目的:探讨超声引导下多模联合检查在淋巴结分枝杆菌感染诊断中的应用价值。方法:回顾性分析2019年1月至2020年12月绍兴文理学院附属医院初诊疑似淋巴结分枝杆菌感染患者42例的临床资料，均在超声引导下行淋巴结负压穿刺术，观察涂片抗酸染色、细菌培养、病理诊断及三种检查联合诊断，并与痰液和肺泡灌洗液涂片抗酸染色及细菌培养结果比较。结果:穿刺液涂片抗酸染色、细菌培养、病理联合诊断的阳性率为71.4%（30/12），显著高于穿刺液涂片抗酸染色阳性率［26.2%（11/42）］、细菌培养阳性率［42.9%（18/42）］、病理阳性率50.0%［（21/42）］，差异均有统计学意义（χ 2=17.20、7.00、4.04， P < 0.001、 P < 0.01、 P=0.040）。痰液涂片和培养阳性率为21.4%（9/33），肺泡灌洗液涂片抗酸染色和培养阳性率为28.6%（12/30），差异有统计学意义（χ 2=21.11、15.43，均 P < 0.001）。 结论:超声引导下对疑似分枝杆菌感染病变淋巴结进行负压抽吸、穿刺活检，采用抗酸染色、细菌培养、病理检查等多模式诊断相结合，可提高分枝杆菌的检出率和诊断率。

艰难梭菌感染(clostridium difficile infection，CDI)是社区和医院较常见的病原菌感染之一，可导致不同程度的腹泻、假膜性肠炎，是全球性的公共健康问题。CDI现有诊断依赖于患者粪便中艰难梭菌(clostridium difficile，CD)相关毒素或毒素编码基因的鉴定，这些传统的细菌学技术具有一定的局限性，可能延误疾病诊疗。研究发现CD有一种特殊的"马粪样"臭味，这种特殊气味来自CD挥发性有机化合物(volatile organic compounds，VOCs)。近年来，越来越多的研究将人体呼气、血液、尿液和粪便中的VOCs作为潜在的非侵入性诊断生物标志物用于感染性疾病和消化道等多种疾病诊断。研究发现，CD的VOCs有助于CDI的快速诊断，其具有潜在的特征性VOCs成分。该文就VOCs及其在CDI快速检测中的应用进行综述。

目的:探讨非结核分枝杆菌肺病的临床病理学特征和分子病理学方法在其诊断中的价值。方法:分析首都医科大学附属北京胸科医院2016年2月至2019年8月石蜡包埋标本诊断肺部非结核分枝杆菌（NTM）感染的45例患者病理组织学形态、抗酸杆菌形态特征及临床、影像、细菌学资料；荧光PCR方法检测结核分枝杆菌特异基因序列IS6110；探针熔解曲线方法行分枝杆菌菌种鉴定；选取同期确诊肺结核病例50例进行比较分析。结果:NTM肺病病理组织学表现为坏死性肉芽肿34例（75.6%，34/45），非坏死性肉芽肿1例（2.2%，1/45），非肉芽肿病变10例（22.2%，10/45）；坏死为粉染坏死、富于核碎片的嗜碱性坏死及化脓性坏死，与肺结核比较，后者更多表现为粉染坏死及嗜碱性坏死，差异有统计学意义（χ 2=10.270， P=0.001；χ 2=7.449， P=0.006）；17例（37.8%，17/45）NTM肺病中观察到巨大奇异形多核巨细胞，与肺结核组比较差异有统计学意义（χ 2=13.446， P<0.01）。抗酸杆菌数量多少不一，形态多样，胞内分枝杆菌常见大量抗酸杆菌，堪萨斯分枝杆菌奇异形抗酸杆菌易见。胞内分枝杆菌18例（40.0%，18/45），蟾蜍分枝杆菌8例（17.8%，8/45），鸟、堪萨斯、龟分枝杆菌各6例（13.3%，6/45），猿猴分枝杆菌1例（2.2%，1/45）。 结论:NTM肺病的诊断和鉴别诊断值得病理医师关注，仅靠组织形态学特征和抗酸杆菌形态特点不能明确诊断，分子病理学方法是确诊结核病和NTM肺病的重要手段。

结核性胸膜炎诊断主要依靠细菌学、病理学、分子生物学、细胞免疫学及综合性诊断策略来实现，且与恶性胸膜疾病及其他感染性胸膜疾病鉴别诊断困难。胸腔积液中存在着丰富的蛋白质、非编码RNA及代谢产物，能够反映宿主疾病病理进程和免疫状态，在胸腔积液中寻找能够指示结核性胸膜炎疾病进程和免疫状态的分子标志物已经成为研究的热点。微小RNA由于在各种临床样本中稳定性极高，能够快速准确地定量，使其有望成为一种非侵袭性的生物标志物来追踪疾病的发生、发展及预后，目前在良恶性胸腔积液鉴别诊断方面有一定的价值。本文将综述胸腔积液miRNA检测用于结核性胸膜炎诊断的现状及问题，为开发结核性胸膜炎诊断新技术提供理论基础。

结核病仍然是威胁人类健康的全球公共卫生问题，快速准确的病原体检测是实现早期诊断和有效治疗的关键。近年来，结核病的病原学诊断由传统的细菌学诊断向分子诊断扩展。近1年，具有良好诊断性能的Xper MTB/RIF Ultra技术更多被应用于非呼吸道样本的检测，Xpert XDR和二代线性探针技术为MDR-TB的早期快速准确诊断提供了更多依据；基因组测序技术也被更多开发应用于非培养物样本的检测，其检测成本和所需时间已相对降低和减少；更适合初级医疗保健中心开展的Truenat技术被更广泛应用；游离DNA检测及质谱检测等新型结核病检测技术同样不断发展，有望成为结核病及耐药结核病早期快速诊断的重要手段。本文综合2021年10月1日至2022年9月30日国内外结核病病原体分子生物学诊断的重要进展成果，评估分子生物学检测技术的优缺点及应用现状，为临床选择和应用提供重要依据。

股骨骨不连是股骨骨折髓内钉术后常见的并发症，发生率为1%~12.5%。目前，股骨骨不连的治疗方式主要分为手术治疗和非手术治疗，而手术治疗为首选方式。手术治疗股骨骨不连的金标准是更换髓内钉，但对于非峡部的股骨骨不连，即使更换大直径的髓内钉，仍然不能解决骨不连断端旋转和成角移位的问题；对于营养不良型骨不连、萎缩型骨不连以及有大块骨缺损的骨不连仅通过更换髓内钉并借助自体骨植骨不足以消除断端间隙、增加断端间接触面积，无法为骨不连断端提供一个良好的生物学环境。另外，更换髓内钉时并不显露骨不连断端，故无法取相应的组织进行细菌学培养，对判断骨不连断端是否合并感染有一定难度。双钢板技术是切开直视下找到骨不连部位，并在骨不连断端放置不同角度的两块钢板进行固定。查阅近10年国内外已发表的与双钢板技术治疗股骨骨不连相关的文献，经分析总结得出双钢板固定联合自体髂骨植骨为骨不连的愈合提供了一个三维立体固定模型，具有稳定性强的特点，在改善骨折端的生物学行为和机械稳定性方面发挥着积极的作用，术后有利于膝关节屈伸活动，同时愈合率高、并发症发生率低，可有效缓解疼痛。

目的:评估B族链球菌肉汤增菌培养法（Todd-Hewitt型，T-H）、直接培养法、液体显色培养法及核酸环介导恒温扩增法（LAMP）在孕晚期妇女筛查中的临床应用。方法:回顾性研究。采集2016年10月至2018年4月在广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心产科门诊产检妊娠35~37周孕妇直肠阴道分泌物标本969份，采用双盲法，以T-H肉汤增菌培养法为参考方法，分3个研究阶段先后比较直接培养法、液体显色培养法及LAMP法的检验性能。以敏感度、特异度、符合率、阳性预测值、阴性预测值及尤登指数为评价指标，一致性用Kappa检验。结果:增菌培养法共检测标本969份，阳性90份（9.3%）。以增菌培养法为参考，敏感度从高到低依次为LAMP法[100%（25/25）]、直接培养法[81.5%（22/27），95 %CI：65.8%~97.1%]、液体显色培养法[71.1%（27/38），95 %CI：55.9%~86.2%]；特异度则依次为直接培养法[100%（282/282）]、液体显色培养法[98.1%（455/464），95 %CI：96.8%~99.3%]、LAMP法[94.0%（125/133），95 %CI：89.9%~98.1%]；符合率依次为直接培养法[98.4%（22+282）/309]、液体显色培养法[96.0%（27+455）/502]、LAMP法[94.9%（25+125）/158]。而直接培养法（0.889）、LAMP法（0.832）与增菌培养法的一致性Kappa值均≥0.75，液体显色培养法则为0.708。直接培养法有18.5%（5/27）的漏检率，LAMP法漏检率为零、假阳性率为6.0%（8/133），液体显色培养法的漏检率、假阳性率分别为28.9%（11/38）、1.9%（9/464）。 结论:本研究所比较的几种GBS筛查方法中，仅LAMP法与增菌培养法在敏感度、特异度及符合率上均具较好的一致性，而其他两种方法存在一定的漏检。临床实验室可根据实际条件、技术力量选择使用，或参照欧美指南推荐的孕晚期增菌培养筛查与产时核酸检测相结合，以最大程度满足临床需求。

目的:探讨二代测序(NGS)技术在诺卡菌肺病诊断方面的价值。方法:对1例肺炎患者的肺泡灌洗液行NGS检测，发现豚鼠耳炎诺卡菌感染，报告该例患者的临床资料、影像学特点、实验室检查和治疗情况，并在PubMed上以关键词"NGS"和"Nocardia otitidiscaviarum"搜索并复习文献。结果:通过NGS快速检测诊断豚鼠耳炎诺卡菌肺病1例。豚鼠耳炎诺卡菌肺病无临床特异性，影像学检查显示肺部多发空洞或片状低密度阴影，诊断主要依据细菌学检验。作为目前最前沿的微生物检测技术，NGS可以更快速、更精确地鉴定致病菌。结论:诺卡菌肺病是一种疗程长的少见病，NGS可以帮助诺卡菌肺病快速精准诊断。

结核分枝杆菌是引起肺结核的重要原因,该病原菌能侵犯人体多个脏器,且具有较强的传染性.由于结核分枝杆菌在人体内不容易被杀死,部分病菌能长期潜伏在机体内实现共存.当机体免疫力下降或其他因素作用下,将会造成结核分枝杆菌的大量复制、定植,从而增加结核病发生率.我国是全球肺结核流行较为严重的国家之一,患者发病起初症状不明显,增加患者临床诊疗难度.因此,加强结核分枝杆菌患者诊断及治疗,有助于改善患儿预后,可指导临床治疗.目前,临床上对于结核分枝杆菌的诊断技术主要包括:细菌学检测、分子生物学检测、免疫学检测等,不同诊断检测技术各有优缺点.本综述将以结核分枝杆菌为起点,探讨结核分枝杆菌临床诊断技术,分析不同诊断技术的优缺点,为临床诊疗提供参考依据.

目的 利用原核表达技术获得肺炎链球菌溶血素(PLY)重组蛋白,探讨其对肺炎链球菌感染性肺炎的血清学诊断价值.方法 根据GenBank中肺炎链球菌ply基因序列,切除羧基端33个核苷酸,设计合成特异性引物,从标准菌株的肺炎链球菌中提取DNA为模板,扩增目的基因ply,克隆后构建原核表达载体PET32a-ply,然后将其转化到大肠埃希菌DH5aBL21(DE3)中,以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其大量表达,获得融合6个组氨酸标签、无溶血活性的重组蛋白,经Ni-NTA树脂纯化,获得重组蛋白,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定后,采用免疫印迹法检测其免疫原性;以重组蛋白PLY为抗原,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测临床诊断为社区获得性肺炎(CAP)并经细菌学确诊的患者血清中相应的IgM抗体,评价其对肺炎链球菌感染性肺炎的快速诊断价值.结果 成功构建出原核表达载体PET32a-ply,并实现了无溶血活性的PLY蛋白的可溶性表达,其具有较好的免疫原性.CAP患者血清抗PLY-IgM抗体阳性率高于体检健康者(P<0.05),其诊断的敏感性均高于常规的痰培养和血培养(P<0.05).结论 以重组蛋白PLY为抗原的ELISA可用于肺炎链球菌感染的血清学快速诊断,在临床上具有重要的应用价值.