibitor组相比,miR-106b-5p inhibitor组RUNX3表达水平增加,miR-106b-5p、MMP2与MMP9表达水平降低,迁移和侵袭细胞数量减少(P<0.05);与miR-106b-5p inhibitor+si-RNA组相比,miR-106b-5p inhibitor+si-RUNX3组RUNX3表达水平降低,miR-106b-5p、MMP2和MMP9表达水平增加,迁移和侵袭细胞数量增多(P<0.05).结论 PIC通过抑制miR-106b-5p表达、促进RUNX3表达来抑制CC细胞迁移及侵袭.
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编辑人员丨2023/8/26
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白皮杉醇调节JAK2/STAT3信号通路对胆囊癌细胞恶性生物学行为的影响
编辑人员丨2023/8/26
目的 探讨白皮杉醇(PIC)基于酪氨酸激酶 2/信号转导和转录激活因子 3(JAK2/STAT3)信号通路对于胆囊癌细胞恶性生物学行为的影响.方法 CCK-8法检测不同浓度PIC对胆囊癌GBC-SD细胞活性的影响.将细胞分为对照组(control组)、白皮杉醇低剂量组(PIC-L组,10 μmol/L)、白皮杉醇中剂量组(PIC-M组,20 μmol/L)、白皮杉醇高剂量组(PIC-H组,40 μmol/L)、阳性对照组(吉西他滨,4 mg/L),结晶紫染色观察细胞平板克隆能力;划痕实验和Transwell实验检测GBC-SD细胞迁移和侵袭能力;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测检测凋亡、迁移侵袭及JAK2/STAT3 信号通路蛋白表达.结果 选择PIC浓度 10、20、40 μmol/L进行后续实验.与control组比较,PIC-L、PIC-M、PIC-H组及吉西他滨组GBC-SD细胞的克隆形成数、迁移侵袭能力、MMP-2、MMP-9 蛋白表达、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3 比值均显著下降(P<0.05);细胞凋亡率及凋亡蛋白(c-caspase-3、c-caspase-9)表达显著上升(P<0.05).结论 白皮杉醇可抑制胆囊癌GBC-SD细胞增殖、迁移和侵袭,诱导胆囊癌细胞GBC-SD凋亡,可能通过抑制JAK2/STAT3 信号通路实现.
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编辑人员丨2023/8/26
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HPLC-TOF-MS分析桃金娘不同部位的化学成分
编辑人员丨2023/8/6
目的 比较分析民族药用植物桃金娘Rhodomyrtus tomentosa的叶、枝和果实的特征性化学成分,并对其果实开展化学成分研究.方法 采用高效液相色谱-飞行时间质谱(HPLC-TOF-MS)分析,结合主成分分析(PCA)和偏最小方差判别分析(OPLS-DA)获得不同部位差异性成分.通过正相硅胶、凝胶(Sephedex LH-20)以及循环制备高效液相(RE-HPLC)等多种色谱手段对桃金娘果实成分进行分离纯化,根据波谱数据对化合物结构进行鉴定.结果 PCA分析显示桃金娘叶中的成分单独成为一支,枝、果两部分合为一支(枝、果两部分存在重合),说明叶的化学成分同枝、果两部分存在较大差异,而枝和果两部分成分差异不大.利用OPLS-DA分析、色谱峰保留时间、精确相对分子质量、元素组成分析检索以及文献比对,从叶中鉴定出4个标识性化合物,分别为杨梅苷(1)、杨梅素-3-O-L-呋喃阿拉伯糖苷(2)、鸢尾苷(3)和3,3'-二去甲基-9-羰基-松脂醇(4);并从桃金娘果实中分离了5个化合物,分别鉴定为maslinic acid (5)、没食子酸乙酯(6)、没食子酸(7)、白藜芦醇(8)和白皮杉醇(9).结论 为桃金娘不同部位差异性成分的识别提供了新方法,同时也为研究同种生物不同部位所具有不同药理活性的差异成分提供新的思路.
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编辑人员丨2023/8/6
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白皮杉醇对急性脑出血大鼠的保护作用及其机制
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究白皮杉醇对急性脑出血大鼠脑组织保护作用,并探讨其作用机制.方法 采用向脑组织注入自体动脉血建立急性脑出血大鼠模型,分别给予高剂量(Pic-H)、低剂量(Pic-L)白皮杉醇(200和100 mg/kg),对各组大鼠进行神经功能缺损评分,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量,原位末端标记法(TUNEL)染色检测脑细胞凋亡数,免疫印迹法(Western blot)检测脑组织中磷酸化c-Jun氨基末端激酶3(p-JNK3)、磷酸化c-Jun(p-c-Jun)和磷酸化转录激活因子2(p-ATF-2)蛋白表达.结果 给予白皮杉醇后,与模型组相比,大鼠的神经功能缺损评分[Pic-L组(1.32±0.24)比(2.89±0.41),Pic-H组(0.98±0.21)比(2.89±0.41)]降低;大鼠血清中NSE的水平[Pic-L组(29.25±2.63)比(38.02±3.35) μg/L,Pic-H组(26.11±2.29)比(38.02±3.35)μg/L]降低;大鼠脑组织TUNEL阳性细胞百分比[Pic-L组(36.78±4.66)%比(62.34±6.24)%,Pic-H组(17.32±2.36)%比(62.34±6.24)%]减少;大鼠脑组织中p-JNK3蛋白表达[Pic-L组(2.67±0.21)比(4.97±0.34),Pic-H组(1.84±0.21)比(4.97±0.34)]降低;p-c-Jun蛋白表达[Pic-L组(2.17±0.19)比(3.38±0.31),Pic-H组(1.78±0.15)比(3.38±0.31)]降低;p-ATF-2蛋白表达[Pic-L组(1.79±0.13)比(2.99±0.27),Pic-H组(1.43±0.12)比(2.99±0.27)]降低;差异有统计学意义(均P<0.05).结论 白皮杉醇可能通过抑制JNK信号通路来减缓急性脑出血大鼠脑组织细胞的凋亡.
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编辑人员丨2023/8/6
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白皮杉醇增强顺铂杀伤喉癌Hep-2细胞的作用及其机制
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨白皮杉醇增强顺铂对喉癌细胞的杀伤作用及其分子机制.方法 体外培养喉癌细胞Hep-2,联合使用白皮杉醇及顺铂,CCK8法检测喉癌Hep-2细胞的增殖能力,流式细胞术检测喉癌Hep-2细胞的凋亡率,Hoechst染色检测喉癌Hep-2细胞中细胞核固缩比例,蛋白印迹法检测BCL-2家族蛋白表达变化.结果 白皮杉醇在50 μmol/L时对喉癌Hep-2细胞的增殖凋亡并无显著影响.与顺铂组相比,白皮杉醇联合顺铂组细胞的增殖能力显著降低,48 h细胞吸光度值白皮杉醇联合顺铂组较顺铂组降低60%,流式细胞术检测发现48 h时,白皮杉醇联合顺铂组喉癌Hep-2细胞的凋亡率显著高于顺铂组(P<0.05),Hoechst染色发现白皮杉醇联合顺铂组喉癌Hep-2细胞的细胞核固缩比例显著增高,差异有统计学意义.蛋白印迹检测发现,白皮杉醇可以显著下调BCL-2蛋白表达水平,上调BAX蛋白表达水平.结论 白皮杉醇可以有效增强顺铂对喉癌细胞的杀伤作用,其分子机制与白皮杉醇可以显著调控BCL-2家族蛋白表达有关.
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编辑人员丨2023/8/6
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白假丝酵母激活的巨噬细胞自噬促进MHCⅡ抗原提呈
编辑人员丨2023/8/6
目的 探究白假丝酵母 (Candida albicans) 激活的Raw264.7细胞自噬在主要组织相容性复合体Ⅱ类分子 (MHCⅡ) 抗原提呈以及协同刺激分子表达中的作用.方法 C.albicans刺激Dectin-1单克隆抗体封闭或白皮杉醇阻断的Raw264.7细胞, Western blot法检测LC3Ⅱ表达量, RT-PCR检测CD80与CD86的表达.免疫荧光实验观察有无3-MA预处理的GFP-LC3-Raw264.7细胞与C.albicans共孵育后MHCⅡ与LC3在胞浆的分布, ELISA法检测有无封闭Dectin-1或3-MA预处理的Raw264.7细胞与C.albicans共孵育不同时间段后IL-6的分泌.结果 阻断Dectin-1或Sky后C.albicans诱导的LC3Ⅱ表达降低.LC3、MHCⅡ与胞内C.albicans存在显著的共定位关系, 阻断自噬后C.albicans与MHCⅡ的共定位明显减弱.C.albicans引发Raw264.7细胞表达CD80与CD86mRNA, 封闭Dectin-1或阻断自噬后二者转录水平降低.C.albicans通过Dectin-1引发Raw264.7细胞分泌IL-6, 阻断自噬对IL-6分泌无显著影响.结论 C.albicans通过Dectin-1/Sky通路激活巨噬细胞自噬, 自噬体的构建促进MHCⅡ招募至胞内C.albicans, 并促进协同刺激分子的表达.
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编辑人员丨2023/8/6
