目的:评价电针预处理对大鼠脑缺血再灌注时皮质Ubc9表达的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠80只，8～12周龄，体重200～250 g，按照随机数字表法分为4组( n＝20)：假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、电针预处理组(E组)和假电针组(SE组)。S组仅暴露颈部血管，不插入线栓阻闭；其余3组采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型，栓塞2 h后拔出线栓恢复灌注。E组和SE组造模前5 d行电针刺激，E组选取百会穴(大鼠头顶部两耳连线中点)电针刺激，参数为2/12 Hz疏密波，强度1 mA，30 min/d，连续5 d，最后1次电针刺激24 h后造模，SE组选取刺激点为百会穴旁开1 cm，其余操作参数同E组。于再灌注24和48 h时行神经功能缺陷评分，随后处死大鼠取大脑皮质缺血半暗带组织，TUNEL法检测细胞凋亡情况并计算凋亡率，Western blot法检测Ubc9和结合状态小泛素样修饰蛋白(SUMO)2/3的表达。 结果:与S组比较，其余3组再灌注24和48 h时神经功能缺陷评分和皮质细胞凋亡率升高，Ubc9和结合状态SUMO2/3表达上调( P<0.05)；与I/R组和SE组比较，E组再灌注24和48 h时神经功能缺陷评分和皮质细胞凋亡率降低，Ubc9和结合状态SUMO2/3表达上调( P<0.05)。 结论:电针预处理减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的机制与进一步上调Ubc9表达，从而增强SUMO2/3化修饰有关。

目的:构建针对血管内皮细胞损伤的靶向微泡,实现对兔心肌缺血再灌注损伤的靶向显像.方法:构建血管内皮细胞间黏附分子-1(ICAM-1)靶向阳离子微泡(TCMB)和非靶向普通阳离子微泡(CMB),肿瘤坏死因子α(TNF-α)活化培养至70％融合的原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)/脐静脉,CMB和TCMB分别以2.0 dynes/cm2的剪切应力通过平行板流动腔连接的细胞培养皿/脐静脉,比较CMB和TCMB对HUVEC/脐静脉的靶向粘附能力.20只新西兰大耳兔随机分为CMB组和TCMB组,每组各10只,参照相关文献方法制备心肌缺血再灌注损伤模型,耳缘静脉注射1ml浓度均为2×108个/ml的CMB(CMB组)和FITC二抗标记的TCMB(TCMB组),比较CMB和TCMB对兔心肌缺血再灌注损伤的靶向显像能力.结果:CMB与TCMB的粒径差异无统计学意义(2.90±1.90μmvs 3.10±2.10μm,P＞0.05),CMB表面电位高于TCMB(+31.30±3.90mV vs +22.00±2.40mV,P＜0.01).与活化血管内皮细胞粘附的TCMB数量是CMB的19.4倍,与脐静脉粘附的TCMB声强度是CMB的3倍,差异均有统计学意义(P＜0.01).TCMB可在兔心肌缺血再灌注损伤区域的冠脉内定向聚集,实现靶向超声分子显像,而CMB无明显靶向显像功能;TCMB组兔损伤区域心肌声强比是CMB组的1.86倍,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:ICAM-1靶向微泡能与损伤的血管内皮细胞特异性粘附,实现对心肌缺血再灌注损伤的靶向超声分子显像.

目的 探讨扩散张量成像(DTI)磁共振成像(MRI)对兔肝热缺血-再灌注损伤的应用价值.方法 健康成年新西兰大白兔20只,随机选取10只夹闭肝动脉和门静脉30 min,再灌注6h建立肝热缺血-再灌注损伤兔模型,另10只作为正常对照组.所有实验兔于Siemens MAGNETOMTrio Tim 3.0T MR行DTI MRI扫描,采集数据后用Siemens Nero 3D进行后处理,由2位经验丰富的影像专业医师分别测量兔肝表观扩散系数(ADC)、各向异性分数(FA)值,并使用组内相关系数(ICC)检验其一致性,观察是否具可重复性.磁共振(MR)检查后立即处死实验兔,经耳缘静脉取血检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、血清乳酸脱氢酶(LDH)水平;取冻存肝组织检测其总超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及髓过氧化酶(MPO)水平.采用两独立样本t检验比较组间ADC、FA值之间差异,组间临床化验指标差异采用非参数Mann-Whitney U检验,应用Spearman相关分析评价ADC值与临床化验指标的相关性,应用受试者工作特征(ROC)曲线评价ADC值诊断效能.结果 两名观察者所测ADC、FA值具有较高的一致性,ICC值分别为0.890、0.823.热缺血-再灌注损伤组和正常组兔肝的ADC值差异有统计学意义(P=0.000),分别为(1.46 ±0.14)×10.mm2/s、(1.83 ±0.20)×10-3 mm2/s,而FA值组间差异无统计学意义,分别为0.38 ±0.03、0.37 ±0.04(P=0.664).两组间ALT、AST、LDH、总SOD、MDA及MPO之间差异均有统计学意义(P=0.000).ADC值与ALT、AST、LDH、MPO及MDA之间均呈负相关(P=0.041、0.004、0.001、0.001、0.012),ADC值和总SOD之间呈显著正相关(r=0.782,P=0.000).ADC值评价兔肝热缺血-再灌注损伤具有较高的诊断效能[曲线下面积(AUC) =0.97],其最佳诊断阈值为1.676×10-3 mm2/s,灵敏度为90％,特异度为100％.结论 DTI MRI能定量、无创评价兔肝热缺血-再灌注损伤引起的肝脏水分子扩散的变化,其评价指标ADC值与肝损伤的程度呈明显相关.

目的 探讨远程缺血预处理(RIPC)对兔脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)时脑源性神经营养因子(BDNF)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PKC)ε蛋白和mRNA含量的影响及其意义.方法 日本大耳白兔36只,随机均分为假手术组(S组)、缺血性损伤组(IR组)、IR+ RIPC组.每组6只动物分别于再灌注第2天和第5天处死.S组不阻断腹主动脉,IR组和IR+RIPC组夹闭腹主动脉30分钟建立SCIRI模型,IR+RIPC组于主动脉阻断前1小时实施RIPC.3组动物在再灌注第2天和第5天行后肢神经功能评分后处死并取脊髓组织L3-L5段,评估病理学变化;用Western blotting和RT-PCR法分别检测脊髓组织 BDNF、PKCε蛋白及其 mRNA含量.结果 同一时间点,与IR组相比,IR+RIPC组后肢神经功能评分和脊髓组织病理切片分级明显改善(P<0.05),脊髓组织BDNF、PKCε蛋白及mRNA表达均明显升高(P< 0.05).结论 RIPC对兔SCI-RI有一定的防治作用,其作用机制与RIPC激活了PKCε/ PKC信号通路,进而上调脊髓损伤区域BDNF蛋白的表达有关.

目的 探讨简单有效的兔心肌缺血再灌注损伤模型制备方法,并利用心肌声学造影评价兔心肌缺血再灌注损伤.方法 将70只日本大耳白兔随机分为2组:35只心肌缺血/再灌注组(I/R)和35只假手术组(SH).I/R组阻断冠状动脉左前降支90 min,再灌注60、120、180min及1周;SH组开胸后同一部位只穿线不阻断.观察两组兔术前及术后各时段心肌声学造影的变化,最后行HE及MASSON染色.结果 成功制备兔心肌缺血再灌注损伤模型30只,I/R组缺血90 min至再灌注180min兔损伤节段造影剂视频强度超声均值对比术前及SH组均有不同程度减低,且差异有统计学意义(P＜0.05).I/R组兔术后HE及MASSON染色均证实有心肌损伤病理表现,随着早期再灌注时间的延长损伤程度逐渐加重.结论 通过阻断兔冠状动脉左前降支90 min后解除阻断使其再灌注可成功建立心肌缺血再灌注损伤模型,心肌声学造影可以有效评价心肌缺血再灌注损伤.

目的 探讨靶向心肌声学造影(MCE)监测兔心肌缺血或再灌注损伤(MIRI)中IL-8表达的效果.方法 经兔耳缘静脉注射SonoVue及携IL-8单抗超声微泡行MCE检查,实时荧光定量PCR (QPCR)检测IL-8的表达量.结果 携IL-8单抗微泡组(靶向MCE组)随着再灌注时间延长心肌缺血区声强度(VI)逐渐增高,于再灌注180 min达高峰;再灌注30～180 min各时段靶向MCE组心肌缺血区VI值明显高于SonoVue微泡组(普通MCE组).相关性分析得出靶向MCE结果与QPCR结果呈正相关(P＜0.05).结论 靶向MCE可无创性地监测MIRI中IL-8的表达量,提高对MIRI诊断的灵敏度,以及评价心肌再灌注情况.

背景 七氟醚作为一种常用的吸人性麻醉药,被广泛应用于全身麻醉.近年来,许多研究表明,七氟醚后处理可以保护脑组织对抗脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤,其作用机制是多方面的,主要包括增强脑的抗缺血能力,减少脑梗死体积和脑水肿程度,减轻脑细胞氧化应激、炎症反应,抑制脑细胞的凋亡.其中,抑制脑细胞的凋亡扮演了重要的角色.目的 就七氟醚后处理脑保护作用相关的细胞凋亡信号转导通路进行综述. 内容 重点阐述七氟醚后处理的脑保护作用及其对细胞凋亡的线粒体途经和内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)途经信号转导通路的调控. 趋向 更好地了解七氟醚后处理脑保护作用的分子机制,从而为临床脑I/R患者的早期治疗提供指导.

目的 研究肢体远程缺血后处理对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨阿片受体在此机制中的可能作用.方法 新西兰大白兔24只,随机分为4组,每组6只.缺血组(SCⅡ组):阻断肾下腹主动脉25 min后再灌注;远程缺血后处理组(RIP组):脊髓缺血操作同SCⅡ组,在开放腹主动脉前2 min予3个循环双下肢缺血后处理;吗啡组(MOR组)及纳洛酮组(NAL组):脊髓缺血前经耳缘静脉分别给予吗啡、纳洛酮1 mg/kg,余操作同RIP组.分别于再灌注4、12、24、48 h对所有动物行后肢运动功能评分;再灌注48 h后行脊髓组织病理学观察并计数脊髓前角正常运动神经元;行再灌注48 h神经功能评分与脊髓前角正常运动神经元计数之间相关性分析.结果 RIP组再灌注4、12、24、48 h神经功能评分及脊髓前角正常运动神经元计数均明显高于SCⅡ组(P＜0.05);再灌注4 h MOR组神经功能评分高于RIP组(P＜0.05),而再灌注12、24、48 h神经功能评分及脊髓前角正常运动神经元计数二者差异无统计学意义(P＞0.05);NAL组再灌后4、12、24、48 h神经功能评分及脊髓前角正常运动神经元计数均明显低于RIP组(P＜0.05);再灌注48 h神经功能评分与脊髓前角正常神经元计数之间等级相关系数 rS＝0.882(P＜0.001),二者之间具有良好的相关性.结论 肢体远程缺血后处理对兔脊髓缺血损伤具有保护作用;该保护作用可被纳洛酮阻断,提示阿片受体参与肢体远程缺血后处理的脊髓保护作用机制.

目的 探讨孕酮对兔脊髓缺血再灌注损伤(spinal cord ischemia-reperfusion injury,SCII)的保护作用,为其用于临床脊髓缺血再灌注损伤治疗提供实验依据.方法 纯种成年日本大耳白兔33只,体质量(2.5±0.2)kg,随机分为三组,分别为孕酮组(n=15)、损伤组(n=15)、正常对照组(n=3).孕酮组及损伤组通过阻断腹主动脉方法制备脊髓缺血再灌注模型,孕酮组术后给予腹腔注射孕酮(8mg/kg),损伤组术后给予腹腔注射等量生理盐水;术后12、24、36、48、72h取材,行HE染色、免疫组织化学染色以及Western blot检测评估脊髓组织改变;术后24、48、72h采用Tarlov神经功能评分对兔后肢运动功能进行评分.以上检测均与正常对照组进行比较.结果 H&E染色结果显示,SCII后脊髓的神经元出现明显的皱缩,凋亡活动增加;与损伤组相比,孕酮组神经元的损伤显著降低.与对照组比较,损伤组及孕酮组术后48、72h时神经元明显减少(P＜0.05),损伤组48、72h时明显少于孕酮组(P＜0.05);损伤组及孕酮组术后24、48及72h时免疫组织化学染色半定量评分显著升高(P＜0.05).术后24、48、72h,损伤组及孕酮组兔运动神经功能均受损,功能评分均显著低于对照组,比较差异有统计学意义(P＜0.05);损伤组评分均低于孕酮组,除24h时比较差异无统计学意义(P＞0.05)外,48、72h组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 孕酮对兔SCII具有明显保护作用.

目的 探讨维生素E(Vit E)对大鼠心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)的影响及机制.方法 选取雄性健康Wistar大鼠60只,按照随机数字表法将其分为Vit E组、模型组和对照组,各20只.前两组在平左心耳下缘2mm处结扎左冠脉前降支(LAD),30 min后松解结扣再灌注,复制MIRI模型;对照组只用丝线穿过LAD但不结扎.VitE组在造模成功即刻肌注Vit E注射液4.5mg/(kg·d),模型组、对照组术后肌注生理盐水4.5 mg/(kg·d),连续给药2周.检测并比较不同干预对各组抗氧化指标、缺血梗死程度及血流动力学指标的影响.结果 ①与模型组比较,Vit E组左心室收缩末期压力(LVESP)明显升高,而左心室舒张末期压力(LVEDP)、血浆心钠素(ANP)明显降低,差异均有高度统计学意义(均P＜ 0.01);②与模型组比较,Vit E组血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮(NO)活性/含量明显升高,而丙二醛(MDA)含量明显降低,差异均有高度统计学意义(均P＜ 0.01);③与模型组比较,Vit E组梗死区(IA)面积、缺血危险区(IDA)面积、IA/IDA、IDA/LV均明显降低,差异均有高度统计学意义(均P＜ 0.01).结论Vit E通过抗氧化应激、清除氧自由基作用改善大鼠MIRI,增强心脏功能.