目的·构建负载在富含负电羟基的高聚物聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)/海藻酸盐(alginate,ALG)水凝胶(PVA-ALG)上的益生菌(Escherichia coli Nissle1917,EcN)体系(EcN@PVA-ALG),探究其在结肠炎症部位定植性及其对葡聚糖硫酸钠盐(dextran sulfate sodium salt,DSS)诱导的炎性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的治疗效果.方法·将EcN悬液加入PVA-ALG水凝胶中,过筛离心后得到EcN@PVA-ALG水凝胶益生菌复合物,使用流变仪验证PVA-ALG水凝胶的合成.利用电位仪检测EcN@PVA-ALG的表面电荷,荧光显微镜观察PVA-ALG上的EcN负载情况.通过酶标仪检测EcN@PVA-ALG在 600 nm处的吸光度;同时,取EcN@PVA-ALG复合物悬液进行细菌平板计数,检测EcN@PVA-ALG内EcN的生长活力.采用CCK-8法评估EcN@PVA-ALG对HEK293细胞增殖的抑制作用.利用活体成像系统(IVIS)分析PVA-ALG对炎症结肠的富集作用,观察其炎症靶向性能;将EcN负载在PVA-ALG上,再用IVIS观察EcN@PVA-ALG对炎症结肠的富集,观察其在炎症部位的定植能力.建立DSS诱导的IBD小鼠模型,EcN@PVA-ALG组(n=5)每天灌肠给予1×108CFU的EcN@PVA-ALG,连续5 d;另设PVA-ALG组、EcN组、PBS组和健康对照组,每组5只.治疗期间,每天记录小鼠的体质量.治疗结束后处死小鼠,取其结肠组织,测量结肠长度;进行疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分;检测炎症细胞因子的水平,包括肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-10和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β);通过苏木精-伊红染色(H-E染色)进行结肠组织的病理评估.结果·PVA-ALG和EcN@PVA-ALG均带负电.EcN成功负载于PVA-ALG,并且PVA-ALG不影响EcN的生长活力;同时,PVA-ALG对正常细胞也具有良好的安全性.与健康对照组相比,PVA-ALG对炎症结肠组织具有超过2倍的富集效果.体内外实验发现,负载EcN的EcN@PVA-ALG复合物对炎症组织的富集效果比未加任何修饰的EcN高8倍.EcN@PVA-ALG治疗后,小鼠体质量迅速恢复,DAI的上升被显著抑制,结肠长度与健康小鼠相近,促炎细胞因子TNF-α、IL-6水平降低而抗炎细胞因子IL-10和TGF-β水平升高,结肠组织隐窝结构恢复.结论·相比于未加修饰的EcN,EcN@PVA-ALG促进了EcN在结肠炎症部位的定植,并使其发挥更好的治疗DSS诱导的IBD的功效.

目的 以藤黄酸(GA)为模型药物,将GA吸附在层状双金属氢氧化物(LDH)表面从而获得GA-LDH复合物.方法 采用高效液相色谱法(HPLC)测定GA含量,并进行方法学验证.采用共沉淀、离子交换、剥离-重组、胶束载药等方法制备GA-LDH复合物.以载药量和包封率为指标,对载药方法、药载比和不同粒径大小的载体进行单因素考察.采用IR和XRD等对样品结构表征,考察GA-LDH的缓冲及缓释性能;采用分子对接方法计算GA与LDH之间的结合能大小.结果 确定以离子交换法、药载比为3∶5、水热合成LDH制备GA-LDH复合物的最佳制备工艺.优化后GA-LDH的载药量和包封率分别为21.37％、46.29％.酸碱滴定试验发现GA-LDH具有和LDH相似的缓冲性能.体外释放试验表明,GA-LDH具有一定的缓释效果,释药机制为被动扩散过程.分子对接结果从理论上佐证了 GA-LDH复合物的形成.结论 该载药复合物具有良好的载药性能和缓冲性能,有望成为一种新型的中药抗肿瘤成分高效载体.

目的 以替加氟和焦脱镁叶绿酸A为原料合成缀合物,并将其制备成胶束,实现光动力治疗和化疗的协同抗肿瘤作用.方法 以丁二酸酐连接替加氟衍生物与焦脱镁叶绿酸A,通过核磁共振氢谱、质谱进行结构表征;通过溶剂挥发法制备载药胶束,以载药量、形貌、粒径、ζ电位、体外抗肿瘤活性等对载药胶束进行制剂学评价.结果 替加氟-焦脱镁叶绿酸A复合物的结构得以确证;通过马尔文激光粒度仪和透射电镜验证所制备载药胶束粒径为143.9 nm,粒度均一;载药胶束可持续释药72 h以上,且激光照射可加速药物释放;载药胶束经激光照射可增强体外抗肿瘤效果,IC50值为14.81 μg·mL-1,其细胞毒性相较于单独给药替加氟增加至1.43倍.结论 替加氟-焦脱镁叶绿酸A前药负载的胶束可实现替加氟的缓释作用,并可通过光动力治疗联合化疗有效提高替加氟体外抗肿瘤效果.

目的 探讨弥散张量纤维束成像(DTT)联合氢质子磁共振波谱(1H-MRS)对脑胶质瘤病理分级的诊断价值.方法 将68例脑胶质瘤患者按照病理分级分为低级别组32例和高级别组36例.两组患者均采用DTT和 1H-MRS进行检查.观察患者常规MRI检查结果、DTT结果及代谢指标.结果 低级别组和高级别组患者平扫、增强扫描结果比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).高级别组患者脑肿瘤实质区和瘤周水肿区胆碱复合物(Cho)/肌酸(Cr)、Cho/N-乙酰天门冬氨酸(NAA)均明显高于低级别组,差异均有统计学意义(P＜0.01).两组患者肿瘤周围水肿带和瘤体相对各向异性分数(rFA)值比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);两组患者瘤体rFA值均低于肿瘤周围水肿带,差异均有统计学意义(P＜0.05).高级别组患者肿瘤周围水肿带和瘤体相对表观扩散系数(rADC)值均明显低于低级别组,差异均有统计学意义(P＜0.01).两组患者DTT结果比较,差异有统计学意义(P＜0.01).DTT联合 1H-MRS诊断脑胶质瘤病理分级的灵敏度、特异度、准确度均高于DTT和 1H-MRS单项检查.结论 DTT联合 1H-MRS有助于制订更好的手术方案,增加对脑胶质瘤和脑部白质纤维束的认知,提高对受损脑组织的了解程度,减少因检查对患者造成的创伤.DTT联合 1H-MRS的检查结果能够作为临床诊断脑胶质瘤病理分级的重要依据.

通过化学键合透明质酸(HA)和甘草次酸(GA)制备具有CD44受体靶向作用的HA-GA复合物,用以制备聚合物胶束,并采用MTT比色法和酶联免疫吸附分析法等对其制剂学性质和体外抗肝纤维化活性进行评价.结果显示,HA-GA复合物的临界胶束浓度为9.6μg/mL,形成的聚合物胶束粒径为217.0 nm,GA含量为18.9％.HA-GA聚合物胶束比GA溶液的细胞毒性强,同时能抑制肝星状细胞分泌转化生长因子β1,表现出了良好的体外抗肝纤维化活性.

目的 以两亲性聚己内酯-聚精氨酸聚合物(PCL-R15)为载体,采用不同工艺流程制备得到粒径电位均不同的2种纳米颗粒,并以静电结合包载siRNA得到2种纳米复合物(NR60/siRNA和NR160/siRNA),比较两者在体外细胞水平的效应差异.方法 通过对比考察2种纳米复合物的粒径、电位、siRNA包载保护能力、细胞毒性、细胞摄取机制和基因沉默效率等方面的差异.结果 2种胶束复合物虽然具有类似的siRNA保护能力和细胞毒性,但NR160/siRNA复合物表现出较高的粒径电位值,两者粒径相差约100 nm和电位相差约20 mV.并且NR160/siRNA复合物具有更高的细胞摄取效率和更为复杂的摄取途径,表现出更强的基因沉默效率.结论 不同工艺制得的2种PCL-R15/siRNA纳米复合物可在细胞水平上引起siRNA转染效率的差异.

目的 介绍甘草次酸修饰肝靶向药物传递系统研究进展,为该领域的深入研究和临床用药提供参考.方法 查阅近5年国内外相关文献,对甘草次酸修饰的肝靶向药物传递系统进行归纳和总结.结果 以甘草次酸受体为靶点,应用基于甘草次酸修饰的纳米药物传递系统(脂质体、纳米粒和聚合物胶束等)和甘草次酸-药物复合物将药物更有效地传递至肝组织、肝细胞中,提高抗肿瘤药物的作用效果.结论 甘草次酸修饰肝靶向药物传递系统具有极大的研究价值和应用前景.

目的 制备一种共载基因和化学治疗药的硫辛酸(LA)修饰的以非内吞机制进入细胞的固有无序蛋白-细胞质定位的内化肽6(CL)的纳米复合物(LA-CL),并考察其在人胚肾细胞系HEK293细胞的转染效率、细胞摄取情况及其体外释放规律.方法 以不同比例(2.5%、5%、10%、20%)半胱氨酸作为交联剂,合成4种不同交联度的LA-CLss,分别命名为LA-CLss1~LA-CLss4,并用核磁共振氢谱(1HNMR)和凝胶色谱鉴定.取增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)和LA-CLss以不同氮磷比(N/P,2.5、5、10、20、40、80)自组装形成纳米复合物,用激光粒度测定仪测定复合物的粒径和zeta电位,琼脂糖凝胶电泳测定载体LA-CLss对pEGFP的包裹能力和保护能力.用超声乳化法制备载多西他赛(DTX)的载药胶束,并用芘荧光探针光谱法测定LA-CLss3的临界胶束浓度.将LA-CLss/pEGFP纳米复合物与HEK293细胞共同培养,考察不同交联度复合物的细胞转染情况.结果 1HNMR结果确定LA-CLss合成成功.N/P=40时,HEK293细胞对LA-CLss3/pEGFP的转染效率高于LA-CL、LA-CLss1、LA-CLss2、LA-CLss4与pEGFP形成的复合物.超声乳化法制备的载药胶束包封率为(85.25±0.04)%,载药量为(8.81±0.02)%.细胞摄取结果表明,该载体可以有效地将基因递送至细胞内.体外释放实验结果表明,该多肽胶束具有还原性条件敏感释药行为.结论 制备的LA-CLss/DTX/pEGFP纳米复合物有望成为一种高效的共载基因和化学治疗药的载体.

目的构建angiopep-2修饰的硫辛酸-聚精氨酸组氨酸(LHRss)多肽纳米胶束并包载抗肿瘤药物多柔比星(DOX)的脑胶质瘤靶向纳米给药系统(LHRss-An/DOX).方法采用超声乳化法制备包载化疗药物DOX的多肽胶束LHRss-An/DOX,检测复合物的粒径、zeta电位和外观形态;测定载药量和包封率,并对其体外释放特性进行考察;通过体外血脑屏障(BBB)模型考察载药胶束的跨膜转运效率,使用激光扫描共聚焦显微镜观察DOX胞内的分布情况及对脑胶质瘤的靶向性.结果胶束LHRss-An/DOX呈球形,平均粒径为(100.9±8.7)nm,聚合物分散性指数为0.232,电位为(28.8±3.3)mV,最佳药载比为40％,载药量为15.8％,包封率为55.3％,在pH 7.4、pH 5.5和pH 5.5+10 mmol/L DL-二硫苏糖醇(DTT)环境下72 h内的累积释放率分别为(60.3±2.6)％、(84.1±3.9)％和(96.6±2.7)％;LHRss-An/DOX的跨BBB效率分别是LHRss/DOX和游离DOX的2.04和4.27倍,差异有统计学意义(P<0.05);脑胶质瘤细胞U251摄取LHRss-An/DOX的荧光强度强于LHRss/DOX和游离DOX的荧光强度.结论经过angiopep-2修饰的载药纳米胶束的跨BBB能力及脑胶质瘤的靶向性显著增强,是一种潜在高效的靶向胶质瘤给药系统.

目的 制备了一种新型多柔比星纳米载药胶束.方法 通过开环聚合合成两亲性高分子聚合物聚乳酸-甲氧基聚乙二醇(PLA-mPEG);通过左旋的聚乳酸(PLLA)与右旋的聚乳酸(PDLA)之间的空间立构复合作用形成空间立构复合物mPEG-PLLA/mPEG-PDLA.并由两亲性分子的自组装作用形成胶束,包载阿霉素并在体外模拟载药胶束在体内的释放情况.结果 PLA-mPEG聚合物由1H NMR和红外波谱表征,通过差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)与X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)确证立构复合结构的形成.通过动态光散射测定空白胶束为(80±28)nm与载药胶束的粒径(160±63)nm,通过芘探针法测定胶束的临界胶束浓度(critical micelle concentration,CMC)为6.6mg/L.测得阿霉素立构复合纳米胶束的载药量为4.54％.结论 通过空间立构复合作用形成的胶束,比单一聚乳酸均聚物形成的胶束的CMC更低,载药量更高,稳定性更好.