目的:建立绿芫菁中斑蝥素的含量测定方法,并将测定结果用于筛选提取斑蝥素来源药材的依据.方法:以丙酮为溶剂,采用超声提取法提取绿芫菁中斑蝥素;采用高效液相色谱法测定斑蝥素的含量;色谱柱为C18,流动相为甲醇-水(23:77),检测波长为230 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,进样量为10 μL;检测绿芫菁中斑蝥素的含量并与采用《中国药典》方法(以氯仿为提取溶剂)测定含量的结果进行比较.结果:斑蝥素检测质量浓度线性范围为0.2~1.0 mg/mL(r=0.9988),平均方法回收率为101.1%(RSD为1.7%,n=6);绿芫菁中斑蝥素的平均含量为0.932%(n=3),采用《中国药典》方法测得的含量为0.793%(n=3),均高于《中国药典》项下斑蝥素来源药材中斑蝥素含量需大于0.35%的要求.结论:建立的绿芫菁中斑蝥素的含量测定方法准确可靠;绿芫菁中斑蝥素的含量达到《中国药典》的要求,可用作提取斑蝥素的来源药材.

斑蝥在藏、蒙、维、彝等多个民族中均有药用记载,涉及芫菁科大斑芫菁、眼斑芫菁、绿芫菁、锯角豆芫菁等多个种,炮制方法主要有糯米炒、酒制、醋制、炒炙等,在藏药中为味苦、辛,性温;在蒙药中为味苦、辛,性平;在维吾尔药中为味辛、性热;在彝药、瑶药、水药中为味辛、性寒,主要用于治疗肿瘤(瘰疬、恶疮)、癣症、狂犬咬伤.现代研究表明,斑蝥药典种的部分近缘属芫菁体内斑蝥素含有量亦十分可观.本文通过查阅各民族本草典籍,对斑蝥在民族药中的基源、炮制、性味、主治功效及应用进行考证;通过分析现代文献,对斑蝥药典种的近缘种属研究进行总结.

首次报道绿芫菁属Lytta Fabricius,1775印绿芫菁亚属Indiolytta Selander,1960和端黑绿芫菁Lytta(Indiolytta)melanura (Hope,1831)在中国的分布.标本采自广西壮族自治区宁明县那才村,保存在中山大学生物博物馆.此外,给出端黑绿芫菁形态描述和特征图,并比较和讨论了该种与印绿芫菁亚属其他3种的区别.

[目的]建立绿芫菁Lytta caraganae成虫触角转录组数据库,并挖掘和鉴定其成虫触角中嗅觉识别相关的气味结合蛋白(odorant-binding proteins,OBPs)和化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)基因.[方法]采用Illumina HiSeq平台对绿芫菁成虫触角进行转录组分析,比对NR,NT,KO,Pfam,Swiss-Prot,GO和KOG数据库进行基因注释,根据注释信息筛选绿芫菁OBP和CSP基因;利用ClustalX 1.83和MEGA 7.0软件分别分析OBP和CSP基因结构特点及进化关系;通过qRT-PCR技术测定绿芫菁雌雄成虫触角中OBP和CSP基因的表达量.[结果]从绿芫菁成虫触角转录组中共获得51 028条transcripts和41 998条unigenes;基因注释结果表明,在NR数据库中匹配度最高(87.3％)的物种是赤拟谷盗Tribolium castaneum;筛选到22个OBP基因和7个CSP基因,序列比对结果显示,有13个LcarOBPs包含6个保守的半胱氨酸残基,属于classic OBPs;系统进化树表明,绿芫菁的OBPs和LcarCSPs分别与眼斑沟芫菁Hycleus cichorii和大斑沟芫菁H.phaleratus的OBPs和CSPs序列氨基酸一致性最高,表明进化关系最近;qRT-PCR结果显示,2个LcarOBPs基因和2个LcarCSP基因在绿芫菁雄成虫触角中高表达,10个LcarOBP基因和2个LcarCSP基因在雌成虫触角中高表达.[结论]本研究首次鉴定了绿芫菁成虫触角中的OBP和CSP基因,为进一步研究绿芫菁嗅觉识别机制提供了理论基础.

[目的]应用线粒体COI和核CAD基因片段探讨自动条形码间隔探索(automatic barcode gap discovery,ABGD)、广义混合 Yule 溯祖模型(generalized mixed Yule coalescent,GMYC)、贝叶斯泊松树进程(Bayesian Poisson tree processes,bPTP)和贝叶斯系统发育和系统地理分析(Bayesian phylogenetics and phylogeography,BPP)4种分析方法在芫菁科(Meloidae)昆虫分子物种界定中的适用性.[方法]分别基于COI,CAD和COI+CAD串联序列数据集,应用ABGD,GMYC,bPTP和BPP 4种方法对中国北方芫菁科常见的6属(沟芫菁属Hycleus、斑芫菁属Mylabris、豆芫菁属Epicautai、绿芫菁属Lytta、星芫菁属Megatrachelus和短翅芫菁属Meloe)18个形态种进行分子物种界定,并与形态学鉴定结果进行比较.[结果]利用COI+CAD串联序列数据集所得物种界定结果与形态鉴定结果一致;COI数据集使用ABGD和GMYC方法的界定结果与形态鉴定结果一致,而bPTP划分的物种数较形态鉴定结果多;基于CAD序列在3种单基因物种界定方法的结果中,除GMYC与形态划分一致外,其余均显示部分结果与形态划分不同.[结论]在芫菁科分子物种界定中,多基因联合序列、多种界定方法分析所得结果优于单一基因片段和界定方法的分析结果.本研究的结果为芫菁科昆虫的分子物种界定和整合分类提供了数据支持和参考.