目的:构建荷载第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶（PTEN）基因的溶瘤腺病毒验证其在前列腺癌中表达水平及靶向抗肿瘤效果。方法:挖掘公开数据库和利用Galaxy在线工具处理本中心去势抵抗性前列腺癌（CRPC）标本基因测序数据，分析PTEN基因在前列腺癌组织中的表达差异。收集2019年3月至2022年8月徐州医科大学附属医院79例前列腺癌患者的病理样本和临床信息，免疫组织化学法检测前列腺癌组织及癌旁组织中PTEN蛋白的表达。同源重组法构建溶瘤腺病毒ZD55-PTEN，细胞计数试剂盒（CCK-8）法、Hoechst-33258和划痕实验检测其靶向抗肿瘤效果。分别采用卡方检验和 t检验对定性资料和定量资料进行统计分析，不满足正态分布的数据采用Mann-Whitney U检验；Spearman分析PTEN表达水平与临床病理特征的关系。 结果:前列腺癌组织中PTEN表达水平明显低于癌旁组织，差异有统计学意义（501例比52例， Z＝－19.25， P<0.05）；PTEN的mRNA表达水平与淋巴结转移（ n＝425， rs＝－0.98， P<0.05）和Gleason评分（ n＝497， rs＝－1.25， P<0.05）呈负相关。CRPC阶段PTEN缺失明显高于激素敏感性前列腺癌（HSPC）阶段（79例比125例， Z＝－0.89， P<0.05）。前列腺癌组织的PTEN蛋白缺失率高于癌旁组织（45.6%比16.5%， t＝10.98， P<0.01），术前血清PSA水平（ n＝79， rs＝－0.47， P<0.01）和术后Gleason评分（ n＝79， rs＝－0.31， P<0.05）与PTEN的表达呈负相关。PTEN缺失的前列腺癌患者，确诊时PSA水平（36例比43例， χ2＝12.22， P<0.05）和根治术后Gleason评分（36例比43例， χ2＝6.92， P<0.05）显著高于PTEN蛋白完整患者。成功构建溶瘤腺病毒ZD55-PTEN，ZD55-PTEN组细胞存活率低于对照组[ZD55-EGFP组（49.67±4.19）%、ZD55-PTEN组（29.33±3.84）%， t＝8.68， P<0.05]；细胞凋亡率高于对照组[PBS组（12.86±5.23）%、ZD55-EGFP组（48.18±4.22）%、ZD55-PTEN组（68.93±5.88）%， t＝5.90， P<0.05]；划痕愈合率低于对照组[PBS组（79.13±3.98）%、ZD55-EGFP组（61.02±4.73）%、ZD55-PTEN组（47.92±5.97）%， t＝6.34， P<0.05]。 结论:PTEN基因低表达于前列腺癌组织中，且具有抑制DU145细胞的增殖、迁移并诱导凋亡的功能。

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-494在脊髓损伤中的作用及其意义。方法:应用脊髓表面挫伤的方法建立大鼠脊髓损伤模型。分为1个假损伤对照组和5个脊髓损伤组，每组5只大鼠(购自复旦大学实验动物中心)。用miRNA芯片分析脊髓损伤后不同时间miRNA的表达。用agomiR-494鞘内治疗后，评定大鼠运动功能。正态性采用Shapiro-Wilk正态检验，组间差异采用单因素方差分析和双侧 t检验。 结果:与假损伤对照组比较，有14个miRNA上调，有46个miRNA下调2倍，而miR-494是最显著下调的miRNA之一。与单纯SCI组比较，agomiR-494鞘内治疗后的SCI＋agomiR-494组，大鼠运动功能明显改善，剩余组织(甲酚紫染色评估)增多，TUNEL阳性细胞减少。agomiR-494对miR-494的上调可促进脊髓损伤后大鼠的功能恢复，减小病变大小并抑制凋亡细胞。脊髓组织中miR-494的表达与第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)的表达呈负相关( r＝－0.834， P<0.05)。此外，miR-494通过直接靶向BV-2细胞中的3’端非编码区(3’UTR)来抑制蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)途径的负调节剂PTEN。 结论:在大鼠脊髓损伤模型中miR-494的过表达通过抑制PTEN的表达来激活Akt/mTOR信号通路，对脊髓损伤具有保护作用。

目的:基于生信分析评价前列腺癌(PCa)中TP53及第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)的表达水平及相关性。方法:利用生物信息学方法，挖掘公开数据库，分析TP53基因在前列腺癌中的表达并分析其可能的调控机制。收集徐州医科大学附属医院泌尿科2022年3月至2022年8月间诊治的PCa 79例，复阅病理切片并整理相关临床资料，采用免疫组织化学SP染色法检测79例PCa中PTEN及TP53的蛋白表达水平。分类资料的组间比较采用卡方检验和Mann-Whitney U检验，应用Pearson相关分析前列腺癌患者中PTEN和TP53的相关性。 结果:通过TCGA数据库分析，TP53在前列腺癌组织中的表达水平明显高于正常组织(501个比52个， Z＝8 874.5， P<0.05)；TP53表达水平(低表达250例比高表达251例)与前列腺癌患者临床病理参数关系表明，TP53与患者年龄( χ2＝6.079， P>0.05)、T分期( χ2＝0.338， P>0.05)、N分期( χ2＝0.176， P>0.05)、PSA水平( χ2＝0.016， P>0.05)和Gleason评分( χ2＝3.999， P>0.05)在内的临床特征之间均无统计学意义；建立前列腺癌总体生存期(OS)预测列线图，分析得出TP53不能作为OS的独立预后因素，PSA值与Gleason评分在前列腺有预后作用；免疫组织化学染色PTEN蛋白阳性(完整)者占73%，阴性(缺失)者占27%；TP53蛋白染色呈野生型突变模式者占81%，突变型表达模式者占19%。Pearson统计学分析，PTEN缺失与TP53突变型显著相关性( r＝0.653， P<0.05)。 结论:TP53联合PTEN对前列腺癌的进展有一定预测作用，且为临床前列腺癌治疗提供参考。

目的:观察第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)和凋亡抑制蛋白生存素(Survivin)在直肠癌组织中的表达，探讨其对直肠癌新辅助放化疗(nCRT)后肿瘤退缩效果的预测价值及与预后相关性。方法:收集华中科技大学同济医学院附属普爱医院2014年1月至2016年1月行nCRT＋全直肠系膜切除术(TME)＋辅助化疗(aCT)的直肠癌患者78例，应用免疫组织化学染色法检测直肠癌组织中PTEN、Survivin的表达，应用Spearman等级相关检验分析PTEN和Survivin表达的关系，应用美国肿瘤联合委员会(AJCC)-肿瘤病理评估(TRG)评分系统对放化疗后肿瘤退缩效果进行评价，分析PTEN和Survivin同肿瘤退缩效果之间的关系。采用Kaplan-Meier法分析PTEN、Survivin的表达与无病生存期(DFS)的相关性。结果:免疫组织化学显示PTEN和Survivin的阳性表达率分别为56.4%(44/78)、66.7%(52/78)，且两者表达呈负相关( r s＝-0.512， P<0.01)。PTEN和Survivin的表达与组织学分型、T分期、淋巴结转移及肿瘤退缩明显相关( χ2＝11.031/12.326、8.045/6.205、6.617/5.246、11.204/8.357， P<0.05)，而与患者年龄、性别无明显相关( χ2＝0.018/0.632、0.143/0.696， P>0.05)。nCRT后肿瘤退缩总有效率为53.8%(42/78)，其中PTEN(＋)/Survivin(-)组有效率明显高于其他组( χ2＝15.031， P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示，PTEN阳性者的中位DFS(32.0个月)显著高于阴性者(25.0个月)( χ2＝4.144， P<0.05)。Survivin阳性者的中位DFS(24.0个月)显著低于阴性者(32.0个月)( χ2＝4.126， P<0.05)。 结论:PTEN和Survivin在直肠癌组织中的表达呈负相关，两者的表达状态有助于预测nCRT后肿瘤退缩效果和判断预后。

目的:探讨小分子靶向药物SKLB-BH128诱导线粒体自噬抗结直肠癌的分子机制研究。方法:结直肠癌细胞系SW620细胞随机分为对照组、50 ng/ml组和100 ng/ml组，对照组、50 ng/ml组和100 ng/ml组细胞分别用0 ng/ml、50 ng/ml组和100 ng/ml SKLB-BH128处理24 h，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析细胞的活力和克隆形成数量；采用蛋白质免疫应激分析沉默调节蛋白3(SIRT3)、线粒体外膜转位酶20(TOM20)、叉头框O3A(FOXO3A)、第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因诱导激酶(PINK1)、Parkin、微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达水平，计算LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值；在SIRT3过表达结肠癌细胞分析SKLB-BH128对线粒体自噬蛋白表达的影响；采用流式细胞术分析细胞凋亡情况。SKLB-BH128组间计量数据比较采用单因素分析。结果:对照组细胞吸光度值和克隆形成率[1.75±0.07、(83.50±8.88)%]高于50 ng/ml组[1.34±0.16、(72.25±6.09)%]，差异有统计学意义( t＝5.681、4.974， P<0.05)。50 ng/ml组细胞吸光度值和克隆形成率[1.34±0.16、(72.25±6.09)%]明显高于100 ng/ml组细胞[0.85±0.05、(61.88±5.22)%]，差异有统计学意义( t＝4.998、5.441， P<0.05)。对照组细胞SIRT3相对活性(1.08±0.19)高于50 ng/ml组细胞(1.48±0.15)，差异有统计学意义( t＝6.158， P<0.05)。50 ng/ml组细胞SIRT3相对活性(1.48±0.15)高于100 ng/ml组细胞(1.85±0.14)，差异有统计学意义( t＝4.612， P<0.05)。对照组FOXO3A和Beclin1乙酰化水平(1.10±0.07、1.30±0.06)高于50 ng/ml组细胞(0.81±0.06、0.98±0.08)，差异有统计学意义( t＝6.879、7.562， P<0.05)。50 ng/ml组细胞FOXO3A和Beclin1乙酰化水平(0.81±0.06、0.98±0.08)明显高于100 ng/ml组细胞(0.54±0.07、0.76±0.10)，差异有统计学意义( t＝8.224、6.325， P<0.05)。对照组细胞线粒体外膜转位酶20(TOM20)表达水平(1.22±0.07)高于50 ng/ml组细胞(0.92±0.06)，差异有统计学意义( t＝3.561， P<0.05)。50 ng/ml组细胞TOM20表达水平(0.92±0.06)高于100 ng/ml组细胞(0.64±0.10)，差异有统计学意义( t＝3.120， P<0.05)。对照组细胞PINK1表达水平和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(0.81±0.07、0.71±0.08)低于50 ng/ml组细胞(1.17±0.11、1.07±0.07)，差异有统计学意义( t＝6.312、4.589， P<0.05)。50 ng/ml组细胞PINK1表达水平和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(1.17±0.11、1.07±0.07)低于100 ng/ml组细胞(1.41±0.10、1.39±0.08)，差异有统计学意义( t＝5.140、3.441， P<0.05)。对照组细胞凋亡率[(2.55±0.27)%]低于50 ng/ml组[(7.16±1.24)%]，差异有统计学意义( t＝5.123， P<0.05)。50 ng/ml组细胞凋亡率[(7.16±1.24)%]低于100 ng/ml组细胞凋亡率[(19.07±2.41)%]，差异有统计学意义( t＝6.210， P<0.05)。 结论:SKLB-BH128靶向激活SIRT3，诱导线粒体自噬，进而抑制结肠癌细胞增殖，诱导肿瘤细胞的凋亡。

目的:通过体外培养人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)观察微小RNA(miRNA)-29a与第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)的调节对神经细胞增殖和轴突生长的作用。方法:通过上海中科院细胞库购买的SH-SY5Y细胞经过体外培养(4×10 4/ml)分别转染miRNA-29a的激动剂和抑制剂(40 nmol/L)，构建miRNA-29a不同表达水平的细胞。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测细胞转染效果(转染24 h)和人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因表达水平(转染48 h)。转染72 h后通过蛋白免疫印迹(Western blot)检测不同细胞中PTEN、Akt和mTOR蛋白的表达和磷酸化水平，通过神经形态学和二苯基四氮唑溴盐比色法(MTT)检测细胞的增殖和轴突长度。通过单因素方差分析及LSD- t法检验比较各组数据。 结果:转染miRNA-29a激动剂组的miRNA-29a表达水平明显高于miRNA-29a抑制组(9.03±0.12比0.31±0.03， t＝241.70， P<0.05)，而激动组PTEN基因和蛋白的表达水平明显低于抑制组(0.31±0.02比3.26±0.23、0.30±0.06比3.36±0.15， t＝45.09、58.79， P<0.05)。miRNA-29a激动组中Akt、mTOR蛋白的磷酸化水平明显高于抑制组(3.26±0.13比0.42±0.03、2.57±0.13比0.31±0.04， t＝71.45、51.55， P<0.05)。在miRNA-29a激动组中，SH-SY5Y细胞增殖活性和轴突长度明显高于miRNA-29a抑制组[0.86±0.07比0.44±0.03、(157.56±11.13) μm比(43.48±4.92) μm， t＝13.89、31.11， P<0.05]。 结论:miRNA-29a可以通过干预PTEN表达，调节磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt/mTOR信号通路中Akt和mTOR蛋白的磷酸化水平，促进SH-SY5Y细胞增殖和轴突生长。

目的:探讨脊髓损伤后大鼠线粒体自噬变化及靶向Nix对脊髓损伤的影响。方法:30只SD大鼠按照数字表格法分为对照组、脊髓损伤组和Nix下调组，每组10只。Nix下调组小鼠在术前24 d脊髓中注射Nix短发卡RNA(shRNA)腺相关病毒，对照组和脊髓损伤组相同位置注射等体积对照腺相关病毒。脊髓损伤组和Nix下调组大鼠采用动脉瘤夹压迫型损伤法制备脊髓损伤模型，对照组不做处理。两组建模14 d后采用染色法分析脊髓部位变性神经元的数量；采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)运动功能评分表分析3组大鼠损伤后运功功能变化；采用蛋白质免疫印迹分析3组大鼠线粒体外膜蛋白TOM20、线粒体内膜蛋白Tim23、第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因诱导激酶(PINK1)、Parkin表达水平。采用透射电子显微镜分析3组大鼠3组大鼠脊髓细胞自噬体数量；采用流式细胞术分析3组小鼠脊髓细胞线粒体膜电位；组间比较采用单因素方差分析。结果:Nix下调组大鼠骨髓组织Nix蛋白表达水平(0.89±0.31)明显低于脊髓损伤组(1.79±0.11)，差异有统计学意义( t＝15.320， P<0.05)。Nix下调组大鼠骨髓组织TOM20和Tim23蛋白表达水平(0.80±0.07、0.69±0.06)明显高于脊髓损伤组(0.53±0.12、0.39±0.09)，差异有统计学意义( t＝6.029、8.270， P<0.05)。Nix下调组大鼠骨髓组织PINK1和Parkin蛋白表达水平(1.04±0.11、0.83±0.07)明显低于对照组(1.48±0.15、1.24±0.13)，差异有统计学意义( t＝7.565，9.019， P<0.05)。Nix下调组大鼠骨髓组织死亡神经元数量[(6.70±1.34)个]明显低于脊髓损伤组[(17.9±5.26)个]，差异有统计学意义( t＝6.527， P<0.05)。Nix下调组大鼠骨髓细胞自噬数量[(14.00±2.58)个]明显高于脊髓损伤组[(29.70±3.56)个]，差异有统计学意义( t＝11.290， P<0.05)。Nix下调组大鼠骨髓细胞线粒体膜电位荧光强度(179.54±12.02)明显高于脊髓损伤组(108.14±12.89)，差异有统计学意义( t＝12.810， P<0.05)。Nix下调组大鼠BBB评分[(12.50±2.80)分]明显高于脊髓损伤组[(5.80±1.48)分]，差异有统计学意义( t＝6.960， P<0.05)。 结论:脊髓损伤后线粒体自噬水平显著增加，下调Nix可抑制抑制线粒体自噬，降低线粒体损伤，保护脊髓神经元，进而改善大鼠神经功能。

目的:探讨Bisperoxovanadium[bpV(pic)]对脊髓损伤(SCI)后自噬的影响及其机制。方法:将20只SD大鼠购自右江民族医学院动物中心按随机数字表法分为假手术组、SCI组、bpV(pic)组；假手术组4只，另外两组每组8只。假手术组只行椎板切除术，不造成SCI；SCI组按Allen’s法制做SCI模型，不进行其他干预处理；bpV(pic)组在SCI模型基础上予bpV(pic)干预处理。伤后6 h、1、3、7、14 d对各组大鼠进行运动功能Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分。伤后2周对SCI组和bpV(pic)组SCI部位进行切片后苏木精-伊红(HE)染色和尼氏染色分析病理变化；免疫荧光分析SCI组和bpV(pic)组的LC3B蛋白变化，免疫印迹分析LC3B、Beclin1和磷酸化第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)及磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)的蛋白变化。2周后通过免疫组织化学进一步验证SCI组与bpv(pic)组磷酸化PTEN的变化。采用两独立样本的 t检验。 结果:假手术组的大鼠并没有出现运动功能的障碍，BBB评分一直稳定在21分左右。在SCI手术对照组，大鼠出现严重的运动功能失调，第7天，SCI手术对照组BBB评分为(6.02±1.02)分，bpv(pic)治疗组为[(7.82±0.11)分， t＝3.039， P<0.05]，第14天SCI手术对照组评分为(8.87±1.29)分，bpv(pic)治疗组为[(12.02±1.12)分， t＝4.211， P<0.05]，尼氏染色结果显示SCI手术组阳性率(12.45±1.90)%，bpv(pic)治疗组为(24.14±2.09)%， t＝7.154， P<0.05]，差异均有统计学意义。LC3B免疫荧光结果显示，SCI手术组阳性率为(7.71±2.08)%，bpv(pic)治疗组为(21.14±1.97)%( t＝9.352， P<0.05)，免疫印迹染色，LC3B SCI手术组相对表达量为0.32±0.12，bpv(pic)治疗组为2.67±0.21( t＝17.110， P<0.05)；Beclin1，SCI手术组相对表达量为0.86±0.22，bpv(pic)治疗组为1.91±0.31( t＝4.784， P<0.05)，差异均有统计学意义。免疫印迹法结果显示，SCI手术组p-pten相对表达量为0.31±0.05，bpv(pic)治疗组为0.19±0.04( t＝3.246， P<0.05)；SCI手术组p-ERK1/2相对表达量为0.03±0.01，bpv(pic)治疗组为0.95±0.20( t＝7.785， P<0.05)；免疫荧光，p-ERK1/2 SCI手术组阳性率(19.91±1.18)%，bpv(pic)治疗组为(52.43±3.97)%( t＝17.620， P<0.05)，差异均有统计学意义。 结论:bpV(pic)能明显改善大鼠SCI后的神经修复及运动功能恢复，其可能机制是bpV(pic)通过抑制PTEN的磷酸化活性，进而激活ERK1/2信号，增强神经细胞的自噬，进而促进损伤修复。

目的:探讨前列腺癌(PCa)中特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)、第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)的蛋白表达水平及临床意义。方法:收集徐州医科大学附属医院泌尿科2022年3月至8月间诊治的79例PCa患者的相关资料，采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)染色法检测79例PCa中SATB1、PTEN蛋白表达水平，并分析其相关性。结果:79例PCa患者年龄≤65岁者13例，>65岁者66例，中位年龄77岁。术前前列腺特异抗原(PSA)值0~10 ng/ml者13例，10~20 ng/ml者12例，>20 ng/ml者51例，另有3例PSA值不详。病理Gleason评分<7分者6例，评分＝7分者11例，评分>7分者62例。免疫组织化学染色SATB1高表达者占57%，低表达者占43%；PTEN蛋白阳性者占73%，阴性者占27%。SATB1缺失与PTEN缺失、年龄呈正相关( r＝－0.292、－0.235， P<0.05)，与术前PSA值、Gleason评分无明显相关。 结论:分析PCa中SATB1、PTEN的表达有助于PCa的风险分层，为预测预后提供参考。

目的:探讨p53/微小RNA(miRNA，miR)-205/第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)信号通路在顺铂诱导急性肾损伤小鼠中的作用，减轻顺铂在三阴性乳腺癌中发挥抗肿瘤活性时产生的不良反应。方法:30 mg/kg顺铂腹腔注射小鼠(购自江苏卡文斯实验动物中心)建立急性肾损伤模型。将18只雄性C57小鼠随机分为顺铂组、顺铂＋p53抑制剂组、对照组。检测每组小鼠血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平；苏木精-伊红(HE)染色评估肾小管损伤；半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3荧光染色检测肾小管上皮细胞凋亡；反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-205表达；蛋白质印迹法(Western blot)分析肾组织p53和PTEN表达。使用SPSS 17.0统计软件分析，采用 t检验和单因素方差分析。 结果:Western blot分析结果显示顺铂组p53和PTEN相对表达量较对照组显著升高(0.16±0.03比0.70±0.04、0.43±0.05比0.91±0.07)，差异有统计学意义( t＝10.792、5.625， P<0.05)。RT-PCR显示顺铂组miR-205表达量较对照组显著降低(0.96±0.02比0.41±0.03)，差异有统计学意义( t＝14.763， P<0.05)。与对照组比较，顺铂组显著升高Cr[(26.83±2.30) μmol/L比(92.17±3.60) μmol/L， t＝15.268， P<0.05]、BUN水平[(19.67±1.86) mmol/L比(52.83±3.52) mmol/L， t＝8.344， P<0.05]，加重肾小管损伤分数(0.50±0.22比2.66±0.21， t＝7.051， P<0.05)及肾小管上皮细胞凋亡分数(0.83±0.31比5.66±0.49， t＝8.303， P<0.05)，以上差异均统计学意义。顺铂＋p53抑制剂组较顺铂组Cr[(92.17±3.60) μmol/L比(69.00±3.06) μmol/L， t＝4.894， P<0.05]及BUN水平显著降低[(52.83±3.52) mmol/L比(40.00±2.88) mmol/L， t＝2.822， P<0.05]，肾小管损伤分数(2.66±0.21比1.33±0.21， t＝4.471， P<0.05)及肾小管上皮细胞凋亡分数减轻(5.66±0.49比2.50±0.22， t＝5.836， P<0.05)，同时miR-205升高(0.41±0.03比0.61±0.03， t＝9.303， P<0.05)和PTEN表达水平降低(0.91±0.07比0.65±0.04， t＝3.235， P<0.05)，以上差异均有统计学意义。 结论:调控p53/miR-205/PTEN轴减轻顺铂诱导急性肾损伤，为顺铂所致急性肾损伤提供潜在治疗靶点。