目的:评价七氟烷对肺动脉高压大鼠右心室重构时心肌细胞Ca 2＋转运蛋白表达的影响。 方法:清洁级健康成年雄性SD大鼠24只，8～10周龄，体质量200～250 g，采用随机数字表法分为4组( n＝6)：对照组(CM组)、七氟烷组(CS组)、野百合碱组(M组)和七氟烷＋野百合碱组(S组)。M组和S组大鼠腹腔注射野百合碱60 mg/kg，CM组大鼠腹腔注射野百合碱溶解剂。注射野百合碱后第1天时S组和CS组大鼠吸入2.5%七氟烷1 h，每周2次，每次间隔3 d。野百合碱注射后6周应用小动物经胸超声心动图法测定肺动脉加速时间和肺动脉射血时间。在3%七氟烷麻醉下暴露小鼠胸腔，灌注心脏，留取肺动脉分支血管和右心室心肌组织。HE染色观察肺小动脉管壁厚度和右心室心肌细胞横截面积，Western blot法检测右心室心肌细胞Ca 2＋转运蛋白的表达。 结果:与CM组相比，M组大鼠肺动脉加速时间和肺动脉射血时间比值减小，右心室心肌细胞横截面积增大，肺小动脉管壁厚度增加，1型钠钙交换体和三磷酸肌醇受体表达上调，L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基、兰尼碱受体、肌浆网钙泵2α和亲联蛋白-2表达下调( P<0.01)；与M组相比，S组大鼠肺动脉加速时间和肺动脉射血时间比值升高，右心室心肌细胞横截面积减小，肺小动脉管壁厚度减少，1型钠钙交换体和三磷酸肌醇受体表达下调，L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基、兰尼碱受体、肌浆网钙泵2α和亲联蛋白-2表达上调( P<0.01)。 结论:七氟烷改善肺动脉高压大鼠右心室重构的机制与调节心肌细胞Ca 2＋转运蛋白表达有关。

目的:探讨丙戊酸钠（sodium valproate, VPA）对猪心肺复苏（cardiopulmonary resuscitation, CPR）后心脑损伤的作用及机制。方法:国产健康雄性白猪25头，体质量（37±3）kg，随机（随机数字法）为假手术组（Sham, n=6）、CPR组（ n=10）与CPR+VPA组（ n=9）。经右心室电极释放交流电诱发心脏骤停9 min，然后CPR 6 min，以此制备猪心脏骤停-复苏模型。CPR+VPA组在复苏后5 min利用微量输液泵经股静脉泵入VPA 150 mg/kg，持续1 h。于复苏后1 h、2 h、4 h和24 h，经股静脉采集血液标本，应用ELISA法检测心肌肌钙蛋白（cardiac troponin I, cTnI）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase MB, CKMB）、神经元特异度烯醇化酶（neuron specific enolase, NSE）和S100B蛋白（S100B protein, S100B）。复苏后24 h对动物实施安乐死，迅速获取左室心肌和大脑皮层组织标本，应用Western blot法检测C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein, CHOP）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12（caspase 12）和caspase 3的蛋白表达水平，TUNEL法检测细胞凋亡水平。三组间的计量资料比较，采用单因素方差分析。 结果:与Sham组相比，CPR组和CPR+VPA组复苏后心脑损伤标志物cTnI、CKMB、NSE和S100B的血清浓度均明显升高（均 P<0.05）。与CPR组相比，CPR+VPA组cTnI和NSE在复苏1 h后、CKMB和S100B在复苏2h后的血清浓度显著降低（均 P<0.05）。CPR组和CPR+VPA组复苏后心脑组织内质网应激凋亡相关蛋白CHOP、caspase 12和caspase 3表达较Sham组明显增加，细胞凋亡指数显著升高（均 P<0.05）。而CPR+VPA组心脑组织的CHOP、caspase 12和caspase 3较CPR组明显减少，细胞凋亡程度显著降低（均 P<0.05）。 结论:VPA具有减轻猪CPR后心脑损伤的作用，其机制可能与抑制内质网应激途径介导的细胞凋亡过程有关。

脓毒症是重症监护病房的常见病,也是危重症患者的主要死因.脓毒症心肌功能障碍是脓毒症引起的心功能不全,是脓毒症的常见并发症.文章从炎性反应、心肌抑制因子、心肌细胞线粒体功能、氧化应激、钙离子泵、内质网应激、心肌细胞凋亡、心脏微血管功能、交感神经与β肾上腺素受体、补体等方面阐述脓毒症心肌功能障碍的发病机制,探讨自噬作用在以上各个发病机制中的干预作用.从自噬角度干预脓毒症心肌功能障碍的病理生理过程可能成为治疗该病的新靶点.

目的 研究干扰心肌组织中脂肪酸转位酶CD36的表达对高脂饮食诱导的肥胖小鼠心肌细胞钙调控的影响.方法 4周龄的雄性C57小鼠,随机分为正常对照组(N-mock)、肥胖对照组(O-mock)及肥胖干预组(O-CD36),采用高脂饮食诱导肥胖.6周龄时,经心肌注射靶向CD36(O-CD36)或靶向无关基因(N-mock、O-mock)的重组慢病毒,以下调心肌组织中目标基因的表达.16周龄时,取小鼠左心室组织,检测CD36和肌质网钙泵(SERCA2a)的mRNA和蛋白表达;并分离单个心室肌细胞,使用活细胞工作站检测心肌细胞钙瞬变.结果 肥胖小鼠心肌组织中CD36的表达较正常小鼠无显著改变,慢病毒介导的RNA干扰显著下调了CD36的表达.肥胖引起心肌细胞SERCA2a的蛋白表达降低及肌质网钙处理能力的下降;下调CD36的表达增加了SERCA2a的含量,并改善了钙调控异常.结论 下调心肌组织中CD36的表达可改善肥胖所引起的心肌细胞钙调控异常.

目的 探讨甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-AZA-2'-dC)在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌肥大细胞的对肌浆网Ca2+-ATP泵(SERCA2a)表达等的影响.方法 培养SD大鼠乳鼠原代心肌细胞,根据处理方法,分为5组,分别为对照组、血管紧张素Ⅱ组、5-氮杂胞苷组、血管紧张素Ⅱ与5-氮杂胞苷同时处理组和5-氮杂胞苷预处理组;按照分组处理48 h后分别测定心肌细胞A型利钠肽(ANP)mRNA及蛋白表达、细胞面积等心肌细胞肥大的指标;Western blot检测心肌细胞肌浆网Ca2+-APT泵(SERCA2a)、钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)、磷酸化钙调蛋白激酶Ⅱ(p-CaMK Ⅱ)的蛋白质表达的水平;激光共聚焦检测胞内钙变化情况.结果 血管紧张素Ⅱ(10-6 mol/L)处理心肌细胞48 h,可使ANP mRNA及蛋白表达增加(P＜0.05).与对照组相比,血管紧张素Ⅱ组心肌细胞ANP、p-CaMK Ⅱ蛋白表达明显增加(P＜0.01);而5-氮杂胞苷(10-6 mol/L)同时加药组及预处理组较之血管紧张素Ⅱ组则下降(P＜0.01);与对照组相比,血管紧张素Ⅱ组心肌细胞的SERCA2a蛋白质表达下降(P＜0.01),而5-氮杂胞苷同时加药组及预处理组较血管紧张素Ⅱ组的上升(P＜0.01).钙离子变化情况,与对照组相比,血管紧张素Ⅱ组胞内钙离子峰值上升时间和下降时间均延长(P＜0.05),而5-氮杂胞苷同时加药组及预处理组较之血管紧张素Ⅱ组则稍缩短(P＜0.05).结论 5-氮杂胞苷可抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大,其机制可能通过促进SERCA2a表达有关;SERCA2a表达的增加,缩短胞浆钙再摄取入肌浆网的时间,有利于维持胞内钙稳态.

钙泵在生命活动中具有重要作用,是细胞学和分子生物学领域重要研究对象之一.钙泵的研究从发现至今已历经半个世纪.科学家在肌质网钙泵、动物细胞质膜钙泵和植物细胞钙泵3个领域取得了许多突破性的进展,揭示了其分子结构和转运机制.但是与钠钾泵和质子泵相比,仍然有许多谜底有待进一步揭开.

Seipin基因为内质网固有蛋白,高表达于全身脂肪组织、中枢神经系统和睾丸细胞中,具有维持脂滴形态,调节脂肪细胞和神经元分化等功能.Berardinelli-Seip先天性脂质营养不良症(BSCL)与Seipin基因密切关联.BSCL患者会失去绝大部分代谢活跃的脂肪组织和机械运动相关脂肪组织.同时Seipin基因缺陷患者多发生运动神经元病变,统称为Seipin病,男性BSCL患者存在的严重精子畸形症与Seipin基因缺陷有关.不同部位的病变之间存在相同致病机制.Seipin基因缺陷可导致细胞脂解酶活性增强和膦酸累积,并且Seipin基因可通过与肌质网钙泵和14-3-3β相互作用而参与对细胞骨架重组与细胞内钙稳态的调节.

心肌细胞凋亡(apoptosis)是机体内外某些因素刺激特定信号的传导通路,触发细胞中预先存在的"自杀"机制,继而正常死亡的过程,而过度凋亡可造成心肌不可逆损伤,是急性心脏病微观水平的主要表现.目前,中医方药主要通过减少钙超载、干预线粒体通路、死亡受体通路,以及内质网通路等4个方面来调节心肌细胞凋亡.中医方药可限制Ca2+从细胞外过度流入细胞内,防止Ca2+泵被激活和细胞负荷过多,从而抑制钙超载导致细胞崩解;通过抑制线粒体通透性转变孔过度开放,稳定线粒体结构,并能清除过多活性氧保护细胞内膜,减少细胞色素C的释放,从而有效保护心肌细胞;抑制死亡受体被激活,祛除趋化因子,恢复细胞内稳态,有效阻止Caspases被激活而诱发的级联反应,减少细胞非正常凋亡;另外可清除对心肌细胞产生刺激因子,恢复心肌细胞正常生长环境,维护细胞超微结构的稳定性,从而避免内质网应激导致的细胞凋亡.

慢性心力衰竭(CHF)是多种心血管疾病发展的终末阶段,发病率及病死率高,治疗费用昂贵.心肌细胞肌质网钙泵(SERCA2a)表达及活性异常是CHF发生、发展的重要病理机制.AAV1/SERCA2a转基因治疗CHF临床试验结果不尽如人意,研究者重新提出“应充分重视提高内源性心肌SERCA2a水平及活性的药物筛选及研发”.中医药治疗CHF历史悠久,效果显著.CHF在中医学中可归属于“心悸”“喘证”“水肿”等范畴.大量研究表明中药复方、单味中药、中药单体能有效改善内源性心肌SERCA2a表达水平及活性从而起到防治CHF的作用.

骨骼肌拥有高度发达的内质网,又被称为肌浆网,不仅可以作为钙泵完成肌肉的兴奋收缩偶联反应,还可对各种生理或病理性刺激迅速做出反应,通过内质网应激反应,激活下游信号通路,赋予骨骼肌应对外界或内在刺激的能力.因此,骨骼肌内丰富的内质网是骨骼肌具有高度可塑性的细胞学基础.大量研究表明,内质网应激广泛参与了骨骼肌的生理和病理进程,本文就内质网应激在骨骼肌成肌分化、萎缩和运动的作用进行了综述.