目的:总结1例罕见的黏多糖贮积症Ⅱ型(mucopolysaccharidosis type Ⅱ，MPS Ⅱ)患儿的临床特点及基因检测结果。方法:分析患儿的临床特点、酶学、相关代谢产物及家系 IDS基因变异检测的结果。 结果:患儿表现为全面发育迟缓、粗犷面容、反复呼吸道感染、听力下降、腹股沟斜疝、肝脾肿大、骨骼畸形等。尿黏多糖明显升高，尿硫酸皮肤素阳性，白细胞IDS酶活性显著降低。基因检测提示患儿携带 IDS基因c.676C>G变异，遗传自母亲。 结论:患者被确诊为MPS Ⅱ， IDS基因c.676G为其致病变异，既往未见报道。基因分析结合酶学分析是MPS诊断分型的有效方法。

目的:探讨新疆野生荒漠肉苁蓉粗多糖（WCDCP）对卵清白蛋白（OVA）诱导小鼠免疫应答的影响。方法:将42只ICR小鼠按随机数字表法分为7组（每组6只）：9 g/L NaCl组（空白对照组）、WCDCP组（400 μg WCDCP）、OVA组（10 μg OVA）、低剂量WCDCP/OVA组（100 μg WCDCP+10 μg OVA）、中剂量WCDCP/OVA组（400 μg WCDCP+10 μg OVA）、高剂量WCDCP /OVA组（800 μg WCDCP+10 μg OVA）、铝佐剂/OVA组（阳性对照组，200 μg铝佐剂+10 μg OVA）。采用两点注射于小鼠后腿肌内进行免疫，共免疫2次，初次免疫后间隔2周加强免疫1次。分别于初次免疫后7、14、21、28 d称量小鼠体质量，观察小鼠体质量和生长状态变化，并采用间接酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清IgG抗体及抗体分型水平。初次免疫后21 d，采用噻唑蓝法检测小鼠脾脏淋巴细胞增殖水平，流式细胞术检测小鼠脾脏和淋巴结中的T细胞亚群比例。结果:初次免疫后7 d，高剂量WCDCP/OVA组的血清IgG抗体水平（0.597 6±0.110 7）明显高于OVA组（0.254 4±0.074 8）（ P<0.05）。初次免疫后28 d，高剂量WCDCP/OVA组的血清IgG、IgG1和IgG2a抗体水平均高于OVA组（0.972 3±0.243 8比0.389 2±0.077 4，1.156 0±0.088 4比0.612 6±0.059 7，1.648 0±0.103 9比0.557 2±0.181 5），差异均具有统计学意义（ P<0.05， P<0.001， P<0.001）。高剂量WCDCP对刀豆蛋白A和脂多糖诱导的脾脏细胞增殖均具有明显的促进作用（ P<0.001， P<0.05）。高剂量WCDCP/OVA组小鼠脾脏中的CD3 +CD8 + T和CD3 +CD4 + T细胞比例明显高于OVA组[（10.83±0.44）%比（6.76 ± 0.58）%，（28.17 ± 1.67）%比（19.17±2.73）%]，差异均具有统计学意义（ P<0.01， P<0.05）。WCDCP对小鼠体质量（均 P>0.05）和生长无影响。 结论:WCDCP可增强OVA抗原的体液免疫反应和细胞免疫反应，且对小鼠生长无不良反应，是一种安全有效的候选疫苗佐剂。

目的:探究新疆荒漠肉苁蓉粗多糖(crude polysaccharides from Cistanche deserticola Y．C.Ma, CPCD)配伍流感病毒疫苗(influenza virus vaccine，IVV)的抗原节约作用。 方法:一定剂量的CPCD配伍低剂量(0.01 μg)或高剂量(0.1 μg)的IVV皮下途径免疫小鼠，血凝抑制(hemagglutinin inhibition, HI)试验检测血清中HI抗体滴度；间接ELISA法检测血清中特异性抗体及亚型的水平；MTT法检测脾脏淋巴细胞增殖水平；流式细胞术检测脾脏细胞中T淋巴细胞亚群及胞内细胞因子IFN-γ的表达水平。结果:CPCD可以显著增强血清中HI抗体滴度(234.67±47.70 vs 149.33±47.70, P<0.05)，促进特异性IgG( A450值：1.16±0.63 vs 0.30±0.21, P<0.05)和IgG1( A450值：1.09±0.60 vs 0.26±0.21, P<0.05)抗体水平的提高，并促进脾脏淋巴细胞增殖( P<0.05)。CPCD还可显著提高CD4 +[(41.97±4.58)% vs (25.43±1.48)%, P<0.05]、CD8 +[(12.67±0.33)% vs (9.02±1.07)%, P<0.05]及CD4 +CD44 +[(11.77±0.69)% vs (8.64±0.71)%, P<0.05]、CD8 +CD44 +[(6.70±0.67)% vs (4.66±0.39)%, P<0.05] T淋巴细胞亚群的比例及胞内细胞因子IFN-γ[CD4 +：(1.36±0.07)% vs (0.87±0.06)%, CD8 +：(2.09±0.20)% vs (1.42±0.08)%, P均<0.05]的分泌水平。CPCD配伍IVV的低剂量组和IVV高剂量组之间差异无统计学意义( P>0.05)，显示可以节约10倍IVV抗原用量。 结论:CPCD配伍IVV可以显著增强体液免疫应答和细胞免疫应答，具有抗原节约作用，为IVV新型佐剂的研究提供实验参考，并具有应用于季节性流感和流感大流行防治的潜力。

目的:研究慢性不可预知性应激对大鼠肠道和肝脏的损伤作用及机制，探讨脑-肠-肝轴存在的可能性。方法:雄性SD大鼠20只随机分为对照组和应激组(10只/组)，应激组大鼠采用慢性不可预知性应激方法持续刺激4周制备慢性应激模型，对照组大鼠不进行应激刺激，正常饲养。造模结束后，纳入对照组大鼠10只，应激组大鼠7只，采用糖水偏好实验评价两组大鼠抑郁行为。糖水偏好实验结束后处死大鼠，16S rRNA测序分析检测肠道菌群多样性，HE染色法检测回肠和肝组织病理损伤，免疫组化法检测回肠组织闭锁蛋白(occludin)、肝组织Toll样受体4(Toll-like receptor 4，TLR4)蛋白表达，Western blot法检测肝组织TLR4蛋白的表达水平。大鼠门静脉取血，偶氮显色法鲎试验检测脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)水平；大鼠腹腔动脉取血，血液生化法检测肝功能。使用SPSS 25.0进行统计分析，两组间比较使用 t检验或Mann-Whitney U检验。应用STAMP软件，采用Wilcoxon秩和检验分析两组间菌群丰度差异。 结果:应激组大鼠糖水消耗量[ (7.86±0.90)ml]、糖水偏爱率[(43.06±5.65)%]均低于对照组大鼠[(15.10±1.51)ml、(76.81±6.44)%]，差异有统计学意义( t＝11.33，11.16，均 P<0.01)。慢性应激使大鼠肠道组织出现病理损伤：与对照组相比，应激组大鼠回肠绒毛变长[(448.93±12.71)μm，(497.12±16.72)μm； t＝-5.88， P<0.01]、变粗[(81.99±16.54)μm，(133.93±6.78)μm； t＝-7.12， P<0.01]，occludin蛋白表达明显下调[(0.236±0.011)，(0.130±0.026)； t＝9.12， P<0.01]，LPS水平明显上升[(18.83±2.62)EU/L，(38.64±2.51)EU/L； t＝-5.79， P<0.01]。大鼠肠道菌群Beta多样性在慢性应激作用下发生偏移，应激组大鼠肠道WPS-2菌门丰度较对照组升高( t＝2.76， P<0.05)。慢性应激使大鼠肝脏组织出现病理损伤：与对照组相比，应激组大鼠肝组织TLR4蛋白表达增加[(0.169±0.014)，(0.475±0.034)； Z＝-2.37， P<0.05]；与对照组相比，应激组大鼠血清ALT[(39.7±6.2)U/L，(82.9±43.1)U/L； Z＝-2.35， P<0.05]、AST[(130.9±28.9)U/L，(472.7±263.3)U/L； Z＝-2.64， P<0.05]水平升高，尤以AST变化明显。 结论:慢性应激可导致大鼠肠道和肝脏同步损伤，其作用机制可能与慢性应激致肠道菌群多样性改变，肠道通透性增加，LPS经门静脉血入肝，作用于肝内TLR4有关。

目的:筛选新疆栽培一枝蒿粗多糖（CARCP）作为口蹄疫灭活疫苗（FMDV）佐剂肌肉免疫的最佳剂量，探讨CARCP对FMDV的免疫增强效果。方法:不同剂量的CARCP配伍FMDV，通过肌肉免疫途径免疫ICR小鼠2次，ELISA检测小鼠血清中FMDV特异性抗体、抗体亚型及免疫球蛋白E（IgE）；MTT法检测脾脏细胞增殖；流式细胞术检测脾脏T淋巴细胞亚群及胞内细胞因子分泌水平；CARCP免疫后观察小鼠临床症状，注射部位反应，称量免疫后小鼠体质量。结果:与FMDV组相比，CARCP中剂量作为FMDV佐剂，能够显著增强血清IgG、IgG 1和IgG 2a抗体水平及IgG 2a/IgG 1值（均 P<0.05）。CARCP免疫后没有显著促进IgE反应的产生（ P>0.05）。CARCP中剂量显著增强小鼠脾脏细胞增殖（ P<0.01），提高T淋巴细胞亚群CD3 + CD4 +和CD3 + CD8 +的百分含量及CD4 +/CD8 + T细胞亚群值（均 P<0.05）。此外，CARCP中剂量能够显著促进CD4 +干扰素-γ（IFN-γ）及CD8 + IFN-γ分泌（均 P<0.05）。CARCP免疫后小鼠没有出现脱毛、流泪等症状，也没有产生肉芽肿等不良反应。CARCP免疫后同一时间点各组小鼠的体质量差异没有统计学意义（ P>0.05）。 结论:CARCP作为FMDV佐剂促进Th1/Th2型免疫应答，尤其是可以促进偏向Th1型反应并具有一定的安全性，CARCP中剂量免疫增强效果最佳。

目的:分析黏多糖贮积症（MPS）ⅣA型患儿的临床特点。方法:回顾性分析上海交通大学医学院附属新华医院2008年12月至2020年8月经酶活性和基因检测诊断为MPS ⅣA型的111例患儿的一般情况、临床表现及酶活性检测结果，根据临床表现分为重型、中间型和轻型，采用独立样本 t检验比较患儿出生身长体重与正常男女童均值，采用中位数检验对酶活性的检测结果进行组间比较。 结果:111例MPS ⅣA型患儿中男69例、女42例，重型85例、中间型14例、轻型12例。发现患儿异常的年龄1.6（1.0，3.0）岁，确诊年龄4.3（2.8，7.8）岁。所有患儿均出现骨骼病变表现，主要包括鸡胸96例（86.5%），运动功能受损78例（70.3%），脊柱异常71例（64.0%），生长速度缓慢64例（57.7%），关节松弛63例（56.8%），X型腿62例（55.9%）；88例（79.3%）患儿伴骨骼外表现，主要包括打鼾38例（34.2%），面容粗糙34例（30.6%），视觉损伤26例（23.4%）。鸡胸是重型（79例）和中间型（13例）中最常见的骨病表现，轻型中最常见的骨病表现为运动功能受损（11例）；重型中常见的骨骼外表现为打鼾（30例）及面容粗糙（30例），中间型中最常见的骨骼外表现为打鼾（5例），轻型中常见的骨骼外表现为打鼾（3例）和视觉损伤（3例）。重型患儿的身高及体重分别在2~<5岁和5~<7岁时逐渐开始低于正常儿童的-2 s，10~<15岁重型男、女患儿身高标准差分别为正常儿童的（-6.2±1.6） s和（-6.4±1.2） s，体重标准差分别达到（-3.0±1.1） s和（-3.5±0.5） s。中间型患儿7~<10岁时身高逐渐开始低于正常儿童的-2 s，10~<15岁2例中间型男性患儿身高分别为正常男童的-4.6 s和-3.6 s，2例中间型女性患儿身高分别为正常女童的-4.6 s和-3.8 s；72.0%（18/25）的中间型患儿体重在正常儿童-2 s内。轻型男女患儿各年龄段的身高及体重均在正常男女童的-2 s内。轻型患儿酶活性比中间型和重型均高［2.02（1.05，8.20）比0.57（0.47，0.94）和0.22（0，0.59）nmol/（17 h·mg）， Z=9.91、13.98， P=0.005、0.001］，中间型比重型高（ Z=8.56， P=0.010）。 结论:MPS ⅣA型患儿的临床表现主要为鸡胸、运动功能受损、脊柱异常及生长速度缓慢，不同型别的MPS ⅣA型患儿的临床表现、生长速度及酶活性不同。

目的:基于转录组测序（RNA-Seq）技术探讨猪苓多糖改变人原代巨噬细胞生长形态的可能分子机制。方法:通过提取粗多糖并进行分离和纯化得到猪苓多糖。Ficoll法分离新生儿脐带血来源的外周血单个核细胞（PBMC），并通过CD14磁珠分选及重组人巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）诱导人巨噬细胞，连续5 d观察100 ng/ml猪苓多糖对其生长形态的影响。实验组取巨噬细胞使用猪苓多糖干预48 h，对照组不进行处理，对两组细胞进行转录组测序筛选差异基因；将得到的测序结果进行差异基因表达的GO、KEGG功能注释及信号通路显著性富集分析。结果:诱导巨噬细胞具有贴壁生长及伪足分化能力，贴壁后细胞呈梭形和多角形，伪足较细长。100 ng/ml猪苓多糖处理能显著影响巨噬细胞的生长状态，巨噬细胞伪足逐渐消失且细胞变圆，最终分化褪失。比较两组测序结果发现差异表达基因共13 825个，其中上调基因7028个，下调基因6797个。差异基因的GO功能显著性富集分析显示，差异基因主要集中在细胞外基质（ECM）过程。差异基因的信号通路显著性富集分析结果主要集中在ECM合成与细胞黏附通路。结论:通过RNA-Seq技术证实猪苓多糖影响巨噬细胞的生长状态的分子机制依赖于ECM相关基因及黏附蛋白合成相关基因实现，为进一步研究猪苓多糖对巨噬细胞自身生理功能的调节作用提供依据。

目的:研究右归饮对激素性股骨头坏死（steroid-induced avascular necrosis of femoral head，SANFH）模型大鼠的影响，探讨其作用机制。方法:取50只SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组及右归饮低（6.6 g生药/kg）、中（13.2 g生药/kg）、高（26.4 g生药/kg）剂量组，每组10只。除正常组外，其余各组大鼠采用脂多糖（LPS）联合激素法制备SANFH模型。右归饮各剂量组在造模同时灌胃相应剂量的右归饮，模型组和正常组灌胃等体积生理盐水，1次/d，连续8周。末次给药后，采用全自动生化分析仪测定各组大鼠血清钙、磷水平；各组大鼠股骨头标本行MRI检测，采用HE染色观察大鼠股骨头病理学改变，采用RT-PCR检测大鼠股骨头caspase-3、β-catenin、Wnt3α基因表达。结果:与模型组比较，右归饮中、高剂量组血清钙、磷水平升高（ P<0.05或 P<0.01），右归饮低剂量组血清磷水平升高（ P<0.05）；右归饮中、高剂量组股骨空骨陷窝率降低（ P<0.05或 P<0.01）；右归饮低、中、高剂量组caspase-3 mRNA［（2.146±0.191）、（1.688±0.247）、（1.370±0.252）比（2.535±0.236）］水平降低（ P<0.05或 P<0.01），β-catenin mRNA［（0.433±0.102）、（0.496±0.091）、（0.698±0.089）比（0.259±0.106）］水平升高（ P<0.05或 P<0.01）；右归饮中、高剂量组Wnt3α mRNA［（0.509±0.061）、（0.833±0.053）比（0.384±0.052）］水平升高（ P<0.05或 P<0.01）。右归饮中、高剂量组MRI检测可见关节周少许T2高信号，关节内可见T2高信号，与股骨头软骨界限较分明，股骨头内部无明显异常信号；右归饮中、高剂量组HE染色可见骨小梁粗大，排列较规则，骨细胞大部分正常，空骨陷窝较少。 结论:右归饮对SANFH大鼠的保护作用可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。

本研究通过中心复合设计,采用响应曲面法优化沙漠小球藻GTD4C-2(Chlorella sp.GTD4C-2)胞内多糖(in-tracellular polysaccharide,IPSs)提取工艺.得到最佳提取条件:提取时间:1 h;提取温度:80℃;固液比(g/mL):1:25.通过最佳提取条件,提取的IPSs进行离子色谱分离纯化,而后采用高效凝胶色谱、气相色谱与质谱联用和傅里叶红外技术对IPSs进行结构分析.此外,还对其进行DPPH和羟基自由基清除能力检测.得到分子量稳定的IPS-2和IPS-3两种酸性糖,分子量分别为53.1 kDa和25.6 kDa;硫酸基含量分别为(5.69±0.11)％和(8.46±0.03)％;且单糖组成均为葡萄糖、半乳糖.体外抗氧化能力(以vC为阳性对照):VC＞IPSs＞IPS-3＞IPS-2.从沙漠小球藻中分离得到的多糖具有抗氧化能力,且粗提IPSs抗氧化活性强于IPS-2和IPS-3.沙漠小球藻多糖在食品,药品和保健品等方面具有广阔的应用前景.

目的 优化虎杖多糖提取工艺,研究其对RAW264.7细胞活性的影响以及在脂多糖诱导的炎症过程中的作用机制.方法 用Sevage法对虎杖多糖粗提取物中游离蛋白进行处理,然后进行单因素实验,最后利用响应面法筛选虎杖多糖提取及除蛋白方案.将RAW264.7细胞分为正常组和不同浓度虎杖多糖组(5、10、20、40、80、120μg·mL-1),采用CCK-8试剂盒检测虎杖多糖对细胞活力的影响.将RAW264.7细胞分为空白组,模型组(100 μg·L-1脂多糖),不同浓度给药组(20、40、80 μg·mL-1虎杖多糖溶液),采用ELISA试剂盒检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-(IL-6)分泌水平;采用Western blot法检测TLR4、MyD88、NF-KBp65蛋白表达水平.结果 筛选得虎杖多糖最优提取方案为Sevage试剂与供试液体积比1∶4、振摇强度8档、振摇时间12 min、除蛋白4次.虎杖多糖质量浓度在20～40μg·mL-1内使细胞活力显著提升,对RAW264.7细胞生长有明显促进作用.与空白组相比,模型组细胞活力升高,TNF-α和IL-6分泌水平及TLR4、NF-κBp65和MyD88蛋白表达水平显著升高,表明巨噬细胞炎症模型构建成功.与模型组相比,虎杖多糖20、40、80 μg·mL-1组RAW264.7细胞活力显著降低.此外,在细胞上清液中发现TNF-α和IL-6分泌水平明显减少,并且TLR4、MyD88和NF-κBp65蛋白表达水平也显著降低.结论 虎杖多糖可以减少脂多糖诱导的RAW264.7细胞中TNF-α和IL-6分泌,抑制NF-κB信号通路可能是其发挥抗炎作用的一种机制.