目的:建立HPLC法同时测定叶下珠中没食子酸、短叶苏木酚、柯里拉京、老鹳草素、鞣花酸和芦丁6种成分含量的方法及指纹图谱分析方法。方法:叶下珠以50%甲醇超声提取，采用Phenonmenex Luna C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱，流速1.0 ml/min，柱温25 ℃，进样量10 μl，检测波长270 nm。建立不同产地叶下珠HPLC指纹图谱，采用主成分分析法（PCA）和正交偏最小二乘判别（OPLS-DA）分析不同产地叶下珠化学成分的差异性。结果:没食子酸、短叶苏木酚、柯里拉京、老鹳草素、鞣花酸和芦丁分别在0.042 8~0.641 6、0.033 4~0.501 4、0.142 2~2.133 1、0.383 1~5.746 5、0.063 1~0.946 2、0.019 2~0.287 8 μg范围内与峰面积线性关系良好，平均回收率分别为103.65%、96.39%、101.85%、95.04%、98.79%、98.33%。不同产地叶下珠HPLC指纹图谱共有14个特征峰，鉴别指认其中6种化合物。PCA分析结果显示不同产地叶下珠所含化学成分具有差异性，OPLS-DA筛选出老鹳草素、鞣花酸和柯里拉京3个化合物为不同产地叶下珠的差异性成分。结论:该方法高效、准确、灵敏度高，可用于叶下珠药材中上述6种成分含量的测定，建立的不同产地叶下珠HPLC指纹图谱结合6个特征性指标成分含量测定方法可用于叶下珠的质量控制评价。

目的 采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)建立鹅不食草药材倍半萜内酯类特征图谱,并同时测定4种有效成分的含量,评价不同产地鹅不食草药材质量的差异.方法 采用HPLC法进行测定,色谱柱为Waters HSS T3(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.02％磷酸溶液,梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,波长为225 nm,柱温为40℃,进样量为10μL;建立20批鹅不食草药材特征图谱,通过对照品比对并结合紫外-3D光谱分析,对共有峰进行鉴定,并对4种成分的含量进行测定;对20批鹅不食草药材倍半萜内酯类特征图谱进行相似度评价及主成分分析(principal component analysis,PCA),利用正交偏最小二乘法—判别分析(orthogonal partial least-squares discrimination analysis,OPLS-DA)寻找不同产地鹅不食草药材的差异性成分.结果 鹅不食草药材特征图谱有7个共有峰,指认出其中4个峰,分别为短叶老鹳草素A、山金车内酯C、山金车内酯D和小堆心菊素C;除广西产区的3批样品外,其余17批样品相似度均大于0.95;PCA将20批鹅不食草药材划分为2类,OPLS-DA法确定3个差异标志物,差异显著性排序分别为峰6>山金车内酯C>峰7.广西产区山金车内酯C含量明显高于其它产地.结论 该方法能有效地分析不同产地鹅不食草药材质量的差异性,为不同产地鹅不食草药材质量的评价提供参考.

建立睡莲花药材HPLC指纹图谱及7种成分一测多评的含量测定方法.采用如下色谱条件建立HPLC指纹图谱:Phenomenex Gemini NX-C18(250 mm × 4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相乙腈-0.2％磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长266 nm.对数据进行相似度分析、主成分分析和聚类分析.同时以没食子酸为内参物,建立没食子酸甲酯等6种成分的相对校正因子.结果显示17批睡莲花药材与参照图谱S16的相似度在0.901～1.000之间,并明确了 11个共有峰,对7个共有峰进行了指认;2批市售图谱与S16图谱相似度为0.568和0.730,说明栽培和野生睡莲花药材与市售样品之间化学信息差异较大.主成分分析、聚类分析法、偏最小二乘-判别分析结果证明了这一结论.一测多评结果显示,没食子酸甲酯、睡莲酚、老鹳草素、鞣花酸、烟花苷和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖的相对校正因子分别为 0.965 0、0.974 0、1.201 3、0.175 4、1.160 3、2.117 3,RSD 分别为 0.37％、0.38％、0.32％、1.76％、0.37％和0.08％(n=8).一测多评法测定结果与外标法测定结果接近.建立的HPLC指纹图谱结合一测多评含量测定法简便可行,在部颁标准的基础上为睡莲花药材质量控制方法的提升提供了参考依据.

目的 建立老鹳草Geranium wilfordii指纹图谱,研究老鹳草提取物的指纹图谱与抗肿瘤活性之间的谱效关系,初步明确老鹳草抗肿瘤主要活性成分.方法 运用中药色谱指纹图谱相似度评价软件,建立老鹳草抗肿瘤活性部位的HPLC指纹图谱.采用MTT法,以人乳腺癌MCF-7细胞为模型,对老鹳草样品的醋酸乙酯部位进行抗肿瘤活性测定.采用多元线性回归法,将量化共有峰面积与MTT法测得老鹳草抗肿瘤活性结果相结合,构建老鹳草抗肿瘤谱效关系.结果 通过指纹图谱的建立,共标定了 16个共有峰,确定1号峰为没食子酸、7号峰为柯里拉京、8号峰为老鹳草素、12号峰为鞣花酸.其中29批药材的相似度均大于0.732,运用主成分分析和聚类分析进一步分析样品间差异,将距离较远的30号样品排除.HPLC指纹图谱中的16个共有峰中,有8个峰对MCF-7细胞有作用,得到MCF-7的谱效方程,经6批药材验证,谱效方程计算值与实际值的偏差率不超过10％.结论 该谱-效方程可用于预测老鹳草的抗乳腺癌作用物质基础.

目的 对老鹳草Geranium wilfordii及70％丙酮提取不同溶剂萃取物的主体成分、特定成分进行快速的分析与鉴定.方法 采用红外光谱、二阶导数光谱结合二维相关红外光谱对老鹳草及其70％丙酮提取不同溶剂萃取物进行分析鉴定.结果 红外宏观指纹分析结果发现老鹳草原药材含有1730、1618～1445、1337 cm-1等特征谱线,主要归属于老鹳草素及其衍生物的鞣质类化合物的特征吸收.通过分析不同极性萃取物,可以快速获知老鹳草素及其衍生物的富集情况和发现亚硝酸钾的前体硝酸钾的存在和分布情况.光谱分析结果表明,醋酸乙酯层、正丁醇层萃取物与老鹳草素相关系数分别为0.944 3、0.930 2,验证大量老鹳草素及其衍生物的存在,及其主要集中在该两层;在氯仿层、醋酸乙酯层和水层提取物中有硝酸钾特征吸收峰,以水层最明显.结论 红外光谱不仅可以对主要有机成分(鞣质、黄酮和多糖类等)进行检测分析,同时可对硝酸钾为代表的无机盐进行快速检测,在中药质量与安全的分析评估中其有广阔的应用前景.

目的:对牻牛儿苗科老鹳草属植物老鹳草Geranium wilfordii Maxim.干燥地上部分的化学成分进行研究,并对分离出的化学成分进行体外抗肿瘤活性评价.方法:采用硅胶柱色谱、制备薄层色谱等对老鹳草的 75%乙醇提取物进行分离纯化,并通过核磁共振波谱法对化合物进行结构鉴定.采用人肝癌细胞HepG2,通过CCK-8 实验检测分离纯化得到的化合物的体外抗肿瘤活性.结果:从老鹳草的 75%乙醇提取物中共分离纯化得到 17 个化合物,分别鉴定为水杨酸(1)、没食子酸甲酯(2)、没食子酸乙酯(3)、1,2,4-苯三酚(4)、原儿茶酸(5)、(6S,9R)-6,9-二羟基-3-酮基-α-香堇醇(6)、短叶苏木酚酸乙酯(7)、没食子酸(8)、euphorhirtin G(9)、异柯里拉京(10)、金丝桃苷(11)、槲皮素(12)、烟酰胺(13)、山柰酚(14)、短叶苏木酚(15)、莽草酸(16)、槲皮素-3-O-(6″-没食子酰基)-β-D-半乳糖苷(17).化合物 2～4、7、8、10、14、15、17 具有体外抗HepG2 细胞增殖的活性[半数抑制浓度(IC50)＜300 μmol·L-1].结论:化合物 2、4、6、9、10、13、16、17 均为首次从该植物中分离得到,化合物 4、6、9、10、13 为首次从老鹳草属植物中分离得到.化合物 10、14 体外抗 HepG2 细胞增殖活性较好,IC50 分别为27.95、18.24 μmol·L-1.

目的:研究老鹳草的化学成分.方法:应用色谱技术进行分离纯化,根据化合物的理化性质和谱学数据鉴定其结构.结果:从老鹳草75％乙醇水提取物的乙酸乙酯部位中分离并鉴定了10个化合物结构,分别为β-谷甾醇(1),柯里拉京(2),1,2,3,6-四-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(3),短叶苏木酚(4),原儿茶酸(5),没食子酸(6),对羟基苯甲酸(7),β-胡萝卜苷(8),槲皮素(9),1,3,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(10).结论:化合物3～5,7,10为首次从该植物中分离得到,其化学成分与老鹳草另外两个药用来源具有一定相似性,从化学成分上证明了三者具有亲缘关系.

目的: 优化叶下珠多酚部位的提取工艺.方法: 以总多酚含量和多酚类成分含量之和(没食子酸、柯里拉京、老鹳草素、短叶苏木酚酸) 的综合评分为评价指标,采用正交试验设计优选叶下珠多酚部位的提取工艺.结果: 优选得到的叶下珠多酚部位提取工艺为: 加入60 倍量50％乙醇,超声提取(200 W,40 kHz) 1 次,时间30 min.结论: 经验证,优选后的工艺稳定、可靠,为进一步研究叶下珠多酚部位的药效物质基础提供数据参考.关键词叶下珠; 多酚部位; 提取工艺

通络通方主要由老鹳草、淫羊藿、红花等药味组成,作为协定处方在我院中西医结合肿瘤内科使用多年,其外用具有温经通络、活血化瘀之功效,可显著改善化疗引起的病理性神经疼痛[1～3].根据临床需求,拟将其开发成院内制剂通络通散,方便患者携带.为控制其质量,笔者结合北京市医疗机构中药制剂质量标准研究技术指导原则[4],采用薄层色谱法(TLC)分别对处方中老鹳草、淫羊藿、红花所含的柯里拉京、淫羊藿苷、羟基红花黄色素A进行了定性鉴别,为建立该制剂的质量标准提供参考.其中以柯里拉京为对照品对老鹳草进行薄层鉴别尚未查到相关文献,本文方法为首次提出,为今后老鹳草的鉴别方法研究提供参考.

目的:通过一种基于通路模式的方法,对传统中药名方小青龙汤治疗咳喘的有效成分进行预测.方法:首先搜索TCM中医药资料库与CTD数据库来整理出小青龙汤已知的各种化合物成分与相关基因,再通过DAVID生物分析系统与KEGG数据库挖掘出与咳喘相关的通路模式.然后利用该通路模式对候选基因打分,筛选出相关性高的基因,并据此推测出治疗咳喘的有效成分.结果:根据上述的计算方式,我们将相关基因根据得分进行排序,得到相关性最好的三种基因分别为MAPK1、MAPK3与RELA.最终预测出的有效成分中效能最高的三种分别是Paeonol(丹皮酚)、Glycyrol(甘草醇)、Geraniin(老鹳草素).结论:此种基于通路模式的方法可以较好的预测出小青龙汤治疗咳喘的有效成分,加以推广更有利于中药基础药理研究的标准化.