目的 探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制.方法 通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激.加强免疫后将胶原免疫的50只小鼠随机分组为CIA模型组、雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷低、中、高剂量组,另有10只小鼠注射等量生理盐水作为对照组.在对小鼠进行连续14天灌胃治疗并观察各组小鼠足爪的炎症程度,取下各组小鼠脾、腹股沟淋巴结和踝关节、膝关节,对踝关节、膝关节进行HE染色,检测各组淋巴结、脾组织中mRNA和蛋白质水平的相关自噬指标.结果 与CIA模型组相比,穿山龙薯蓣皂苷高剂量组关节炎指数(AI)评分降低(P＜0.05);雷公藤组及穿山龙薯蓣皂苷组足爪厚度差值减小(P＜0.01).与对照组相比,CIA模型组体质量明显下降(P＜0.01);小鼠膝关节滑膜和足爪踝关节HE染色结果显示CIA模型组对比对照组出现免疫细胞浸润、骨质侵蚀、软骨破坏和滑膜增生的症状;雷公藤组与穿山龙薯蓣皂苷中、高剂量组对CIA模型有不同程度的治疗作用,可以减轻和预防症状.与CIA模型组相比,雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷治疗组中LC3、Beclin-1的mRNA水平和蛋白水平的表达升高,p62的mRNA水平和蛋白水平的表达降低.结论 穿山龙薯蓣皂苷可能通过抑制自噬对CIA模型小鼠起到治疗作用.

目的:基于网络药理学和分子对接探讨龙加通络胶囊治疗缺血性中风物质基础及作用机制.方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医药综合数据库(TCMID)以及查阅文献获得穿山龙、刺五加的主要活性成分;使用 PharmMapper数据库预测活性成分靶点,利用人类基因综合数据库(GeneCards)和在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)得到疾病相关靶点,对活性成分靶点与疾病靶点取交集后采用 DAVID数据库进行基因本体(GO)功能以及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.最后通过 AutoDock Vina软件对关键靶点和化合物进行分子对接批量处理.结果:筛选出穿山龙、刺五加针对缺血性中风的 14 个活性成分和 179个作用靶点.蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络拓扑分析发现白蛋白(ALB)、蛋白激酶 B1(AKT1)、胱天蛋白酶 3(CASP3)、表皮生长因子受体(EGFR)、酪氨酸激酶(SRC)是穿山龙、刺五加治疗缺血性中风的关键靶点.GO功能分析发现龙加通络胶囊生物过程主要集中在中性粒细胞脱粒、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录过程的正调控、凋亡过程的负调控等多个方面;KEGG信号富集分析主要涉及磷脂酰肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B(PI3K/AKT)、有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)、Ras相关蛋白 1(Rap1)等信号通路.分子对接结果显示活性物质与靶点蛋白之间存在较强的结合力,其中薯蓣皂苷与 AKT1 的结合力最强.结论:穿山龙、刺五加治疗缺血性中风具有多组分、多靶点相互协同的特点,为今后龙加通络胶囊的临床应用提供了理论基础和参考.

穿山龙属于薯蓣科植物,广泛分布于我国的华北、东北、青海等地区,其根茎是一种重要的中药材,在我国具有几千年的应用历史.据中医学记载,该药材具有止咳化痰、祛风止痛、舒筋活血等功效.现代研究表明,该药材的主要活性成分为皂苷,具有抗肿瘤、抗炎、降血脂、抑菌和抗病毒等作用.鉴于其诸多的生物学活性及药理作用,针对其开发和应用具有良好的前景.该文对穿山龙皂苷的药理活性、治疗作用及机制的研究现状加以总结,为进一步研发穿山龙皂苷提供理论基础.

目的:星点设计-效应面法优选穿山龙咀嚼片提取工艺.方法:以乙醇浓度、提取时间、溶媒比为自变量,以薯蓣皂苷含量为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,用效应面法选取出最佳工艺,并进行预测分析.结果:确定最优提取工艺为8倍量,80％乙醇,提取2次,每次120min,提取预测值与理论值偏差平均值为1.4％,二项式拟合复相关系数0.976 9.结论:星点设计-效应面法优选的穿山龙咀嚼片提取工艺方法简单,精密度高,可预测性较好.

目的:通过观察痛性糖尿病周围神经病变模型大鼠坐骨神经中钙离子通道蛋白表达,探究穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变(PDPN)的治疗作用.方法:实验参照Sally等造模方法诱发糖尿病大鼠,以钾离子皮下透入致痛,采用WQ-9E痛阈测定仪测定痛阈值,符合条件者列为PDPN模型大鼠.将大鼠分为STZ模型组、薯蓣皂苷高剂量组、薯蓣皂苷低剂量组和强的松组.采用RT-PCR技术法分别于2周、4周、8周,检测各组大鼠坐骨神经中钙离子蛋白表达水平.结果:与模型组相比,各治疗组的钙离子通道rnRNA表达在4周和8周两个时间点上呈下降趋势(P＜0.01),8周时薯蓣皂苷高剂量组大鼠坐骨神经的钙离子通道mRNA表达低于薯蓣皂苷低剂量组和强的松组(P＜().01,P＜0.05).结论:高剂量组薯蓣皂苷对PDPN的作用优于低剂量组,同时优于强的松组,反映出穿山龙提取物薯蓣皂苷能够缓解PDPN,效果超过强的松.说明穿山龙提取物薯蓣皂苷可以下调痛性糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经钙离子通道mRNA表达,对痛性糖尿病周围神经病变有一定的治疗作用.

穿山龙的主要成分为薯蓣皂苷,具有调节免疫等多种药理作用.现代已作为甾体激素药物和抗冠心病皂苷类药物的重要工业原料.主要药理作用有抗炎、平喘、抗肿瘤、降低血糖、降血尿酸等作用.临床主要用于治疗支气管哮喘、风湿性关节炎、肿瘤、糖尿病等.

本文通过响应面法优选陶瓷膜分离穿山龙薯蓣皂苷的工艺条件.以指标成分转移率为评价,采用单因素方法选取过膜温度(℃)、过膜浓度(g/L)、过膜压力(MPa)三种因素水平.根据Box-Behnken的中心组合实验设计原理,利用Design-Expert软件对数据进行回归分析,得到最佳分离条件.陶瓷膜分离穿山龙薯蓣皂苷的优化条件为:过膜温度30℃、过膜浓度2 g/L、过膜压力0.8 MPa,在此工艺条件下,指标成分转移平均为44.88％.经过响应面优化陶瓷膜分离穿山龙薯蓣皂苷的条件能克服传统水提醇沉工艺导致有效成分损失较大、用醇量大、生产周期长等缺点,具有可操作性,可用于穿山龙薯蓣皂苷的分离.

目的:探讨膜分离与大孔树脂吸附技术对穿山龙水提液物理化学性质的影响.方法:采取煎煮2次,10倍量水,每次120 min的水煎煮工艺提取穿山龙,分别采用不同型号的大孔树脂(HP-20、HPD-600、D101、AB-8)吸附及膜分离(陶瓷微滤膜0.8μm、0.2μm、0.05μm和中空纤维超滤膜50kDa、6kDa)技术纯化穿山龙水提液,测定其电导率,黏度,浊度等物理化学参数及蛋白质、多糖、总黄酮、薯蓣皂苷等物质的含量.结果:穿山龙水提液经不同技术纯化后黏度无显著影响,电导率和浊度纯化后显著减小;通过各物质保留率可看出D101型大孔树脂适合分离纯化薯蓣皂苷,而HPD-600对于各物质的保留都相对较低,与理化参数结果一致.0.2μm微滤膜更适合主含皂苷水提液的分离纯化.结论:理化参数的改变与大分子物质的含量减小有着明显的对应关系:大分子物质含量降低,电导率与浊度减小.与大孔树脂吸附相比,膜分离技术更适合穿山龙水提液中薯蓣皂苷成分的分离纯化,微滤膜比超滤膜对薯蓣皂苷的保留率更高.

目的 建立HPLC法同时测定不同产地穿山龙药材中原薯蓣皂苷、原纤细薯蓣皂苷、甲基原薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷.方法 穿山龙药材粉末经50％甲醇超声处理.采用Agilent SB-Aq色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水,梯度洗脱;检测波长203 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;进样体积20μL.结果 原薯蓣皂苷、原纤细薯蓣皂苷、甲基原薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷在1.0540～10.5400、0.5190～5.1900、0.2870～2.8700、0.0212～0.2120、0.0614～0.6140、0.0614～0.6140μg线性关系良好,r均大于0.9990.平均加样回收率分别为100.19％、100.24％、99.87％、100.92％、99.36％、100.03％,RSD值分别为2.03％、2.51％、2.33％、3.07％、2.77％、3.41％.不同产地的穿山龙药材中原薯蓣皂苷、原纤细薯蓣皂苷、甲基原薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷的质量分数分别为1.587～4.837％、0.260～1.950％、0.477～1.317％、0.037～0.187％、0.801～3.813％、0.088～0.524％.结论 该方法快速、简便、准确,可用于穿山龙药材的质量控制.

目的:观察穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变大鼠Nav 1.7通道mRNA表达的影响.方法:SPF级雄性Wistar大鼠80只,随机取14只为正常对照组,其余大鼠腹腔一次性注射链脲佐菌素STZ(53 mg/kg)造模,72 h后测大鼠尾静脉血血糖＞16.7 mmol/L作为观察对象,持续喂养2周,将60只成模大鼠随机分为模型组,薯蓣皂苷高、低剂量组,强的松组,分别于药物治疗后第4、8周,采用实时荧光定量PCR法检测大鼠坐骨神经Nay 1.7mRNA表达情况.结果:与同期模型组比较,各治疗组大鼠坐骨神经Nay 1.7mRNA表达水平下调(P＜0.01),低剂量组较同期高剂量组Nay 1.7mRNA表达上调(P＜0.01),强的松组与同期低剂量组比较,坐骨神经Nay 1.7mRNA表达水平下调(P＜0.05).结论:薯蓣皂苷可以减轻PDPN大鼠坐骨神经的损伤.