目的 探讨血清长链非编码核糖核酸尿路上皮癌胚抗原1(LncRNA UCA1)、神经元PAS结构域蛋白4(NPASDP4)水平与急性脑梗死(ACI)患者神经功能缺损的关系及对预后的预测价值.方法 选取2021年1月—2023年6月南京大学医学院附属鼓楼医院急诊科收治的ACI患者163例(ACI组),根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为轻度(n=32)、中度(n=73)、重度缺损亚组(n=58),另选取同期健康体检者65例作为健康对照组.根据ACI患者90 d预后分为不良预后亚组52例、良好预后亚组111例.采用实时荧光定量聚合酶链式反应与酶联免疫吸附法,检测血清LncRNA UCA1与NPASDP4水平.Spearman相关性分析血清LncRNA UCA1、NPASDP4水平与ACI患者NIHSS评分的相关性.多因素Logistic回归分析ACI患者不良预后的因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA UCA1、NPASDP4预测ACI患者不良预后的价值.结果 与健康对照组比较,ACI组血清LncRNA UCA1、NPASDP4 水平升高(t/P=20.114/＜0.001、15.711/＜0.001).血清 LncRNA UCA1、NPASDP4 水平重度缺损亚组＞中度缺损亚组＞轻度缺损亚组(F/P=187.914/＜0.001、195.031/＜0.001).ACI 患者血清 LncRNA UCA1、NPASDP4水平与NIHSS评分呈正相关(r/P=0.759/＜0.001、0.773/＜0.001).随访90 d,与良好预后亚组比较,不良预后亚组血清 LncRNA UCA1、NPASDP4 水平升高(t/P=6.963/＜0.001、6.515/＜0.001).年龄大、NIHSS 评分增加、LncRNA UCA1和NPASDP4升高为ACI患者不良预后的独立危险因素[OR(95％CI)=1.107(1.043～1.176)、1.098(1.049～1.150)、3.479(1.941～6.235)、1.959(1.398～2.745)].血清 LncRNA UCA1、NPASDP4 及二者联合预测不良预后的AUC分别为0.777、0.789、0.870,二者联合大于血清LncRNA UCA1、NPASDP4单独预测的AUC(Z/P=3.312/0.001、2.721/0.007).结论 血清LncRNA UCA1表达、NPASDP4水平升高与ACI患者神经功能缺损加重和不良预后密切相关,血清LncRNA UCA1联合NPASDP4水平预测ACI患者不良预后的效能较高.

目的 探讨神经元PAS结构域蛋白(NPAS)4与Janus激酶(JAK)2/信号传导与转录激活因子(STAT)3通路在大鼠颅脑损伤后的相关联系.方法 将雄性SD大鼠随机分为假手术组、TBI组、TBI+AG490组,建立损伤模型,利用免疫组化染色、Western印迹及实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测JAK2、STAT3、磷酸化(p)-JAK2、p-STAT3及NPAS4蛋白.结果 损伤后NPAS4蛋白可见表达升高,并在12 h时达到最高,并持续至少7 d,与p-JAK2、p-STAT3蛋白时序性表达趋势一致,相邻两时间点比较差异显著(P＜0.05);且TBI+AG490组p-JAK2、p-STAT3及NPAS4蛋白表达量较TBI组均显著下降(P＜0.05).结论 NPAS4可在大鼠颅脑损伤后迅速升高并发挥神经保护作用,且其相关作用可能受到JAK2/STAT3通路的调节.

目的 探 讨帕金 森病患者血清神经元PAS结构域蛋白4(neuronal Per-Arnt-Sim domain protein 4,NPASDP-4)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)水平表达与认知功能障碍(cognitive impairment,CI)及严重程度的诊断价值研究.方法 选取中国人民解放军联勤保障部队第九○九医院收治的138例帕金森病患者为帕金森病组,同期该院体检中心的健康体检者69例为健康对照组,并根据是否发生CI以及其严重程度进一步将帕金森病组患者分为认知功能正常组(n=55)、轻度CI组(n=51)和痴呆组(n=32).收集受试者一般资料;ELISA法检测血清NPASDP-4和MBP水平;相关性分析采用Spearman等级相关或Pearson线性相关;诊断价值分析采用ROC曲线;影响因素分析采用多因素Logistic回归.结果 与健康对照组比较,帕金森病组血清NPASDP-4(6.75±0.48ng/ml vs 2.38±0.31ng/ml),MBP(8.34±0.65μg/L vs 3.54±0.42μg/L)水平升高,差异具有统计学意义(t=68.751,55.761,均P＜0.05).认知功能正常组、轻度CI组、痴呆组H-Y分期比较,差异有统计学意义(x2=7.788,P＜0.05).UPDRS-Ⅲ评分与认知功能正常组(41.95±10.36分)比较,轻度CI组(47.92±11.63分)、痴呆组(50.78±13.69分)评分升高,差异具有统计学意义(H=6.672,均P＜0.05).认知功能正常组、轻度CI组、痴呆组病程(4.28±0.54,4.71±0.58和 5.16±0.63 年)及血清NPASDP-4(5.89±0.40,6.83±0.55 和 8.12±0.54ng/ml),MBP(6.65±0.56,8.94±0.69和 10.27±0.70μg/L)水平依次显著升高(H=24.114,207.950,355.594,均 P＜0.05),MMSE 评分(28.47±0.94,24.51±1.35 和 17.09±2.57 分)、MoCA 评分(27.45±1.03,20.18±1.92 和 11.75±2.53 分)、GPCOG 总分(13.47±0.69,10.25±1.04 和 8.97±0.82 分)依次显著降低(H=515.005,775.933,327.584,均 P＜0.05),差异具有统计学意义.帕金森病患者血清NPASDP-4,MBP 水平均与病程(r=0.316,0.358)、H-Y 分期(r=0.345,0.384)、UPDRS-Ⅲ评分(r=0.371,0.396)呈显著正相关(P＜0.05),与 MMSE 评分(r=-0.468,-0.517)、MoCA 评分(r=-0.504,-0.569)、GPCOG总分(r=-0.527,-0.538)呈显著负相关(均P＜0.05).血清NPASDP-4,MBP水平及二者联合诊断帕金森病患者CI的曲线下面积(AUC)分别为0.850,0.930和0.960,诊断帕金森病患者CI严重程度的AUC分别为0.866,0.803和 0.933.H-Y 分期中期[OR(95％CI):4.725(1.742～12.814)],H-Y 分期晚期[OR(95％CI):5.083(1.919～13.464)]、UPDRS-Ⅲ评分[OR(95％CI):3.257(1.464～7.246)]、NPASDP-4[OR(95％CI):5.324(1.516～18.701)]和 MBP[OR(95％CI):5.769(2.459～13.533)]是帕金森病患者 CI 的影响因素(均P＜0.05);NPASDP-4[OR(95％CI):4.768(2.382～9.543)],MBP[OR(95％CI):5.846(3.141～10.882)]是帕金森病患者CI严重程度的影响因素(均P＜0.05).结论 帕金森病患者血清NPASDP-4和MBP呈高水平,且均与CI及其严重程度密切相关,可能具有一定的临床诊断价值.

目的 观察针刺配合通络益气汤治疗脑小血管病致认知功能障碍的临床疗效及其对患者脑微循环、步态平衡和血清神经元PAS结构域蛋白4(neuronal PAS domain protein 4,NPAS4)、P-选择素(CD62P)表达的影响.方法 将 98例脑小血管病致认知功能障碍患者随机分为治疗组和对照组,每组49 例.治疗组采用针刺配合通络益气汤治疗,对照组采用单纯通络益气汤治疗.观察两组治疗前后各项实验室指标[谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)、NPAS4、CD62P、一氧化氮(NO)、亲环素 A(cyclophilin A,CyPA)、脂蛋白相关磷脂酶 A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2)、血管性血友病因子(von Willebrand factor,vFW)水平]、脑微循环指标[血脑屏障通透性、血管差压、临界压力(critical pressure,CP)、脑血管动态阻力(dynamic resistance,DR)]及各量表[Berg平衡量表(Berg balance scale,BBS)、Tinetti平衡与步态量表、蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment,MoCA]评分的变化情况,并比较两组临床疗效.结果 两组治疗后 GSH-Px、NO 水平及CP、各量表评分均较同组治疗前显著上升,AGEs、NPAS4、CD62P、CyPA、Lp-PLA2、vFW水平及血脑屏障通透性、血管差压、DR显著下降,差异均具有统计学意义(P＜0.05).治疗组治疗后GSH-Px、NO水平及CP、各量表评分均明显高于对照组,AGEs、NPAS4、CD62P、CyPA、Lp-PLA2、vFW水平及血脑屏障通透性、血管差压、DR均明显低于对照组,两组比较差异均具有统计学意义(P＜0.05).治疗组总有效率为 98.0%,明显高于对照组的 87.8%,两组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 针刺配合通络益气汤治疗脑小血管病致认知功能障碍疗效确切,可减少氧化应激反应及炎症反应,降低NPAS4、CD62P水平,减少血管内皮功能及认知功能损伤,改善血脑屏障通透性、脑微循环及步态平衡.

目的:观察电针联合重复经颅磁刺激治疗缺血性脑卒中后轻度认知障碍的临床疗效.方法:将106例缺血性脑卒中后轻度认知障碍患者按随机数字表法分为对照组和观察组各53例.对照组在常规治疗基础上给予重复经颅磁刺激治疗,观察组在对照组基础上给予电针治疗.比较两组患者治疗前后的美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分和脑卒中专门化生存质量量表(SS-QOL)评分,并检测两组患者治疗前后与病情相关的血清学指标[包括血管内皮生长因子(VEGF)、可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)、脑源性神经生长因子(BDNF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、泛酸羧基末端水解酶1(UCH-L1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经元PAS结构域蛋白4(NPAS4)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]和脑氧代谢指标[包括动脉-静脉血氧含量差(Ca-v02)、动脉血氧含量(CaO2)、脑氧摄取率(CERO2)]水平,评价两组临床疗效.结果:治疗后,两组NIHSS评分均较治疗前降低(P＜0.05),MoCA、SS-QOL评分均较治疗前提高(P＜0.05);观察组MoCA评分、SS-QOL评分高于对照组(P＜0.05),NIHSS评分低于对照组(P＜0.05).治疗后,两组 SOD、VEGF、BDNF 水平均较治疗前升高(P＜0.05),UCH-L1、TNF-α、MDA、sFlt-1、CaO2、Ca-vO2、CERO2、NSE、NPAS4水平均较治疗前降低(P＜0.05);观察组SOD、VEGF、BDNF水平高于对照组(P＜0.05),UCH-L1、TNF-α、MDA、sFlt-1、CaO2、Ca-vO2、CERO2、NSE、NPAS4水平低于对照组(P＜0.05).观察组总有效率明显高于对照组(P＜0.05).结论:电针联合重复经颅磁刺激治疗缺血性脑卒中后轻度认知障碍疗效确切,可减少氧化应激损伤及炎症反应,促进血管再生,改善脑氧代谢,修复神经及认知功能损伤,提高患者生活质量及疗效.

目的 研究芬太尼暴露对斑马鱼幼鱼的心脏和神经毒性及对其发育相关基因表达的影响.方法 将受精后2h(2hpf)内发育良好的斑马鱼胚胎随机分为正常对照组,芬太尼5,10和20 mg·L-1染毒组.使用体视显微镜观察斑马鱼发育中的畸形表型,24,48,72,96和120 hpf统计斑马鱼胚胎或幼鱼的畸形率,120 hpf统计幼鱼的存活率.72,96和120 hpf采用斑马鱼微视行为分析系统记录幼鱼心率,120 hpf分析心包面积和静脉窦与动脉球(SV-BA)距离.120 hpf采用HE染色观察心房心室结构和心肌细胞结构,Image J软件分析新生神经元的面积和密度,荧光定量PCR检测心脏和神经发育相关基因心脏特异性转录因子(nkx2.5)、神经元PAS结构域蛋白4a(npas4a)、心房型利钠肽原B(nnpb)和高迁移率族转录因子9b(sox9b)mRNA表达.结果 芬太尼造成斑马鱼孵化不完全、脊柱弯曲、尾部畸形和心包水肿等发育畸形.与正常对照组相比,芬太尼10和20 mg·L-1组72 hpf幼鱼的畸形率显著增加(P<0.01),芬太尼各浓度组120 hpf幼鱼的存活率无明显变化;72 hpf芬太尼20 mg·L-1组幼鱼的心率显著下降(P<0.01);120 hpf芬太尼各浓度组幼鱼的心率均显著下降(P<0.01),芬太尼20 mg·L-1组斑马鱼幼鱼心包面积和SB-BA距离均显著增加(P<0.01),心房心室明显肿大,心肌细胞层数少且薄;斑马鱼幼鱼头部新生神经元密度和面积显著下降(P<0.05,P<0.01);nkx2.5,npas4a和sox9b mRNA表达下调(P<0.01),nppb mRNA表达上调(P<0.01).结论 斑马鱼胚胎发育期间接触芬太尼导致幼鱼心脏发育畸形和心跳减缓,同时产生新生神经元毒性,可能与影响心脏和神经发育相关基因的表达相关.

目的 探讨老年脑卒中后抑郁和原发抑郁症患者芳香烃受体核转移蛋白( Arnt) 2 和神经元 PAS结构域蛋白(Npas)4的表达与认知功能的关系.方法 老年患者173例,依据汉密尔顿抑郁量表(HAMD)-24评分结合脑卒中病史分为:脑卒中后抑郁组(47例)、原发性抑郁组(52例)、脑卒中组(45例)、对照组(29例).分别于入院1 w内和2 w后通过事件相关电位P300分析各组患者认知功能;取患者空腹外周静脉血分离白细胞,荧光定量PCR和Western印迹分别检测Arnt2、Npas4 mRNA和蛋白表达情况.结果 与对照组相比,入院1 w内和2 w后的脑卒中后抑郁组、原发性抑郁组、脑卒中组P300潜伏期显著延长,P300波幅显著降低,差异均有统计学意义(P<0. 05);与原发抑郁组和脑卒中组相比,脑卒中后抑郁组P300潜伏期显著延长,P300波幅显著降低,差异均有统计学意义(P<0. 05);入院2 w后脑卒中后抑郁组、原发性抑郁组、脑卒中组较入院1 w内P300潜伏期显著缩短,P300波幅显著升高,差异均有统计学意义(P<0. 05).脑卒中后抑郁组和原发性抑郁组Arnt2 mRNA和蛋白的相对表达量明显高于脑卒中组和对照组, Npas4 mRNA和蛋白的相对表达量明显低于脑卒中组和对照组,差异有统计学意义(P<0. 01);脑卒中后抑郁组Arnt2、Npas4 mRNA和蛋白的相对表达量与原发性抑郁组之间差异无统计学意义(P>0. 05).结论 老年脑卒中后抑郁与原发抑郁症患者均存在认知功能障碍,前者更为严重;Arnt2高表达和Npas4低表达可通过诱导海马神经功能损伤来介导老年抑郁症患者认知功能障碍.

目的 探讨神经元PAS结构域蛋白2(neuronal PAS domain protein 2,NPAS2)在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者和细胞系中的表达变化,及其对AML细胞生长的作用.方法 收集陕西省西安市中心医院血液病研究所2013-2017年收治的初诊急性髓系白血病患者46例,实时定量PCR方法检测NPAS2在AML患者及正常对照组骨髓单个核细胞中的表达,Western blot方法检测AML细胞系及对照组中NPAS2的表达;统计学方法分析NPAS2表达高低对AML患者预后的影响;RNAi方法干扰AML细胞内NPAS2表达,利用CCK-8法检测NPAS2对细胞生长的作用.结果 NPAS2在AML患者及细胞系中的表达较对照组升高(P＜0.05);在M1、M2、M3、M4、M5患者中NPAS2表达较对照组升高(P＜0.05),在M6和M7患者中其表达较对照组差异无统计学意义(P＞0.05);高表达NPAS2的AML患者其总体生存期较低表达患者短(P＜0.05);AML细胞中干涉NPAS2后,与对照组比,干涉组细胞生长明显减慢(P＜0.05).结论 NPAS2在AML患者中表达上调并与AML患者预后负相关,同时NPAS2促进AML细胞生长.

背景认知障碍可影响急性脑卒中患者主动参与社会活动、配合肢体功能训练及生活质量,因此寻找有效评估急性脑卒中患者认知障碍严重程度的指标具有重要意义.目的 探讨miRNAs及血清神经元PAS结构域蛋白4(NPAS4)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100β蛋白水平与急性脑卒中患者认知障碍严重程度的关系.方法 选取2014年8月—2018年5月解放军三零七医院神经内科收治的急性脑卒中并认知障碍患者146例,根据认知障碍严重程度分为轻度组(n=101)、中度组(n=30)、重度组(n=15).比较3组患者miRNAs(包括miRNA-34、miRNA-21、miRNA-135)相对表达量及血清NPAS4、NSE、S100β蛋白水平;miRNAs相对表达量及血清NPAS4、NSE、S100β蛋白水平与急性脑卒中患者认知障碍严重程度的相关性采用Spearman秩相关分析;绘制ROC曲线以评价miRNAs相对表达量及血清NPAS4、NSE、S100β蛋白水平对急性脑卒中患者认知障碍严重程度的评估价值.结果 (1)重度组患者miRNA-34、miRNA-21、miRNA-135相对表达量及血清NSE、S100β蛋白水平低于轻度组和中度组,血清NPAS4水平高于轻度组和中度组(P<0.05);中度组患者miRNA-34、miRNA-21、miRNA-135相对表达量及血清NSE、S100β蛋白水平低于轻度组,血清NPAS4水平高于轻度组(P<0.05).(2)Spearman秩相关分析结果显示,miRNA-135相对表达量及血清NSE、S100β蛋白水平与急性脑卒中患者简明精神状态量表(MMSE)评分呈正相关(rs值分别为0.420、0.434、0.456,P<0.05),血清NPAS4水平与急性脑卒中患者MMSE评分呈负相关(rs=-0.448,P<0.01).(3)ROC曲线分析结果显示,miRNA-135相对表达量评估急性脑卒中患者认知障碍严重程度的曲线下面积(AUC)为0.747,最佳截断值为0.71;血清NPAS4水平评估急性脑卒中患者认知障碍严重程度的AUC为0.729,最佳截断值为2.01 mg/L;血清NSE水平评估急性脑卒中患者认知障碍严重程度的AUC为0.751,最佳截断值为13.00 U/ml;血清S100β蛋白水平评估急性脑卒中患者认知障碍严重程度的AUC为0.755,最佳截断值为0.19μg/L.结论 miRNA-34、miRNA-21与急性脑卒中患者认知障碍严重程度无关,而miRNA-135及血清NPAS4、NSE、S100β蛋白水平与急性脑卒中患者认知障碍严重程度有关,且四者对急性脑卒中患者认知障碍严重程度具有一定评估价值.

目的 探讨事件相关电位P300、血清神经元PAS结构域蛋白4(NPAS4)水平与脑小血管病(CSVD)患者认知功能障碍的相关性.方法 选择2017年2月至2019年6月新乡医学院第二附属医院收治的98例CSVD患者为研究对象.采用简明精神状态量表(MMSE)评分评估患者认知功能,根据MMSE评分将患者分为轻度组(n=52,MMSE评分21～26分)和中重度组(n=46,MMSE评分<21分),同期选择健康体检者50例作为对照组(MMSE评分27～30分).采用诱发电位仪检测3组受试者P300潜伏期和波幅,采用酶联免疫吸附法检测3组受试者血清NPAS4水平,采用Spearman相关分析患者P300电位、NPAS4水平与MMSE评分的相关性.结果 中重度组患者血清NPAS4水平高于对照组和轻度组(P<0.05);轻度组患者血清NPAS4水平高于对照组(P<0.05).轻度组和中重度组患者P300潜伏期长于对照组,P300波幅低于对照组(P<0.05);中重度组患者P300潜伏期长于轻度组,P300波幅低于轻度组(P<0.05).MMSE评分与P300潜伏期、NPAS4水平呈负相关(r=-0.706、-0.425,P<0.05),与P300波幅呈正相关(r=0.758,P<0.05).结论 P300电位、血清NPAS4水平变化与CSVD患者认知障碍严重程度有关,P300电位和血清NPAS4水平可用于CSVD患者认知功能的早期评估.