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新疆荒漠肉苁蓉粗多糖配伍流感病毒疫苗的抗原节约作用
编辑人员丨5天前
目的:探究新疆荒漠肉苁蓉粗多糖(crude polysaccharides from Cistanche deserticola Y.C.Ma, CPCD)配伍流感病毒疫苗(influenza virus vaccine,IVV)的抗原节约作用。 方法:一定剂量的CPCD配伍低剂量(0.01 μg)或高剂量(0.1 μg)的IVV皮下途径免疫小鼠,血凝抑制(hemagglutinin inhibition, HI)试验检测血清中HI抗体滴度;间接ELISA法检测血清中特异性抗体及亚型的水平;MTT法检测脾脏淋巴细胞增殖水平;流式细胞术检测脾脏细胞中T淋巴细胞亚群及胞内细胞因子IFN-γ的表达水平。结果:CPCD可以显著增强血清中HI抗体滴度(234.67±47.70 vs 149.33±47.70, P<0.05),促进特异性IgG( A450值:1.16±0.63 vs 0.30±0.21, P<0.05)和IgG1( A450值:1.09±0.60 vs 0.26±0.21, P<0.05)抗体水平的提高,并促进脾脏淋巴细胞增殖( P<0.05)。CPCD还可显著提高CD4 +[(41.97±4.58)% vs (25.43±1.48)%, P<0.05]、CD8 +[(12.67±0.33)% vs (9.02±1.07)%, P<0.05]及CD4 +CD44 +[(11.77±0.69)% vs (8.64±0.71)%, P<0.05]、CD8 +CD44 +[(6.70±0.67)% vs (4.66±0.39)%, P<0.05] T淋巴细胞亚群的比例及胞内细胞因子IFN-γ[CD4 +:(1.36±0.07)% vs (0.87±0.06)%, CD8 +:(2.09±0.20)% vs (1.42±0.08)%, P均<0.05]的分泌水平。CPCD配伍IVV的低剂量组和IVV高剂量组之间差异无统计学意义( P>0.05),显示可以节约10倍IVV抗原用量。 结论:CPCD配伍IVV可以显著增强体液免疫应答和细胞免疫应答,具有抗原节约作用,为IVV新型佐剂的研究提供实验参考,并具有应用于季节性流感和流感大流行防治的潜力。
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编辑人员丨5天前
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新疆野生荒漠肉苁蓉粗多糖对OVA诱导小鼠免疫应答的影响
编辑人员丨5天前
目的:探讨新疆野生荒漠肉苁蓉粗多糖(WCDCP)对卵清白蛋白(OVA)诱导小鼠免疫应答的影响。方法:将42只ICR小鼠按随机数字表法分为7组(每组6只):9 g/L NaCl组(空白对照组)、WCDCP组(400 μg WCDCP)、OVA组(10 μg OVA)、低剂量WCDCP/OVA组(100 μg WCDCP+10 μg OVA)、中剂量WCDCP/OVA组(400 μg WCDCP+10 μg OVA)、高剂量WCDCP /OVA组(800 μg WCDCP+10 μg OVA)、铝佐剂/OVA组(阳性对照组,200 μg铝佐剂+10 μg OVA)。采用两点注射于小鼠后腿肌内进行免疫,共免疫2次,初次免疫后间隔2周加强免疫1次。分别于初次免疫后7、14、21、28 d称量小鼠体质量,观察小鼠体质量和生长状态变化,并采用间接酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清IgG抗体及抗体分型水平。初次免疫后21 d,采用噻唑蓝法检测小鼠脾脏淋巴细胞增殖水平,流式细胞术检测小鼠脾脏和淋巴结中的T细胞亚群比例。结果:初次免疫后7 d,高剂量WCDCP/OVA组的血清IgG抗体水平(0.597 6±0.110 7)明显高于OVA组(0.254 4±0.074 8)( P<0.05)。初次免疫后28 d,高剂量WCDCP/OVA组的血清IgG、IgG1和IgG2a抗体水平均高于OVA组(0.972 3±0.243 8比0.389 2±0.077 4,1.156 0±0.088 4比0.612 6±0.059 7,1.648 0±0.103 9比0.557 2±0.181 5),差异均具有统计学意义( P<0.05, P<0.001, P<0.001)。高剂量WCDCP对刀豆蛋白A和脂多糖诱导的脾脏细胞增殖均具有明显的促进作用( P<0.001, P<0.05)。高剂量WCDCP/OVA组小鼠脾脏中的CD3 +CD8 + T和CD3 +CD4 + T细胞比例明显高于OVA组[(10.83±0.44)%比(6.76 ± 0.58)%,(28.17 ± 1.67)%比(19.17±2.73)%],差异均具有统计学意义( P<0.01, P<0.05)。WCDCP对小鼠体质量(均 P>0.05)和生长无影响。 结论:WCDCP可增强OVA抗原的体液免疫反应和细胞免疫反应,且对小鼠生长无不良反应,是一种安全有效的候选疫苗佐剂。
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编辑人员丨5天前
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新疆栽培荒漠肉苁蓉醇提物的免疫调节作用研究
编辑人员丨5天前
目的:探讨新疆栽培荒漠肉苁蓉醇提物(EECCD)的免疫调节活性。方法:以卵清蛋白(OVA)为抗原,将ICR小鼠分为9 g/L NaCl组(空白对照组)、EECCD组(1 200 μg EECCD)、OVA组(10 μg OVA)、低剂量EECCD/OVA组(400 μg EECCD+10 μg OVA)、中剂量EECCD/OVA组(800 μg EECCD+10 μg OVA)、高剂量EECCD/OVA组(1 200 μg EECCD+10 μg OVA)和铝佐剂(Alum)/OVA组(200 μg Alum+10 μg OVA)。皮下免疫小鼠,初免14 d后加强免疫1次。采用间接酶联免疫吸附测定法检测OVA特异性抗体水平,噻唑蓝法检测脾淋巴细胞增殖水平,流式细胞术检测白细胞介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)水平,并检测EECCD对树突状细胞(DCs)共刺激分子的表达和CD4 +CD25 +Foxp3 +调节性T细胞的影响。 结果:EECCD可提高抗体水平,具体表现为:低、中、高剂量EECCD/OVA均提高了OVA特异性IgG抗体滴度,中剂量EECCD/OVA组抗体滴度达25万,与Alum/OVA组相当;中剂量EECCD/OVA明显提高了OVA特异性IgG1水平( P<0.01),且与Alum/OVA组相比差异无统计学意义( P>0.05);中剂量和高剂量EECCD/OVA明显提高了IgG2a水平(均 P<0.01),且中剂量EECCD/OVA组明显高于Alum/OVA组( P<0.01)。由此筛选出中剂量EECCD为最佳剂量。中剂量EECCD/OVA能明显提高脾淋巴细胞的增殖水平( P<0.05),促进CD4 + T细胞分泌IL-4和IFN-γ(均 P<0.01),还可明显提高DCs表面分子(CD40、CD80、CD86、MHCⅡ)的表达(均 P<0.05),降低CD4 +CD25 +Foxp3 +调节性T细胞的表达( P<0.05)。 结论:EECCD具有良好的免疫调节活性,能促进偏向Th1型免疫应答,对疾病的预防和治疗具有潜在的作用。
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编辑人员丨5天前
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新疆栽培荒漠肉苁蓉粗多糖肌肉免疫对OVA蛋白免疫效果的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨新疆栽培荒漠肉苁蓉粗多糖(cultivated C. deserticola crude polysaccharides,CCDCP)作为模式抗原卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)佐剂的免疫增强作用.方法 将低、中、高3 个剂量的CCDCP 分别配伍OVA 蛋白,肌肉免疫小鼠,免疫2 次,间隔2 周,阳性对照为铝佐剂组,ELISA法检测小鼠血清中的IgG 及其分型IgG1、IgG2a 抗体的表达水平;MTT 法检测脾细胞增殖;并观察免疫后小鼠的生长状况.结果 高剂量CCDCP 组在免疫后7 d 就可以显著提高IgG 的水平(P<0. 05),在免疫后的21 d 和28 d 可极显著提高IgG 的抗体水平(P<0. 01),与铝佐剂组相比差异有统计学意义(P<0. 05);高剂量CCDCP 组可以显著提高IgG1 和IgG2a 的抗体水平(P<0. 05),与铝佐剂组相当;中剂量和低剂量的CCDCP 显著增强脾细胞的增殖水平(P<0. 05),与铝佐剂组相比差异有统计学意义(P<0. 01);CCDCP 对小鼠体重的影响差异无统计学意义(P>0. 05).结论 CCDCP 作为OVA 蛋白的佐剂能够增强Th1 型和Th2 型的免疫应答,尤其可以诱导早期抗体的产生和Th1 型的免疫应答,为CCDCP 作为疫苗佐剂的研究提供参考.
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编辑人员丨2023/8/6
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新疆野生与栽培荒漠肉苁蓉粗多糖免疫增强活性比较
编辑人员丨2023/8/6
目的 比较新疆野生与栽培荒漠肉苁蓉粗多糖(wild/cultivate Cistanehe deserticola Po-lysaccharids,WCDPS/CCDPS)的免疫增强效果.方法 不同剂量(低、中、高)的WCDPS和CCDPS与卵清蛋白(ovalbumin,OVA)皮下共免疫 ICR小鼠,ELISA法检测 OVA特异性抗体 IgG及抗体亚型IgG1和IgG2a,MTT法检测OVA特异性的淋巴细胞增殖活性,流式细胞术检测CD4+T细胞和CD8+T细胞的表达水平.结果 WCDPS和CCDPS均能够显著提高OVA特异性抗体IgG及抗体分型IgG1和IgG2a的表达水平(P<0.05),且WCDPS和CCDPS相同剂量之间差异无统计学意义(P>0.05);WCDPS和CCDPS能显著促进OVA特异性的淋巴细胞增殖,且相同剂量之间差异无统计学意义(P>0.05);WCDPS和CCDPS也能显著提高CD4+T和CD8+T细胞的百分含量(P<0.05),且相同剂量之间差异无统计学意义(P>0.05),WCDPS和CCDPS对免疫后的小鼠体重没有影响.结论 WCDSP和CCDPS均能显著增强OVA特异性的体液和细胞免疫应答,两者之间差异无统计学意义,并具有较好的安全性.
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编辑人员丨2023/8/6
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荒漠肉苁蓉中苯乙醇苷类与多糖含量的测定及抗氧化作用研究
编辑人员丨2023/8/6
目的:同时测定荒漠肉苁蓉中5种苯乙醇苷类与多糖含量及其抗氧化活性.方法:制备荒漠肉苁蓉总苷与70%醇提物,建立UPLC色谱条件,测定其中5种苯乙醇苷类成分含量,苯酚硫酸法测定多糖含量,同时运用体外清除DPPH自由基实验评价三者抗氧化活性.结果:荒漠肉苁蓉中含量最高成分为松果菊苷,其次为毛蕊花糖苷,醇提物中两者含量为1.9%,5种苯乙醇苷类成分总含量为2%;醇提物经纯化后,两者含量达到17%,5种苯乙醇苷类成分总量达到20.2%,含量提高约9~10倍;苯酚硫酸法测得多糖含量为86.87%;体外清除·DPPH实验中,以IC50值为评价标准,其清除DPPH自由基能力大小为:总苷>70%醇提物>多糖.结论:文章首次同时检测荒漠肉苁蓉中苯乙醇苷类与多糖组份的含量,且苯乙醇苷类成分抗氧化活性显著高于多糖,为荒漠肉苁蓉质量评价、活性成分的利用提供数据参考.
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编辑人员丨2023/8/6
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塔中栽培荒漠肉苁蓉中4个新的顺式苯乙醇苷类成分
编辑人员丨2023/8/6
对新疆塔中栽培荒漠肉苁蓉Cistanche deserticola干燥肉质茎的化学成分进行研究.采用正相硅胶、凝胶Sephadex LH-20、MCI、ODS以及半制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,运用NMR,MS等波谱方法以及结合文献数据对分离得到的化合物进行结构鉴定.从塔中栽培荒漠肉苁蓉干燥肉质茎85%乙醇提取物中分离得到4个化合物,其结构鉴定为顺式管花苷B(1)、顺式肉苁蓉苷K(2)、顺式肉苁蓉苷J(3)、顺式异肉苁蓉苷C(4).化合物1~4为新的顺式苯乙醇苷类化合物,该文为首次报道4个新化合物的1 H-NMR和13C-NMR波谱数据,为全面分析本种栽培品的化学成分提供了一定的科学数据.
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编辑人员丨2023/8/6
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定性分析不同产地荒漠肉苁蓉苯乙醇苷类及多糖类成分
编辑人员丨2023/8/6
目的:UPLC分析不同产地荒漠肉苁蓉苯乙醇苷类成分,MALLS测定肉苁蓉粗多糖分子量分布,离子色谱测定单糖组成,全面比较不同产地荒漠肉苁蓉内在品质的差异,为荒漠肉苁蓉的综合评价提供方法依据和数据参考.方法:UPLC色谱条件:色谱柱:Waters Acquity UPLC(R) BEH C18(2.1mm×100 mm,1.7 μm);流动相:乙腈(A)-0.1%甲酸水(B),梯度洗脱条件:(~8 min,2%A;8~16 min,12%A;16~19 min,16%A;19~22 min,16%~22%A;22~25 min,19% A;25~30 min,19%~25% A;30~32 min,25% A;32~35 min,25%~30% A;35~38 min,30%~40% A;38~40 min,40%~50%A.离子色谱分离条件:色谱柱:Carbo PacTMPA20(3mm×150 mm)Analytical;梯度洗脱条件:A为水,B为250 mmol·L-1的氢氧化钠,C为1 mol·L-1的醋酸钠;0~20 min,94%A,6%B,0C;20~20.1 min,89%A,6% B,5% C;20.1~35 min,74% A,6% B,20% C;35.1~45 min,20% A,80% B,0 C;45.1~55 min,94% A,6% B,0 C.MALLS测定条件:色谱柱:TSK Gel G4000PWxl;流动相:0.1 mol·L-1氯化钠溶液;流速:0.5 mg·min-1;进样量:200μL;样品浓度:1 mg·mL-1.结果:通过对不同产地荒漠肉苁蓉UPLC图峰面积进行积分,得到5种苯乙醇苷类峰面积,并进行相对比较;MALLS检测得到不同产地荒漠肉苁蓉粗多糖的分子量及分布,同时离子色谱法检测到其均有7种单糖组成.结论:UPLC测定结果显示,不同产地荒漠肉苁蓉苯乙醇苷类成分相对含量差别较大,人工栽培肉苁蓉在秋季采收时含量较高;MALLS检测结果显示,不同产地荒漠肉苁蓉的多糖分子量大小、分布及单糖组成差异明显.
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编辑人员丨2023/8/6
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HPLC-MS鉴定塔中栽培肉苁蓉药材的17个成分
编辑人员丨2023/8/6
目的:通过HPLC-MS对新疆塔中荒漠栽培肉苁蓉Cistanche deserticola药材60%甲醇提取物的色谱图进行鉴定.方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(含0.1%的甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温25℃,进样量10 μL.结果:在相同色谱条件下,通过与已分离得到的对照品的保留时间、相对分子质量以及碎片离子进行比较,对新疆塔中荒漠栽培肉苁蓉药材的16个色谱峰中的17个成分进行了准确的鉴定,分别确定为松柏苷,去甲紫丁香苷,紫丁香苷,松果菊苷,肉苁蓉苷A,类叶升麻苷(管花苷A),肉苁蓉苷B,异类叶升麻苷,2'-乙酰基肉苁蓉苷A,肉苁蓉苷C,异肉苁蓉苷C,2'-乙酰基类叶升麻苷,管花苷B,epimeridinoside A,肉苁蓉苷K,肉苁蓉苷J.结论:该研究方法适用于肉苁蓉60%甲醇提取物色谱峰的鉴定,为全面分析该药材的化学成分提供了一定的科学数据.
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编辑人员丨2023/8/6
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荒漠肉苁蓉花及木质化茎的化学成分定性分析
编辑人员丨2023/8/6
荒漠肉苁蓉为著名补益类中药肉苁蓉的2种基原植物之一,为寄生植物.一般在其出土前挖取带鳞片的肉质茎作为药用,而出土、开花后的木质化茎和花一般被丢弃.为了探讨这些非传统药用部位的药用价值,该文利用高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱技术(HPLC-IT-TOF-MS)对荒漠肉苁蓉花及木质化茎的化学成分进行深入的定性分析.样品粉末经50%甲醇-水超声提取后,采用Capcell core ADME色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水系统梯度洗脱;正/负离子自动多级质谱模式采集高分辨质谱数据;利用对照品推导主要化学类型的质谱裂解规律并指认部分信号,结合对比文献数据以及解析高分辨质谱数据,共对发现的62个信号中的39个进行了结构注释,主要成分包括苯乙醇苷类、环烯醚萜苷类、木质素苷类、糖类等.荒漠肉苁蓉花及木质化茎与肉质茎的化学成分轮廓差异较大,不能等同使用,但其含有较为丰富的木质素和环烯醚萜苷类成分,具有一定的开发利用价值.
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编辑人员丨2023/8/6
