目的:探讨结肠癌组织中长非编码RNA 00673(LINC00673)表达与患者临床病理特征的关系及其作用机制。方法:实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测河北医科大学第二医院在2017年4月至2019年6月手术切除的70例结肠癌组织及癌旁正常肠黏膜组织的LINC00673的表达。患者男45例，女25例。年龄(56.4±11.8)岁，中位年龄56岁。实验分为转染组、阴性对照组及空白对照组。分析LINC00673表达与患者临床病理特征的关系。RNA干扰技术抑制LINC00673在结肠癌细胞中的表达，检测抑制LINC00673表达后细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响并探讨分子机制。应用SPSS 22.0统计软件分析，采用 t检验、方差分析处理数据。 结果:与癌旁正常肠粘膜组织(0.703±0.223)比较，结肠癌组织中LINC00673表达(1.393±0.345)明显增高( t＝14.053， P<0.01)。LINC00673表达与肿瘤分化程度(高中分化1.004±0.273，低未分化1.491±0.245)、临床分期(Ⅰ～Ⅱ期1.009±0.274，Ⅲ～Ⅳ期1.608±0.226)、淋巴结转移(阳性1.523±0.265，阴性0.988±0.290)明显相关( t＝－6.084， P<0.01； t＝－9.730, P<0.01； t＝6.060, P<0.01)。结肠癌细胞株LINC00673水平明显高于正常肠粘膜细胞株HIEC( F＝21.364， P<0.01)；抑制LOVO中LINC00673表达后细胞迁移及侵袭能力明显降低(迁移： F＝1211.220， P<0.01；侵袭： F＝72.672， P<0.01)；细胞中EMT相关基因E-Cadherin表达增高，N-Cadherin、Vimentin、MMP-9表达明显降低( F＝196.401、147.029、47.231、137.190、551.551、35.646、24.948、17.593， P<0.01)，差异有统计学意义。 结论:LINC00673在结肠癌组织中表达增高，抑制LINC00673表达可通过调节EMT分子而抑制结肠癌细胞的EMT。

目的:检测胃癌患者血清和胃癌组织中结肠癌转移相关基因1（MACC1）的表达水平，分析血清及胃癌组织中MACC1表达的相关性，并对MACC1作为胃癌发病标记物诊断的有效性进行探讨。方法:收集51例胃癌患者的血清标本、胃癌组织、癌旁组织、正常胃黏膜标本，同时收集30例正常人血清标本。分别通过和免疫组织化学法和酶联免疫吸附法（ELISA）测定MACC1在胃癌组织、癌旁组织、正常胃黏膜及血清中的表达水平。分析MACC1在血清与胃癌组织中表达的关系，并绘制受试者操作特征（ROC）曲线。分析MACC1的表达与临床病理参数（性别、年龄、发生部位、肿瘤大小、病理分型、胃壁浸润深度、局部淋巴结转移、远处转移、TNM分期）的关系。结果:与健康者相比，胃癌患者血清MACC1表达显著升高（ P<0.05）。与胃黏膜组织、癌旁组织相比，胃癌组织中MACC1的表达显著升高（均 P<0.05），癌旁组织和正常组织中MACC1的表达差异无统计学意义（ P>0.05）。胃癌组织和胃癌患者血清中的MACC1水平呈正相关（ P<0.01）。胃癌患者血清及胃癌组织中MACC1水平与患者临床病理参数间均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:MACC1在胃癌患者血清及胃癌组织中均高表达，且表达水平呈正相关。MACC1有望成为诊断胃癌的临床生物指标。

目的:探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)在侵袭转移中的作用及其机制。方法:收集2016年7月至2017年9月于江南大学附属医院手术切除肺癌组织及其对应的癌旁组织180例，构建组织微阵列免疫组织化学检测组织中MACC1与β-连环蛋白(β-catenin)的表达情况。采用慢病毒介导的小干扰RNA(siRNA)下调MACC1在A549细胞中的表达，分为对照组、慢病毒空载体组和敲低组。构建短发卡RNA(shRNA)质粒实现MACC1-shRNA干扰质粒后慢病毒感染H1299细胞(购自美国ATCC公司)使MACC1基因的沉默，分为质粒转染组与慢病毒空载体组，采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法、Transwell小室实验、划痕试验分别检测细胞增殖能力、侵袭性和迁移性。组间比较采用两独立样本 t检验。 结果:组织芯片免疫组织化学显示肺腺癌组织中MACC1与β-catenin的表达水平呈正相关(相关系数0.397， P<0.05)；慢病毒介导A549细胞MACC1下调后引起β-catenin表达下降[对照组(0.83±0.04)比空载体组(0.91±0.09， t＝-0.241， P>0.05；空载体组(0.91±0.09)比敲低组(0.24±0.02， t＝1.940, P<0.05)；对照组(0.83±0.04)比敲低组(0.24±0.02， t＝1.699， P<0.05]；沉默MACC1后行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测H1299的β-catenin表达显著下降(0.79±0.07比0.38±0.08， t＝3.267， P<0.05)，且质粒转染组H1299细胞平均穿膜细胞数[(18.3±2.36)个]少于慢病毒空载体组[(36.2±2.1)个， t＝-13.460， P<0.05]；划痕实验显示24 h后质粒转染组[(266±27) μm]距离明显小于慢病毒空载体组[(931±36) μm， t＝2.631， P<0.01]。 结论:MACC1在肺腺癌中高表达，促进癌基因β-catenin的表达，从而促进肺腺癌的侵袭转移。

目的:观察微小RNA(microRNA，miR)-27b-3p与干扰素调节因子4(IRF4)的靶向关系，分析其对结肠癌细胞B细胞淋巴瘤分子-6(bcl-6)表达的影响。方法:2015年12月至2017年1月在南昌大学第二附属医院确诊为结肠癌患者共53例，以肿瘤组织作为研究组，以正常结肠黏膜组织作为对照组。应用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-27b-3p的表达。应用免疫组织化学法检测结肠癌中干扰素调节因子4(IRF4)和B细胞淋巴瘤-6(bcl-6)的表达。选择人结肠癌细胞系116，构建阴性对照组、miR-27b-3p转染组、miR-27b-3p和IRF4共转染组，应用免疫印迹实验检测各组中IRF4和bcl-6的表达。应用双荧光素酶报告基因实验观察miR-27b-3p与IRF4的结合情况。组间比较采用 t检验、配对 t检验及方差分析。 结果:结肠癌中miR-27b-3p的表达(2.67±0.40)明显低于对照组(3.68±0.45， t＝6.180， P<0.01)，miR-27b-3p的表达在不同肿瘤最大径(≥5 cm为2.49±0.39，<5 cm为2.87±0.36)、浸润深度(浆膜及以外为2.44±0.34，未及浆膜为2.88±0.36)、脉管癌栓(有癌栓为2.28±0.42，无癌栓为2.77±0.31)、片状坏死(有坏死为2.36±0.42，无坏死为2.79±0.39)和淋巴结转移(有转移为2.37±0.41，无转移为2.81±0.22)分组的表达中差异有统计学意义( t＝4.250、5.180、5.690、5.110、5.190， P值均<0.05)。miR-27b-3p与生存时间有关( χ2＝5.080， P<0.05)，差异有统计学意义。miR-27b-3p与IRF4( r＝-0.600， P<0.05)、miR-27b-3p与bcl-6( r＝-0.690， P<0.05)均呈负相关性。双荧光素酶报告基因实验显示miR-27b-3p与IRF4具有靶向关系。miR-27b-3p转染组中IRF4和bcl-6的表达低于阴性对照组( t＝3.240、4.330， P<0.05)，差异有统计学意义，共转染组能逆转上述改变。 结论:miR-27b-3p靶向负调控IRF4调节结肠癌细胞bcl-6的表达，miR-27b-3p低表达是肿瘤形成和进展的重要事件，检测miR-27b-3p的表达可能与生存时间有关。

目的:研究p53基因突变和Numb蛋白表达与结直肠癌患者临床病理因素及预后的关系。方法:采用PCR及DNA测序分析60例结直肠癌组织中p53基因突变状况，Western blot检测Numb蛋白的表达，分析p53基因突变状态与Numb蛋白表达水平的相关性；在体外对结肠癌细胞系HCT116（+）和HCT116（-）分别采用基因过表达及RNA干扰，用流式细胞术检测p53基因突变与Numb蛋白表达对结肠癌细胞周期的影响。结果:60例结直肠癌组织中31例存在p53基因突变，突变率为52%，外显子（E）5、6、7、8的突变次数分别为5、6、12、11例次。Numb蛋白在p53基因突变组表达水平显著低于非突变组（ P=0.009）。Numb蛋白低表达患者的预后比高表达患者的差（ P=0.015），其表达水平与结直肠癌的分化程度、淋巴结转移、TNM分期密切相关（均 P<0.05）。在两种细胞中转入Numb后其细胞周期均出现G 2-M期阻滞，增殖受到抑制，DAPT则具有G 1-S期阻滞，二者无明显协同作用。 结论:结肠癌中p53基因突变状态与Numb蛋白表达密切相关，并影响细胞增殖周期及预后。

目的:探讨结直肠癌组织中结肠癌转移相关基因1(MACC1)和Polo样激酶1(PLK1)表达的临床意义。方法:收集2016年4月至2021年3月大庆油田总医院资料完整的结104例结直肠癌组织标本及癌旁正常组织标本，采用免疫组织化学法检测各组织中MACC1蛋白和PLK1蛋白表达，采用 χ2检验分析评估MACC1和PLK1的表达水平与结直肠癌临床病理因素之间的关系。 结果:MACC1蛋白在结直肠癌组织中表达率为73.08%(76/104)，明显高于癌旁组织中表达率15.39%(16/104)，两者差异有统计学意义( χ2＝70.165， P<0.01)；PLK1蛋白在结直肠癌组织中表达率为57.70%(60/104)，明显高于癌旁组织中表达率24.04%(25/104)，两者差异有统计学意义( χ2＝24.371， P<0.01)。MACC1表达水平与结直肠癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期明显相关( χ2＝4.697、6.307、6.899， P<0.05)，PLK1表达水平与结直肠癌淋巴结转移、组织学分化程度、TNM分期明显相关( χ2＝5.446、5.5076、6.307， P<0.05)。 结论:MACC1蛋白和PLK1蛋白表达与结直肠癌侵袭和转移密切相关，检测上述两种指标，并与临床指标结合，将能更准确判断结直肠癌生物学行为及预后、并指导临床治疗。

目的:探究N-乙酰转移酶10(NAT10)对Erastin诱导结直肠癌(CRC)细胞铁死亡敏感性的影响及其机制。方法:使用公共数据库明确NAT10在CRC中的表达及其与Erastin利用度的关系；应用荧光实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)探索Erastin对NAT10 mRNA表达的影响；细胞计数试剂盒(CCK-8)检测NAT10抑制剂Remodelin联合Erastin对CRC细胞SW620活力的影响。构建NAT10稳转敲低细胞株，蛋白质印迹法(Western blot)验证敲减效率成功后，进行RNA-Seq和ac4C-RNA-Seq的测序，分析与对照组比较，NAT10敲低组出现ac4C修饰水平降低和mRNA表达水平下降的基因，再和铁死亡抑制因子集取交集，最后筛选出NAT10调控铁死亡的潜在下游靶基因。RT-qPCR或Western blot检测对照组和NAT10敲低组或Remodelin处理细胞中的转录调节因子核蛋白1(NUPR1)表达水平，验证NAT10对NUPR1的调控作用。两组间比较采取 t检验。 结果:NAT10表达越高，Erastin的药物利用度越低( R＝－0.16， P<0.05)，SW620细胞Erastin作用组响应性升高(1.440±0.035比1.000±0.096， t＝－7.423， P<0.05)，Remodelin+Erastin组细胞活力明显低于Erastin组(0.293±0.017比0.906±0.048， t＝60.680， P<0.05)。通过铁死亡抑制剂Fer-1干预实验，Fer-1+Erastin+Remodelin细胞组比Erastin+Remodelin组比较，细胞活力出现下降(0.489±0.011比0.412±0.036， t＝3.599， P<0.05)。成功构建NAT10稳转敲减细胞系(1.105±0.065比0.309±0.104， t＝11.220， P<0.05)，测序结果联合铁死亡数据库抑制基因集筛选出NUPR1是NAT10调控铁死亡的下游潜在靶基因。公共数据库证实NAT10与NUPR1呈明显正相关( R＝0.40， P<0.05)。RT-qPCR证实NUPR1的mRNA表达在NAT10敲低组中低于对照组(0.087±0.007比0.198±0.005， t＝20.758， P<0.05)。Western blot结果表明用Remodelin抑制NAT10表达后，NUPR1在SW480和SW620实验组中蛋白表达水平低于对照组(SW480：0.611±0.175比1.245±0.350， t＝6.267， P<0.05；SW620：0.745±0.230比1.201±0.343， t＝6.826， P<0.05)。 结论:结肠癌SW620细胞系中NAT10在Erastin作用下响应性升高，NUPR1可能作为其潜在靶基因介导铁死亡抵抗。

目的:结合应用加权基因共表达网络分析(WGCNA)和差异基因表达分析2种方法筛选结肠癌mRNA表达谱中的差异共表达基因，并分析差异共表达基因与预后的关系。方法:基于生物信息学方法从癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合(GEO)数据库分别下载TCGA结肠腺癌数据集的转录组学数据和GSE68468数据集的芯片表达谱数据，筛选出两者在正常组织与结肠癌组织之间的差异表达基因(DEG)和最显著相关的加权基因模块，通过差异基因和加权基因取交集筛选出结肠癌相关差异共表达基因。构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI )网络，利用最大派系中心度(MCC)计算方法筛选出MCC评分排名前10位的核心差异共表达基因，使用TCGA结肠腺癌数据集验证核心基因在正常组织和结肠癌组织中的表达，采用Kaplan-Meier生存分析探索核心基因与患者总生存期和无病生存期之间的关系。使用人类蛋白质图谱(HPA)数据库，对生存相关的差异共表达基因进行免疫组织化学染色验证。结果:TCGA结肠腺癌数据集中DEG共3 481个，GSE68468数据集中DEG共7 275个，共获得237个差异共表达基因。使用PPI网络的MCC计算方法得到10个核心的差异共表达基因，分别为氯离子通道附件1( CLCA1)、 MAPK3、胰高血糖素( GCG)、溶质载体家族26成员3( SLC26 A3)、核受体亚家族1组H成员4( NR1 H4)、脂肪酸结合蛋白1( FABP1)、鸟苷酸环化酶激活因子2A( GUCA2 A)、二磷酸尿苷葡糖醛酸糖基转移酶家族2成员A3( UGT2 A3)、肉碱棕榈酰转移酶2( CPT2)和跨膜4域A12( MS4 A12)。与正常组织相比，TCGA结肠腺癌数据集结肠癌组织的 CLCA1、 GCG、 SLC26 A3、 NR1 H4、 FABP1、 GUCA2 A、 UGT2 A3、 CPT2和 MS4 A12 9个核心基因均下调( P均<0.05)，其中 CLCA1高表达结肠癌患者的总生存期和无病生存期均长于低表达组( P均<0.05)，免疫组织化学染色结果在蛋白质水平也验证了结果的准确性。 结论:CLCA1可能在结肠癌的发展中起关键作用，可作为进一步诊断和治疗的潜在生物标志物。

目的:探讨KRAS基因状态与结直肠癌肝转移(CRLM)患者临床因素和预后的关系。方法:回顾分析2005年1月至2019年12月连续在解放军总医院第一医学中心诊治的1 248例CRLM患者资料，其中男性880例，女性368例，年龄范围21～88岁，中位年龄56岁。比较不同临床特征患者的KRAS基因突变率。单因素和多因素logistic回归分析KRAS基因突变的影响因素。Kaplan-Meier法分析生存情况，生存率比较采用log-rank检验。结果:KRAS基因野生型729例，突变型519例，突变率41.6%(519/1 248)。11例原发病灶位于双侧结肠。女性与男性、糖类抗原19-9≥38 g/L与<38 g/L、糖尿病与非糖尿病、原发病灶位于右半结肠(52.1%，160/307)与左半结肠(38.2%，355/930)的CRLM患者KRAS基因突变率比较，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。单因素回归分析显示，KRAS基因突变与性别、糖类抗原19-9、有无糖尿病、原发肿瘤部位相关。多因素logistic回归分析，原发肿瘤部位( OR＝0.557，95% CI：0.423～0.733)是KRAS基因突变的独立影响因素。KRAS基因野生型CRLM患者累积生存率优于突变型，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:CRLM中，KRAS基因突变型更易出现在右半结肠癌患者中，KRAS基因突变型患者长期预后相对较差。

目的:探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)和驱动蛋白超家族23(KIF23)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:收集2015年2月至2020年11月临沂市人民医院和临沂市肿瘤医院病理学确诊的97例乳腺癌组织和对应癌旁组织，使用免疫组织化学方法检测上述组织中MACC1和KIF23表达，进行 χ2检验统计学分析两者的表达与乳腺癌临床病理学参数之间的关系。 结果:MACC1在乳腺癌组织中阳性表达率为71.13%(69/97)，明显高于在癌旁组织中阳性表达率[18.56%(18/97)]，两者差异有统计学意义( χ2＝54.205， P<0.01)。KIF23在乳腺癌组织中阳性表达率为65.98%(64/97)，明显高于在癌旁组织中阳性表达率[20.62%(20/97)]，两者差异有统计学意义( χ2＝40.648， P<0.01)。MACC1在表达水平与乳腺癌肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移明显相关( χ2＝5.026、7.570、4.478， P<0.05)，差异有统计学意义。KIF23表达水平与乳腺癌肿瘤大小、组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关( χ2＝5.206、8.521、5.165、6.8206， P<0.05)，差异有统计学意义。 结论:检测乳腺癌组织中MACC1和KIF23的表达有助于判断乳腺癌生物学行为。