目的:评价天麻素对神经病理性痛大鼠脊髓腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/瞬时受体电位通道A1(TRPA1)信号通路的影响。方法:SPF级健康雄性SD大鼠36只，6～8周龄，体质量200～230 g，采用随机数字表法分为3组( n＝12)：假手术＋生理盐水组(SHAM组)、神经病理性痛＋生理盐水组(NP组)和神经病理性痛＋天麻素组(GAS组)。2%异氟烷麻醉下，采用坐骨神经慢性结扎损伤法制备大鼠神经病理性痛模型，SHAM组未结扎。造模后连续14 d，GAS组腹腔注射天麻素100 mg/kg，SHAM组和NP组注射等量生理盐水。分别于造模前1 d(T 0)、造模后第1、3、5、7、10和14天(T 1-6)时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。在T 4和T 6时测完痛阈后，2%异氟烷麻醉处死大鼠取L 4-6脊髓组织，采用qRT-PCR法检测TRPA1 mRNA表达，Western blot法检测脊髓TRPA1、AMPK和p-AMPK表达，免疫荧光染色法检测脊髓TRPA1表达；免疫组织化学染色法观察TNF-α、IL-1β和c-fos的表达。 结果:与SHAM组相比，NP组T 1-6时MWT和TWL降低，脊髓TRPA1 mRNA、TRPA1、TNF-α、IL-1β和c-fos表达上调，p-AMPK表达下调( P<0.05)，AMPK表达差异无统计学意义( P>0.05)；与NP组相比，GAS组T 3-6时MWT和T 2-6时TWL升高，脊髓TRPA1 mRNA、TRPA1、TNF-α、IL-1β和c-fos表达下调，p-AMPK表达上调( P<0.05)，AMPK表达差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:天麻素减轻大鼠神经病理性痛的机制可能与调控AMPK/TRPA1信号通路有关。

目的:评价瞬时受体电位香草酸4(TRPV4)在右美托咪定改善机械通气致脑损伤小鼠认知功能降低中的作用。方法:清洁级健康雄性C57BL6小鼠90只，体质量20~25 g，8~12周龄，采用随机数字表法分为5组( n＝18)：对照组(C组)、机械通气组(V组)、HC-067047组(H组)、右美托咪定组(D组)和右美托咪定+GSK1016790A组(DG组)。C组不行机械通气，自主呼吸空气6 h；V组机械通气6 h；H组机械通气3和6 h时分别脑室内注射TRPV4阻断剂HC-067047 10 mmol；D组和DG组机械通气前30 min腹腔注射右美托咪定50 μg/kg；DG组机械通气前60 min脑室内注射TRPV4激动剂GSK1016790A 5 μmol。每组随机取6只小鼠分别于机械通气前1 d、机械通气后3和7 d时行Morris水迷宫实验。机械通气后1 d，每组随机处死6只小鼠取脑组织，采用TUNEL法检测海马CA1区神经元凋亡情况，计算凋亡指数。每组随机处死6只小鼠取海马组织，采用Western blot法检测TRPV4、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)、p-Akt、Bcl-2、Bax和caspase-3的表达。 结果:与C组比较，V组和DG组机械通气后3和7 d逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，海马TRPV4和caspase-3表达上调，p-Akt表达下调，Bcl-2/Bax比值降低，神经元凋亡指数升高( P<0.05)；与V组比较，D组和H组机械通气后3和7 d逃避潜伏期缩短，穿越原平台位置次数增加，海马TRPV4和caspase-3表达下调，p-Akt表达上调，Bcl-2/Bax比值升高，神经元凋亡指数降低( P<0.05)；与D组比较，DG组机械通气后3和7 d逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，海马TRPV4和caspase-3表达上调，p-Akt表达下调，Bcl-2/Bax比值降低，神经元凋亡指数升高( P<0.05)。 结论:TRPV4参与了右美托咪定改善机械通气致脑损伤小鼠认知功能降低的过程，与其上调p-Akt表达，抑制海马神经元凋亡有关。

目的:探讨瞬时受体电位阳离子通道亚家族C成员3(TRPC3)对氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜和人视网膜血管内皮细胞(HREC)生物学行为的调控作用。方法:选取健康SPF级7日龄C57BL/6小鼠32只，采用随机数字表法分为对照组和OIR组，每组16只，其中对照组不做特殊处理，OIR组小鼠诱导OIR模型。出生后第17天(PN17)采用视网膜铺片免疫荧光染色验证模型构建是否成功。将体外培养HREC分为正常对照组、转染试剂组和si-TRPC3组，其中正常对照组不做特殊处理，转染试剂组和si-TRPC3组分别采用转染试剂和转染试剂＋si-TRPC3转染。采用实时荧光定量PCR法检测TRPC3 mRNA相对表达量；采用Western blot法检测TRPC3、转录因子NF-E2相关因子(Nrf2)和超氧化物歧化酶(SOD)蛋白相对表达量。另将HREC分为正常对照组、血管内皮生长因子(VEGF)组、si-TRPC3组和Pyr3(TRPC3通道抑制剂)组，分别用完全培养基、含有20 ng/ml VEGF重组蛋白的培养基、含有20 ng/ml VEGF重组蛋白的培养基(si-TRPC3转染72 h)和含有20 ng/ml VEGF重组蛋白＋1 μmol/L Pyr3的培养基培养48 h，采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测HREC增生能力；分别采用细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞横向和纵向迁移能力。结果:PN17时OIR组小鼠视网膜出现病理性新生血管团簇强荧光染色。OIR组小鼠视网膜TRPC3 mRNA和蛋白相对表达量分别为2.057±0.244和1.517±0.290，明显高于对照组的0.983±0.033和0.874±0.052，差异均有统计学意义( t＝6.165、3.094，均 P<0.05)。si-TRPC3组TRPC3 mRNA和蛋白相对表达量明显低于正常对照组和转染试剂组，Nrf2和SOD蛋白相对表达量明显高于正常对照组和转染试剂组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。CCK-8实验结果显示，VEGF组细胞吸光度( A)值明显高于正常对照组，si-TRPC3组和Pyr3组细胞 A值明显低于VEGF组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。细胞划痕实验结果显示，VEGF组细胞横向迁移率高于正常对照组，si-TRPC3组和Pyr3组细胞横向迁移率低于VEGF组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。Transwell实验结果显示，VEGF组染色细胞数明显多于正常对照组，si-TRPC3组和Pyr3组染色细胞数明显少于VEGF组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:OIR模型小鼠视网膜中TRPC3表达水平升高，下调TRPC3可抑制HREC增生和迁移能力，其机制与Nrf2氧化应激通路激活有关。

原发性低镁血症伴继发性低钙血症(HSH)是甲状旁腺功能减退的罕见病因之一。现报道近期本科诊治的1例原发性HSH患者，并在此基础上探讨该病的诊治策略。患者为26岁男性，以反复四肢麻木、抽搐为主要表现，生化检测提示存在低镁血症、低钙血症、低钾血症及甲状旁腺功能减退，后经基因检测证实存在瞬时受体电位阳离子通道-M亚家族-成员6(TRPM6)基因突变。经规律口服补镁治疗后，患者症状明显缓解。随访患者症状无再发，血电解质正常。原发性HSH多呈常染色体隐性遗传，因TRPM6基因突变导致肠道及肾脏的镁吸收障碍，进而引起系列临床表现，经补镁治疗通常可明显缓解相关症状。

目的:探讨骨形成蛋白2 （BMP-2）调节肺动脉高压（PH）肺血管重构的作用机制。方法:肺动脉平滑肌细胞（PASMC）分组：对照组、PH组、PH+BMP-2组、PH+BMP-2+小干扰BMP-2受体（si-BMPR）-Ⅰa组、PH+BMP-2+ si-BMPR-Ⅰb组、PH+BMP-2+si-BMPR-Ⅱ组。通过缺氧诱导体外PH模型，分别转染si-BMPR-Ⅰa、si-BMPR-Ⅰb、si-BMPR-Ⅱ质粒沉默BMP-2的3个受体。检测各组细胞增殖、凋亡情况，检测瞬时受体电位离子通道C1/6（TRPC1/6）、p21 mRNA和蛋白水平，以及细胞内钙离子水平。结果:PH组PASMC中钙离子水平高于对照组[（785.15 ± 44.26） nmol/L比（224.15 ± 15.87） nmol/L]，而凋亡率低于对照组[（3.15 ± 0.22）%比（7.31 ± 0.45）%]，差异有统计学意义（ P<0.05）；PH+BMP-2组钙离子水平（297.64 ± 21.46） nmol/L，低于PH组，而凋亡率为（6.88 ± 0.75）%，高于PH组，差异有统计学意义（ P<0.05）；PH+BMP-2+si-BMPR-Ⅰa组、PH + BMP-2+si-BMPR-Ⅰb组和PH+BMP-2+si-BMPR-Ⅱ组钙离子水平分别为（412.31 ± 29.57）、（384.34 ± 30.66）、（695.23 ± 39.85） nmol/L，均高于PH+BMP-2组，而凋亡率分别为（4.10 ± 0.27）%、（4.26 ± 0.28）%、（ 3.33 ± 0.24）%，均低于PH+BMP-2组，差异有统计学意义（ P<0.05），其中PH+BMP-2+si-BMPR-Ⅱ组钙离子水平高于PH+BMP-2+si-BMPR-Ⅰa组和PH+BMP-2+si-BMPR-Ⅰb组，而凋亡率低于PH+BMP-2+si-BMPR-Ⅰa组和PH+BMP-2+si-BMPR-Ⅰb组，差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:BMP-2主要通过与受体BMPR-Ⅱ作用抑制TRPC1/6的表达，并抑制钙离子内流和促进p21表达，从而抑制PASMC的增殖并促进凋亡，参与肺血管重构。

疼痛是一种与组织损伤或潜在组织损伤相关的感觉、情感、认知和社会维度的痛苦体验。近年来很多报道表明瞬时受体电位阳离子通道家族（transient receptor potential cation channel, TRPs）中的瞬时受体电位通道蛋白A1(transient receptor potential channel A1, TRPA1）通道参与温度、机械、炎症刺激等引起的不同类型疼痛反应，并且通过多种路径发挥作用。文章从TRPA1的分子结构、表达部位、其激动及拮抗物质的角度出发，探讨其参与不同类型疼痛的机制，对目前关于TRPA1在疼痛治疗中的研究进展进行综述，为开发新的镇痛药物提供参考依据。

目的:探讨心理应激诱导酸敏感受体在小鼠食管中的表达及氧化应激在食管炎症发生中的作用。方法:选取雄性无特定病原体(SPF)级20只昆明小鼠随机分2组(每组10只)，即慢性束缚应激(Stress)组和正常对照(Control)组。应激组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2 h，其余时间两组小鼠在相同环境中自由饮水摄食，实验持续14 d。光镜下观察苏木精-伊红(HE)染色后食管黏膜组织病理学改变，采用免疫组化、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、酶联免疫吸附测定方法检测烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-4(Nox-4)在小鼠食管及血清中的表达。进一步通过qRT-PCR方法检测食管组织中酸敏感受体的表达水平。结果:光镜下观察发现，HE染色后应激组小鼠食管黏膜组织中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及浆细胞浸润反应和炎症性改变，而对照组小鼠食管全层未发现明显异常。两组小鼠炎症评分结果显示，应激组小鼠食管黏膜损伤评分均明显高于对照组，差异有统计学意义( P<0.001)。免疫组化结果显示，Nox-4主要表达于食管固有层、黏膜及黏膜下层，应激组Nox-4阳性表达显著高于对照组。应激组小鼠食管黏膜组织中Nox-4 mRNA表达水平是对照组的(2.67±0.62)倍，差异有统计学意义( P<0.001)；Nox-4在应激组小鼠血清中的表达水平显著高于对照组[(0.42±0.01)ng/ml vs (2.13±0.35)ng/ml]，差异具有统计学意义( P<0.001)。应激组酸敏感受体如瞬时感受器电位通道-1(TRPV-1)、TRPV-4、酸敏感离子通道-1(ASIC-1)、ASIC-2和ASIC-3的mRNA表达明显高于对照组，差异有统计学意义( P<0.001)。Pearson相关性分析结果显示，应激组Nox-4 mRNA表达与TRPV-1、TRPV-4、ASIC-1、ASIC-2、ASIC-3 mRNA表达之间呈正相关( r＝0.97、0.94、0.98、0.95、0.99， P<0.01)。 结论:心理应激引起酸敏感受体的异常表达，并诱导炎症和氧化应激产生，从而导致食管高敏感性的产生。

目的:探讨非选择性阳离子通道瞬时受体电位通道A1（transient receptor potential channel A1, TRPA1）是否参与丙泊酚联合布比卡因所致背根神经节（dorsal root ganglion, DRG）细胞损伤。方法:以C57B6/J背景的野生型（wild type, WT）小鼠与TRPA1敲除（TRPA1 -/-）小鼠为研究对象，分别采集小鼠腰段（L 3~L 5）DRG进行原代细胞培养，培养24 h后进行体外细胞实验。取培养24 h的WT小鼠DRG细胞采用随机数字表法分为4组（每组9孔）：对照组（未予以药物处理）、丙泊酚组（丙泊酚10 μmol/L）、布比卡因组（布比卡因2 mmol/L）、丙泊酚+布比卡因组（丙泊酚10 μmol/L、布比卡因2 mmol/L），观察WT小鼠DRG细胞在不同药物处理后的细胞形态变化。取培养24 h的WT小鼠DRG细胞采用随机数字表法分为3组（每组9孔）：对照组（未予以药物处理）、丙泊酚+布比卡因组（丙泊酚10 μmol/L、布比卡因2 mmol/L）、HC-030031+丙泊酚+布比卡因组（丙泊酚10 μmol/L、布比卡因2 mmol/L、HC-030031 1 μmol/L），采用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8, CCK-8）法检测DRG细胞活力并计算细胞存活率，MitoSOX Red超氧化物指示剂检测线粒体活性氧（reactive oxygen species, ROS）水平，JC-1法检测线粒体膜电位水平。WT小鼠与TRPA1 -/-小鼠DRG细胞根据小鼠基因型分为WT组与TRPA1 -/-组（每组9孔），比较两组DRG细胞在丙泊酚（10 μmol/L）联合布比卡因（2 mmol/L）处理后线粒体ROS水平及其膜电位的变化。 结果:与对照组、丙泊酚组、布比卡因组比较，布比卡因+丙泊酚组DRG细胞形态改变，甚至细胞破坏。与对照组比较，丙泊酚+布比卡因组细胞存活率降低（ P<0.05），ROS水平升高（ P<0.05），线粒体膜电位水平降低（ P<0.05）；与丙泊酚+布比卡因组比较，HC-030031+丙泊酚+布比卡因组细胞存活率升高（ P<0.05），ROS水平降低（ P<0.05），线粒体膜电位水平升高（ P<0.05）。与WT组比较，TRPA1 -/-组在丙泊酚联合布比卡因处理后，DRG细胞线粒体ROS水平降低（ P<0.05），线粒体膜电位水平增加（ P<0.05）。 结论:TRPA1参与丙泊酚联合布比卡因所致体外培养DRG细胞损伤，与线粒体活性氧及膜电位水平有关。

目的:评价瞬时受体电位香草酸1(TRPV1)/核因子-κB (NF-κB)信号通路在右美托咪定减轻大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用。方法:清洁级健康雄性SD大鼠100只，体重270~320 g，4~5月龄，采用随机数字表法分为5组( n＝20)：对照组(C组)、VILI组(V组)、AMG9810组(A组)、右美托咪定组(D组)和右美托咪定＋RTX组(DR组)。采用潮气量40 ml/kg机械通气4 h的方法制备VILI模型。A组机械通气前1 h腹腔注射TRPV1抑制剂AMG9810 30 mg/kg；D组与DR组机械通气前经20 min静脉输注右美托咪定5.0 μg/kg，机械通气期间以5.0 μg·kg -1·h -1的速率静脉输注；DR组机械通气前连续3 d每天腹腔注射TRPV1激动剂RTX 70 μg/kg。机械通气4 h时，检测支气管肺泡灌洗液(BALF)IL-1β、TNF-α和IL-6浓度，测定氧合指数(OI)和肺湿重/干重(W/D)比值，观察肺组织病理学结果，行肺损伤评分。Western blot法检测肺组织TRPV1和NF-κB的表达，RT-PCR法检测TRPV1 mRNA和NF-κB mRNA的表达。 结果:与C组比较，V组BALF IL-1β、TNF-α和IL-6浓度升高，OI降低，W/D比值和肺损伤评分升高，TRPV1、NF-κB及其mRNA表达上调( P<0.05)；与V组比较，A组、D组、DR组BALF IL-1β、TNF-α和IL-6浓度降低，OI升高，W/D比值和肺损伤评分降低，TRPV1、NF-κB及其mRNA表达下调( P<0.05)；与D组比较，DR组BALF IL-1β、TNF-α和IL-6浓度升高，OI降低，W/D比值和肺损伤评分升高，TRPV1、NF-κB及其mRNA表达上调( P<0.05)。 结论:右美托咪定减轻大鼠VILI的部分机制与抑制TRPV1/NF-κB信号通路激活，抑制肺组织炎症反应有关。

目的:观察穴位贴敷对支气管哮喘（bronchial asthma，BA）小鼠皮肤、肺组织中瞬时受体电位阳离子通道香草酸亚家族成员1（TRP cation channel subfamily V member 1，TRPV1）表达及血清中IFN-γ、IL-4水平的影响，探讨穴位贴敷治疗哮喘的机制。方法:将75只BALB/c小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、穴位贴敷组、假贴敷组、地塞米松组，每组15只。采用屋尘螨滴鼻法制备BA小鼠模型。造模结束后，取小鼠双侧“肺俞”“心俞”“膈俞”进行穴位贴敷，穴位贴敷组贴敷药物为芥子、延胡索、细辛、甘遂药物组方，假贴敷组给予凡士林贴敷，1次/d，共贴敷14次；地塞米松组灌胃10 g/kg地塞米松，1次/d，连续干预14 d。运用EMKA-WBP肺功能检测系统检测小鼠气道阻力；天狼星红染色法、HE染色法观察小鼠肺组织病理形态改变，免疫组化法检测肺组织、皮肤组织中TRPV1表达，ELASA法检测肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-4水平。结果:在浓度为12.5、25.0、50.0 mg/ml的氯化乙酰甲胆碱溶液激发后，与模型组比较，穴位贴敷组、地塞米松组小鼠气道高阻力Penh值下降（ P<0.05）；肺组织HE染色和天狼猩红染色显示气管内炎性浸润和胶原纤维增生情况改善（ P<0.05）；与模型组比较，穴位贴敷组、地塞米松组肺组织TRPV1［（0.28±0.06）、（0.28±0.05）比（0.31±0.08）］表达降低（ P<0.05）；肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-4水平降低（ P<0.05）。 结论:穴位贴敷可通过诱发皮肤反应治疗哮喘，其作用机制可能与激活肺组织、皮肤组织中TRPV1，降低IFN-γ、IL-4水平有关。