目的:优选盐菟丝子最佳炮制工艺,并测定不同产地盐菟丝子中总黄酮与金丝桃苷含量,为后期临床应用提供参考依据.方法:采用紫外分光光度(UV)法与高效液相色谱(HPLC)法测定盐菟丝子总黄酮和金丝桃苷含量,通过熵权法计算其熵权值以计算其综合评分.采用三因素三水平法,考察炒制温度、炒制时间和氯化钠溶液质量分数3个因素,确定盐菟丝子最佳炮制工艺参数.用优选出的最佳工艺参数炮制12批不同产地菟丝子,进行含量测定,完善盐菟丝子质量标准研究.结果:盐菟丝子最优炮制工艺为1％氯化钠溶液浸泡2h,100～110 ℃炒制15 min.用预测得出的最佳工艺条件平行试验3次,实际测得平均综合评分为93.57,与理论预测值96.61相对误差为3.14％,与响应面分析预测值接近.12批菟丝子经过炮制后总黄酮含量增加,金丝桃苷含量减少.盐炙品总黄酮含量在27.23～41.26 mg/g之间,金丝桃苷含量在2.72～3.49 mg/g之间.结论:Box-Behnken Design响应面优化盐菟丝子炮制工艺可靠稳定,具有实用价值.盐菟丝子总黄酮含量高于生品,金丝桃苷含量低于生品,建议在盐菟丝子质量标准中加入总黄酮作为含量测定指标.

目的 观察菟丝子乙醇提取物灌胃对大鼠绝经后骨质疏松症的改善作用并探讨其机制.方法 雌性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组,每组10只.除正常组、假手术组外,各组均采用双侧去卵巢手术建立大鼠绝经后骨质疏松症模型;假手术组在暴露卵巢后切除卵巢周围脂肪组织,不切除卵巢;正常组正常喂养不做任何处理.于建模后两周起开始给药,菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组分别按0.7 g/kg、1.4 g/kg给予菟丝子乙醇提取物灌胃,雌激素对照组给予非甾体雌激素己烯雌酚灌胃,正常组、假手术组及模型组给予等容积生理盐水灌胃,连续给药12周.采用双能X线检测大鼠股骨骨密度,HE染色观察股骨组织病理形态,RT-PCR法检测股骨组织miR-21-5p,Western blotting法检测股骨组织Fas配体(FasL)蛋白.结果 模型组股骨骨密度小于正常组、假手术组,雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组股骨骨密度大于模型组(P均<0.05).正常组及假手术组骨皮质骨膜及骨内膜光滑,骨小梁形态粗细基本一致,皮质区仅出现轻微的松质骨改变;模型组骨小梁明显变薄,间隔增宽,互不相连,排列不齐,皮质区出现严重的松质骨改变;雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组骨小梁间距较模型组均有不同程度的减小,且皮质区松质骨改变变轻.模型组股骨组织miR-21-5p表达高于正常组、假手术组,雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组miR-21-5p表达低于模型组(P均<0.05).模型组股骨组织FasL蛋白表达低于正常组、假手术组,雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组FasL蛋白表达高于模型组(P均<0.05).结论 菟丝子乙醇提取物灌胃对大鼠绝经后骨质疏松症具有改善作用,其机制可能与调控miR-21-5p及其下游蛋白FasL有关.

目的 挖掘道家医方渊源、分类、功效主治、用药特点,为辨治疑难疾病提供借鉴.方法 统计宋代《云笈七签》、明代《正统道藏》、清代《道藏輯要》、民国《道藏精华》、现代《道家医方》收载的 715 首道家医方,对方剂出处渊源、八卦分类、方药剂型、功能主治、药物类别、使用频率等进行统计分析.结果 方剂来源于《肘后备急方》《三品颐神保命神丹》《清宫秘方大全》等 57 部医籍,晋、唐、明、清代收载较多,分为补益剂、清热剂、理血剂等 17 类,剂型为汤、散、丸等 15 种;方剂命名除常用的"主药+剂型"等形式外,经常采用"古代神仙名+剂型""太极八卦+剂型""道教名山+剂型""四方神名+剂型"等 10 种形式;方剂组成药味数在 20 味以内的占比 95.32%,药味数在 10 味以内的占比 67.85%,最多 30 味,最少单味;送服物主要为酒、姜汤、醋汤、盐汤等 24 种;涉及 475味药,包括植物药 366 味、动物药 56 味、矿物药 35 味等;使用频次前十的药味依次为茯苓、甘草、生地、人参、当归、熟地、牛膝、肉苁蓉、菟丝子、肉桂;主要治疗传染瘟疫、中风胸痹、遗精阳痿等证.结论 道家医方来源广泛,剂型丰富,种类繁多,在辨治疑难杂症、养生延年等方面具有颇具特色,值得挖掘开发.

目的:建立菟丝子生品与盐炙品HPLC指纹图谱,结合化学模式识别方法评价菟丝子和盐菟丝子质量,分析炮制前后化学成分差异.方法:采用HPLC法建立菟丝子及其盐炙品指纹图谱,利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012 版)"和SPSS 26.0 软件进行相似度评价、聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA).结果:菟丝子盐炙后的相似度均≥0.930,生品和盐炙品均标定了 16 个共有峰,指认其中 9个成分.菟丝子盐炙后,1～11、14、16 号共有峰响应值有不同程度的增加,其中色谱峰 11 响应值显著增加.CA分析结果显示,菟丝子生品可分为 4 类;PCA确定 4 个主成分因子,累计方差贡献率为 85.801%,色谱峰 3、5、7、12、13号对菟丝子炮制前后化学成分差异变化的贡献率较大.结论:建立的指纹图谱可作为区分菟丝子及其盐炙品的有效手段,结合化学模式识别评价菟丝子盐炙前后整体质量,可为其炮制机制研究提供依据.

目的 建立菟丝子提取物的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,分析其与抗氧化活性的谱效关系.方法 采用UPLC法测定11批菟丝子提取物的指纹图谱,以1,1-二苯基-2-苦基肼自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐法测定菟丝子体外抗氧化活性,结合正交偏最小二乘法(OPLS)以及灰色关联度法分析指纹图谱与抗氧化活性的关联度,筛选出对抗氧化活性贡献较大的关键物质.结果 菟丝子提取物相似度均在0.97以上,共有21个共有峰,通过与对照品对比,指认了 10个峰,其中峰5为新绿原酸,峰8为绿原酸,峰9为隐绿原酸,峰10为咖啡酸,峰12为对香豆酸,峰15为金丝桃苷,峰16为异槲皮苷,峰17为紫云英苷,峰20为槲皮素,峰21为山奈素.灰色关联度以及OPLS结果表明,峰8、15、16、18与抗氧化活性呈现正相关,为主要药效成分.结论 菟丝子抗氧化活性是多组分联合效应的结果,通过指纹图谱与抗氧化谱效分析,可为后面菟丝子的进一步研究提供数据参考.

目的 探讨菟丝子黄酮基于Wnt/β-catenin信号通路干预去卵巢大鼠骨代谢的作用机制.方法 将100只健康大鼠随机分为假手术组、模型组、实验组(菟丝子黄酮高剂量组、中剂量组及低剂量组),每组20只.模型组和实验组在输卵管壶腹处进行结扎,然后切除两侧卵巢;假手术组仅行开腹手术.实验组给予相应剂量的菟丝子黄酮混悬液灌胃,假手术组和模型组给予等量的生理盐水灌胃.12周造模结束后,处死大鼠并取材.测定五组大鼠全身、右侧股骨近端2 cm和4～6腰椎骨的骨密度及血清 β-链蛋白(β-catenin)、骨保护素(OPG)、细胞因子Kb受体活化因子配体(RANKL)、DKK1水平.分析血清 β-catenin水平与OPG、RANKL的相关性.结果 假手术组,高、中、低菟丝子黄酮剂量实验组在全身、股骨近端2 cm及4～6腰椎骨密度上均高于模型组(P<0.05);假手术组、高中低菟丝子黄酮剂量实验组的血清 β-catenin、OPG水平高于模型组(P<0.05),假手术组、高中低菟丝子黄酮剂量实验组的血清RANKL、DKK1水平低于模型组(P<0.05);高、中、低菟丝子黄酮剂量实验组的血清 β-catenin水平均与OPG水平呈正相关(P<0.05),与RANKL、DKK1水平呈负相关(P<0.05).结论 菟丝子黄酮能够调节去卵巢大鼠Wnt/β-catenin信号通路相关因子β-catenin、OPG、RANKL、DKK1的水平,从而增加骨密度,改善骨质疏松症状.

目的 研究盐菟丝子较佳的微波炮制工艺.方法 采用正交设计法,以黄酮含量为指标,探究微波强度、炮制时间、盐用量对菟丝子盐制工艺的影响.以芦丁作为对照品,采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法,测定盐菟丝子总黄酮含量.结果 盐菟丝子较佳的微波炮制工艺条件是:盐用量为药材3％,盐水闷润2h后于微波炉内中火炮制3min,得到炮制品,干燥处理.结论 该法简单易行,条件可控,可作为盐菟丝子的炮制方法之一.

目的:考察食盐和加热两个因素对菟丝子盐炙方法的影响,为进一步探究菟丝子盐炙的作用机制提供理论依据.方法:采用方差分析法对菟丝子不同炮制品中总黄酮、总多糖、金丝桃苷、槲皮素的含量变化进行比较.结果:菟丝子5种炮制品间各化学成分含量均有显著性差异(P＜0.0001),菟丝子加入食盐或加热后总黄酮、总多糖、槲皮素含量明显升高.结论:食盐和加热两个因素对菟丝子盐炙方法均有影响.

目的 观察菟丝子黄酮对大鼠激素型骨质疏松症的影响,并初步探讨其作用机制.方法 将40只SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组、西药组,每组10只.除假手术组外,其余组均采用双侧切除大鼠卵巢法制备骨质疏松模型.手术4周后,西药组大鼠每天灌胃给予己烯雌酚30 μg/kg,中药组大鼠每天灌胃给予菟丝子黄酮0.1 g/kg,假手术组和模型组灌胃给予等量生理盐水,均连续灌胃12周.12周后,测量各组大鼠骨物理生长指标及骨密度,比色法检测各组大鼠血清钙(Ca)、磷(P)及碱性磷酸酶(ALP)水平,Western Blot法检测各组大鼠股骨骨保护素(OPG)及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达水平.结果 与假手术组比较,模型组大鼠骨质量指数、骨密度均明显降低(P均＜0.05),血清Ca水平明显升高(P＜0.05),股骨中Bax蛋白表达水平明显上调而Bcl-2、OPG蛋白表达水平明显下调(P均＜0.05);与模型组比较,中药组大鼠骨质量指数、骨密度及血清Ca、ALP水平均明显升高(P均＜0.05),股骨中Bax蛋白表达水平明显下调而Bcl-2、OPG蛋白表达水平明显上调(P均＜0.05).结论 菟丝子黄酮对大鼠激素型骨质疏松症具有很好的骨保护作用,该作用可能与其抑制成骨细胞凋亡有关.

目的 观察补肾健脾化瘀中药提取物对难治/复发再生障碍性贫血(AA)患者骨髓单个核细胞集落形成的影响.方法 选择15例难治/复发AA患者,采集患者骨髓液,提取骨髓单个核细胞,将其分为补肾健脾化瘀中药组、雷帕霉素组、空白对照组.将细胞置于红系祖细胞红系集落形成单位(CFU-E)、爆式红系集落形成单位(BFU-E)、粒细胞巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM)常规培养体系中培养,雷帕霉素组加入终浓度25nmol/L的雷帕霉素;补肾健脾化瘀中药组加入当归多糖、淫羊藿苷、巴戟天多糖、黄芪多糖、三七总皂苷、黄精多糖各100μg/mL,菟丝子黄酮、人参二醇各50 μg/mL;空白对照组加入生理盐水.10 d后计数各组CFU-E、BFU-E、CFU-GM数量.结果 与空白对照组比较,雷帕霉素组、补肾健脾化瘀中药组CFU-E、BFU-E、CFU-GM数量均增加(P均＜0.01),雷帕霉素组与补肾健脾化瘀中药组比较差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 补肾健脾化瘀中药提取物可增加难治/复发再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞的集落形成,促进骨髓单个核细胞的增殖.