[目的]构建一种葛根素(Pu)参与的海藻酸钙水凝胶,具有可注射性和钙离子敏感性,可用于控释药物或负载间充质干细胞,用于骨关节炎治疗.[方法]以海藻酸钠(SA)、氯化钙(CaCl2)和Pu为原料制备不同处方凝胶,黏度计实验考察处方原料对 凝胶黏度的影响,通过流变学方法筛选最佳处方,并考察Pu对 凝胶强度的影响,观察冻干凝胶的微观结构,通过溶胀实验、体外降解实验和药物释放实验考察凝胶溶胀率、体外稳定性和药物缓释性能.[结果]通过物理搅拌得到均一透明凝胶,处方中原料对 凝胶强度影响大小顺序为CaCl2>SA>Pu,筛选最佳处方为0.2% Pu+0.6% SA+6 mmol/L CaCl2,扫描电微镜下凝胶呈现三维网孔结构,表征实验表明Pu对 凝胶强度有促进作用,Pu使凝胶溶胀率由75倍减小至45倍,体外初始降解时间由12 d增加至24 d,该凝胶对 粉防己碱具有良好的缓释作用.[结论]Pu参与海藻酸钙凝胶构建,增加胶凝强度并改善凝胶溶胀和体外降解性质,该凝胶强度适宜并呈三维网孔结构,对 粉防己碱有缓释作用,是良好的可注射型 药物或干细胞载体用于骨关节炎的治疗.

背景:温敏水凝胶具有仿细胞外基质、良好生物相容性、微创可注射和原位成型等特点,在组织工程中广泛使用.目的:制备脂质体介导的温敏型海藻酸/磷酸三钙/胶原Ⅰ(Alg/TCP/Col)水凝胶,并对其进行表征.方法:通过交错融合制备包载不同浓度钙离子的脂质体Ca-IFVs,综合考察脂质体包封率和载药率,筛选最佳钙离子浓度的脂质体,用于以下实验.将Alg/TCP/Col前体溶液(海藻酸或海藻酸/磷酸三钙前体溶液)与脂质体Ca-IFVs以不同的配比(5,10,15,20)在37℃下混合,制备温敏型水凝胶,观察水凝胶的结构、流变性、体积溶胀比及机械性能.将MC3T3-E1细胞分别接种于Alg/TCP/Col水凝胶、海藻酸水凝胶、海藻酸/磷酸三钙水凝胶表面,接种1,3,7 d后,采用共聚焦显微镜观察细胞形态.结果与结论:①冻干水凝胶中孔的尺寸在50-100μm范围,α-磷酸三钙的颗粒均匀地附着在海藻酸/α-磷酸三钙水凝胶的表面上;与海藻酸/α-磷酸三钙水凝胶相比,Alg/TCP/Col水凝胶是具有胶原纤维的致密聚集体;②Alg/TCP/Col水凝胶具有在35-39℃之间适当的相转变温度Tm;③随着复合材料凝胶中Ca-IFVs体积的增加,凝胶体积溶胀比增加,当将α-磷酸三钙复合物加入到海藻酸/α-磷酸三钙水凝胶中时,溶胀比略有降低;与海藻酸/α-磷酸三钙水凝胶相比,Alg/TCP/Col水凝胶的溶胀比增加;④在前体溶液与脂质体配比为10时,Alg/TCP/Col水凝胶、海藻酸/α-磷酸三钙水凝胶的压缩模量高于海藻酸水凝胶(P<0.05);⑤在前体溶液与脂质体配比为10时,海藻酸水凝胶表面的MC3T3-E1细胞呈圆形;海藻酸/α-磷酸三钙水凝胶中的细胞形态趋于扩展,散布在水凝胶孔表面上;在Alg/TCP/Col水凝胶表面的细胞具有应力延长形态,细胞形态趋势相似,并向凝胶内部延伸,同时数量显著增加;⑥结果表明脂质体介导的Alg/TCP/Col水凝胶,具有良好的机械性能及细胞相容性.

背景:鬼臼毒素具有抑制癌细胞增殖、抗病毒和抗病虫害的功能,但其单独应用有较大不良反应且生物利用度低.目的:制备海藻酸钠/鬼臼毒素凝胶珠,以期望实现鬼臼毒素的控释或靶向给药,提高疗效,降低其生物毒性和不良反应.方法:采用外部离子凝胶法制备海藻酸钠/鬼臼毒素凝胶珠,检测鬼臼毒素质量浓度分别为25,50,75 g/L时的凝胶珠载药量,以及凝胶珠在不同pH值环境中(pH=2.1,4.6,7.4)的溶胀率及释药行为.分别以含5,10,20,40 mg/L海藻酸钠/鬼臼毒素凝胶珠(或鬼臼毒素或海藻酸钠)的细胞培养基培养肠癌细胞SW480与肠上皮细胞NCM460,48 h后,检测肠上皮细胞NCM460的存活率及肠癌SW480细胞的抑制率.结果与结论:①当鬼臼毒素质量浓度分别为25,50,75 g/L时,凝胶珠的载药率分别为8.97%,17.02%和19.16%;②当鬼臼毒素质量浓度分别为25,50,75 g/L时,凝胶珠在pH=2.1,4.6的环境中几乎不溶胀;在pH=7.4的环境中溶胀,且随着鬼臼毒素质量浓度的增加,凝胶珠溶胀率增加;③在pH=7.4的环境中,24 h内有(69.5±9.1)%的鬼臼毒素缓慢地从凝胶珠中释放出来;在pH=2.1,4.6的环境中,24 h内只有(2.0±0.2)%和(2.1±0.6)%的鬼臼毒素从凝胶珠中释放出来;④随着药物质量浓度增加,各组NCM460细胞存活率逐步下降,海藻酸钠无细胞毒性,鬼臼毒素有明显的细胞毒性,凝胶珠可降低鬼臼毒素的细胞毒性;⑤随着药物质量浓度的增加,各组SW480细胞抑制率逐渐提高,凝胶珠的抑制作用强于海藻酸钠与鬼臼毒素;⑥结果表明,海藻酸钠/鬼臼毒素凝胶珠是一种有研究前景的pH敏感缓释型结肠癌载药体系.

背景:在治疗肺部哮喘过程中,地塞米松磷酸钠存在毒性大、体内代谢时间短等问题,因此急需一种以缓释方式给药的地塞米松磷酸钠制剂,以解决上述问题.目的:制备pH敏感壳聚糖/地塞米松磷酸钠纳米颗粒,考察其载药量、微观形貌、粒径分布及体外释放等特性,同时考察其炎症抑制作用.方法:以壳聚糖为原料,采用离子凝胶法制备pH敏感壳聚糖/地塞米松磷酸钠纳米颗粒,检测其载药量、微观形貌、粒径分布及体外释放特性.将32只SD大鼠随机分为4组,正常组第0,7天分别皮下注射1 mL生理盐水,第14天起雾化吸入生理盐水1 mL,1次/d,30 min/次,连续7 d;哮喘组第0,7天分别皮下注射1 mL致敏液,第14天起雾化吸入含1%卵白蛋白的生理盐水1 mL,1次/d,30 min/次,连续7 d;对照组激发前30 min腹腔注射地塞米松磷酸钠(0.25 mg/kg),其余同哮喘组;实验组激发前30 min腹腔注射壳聚糖/地塞米松磷酸钠纳米颗粒(地塞米松磷酸钠0.25 mg/kg),其余同哮喘组;14 d后取肺组织,进行苏木精-伊红染色.结果与结论:①随着地塞米松磷酸钠质量浓度的增加,壳聚糖/地塞米松磷酸钠纳米颗粒载药量逐渐增加;②壳聚糖/地塞米松磷酸钠纳米颗粒为白色椭圆形,95%纳米颗粒直径在40-70 nm之间,平均粒径为53.2 nm;③在pH=7.4的模拟肠液中,地塞米松磷酸钠缓慢地从纳米颗粒中出来,120 min后全部释放;在pH=2.1和pH=4.6的模拟胃液中,120 min内没有地塞米松磷酸钠释放出来;④苏木精-伊红染色显示,哮喘组支气管平滑肌肥厚,黏膜充血水肿,并有大量炎症细胞浸润;对照组支气管炎症性有所减轻;实验组支气管炎症明显减轻,支气管壁周围仅有少量炎症细胞浸润;⑤结果表明,pH敏感壳聚糖/地塞米松磷酸钠纳米颗粒具有缓释功能,可抑制哮喘大鼠肺泡灌洗液中炎症细胞的产生.

目的 制备薄荷脑鼻用原位凝胶剂,并对其流变性及凝胶特性进行研究.方法 采用离子敏感型高分子材料去乙酰结冷胶制备薄荷脑鼻用原位凝胶剂.考察原位凝胶剂的流变学特征、微观结构及持水能力;采用荧光示踪法通过动物活体成像系统考察原位凝胶剂在大鼠鼻腔中的滞留时间.结果 应用0.5％去乙酰结冷胶可成功制备的离子敏感型薄荷脑鼻用原位凝胶,其在4℃及20℃均具有适宜的黏度,持水能力良好,与人工鼻黏液反应后形成凝胶网络包裹药物并有效黏附于鼻黏膜,动物活体成像结果显示原位凝胶可明显提高药物在鼻腔内的滞留时间达到4h以上.结论 薄荷脑鼻用原位凝胶在鼻腔中的黏附性好、滞留时间长,具有一定的缓释作用.

目的 制备叶黄素纳米粒离子敏感型眼用原位凝胶滴眼剂,并对其进行体外评价.方法 采用超声辅助反溶剂沉淀法制备叶黄素白蛋白纳米粒,加入去乙酰结冷胶进一步制得离子敏感型原位凝胶;pH计与流变仪分别测定其与人工泪液混合前后的pH值及流变学特征;采用桨法考察制剂体外释放行为.结果 制备的叶黄素纳米粒粒径为(114.93±8.64)nm,冻干后粒径增大但仍分布均匀;所得叶黄素纳米粒凝胶液的实际载药量为(0.686±0.05)mg·g-1.与人工泪液混合后形成持水性良好的凝胶,人工泪液混合前、后凝胶样品的pH分别为(7.09±0.14)和(7.34±0.33);体外累积释放率在10h时达到80％.结论 将叶黄素纳米粒载入离子型凝胶材料中所得的原位凝胶在生理条件下发生胶凝,黏附性能增加且具有缓释作用.

背景:5-氟尿嘧啶类药物存在毒性大、体内代谢时间短等临床问题.目的:制备海藻酸钠/层状双氢氧化物-5-氟尿嘧啶凝胶珠载药体系,考察其载药量、微观形貌、体外释放及对肝癌细胞的抑制效果.方法:设置层状双氢氧化物-5-氟尿嘧啶溶胶液与海藻酸钠溶液的体积比分别为3∶5,4∶5,5∶5,采用离子凝胶法制备海藻酸钠/层状双氢氧化物-5-氟尿嘧啶凝胶珠,检测其载药量.将海藻酸钠/层状双氢氧化物-5-氟尿嘧啶凝胶珠分别放置于pH=2.1,4.6,7.4的PBS中,定时检测5-氟尿嘧啶释放率.将肝癌SMMC-7 721细胞株分组培养,分别加入不同质量浓度(5,10,20,40 mg/L)的海藻酸钠、层状双氢氧/5-氟尿嘧啶凝胶珠、海藻酸钠/层状双氢氧化物-5-氟尿嘧啶凝胶珠混悬液,培养24 h后,检测细胞抑制率.结果与结论:①体积比3∶5,4∶5,5∶5载药体系的载药量分别为(3.09±0.08)％,(4.55±0.10)％,(5.47±0.1 4)％;②与pH=7.4条件比较,海藻酸钠/层状双氢氧化物-5-氟尿嘧啶凝胶珠在pH=2.1,4.6条件下释放5-氟尿嘧啶速度较快,并且随着5-氟尿嘧啶负载量的增加,5-氟尿嘧啶的释放速度逐渐增加;③不同质量浓度海藻酸钠对肝癌SMMC-7 721细胞株的抑制作用较小;随着质量浓度的增加,层状双氢氧/5-氟尿嘧啶凝胶珠、海藻酸钠/层状双氢氧化物-5-氟尿嘧啶凝胶珠对肝癌SMMC-7721细胞株的抑制作用逐渐增强,且海藻酸钠/层状双氢氧化物-5-氟尿嘧啶凝胶珠的抑制作用更强;④结果表明,海藻酸钠/层状双氢氧化物-5-氟尿嘧啶凝胶珠具备pH选择性缓释作用及较强的肿瘤抑制效果.

目的:研制苯甲酸利扎曲普坦(RB)鼻用温度-离子敏感型原位凝胶,并考察其体外性质.方法:筛选合适的吸收促进剂,并对泊洛沙姆407及去乙酰结冷胶的最佳用量进行考察,制备RB温度-离子敏感型原位凝胶,对其胶凝温度、胶凝时间、胶凝强度、生物黏附力及体外释药特性进行测定.结果:最佳吸收促进剂为1.0％的羧甲基壳聚糖(CMCS),泊洛沙姆407用量为18％,去乙酰结冷胶用量为0.3％,胶凝温度为(32.6±0.3)℃,胶凝时间为(25.6±1.8)s,胶凝强度为(122.4±1.5)s,生物黏附力为(152.25±12.76)(×102dyne·cm-2),体外释药符合Higuchi方程:Q=5.5856t1/2+0.3260(r=0.9942).结论:RB鼻用温度-离子敏感型原位凝胶具有较好的温度、离子敏感性,并具有明显的缓释性.

目的:对苯甲酸利扎曲普坦(RB)鼻用温度-离子敏感型原位凝胶的体外溶蚀及安全性进行研究.方法:采用体外振荡法检测RB鼻用温度-离子敏感型原位凝胶的基质溶蚀及药物释放特性.以生理盐水为正常对照,1％去氧胆酸钠为阳性对照,观察RB鼻用温度-离子敏感型原位凝胶对蟾蜍上腭纤毛运动及形态的影响,以及对大鼠鼻黏膜形态的影响.结果:RB鼻用温度-离子敏感型原位凝胶的基质溶蚀及释药均为零级动力学过程,溶蚀方程为A=0.0922t+0.1988(r=0.9986),释药方程为Q=0.2460t+1.8462(r=0.9977),且两者有明显的线性相关性:Q=0.3525A-0.4248(r=0.9990).与正常对照组相比,RB鼻用温度-离子敏感型原位凝胶对蟾蜍纤毛运动能力无显著影响(P>0.05),且纤毛分布均匀,排列整齐,同时对大鼠鼻黏膜无明显的毒性.结论:RB从原位凝胶中的释放主要受凝胶溶蚀控制,同时具有良好的鼻用安全性.

目的 合成聚乙二醇-聚乳酸-聚组氨酸-聚乙烯亚胺(methoxy-poly(ethylene glycol)-polylactide-polyhistidine-ss-polyethylenimine,mPEG-PLA-PHis-ss-PEI)阳离子聚合物并制备siRNA胶束复合物,考察其体外制剂学性质.方法 以聚乙二醇单甲醚、D,L-丙交酯、聚组氨酸和聚乙烯亚胺为起始原料,合成聚乙二醇-聚乳酸-聚组氨酸-聚乙烯亚胺,并应用核磁共振氢谱和凝胶渗透色谱进行表征;采用薄膜分散法制备mPEG-PLA-PHis-ss-PEI/siRNA胶束复合物(micelleplexes);动态激光散射法测定胶束复合物的粒径和Zeta电位值;透射电镜观察胶束复合物的形态;超速离心法测定胶束复合物中,小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)的包封率;琼脂糖凝胶电泳阻滞法分别考察阳离子聚合物抵御阴离子置换能力、血清稳定性和胶束复合物在弱酸性和还原性条件下siRNA的触发释放行为.结果 所制备的胶束复合物呈类球形,大小均一,分布均匀;当氮磷比(nitrogen/phosphoruse molar ratio,N/P)为20时,胶束复合物平均粒径为104.0 nm,Zeta电位值为30.1 mV,siRNA的包封率为(92.9±2.4)％;凝胶电泳阻滞实验结果显示,当N/P大于7时,胶束复合物具有良好的阴离子抵御能力及较强的血清稳定性;胶束复合物在较低N/P条件下具有pH敏感和还原敏感性.结论 所制备的胶束复合物稳定性较好,可用于递送siRNA.