目的 观察菟丝子乙醇提取物灌胃对大鼠绝经后骨质疏松症的改善作用并探讨其机制.方法 雌性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组,每组10只.除正常组、假手术组外,各组均采用双侧去卵巢手术建立大鼠绝经后骨质疏松症模型;假手术组在暴露卵巢后切除卵巢周围脂肪组织,不切除卵巢;正常组正常喂养不做任何处理.于建模后两周起开始给药,菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组分别按0.7 g/kg、1.4 g/kg给予菟丝子乙醇提取物灌胃,雌激素对照组给予非甾体雌激素己烯雌酚灌胃,正常组、假手术组及模型组给予等容积生理盐水灌胃,连续给药12周.采用双能X线检测大鼠股骨骨密度,HE染色观察股骨组织病理形态,RT-PCR法检测股骨组织miR-21-5p,Western blotting法检测股骨组织Fas配体(FasL)蛋白.结果 模型组股骨骨密度小于正常组、假手术组,雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组股骨骨密度大于模型组(P均<0.05).正常组及假手术组骨皮质骨膜及骨内膜光滑,骨小梁形态粗细基本一致,皮质区仅出现轻微的松质骨改变;模型组骨小梁明显变薄,间隔增宽,互不相连,排列不齐,皮质区出现严重的松质骨改变;雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组骨小梁间距较模型组均有不同程度的减小,且皮质区松质骨改变变轻.模型组股骨组织miR-21-5p表达高于正常组、假手术组,雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组miR-21-5p表达低于模型组(P均<0.05).模型组股骨组织FasL蛋白表达低于正常组、假手术组,雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组FasL蛋白表达高于模型组(P均<0.05).结论 菟丝子乙醇提取物灌胃对大鼠绝经后骨质疏松症具有改善作用,其机制可能与调控miR-21-5p及其下游蛋白FasL有关.

目的 建立菟丝子提取物的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,分析其与抗氧化活性的谱效关系.方法 采用UPLC法测定11批菟丝子提取物的指纹图谱,以1,1-二苯基-2-苦基肼自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐法测定菟丝子体外抗氧化活性,结合正交偏最小二乘法(OPLS)以及灰色关联度法分析指纹图谱与抗氧化活性的关联度,筛选出对抗氧化活性贡献较大的关键物质.结果 菟丝子提取物相似度均在0.97以上,共有21个共有峰,通过与对照品对比,指认了 10个峰,其中峰5为新绿原酸,峰8为绿原酸,峰9为隐绿原酸,峰10为咖啡酸,峰12为对香豆酸,峰15为金丝桃苷,峰16为异槲皮苷,峰17为紫云英苷,峰20为槲皮素,峰21为山奈素.灰色关联度以及OPLS结果表明,峰8、15、16、18与抗氧化活性呈现正相关,为主要药效成分.结论 菟丝子抗氧化活性是多组分联合效应的结果,通过指纹图谱与抗氧化谱效分析,可为后面菟丝子的进一步研究提供数据参考.

菟丝子是旋花科植物南方菟丝子或菟丝子的干燥成熟种子,具有补肾固精、明目安胎等功效,被《神农本草经》列为上品,黄酮类为其主要有效成分.现有研究通过动物实验与网络药理学方法,从保护生殖系统、防治骨质疏松、调节免疫、抗衰老、抗肿瘤等多个角度对菟丝子的药理机制进行了探讨,并取得了较大进展,但关于菟丝子的临床应用研究还比较欠缺.本文对近 10年来菟丝子及其提取物的相关药理机制的研究进行了梳理总结,以期理清研究趋势、揭示研究意义、启发研究思路,同时为菟丝子的进一步研究及临床应用提供借鉴与参考.

目的 探讨补肾活血汤(熟地黄、菟丝子、补骨脂,等)石油醚提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的迁移作用及相关机制.方法 全骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,细胞划痕、Transwell实验观察补肾活血汤石油醚提取物0、25、50、100、200μg/mL剂量组的细胞迁移能力,Western blot和RT-PCR检测Wnt5a、蛋白激酶C(PKC)表达情况.结果 第3代BMSCs表面抗原CD29、CD90、CD44表达阳性,而CD45表达阴性;细胞划痕6h及12h后,药物各剂量组细胞迁移速度明显高于空白组(P＜0.05,P ＜0.01);Transwell实验中100 μg/mL补肾活血汤石油醚提取物为促细胞迁移最佳剂量,差异有统计学意义(P＜0.01);RT-PCR结果显示与空白对照组比较,药物各剂量组的Wnt5a mRNA水平均升高(P＜O.05,P＜0.01),而与空白对照组的PKC mRNA水平比较,药物只有100μg/mL剂量mRNA表达水平升高(P＜0.01);Western blot结果表明药物组各剂量的Wnt5a、PKC蛋白表达较空白对照组都明显升高(P＜0.01),均且以100 μg/mL剂量最高(P＜0.01).结论 补肾活血汤石油醚提取物可以促进BMSCs体外迁移,其作用机制可能与Wnt5a/PKC信号通路有关.

目的 观察补肾健脾化瘀中药提取物对难治/复发再生障碍性贫血(AA)患者骨髓单个核细胞集落形成的影响.方法 选择15例难治/复发AA患者,采集患者骨髓液,提取骨髓单个核细胞,将其分为补肾健脾化瘀中药组、雷帕霉素组、空白对照组.将细胞置于红系祖细胞红系集落形成单位(CFU-E)、爆式红系集落形成单位(BFU-E)、粒细胞巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM)常规培养体系中培养,雷帕霉素组加入终浓度25nmol/L的雷帕霉素;补肾健脾化瘀中药组加入当归多糖、淫羊藿苷、巴戟天多糖、黄芪多糖、三七总皂苷、黄精多糖各100μg/mL,菟丝子黄酮、人参二醇各50 μg/mL;空白对照组加入生理盐水.10 d后计数各组CFU-E、BFU-E、CFU-GM数量.结果 与空白对照组比较,雷帕霉素组、补肾健脾化瘀中药组CFU-E、BFU-E、CFU-GM数量均增加(P均＜0.01),雷帕霉素组与补肾健脾化瘀中药组比较差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 补肾健脾化瘀中药提取物可增加难治/复发再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞的集落形成,促进骨髓单个核细胞的增殖.

目的:研究中药菟丝子对MC3T3-E1细胞促增殖作用及其可能的作用机制.方法:体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,通过MTT法检测菟丝子提取物对细胞增殖的影响,通过相关试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性和钙盐沉积水平,Western Blot检测Ⅰ型胶原蛋白、BMP2和Smad4蛋白表达.结果:菟丝子提取物能够促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖,提高ALP活性和钙盐沉积,并上调Col-Ⅰ、BMP2和Smad4蛋白表达(P＜0.05),菟丝子提取物浓度在10μg/mL时促进作用较明显.结论:菟丝子提取物能够促进成骨细胞增殖,其作用机制可能与调节BMP2/Smad4信号通路有关.

目的 建立蒽酮-硫酸法测定复方木鸡颗粒(云芝提取物、核桃楸皮、山豆根、菟丝子)中粗多糖的含有量.方法 以葡萄糖为对照品,在626 nm波长处测定粗多糖含有量.结果 葡萄糖在10～ 60 μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=O.999 1),平均加样回收率为98.1％,RSD为2.6％.结论 该方法简便稳定,可控性强,重复性好,可用于复方木鸡颗粒的质量控制.

目的 初步筛选黑龙江产小粒菟丝子雌激素样作用的质量标志物,为后续实验研究及质量控制提供参考依据.方法 采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOFMS/MS)技术对菟丝子提取物进行定性分析,并建立菟丝子不同极性部位的指纹图谱.以小鼠子宫系数、子宫内膜厚度和血清雌激素水平评价不同极性部位的雌激素样活性,通过双变量相关分析和灰色关联度分析构建化学物质组与雌激素效应的组-效相关性,筛选质量标志物,并建立其中5个质量标志物的含量测定方法.结果 在正、负离子扫描模式下共发现10个与菟丝子雌激素样作用相关的指标成分,分别为金丝桃苷、紫云英苷、豆甾醇、新菟丝子苷C、芹菜素、山柰酚、6-O-反式-对香豆酰基-呋喃果糖-(2→1)-吡喃葡萄糖苷、槲皮素、异鼠李素和2,6-十八碳二炔酸.对其中5个质量标志物进行了含量测定,质量分数分别为金丝桃苷(2.753±0.097) mg/g、槲皮素(1.139±0.107) mg/g、芹菜素(1.104±0.047) mg/g、山柰酚(1.144±0.079) mg/g、异鼠李素(0.697±0.074) mg/g.结论 基于组-效关联思路可初步发现黑龙江产小粒菟丝子的质量标志物,所建立的质量标志物含量测定方法准确、稳定.

目的 研究五子衍宗丸(枸杞子、菟丝子、覆盆子等)补肾涩精有效部位的谱效关系.方法 石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇、水依次提取药液浸膏后,考察各提取物对雷公藤多苷致肾精亏虚证大鼠FSH、T、NO水平的影响以筛选有效部位.建立10批样品HPLC指纹图谱,通过灰色关联度考察其与补肾涩精药效的关系.结果 与模型组比较,水饱和正丁醇提取物组NO、T水平升高(P＜0.05),FSH水平降低(P＜0.05),故以其为有效部位.该部位所含成分对补肾涩精作用贡献度最大的为7号峰(绿原酸),其次为14号峰(槲皮素)、16号峰、13号峰.结论 五子衍宗丸补肾涩精药效成分主要集中在水饱和正丁醇部位(即大极性成分),可为进一步研究其物质基础提供参考.

目的:系统了解中药对成骨细胞增殖、分化的影响.方法:以"成骨细胞""中药""细胞增殖""细胞分化""Osteoblast""Chinese medicine""Proliferation""Differentiation"等为关键词,在中国知网、PubMed、万方数据等数据库中组合查询2010年1月1日-2020年5月31日发表的相关文献,对中药促进成骨细胞增殖、分化的研究进行汇总,梳理中药单体、提取物、方剂对成骨细胞增殖、分化的影响.结果 与结论:共检索到相关文献75篇,其中有效文献42篇.具有促进成骨细胞增殖与分化作用的中药单体主要有皂苷类化合物、黄酮类化合物、香豆素类化合物以及一些多糖类、酚苷类、生物碱、萜类、木脂素等化合物,如黄芩甲苷,淡豆豉异黄酮、佛手柑内酯等;中药提取物有飞天蜈蚣七水提物、骨碎补醇提物、菟丝子醇提物等;中药方剂则以补肾活血方、骨康方为代表.目前,有关中药单体和中药提取物对成骨细胞影响的研究较多,而中药方剂较少.虽然现有研究已经明确了中药在促进成骨细胞增殖、分化方面的作用,然而各类中药促进成骨细胞增殖、分化的作用机理尚未得到完全揭示,导致中医药的优势和特色未能充分体现.在今后的工作中,研究者可以继续以中药单体、中药提取物以及中药方剂为立足点,在机制研究的基础上,筛选出具有确切效果且安全的药物,为临床治疗相关骨病提供参考.