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光学体表引导放疗技术的临床应用
编辑人员丨1周前
光学体表引导放疗技术采用三维体表成像原理实时获取体表图像,通过与参考图像比较,可完成治疗前位置验证、治疗中实时监控和门控治疗等功能。它是一种无创无辐射的技术,其临床应用主要包括颅内、头颈、胸腹部、乳腺、四肢以及儿童肿瘤的治疗,应用研究进展包括更少体表标记、更少束缚固定、更安全碰撞预测和更准确实时追踪方面。
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编辑人员丨1周前
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人蜕膜间充质干细胞来源外泌体对高糖老化人真皮成纤维细胞功能的影响及其可能机制
编辑人员丨1周前
目的:建立人真皮成纤维细胞(HDF)高糖老化模型,探讨人蜕膜间充质干细胞(dMSC)来源外泌体对高糖老化HDF增殖、迁移、凋亡的影响及其可能机制。方法:采用实验研究方法。收集2021年1—3月解放军总医院第四医学中心收治的4例男性包茎患者(18~22岁)环切术后废弃包皮组织,分离培养获取原代HDF。取第6代HDF,按照随机数字表法分为低糖组和高糖组,分别采用低糖完全培养基和高糖完全培养基进行每72小时换液、不传代培养,10 d后取细胞,于接种后24 h,采用β-半乳糖苷酶试剂盒检测细胞衰老情况;于接种后48 h,采用蛋白质印迹法检测细胞衰老相关蛋白p16、p53表达情况;于接种后24、48、72 h,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞增殖情况;于接种后48 h,采用脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色法检测细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况;于接种后24 h,采用Transwell实验测定细胞迁移能力。取人dMSC培养48~72 h,采用差速高速离心法获取其外泌体,采用透射电子显微镜观察dMSC外泌体形态,采用纳米颗粒追踪分析法检测dMSC外泌体的粒径分布,采用蛋白质印迹法检测dMSC外泌体标志蛋白CD9、肿瘤易感基因101(TSG101)的表达。取dMSC外泌体及前述高糖完全培养基诱导老化的HDF共孵育24 h,采用PKH67试剂盒检测细胞摄取外泌体的情况。取前述高糖完全培养基诱导老化的HDF,同前分为单纯高糖组、高糖+低浓度外泌体组、高糖+高浓度外泌体组,分别于高糖完全培养基中加入等体积的磷酸盐缓冲液、终质量浓度为50 μg/mL dMSC外泌体、终质量浓度为100 μg/mL dMSC外泌体进行常规细胞培养。分组后同前于对应时间点采用CCK-8法和EdU染色法、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞增殖、细胞周期和凋亡及细胞迁移情况。根据前述结果,另取经高糖完全培养基诱导老化的HDF,分为单纯高糖组、高糖+高浓度外泌体组并同前处理。分组培养48 h,采用实时荧光定量反转录PCR法检测单纯高糖组和高糖+高浓度外泌体组细胞衰老相关的微小RNA-145-5p(miR-145-5p)、miR-498、miR-503-5p及其靶基因钙/钙调素依赖性蛋白激酶1D(CAMK1D)、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因( PTEN基因)和细胞周期蛋白D1的mRNA表达情况。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD- t检验和独立样本 t检验。 结果:接种后24 h,高糖组HDF β-半乳糖苷酶阳性染色率为(38.4±4.2)%,明显高于低糖组的(16.5±2.2)%( t=4.65, P<0.01)。接种后48 h,高糖组HDF的衰老相关蛋白p16和p53的表达量均明显高于低糖组( t值分别为11.85、3.02, P<0.05或 P<0.01)。接种后24、48、72 h,高糖组HDF的增殖活性均明显低于低糖组( t值分别为4.13、9.90、15.12, P<0.01)。接种后48 h,高糖组HDF的EdU阳性染色率明显低于低糖组( t=3.83, P<0.05)。接种后48 h,高糖组HDF周期的G2/M+S亚群在3个亚群(G0/G1、S和G2/M)的占比明显低于低糖组( t=8.74, P<0.01)。接种后24 h,高糖组HDF穿过Transwell滤膜到达下室的细胞数量为(37±6)个,明显少于低糖组的(74±7)个( t=8.42, P<0.01)。接种后48 h,高糖组HDF凋亡率明显高于低糖组( t=8.48, P<0.01)。dMSC外泌体为边缘清晰、大小分布均匀的杯状或者圆形囊泡,粒径基本处于80~200 nm。dMSC外泌体标志性蛋白CD9、TSG101表达均呈阳性。共孵育24 h,外泌体被HDF摄入胞内,主要分布于细胞核周围。分组培养24、48、72 h,高糖+低浓度外泌体组和高糖+高浓度外泌体组HDF增殖活性均明显高于单纯高糖组( t值分别为6.36、6.10、7.76,8.92、12.17、10.74, P<0.01),高糖+高浓度外泌体组HDF增殖活性均明显高于高糖+低浓度外泌体组( t值分别为7.92、4.82、4.72, P<0.01)。分组培养48 h,与单纯高糖组比较,高糖+低浓度外泌体组和高糖+高浓度外泌体组HDF EdU阳性染色率均明显升高( t值分别为5.32、9.88, P<0.01);与高糖+低浓度外泌体组比较,高糖+高浓度外泌体组HDF EdU阳性染色率显著升高( t=5.27, P<0.01)。分组培养48 h,与单纯高糖组比较,高糖+低浓度外泌体组和高糖+高浓度外泌体组HDF中的G0/G1期亚群占比均显著降低( t值分别为3.81、4.31, P<0.05),G2/M+S亚群占比均明显升高( t值分别为3.81、4.31, P<0.05)。分组培养24 h,与单纯高糖组相比,高糖+低浓度外泌体组和高糖+高浓度外泌体组HDF穿过滤膜的数量均明显增多( t值分别为10.14、13.39 ,P<0.01);与高糖+低浓度外泌体组相比,高糖+高浓度外泌体组HDF穿过滤膜的数量明显增多( t=6.27 ,P<0.01)。分组培养48 h,与单纯高糖组比较,高糖+低浓度外泌体组和高糖+高浓度外泌体组HDF凋亡率均明显降低( t值分别为3.72、5.53, P<0.05或 P<0.01)。分组培养48 h,与单纯高糖组相比,高糖+高浓度外泌体组HDF的miR-145-5p、miR-498 mRNA表达量均明显上升( t值分别为13.03、8.90, P<0.01),miR-503-5p mRNA表达量明显下降( t=3.85, P<0.05);高糖+高浓度外泌体组中HDF的CAMK1D、 PTEN基因mRNA表达量均明显低于单纯高糖组( t值分别为8.83、5.97, P<0.01),细胞周期蛋白D1 mRNA表达量明显高于单纯高糖组( t=4.03, P<0.05)。 结论:人dMSC来源外泌体可显著提高高糖老化HDF的增殖和迁移能力,抑制其凋亡。这可能与HDF内miR-145-5p和miR-498表达增高抑制了CAMK1D和 PTEN基因的表达及miR-503-5p表达下降促进了细胞周期蛋白D1的表达有关。
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编辑人员丨1周前
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光学引导跟踪系统在放疗应用中的准确性研究
编辑人员丨1周前
目的:初步探究体表光学引导跟踪系统(OGTS)在肿瘤放射治疗应用中的追踪精度。方法:分为模体验证及临床验证,模体验证采用专用设备,利用OGTS记录光学标记点在反光球平台上从指定位置移动到目标位置的位移值,将该位移值与模体中固定距离比较,以计算系统的准确性与重复性。临床验证通过选取45例放疗患者进行OGTS跟踪准确性和重复性研究,其中头部、乳腺、直肠肿瘤患者各15例。每例患者均获取随机3个治疗分次下图像引导校正摆位前后图像引导定位系统(IGPS)和OGTS的值,分别记录每次误差校正的平移值。治疗前用IGPS修正患者摆位误差并获取相关数据,以IGPS校正平移误差的结果为金标准验证OGTS监测患者位置平移的准确性,计算综合平移偏差。结果:模体测量结果显示,跟踪准确性的综合平移偏差最大值为0.18 mm,跟踪重复性综合平移偏差的标准差为0.03 mm。临床试验结果统计显示,IGPS与OGTS追踪精度仅在头部 z方向上差异有统计学意义( t=2.21, P<0.05),而在头部其他方向及乳腺、直肠的3个平移方向差异均无统计学意义( P>0.05)。综合平移偏差分析表明,在头、乳腺、直肠分别为(0.91±0.62)、(1.64±1.30)和(1.52±1.29)mm,符合两者偏差≤2 mm的要求。 结论:OGTS操作简单、追踪精度较好,可辅助IGPS用于治疗中实时呼吸监测。
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编辑人员丨1周前
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电磁实时追踪系统质控实践指南
编辑人员丨1周前
个体化、精准化放射治疗时代对肿瘤运动管理提出了更高的要求,电磁实时追踪系统即为有代表性的肿瘤运动管理技术。该技术涉及的人员、流程较多,质量控制也不同于一般的放射治疗质控实践,因此制定了本质控实践指南。本指南为开展电磁实时追踪系统的机构提供组织、人员、设备、技术流程及文档记录等方面的质量控制标准,内容涵盖系统介绍、适应证选择及患者宣教、信标转发器植入流程及质控、日检、月检和文档记录。基于本指南,可以满足电磁实时追踪系统质控实践的各项标准要求。
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编辑人员丨1周前
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AlignRT引导联合开放式面罩的头部肿瘤放疗摆位流程与误差分析
编辑人员丨1周前
目的:提出一种基于光学体表追踪系统AlignRT联合开放式面罩的头部肿瘤无标记线全疗程摆位流程,评估摆位时间和重复摆位次数,并对比分析AlignRT与锥形束CT(cone beam CT,CBCT)两者之间摆位误差的差异、相关性和一致性。方法:回顾性分析33例132分次开放式面罩固定头部肿瘤患者摆位误差数据,全疗程放疗使用AlignRT引导无标记线摆位并以治疗计划系统中自动生成的外轮廓(Body)结构作为参考体表,结束摆位后分别获取AlignRT与CBCT两种系统的左右( x轴)、升降( y轴)、进出( z轴)、床旋转(Rtn)、进出倾斜(Pitch)和左右转动(Roll)6维方向摆位误差,并记录摆位时间与重复摆位次数。分别采用Wilcoxon和Spearman法分析两种系统摆位误差的差异和相关性;应用Bland-Altman法评估两者一致性。 结果:6维方向CBCT摆位误差均满足临床要求(线性方向范围-0.30~0.30 cm,旋转方向范围-2.0°~2.0°),摆位时间为(98±31)s,重复摆位次数占比1.51%(2/132)。两种系统摆位误差除 x( Z=-3.11, P=0.002)、 y( Z=-7.40, P<0.001)和Pitch( Z=-4.48, P<0.001)外差异均无统计学意义。摆位误差除 z方向外, x( rs=0.47, P<0.001)、 y( rs=0.29, P=0.001)、Rtn( rs=0.47, P<0.001)、Pitch( rs=0.28, P=0.001)和Roll( rs=0.45, P<0.001)均呈正相关。6维方向摆位误差95%一致性界限(95%LoA)分别为-0.12~0.09 cm、-0.07~0.17 cm、-0.19~0.20 cm、-1.0°~0.9°、-1.0°~1.5°和-0.9°~1.0°,95%一致性界限的95%可信区间(95% CI)分别为-0.14~0.11 cm、-0.09~0.19 cm、-0.23~0.23 cm、-1.2°~1.1°、-1.2°~1.7°和-1.0°~1.1°,均位于临床摆位误差容许范围之内。6维方向摆位误差差值3.41%(27/792<5%)在95% LoA之外。在95% LoA范围内,差值绝对值的最大值分别为0.12、0.16、0.19 cm、0.9°、1.5°和1.0°。 结论:基于AlignRT联合开放式面罩的头部肿瘤无标记线全疗程摆位流程,使AlignRT与CBCT摆位误差具有一定的相关性和一致性,摆位效率尚可,可应用于首次治疗,并实现治疗中实时监测提高安全性,具有临床应用价值。
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编辑人员丨1周前
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MR加速器在肺癌放疗中的应用及基本应用流程
编辑人员丨1周前
放疗是肿瘤治疗的重要手段之一。图像引导放疗是目前实现肿瘤精准放疗的主流技术。MR加速器能在放疗过程中对肿瘤进行MRI,实现肿瘤的实时追踪与监控,完成MR引导的自适应放疗。本文将综述MR加速器在肺癌中的相关研究与应用。
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编辑人员丨1周前
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放疗中肿瘤实时监测与追踪技术的研究进展
编辑人员丨1周前
肿瘤的运动限制了放疗准确性的进一步提高。肿瘤位置的实时监测与追踪是提高肿瘤放疗精度的一种新兴技术。根据所使用的方法大致分为基于非辐射的系统和基于辐射的系统。前者有超声引导、磁共振引导、电磁追踪、光学影像引导、基于人工智能等技术,后者有千伏级、兆伏级X线成像系统和基于CT的引导系统等。本综述回顾了目前放疗中肿瘤实时监测与追踪技术的研究进展,包括各自优缺点以及目前在临床上的运用情况。
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编辑人员丨1周前
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早期胰腺癌患者血清外泌体差异miRNA筛选及hsa-let-7f-5p的诊断价值
编辑人员丨1周前
目的:筛选早期胰腺癌患者血清外泌体差异表达的微小RNA(microRNA,miRNA),并评估外泌体hsa-let-7f-5p对早期胰腺癌的诊断价值。方法:选取2019年1月至2020年1月间南京中医药大学附属医院行手术并经病理证实的19例早期胰腺癌患者(早期胰腺癌组)和16例慢性肿块型胰腺炎患者(胰腺炎组),收集两组患者的血清样本,同时选取19名健康志愿者的血清样本作为正常对照组。采用exoEasy Maxi Kit试剂盒分离血清外泌体,透射电子显微镜(TEM)下观察外泌体的结构特征,纳米颗粒追踪分析观察外泌体的粒径大小,蛋白质免疫印迹法检测外泌体表面特异性蛋白标志物CD 63、CD 81表达。利用miRNeasy Serum/Plasma Kit试剂盒抽提外泌体总RNA,对其进行质检后构建小RNA文库,参照小RNA数据库,对早期胰腺癌组、胰腺炎组及正常对照组差异表达的外泌体miRNA进行筛选。通过实时荧光定量PCR法验证候选外泌体miRNA的表达量,分析各组miRNA的表达量差异。应用基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集通路分析候选miRNA的靶基因及代谢通路在早期胰腺癌发生与发展中的作用。 结果:TEM可见外泌体特征性碟形双层囊膜结构,粒径主峰在150 nm左右,外泌体特异性蛋白CD 63、CD 81表达阳性,对比早期胰腺癌组与胰腺炎组和正常对照组miRNA表达的差异,筛选获得特异性的肿瘤标志物外泌体hsa-let-7f-5p,其在早期胰腺癌组中的表达显著高于胰腺炎组及正常对照组( P值均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外泌体hsa-let-7f-5p鉴别早期胰腺癌组和胰腺炎组的AUC值为0.843(95% CI0.640~1.000),灵敏度和特异度分别为100%和81.82%,鉴别早期胰腺癌组和正常对照组的AUC值为1.000(95% CI1.000~1.000),灵敏度和特异度均为100%,其诊断早期胰腺癌效能与CA19-9相当( P>0.05)。GO分析结果显示,外泌体hsa-let-7f-5p的靶基因主要参与补体激活凝集素途径,表达蛋白主要分布于纤毛层,分子多发挥与一氧化氮合酶结合的功能。KEGG通路富集分析结果表明,外泌体hsa-let-7f-5p的靶基因与MAPK信号通路关系密切。 结论:血清外泌体hsa-let-7f-5p可作为早期胰腺癌诊断的潜在标志物。
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编辑人员丨1周前
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溶瘤病毒体内显像的研究进展
编辑人员丨1周前
溶瘤病毒可以在不对正常细胞产生影响的情况下招募和激活免疫细胞,靶向杀死肿瘤细胞并且感染破坏肿瘤的血管系统。经过基因改造的溶瘤病毒可在肿瘤细胞中选择性地复制并表达报告基因,因此,溶瘤病毒疗法在肿瘤学领域受到越来越多的关注。目前很多研究者致力于对溶瘤病毒进行优化复制,实现对其追踪,通过分子显像无创并连续地识别病毒靶向肿瘤的能力,测量病毒的感染水平,为临床提供安全、有效的信息。这种实时追踪可为优化患者的治疗提供病毒剂量和给药时间等信息,且可避免多次重复的组织病理学活检。此外,溶瘤病毒治疗的分子显像可以检测肿瘤的起源及其转移部位,是一种更灵敏、特异性更高的诊断技术。追踪病毒复制的成像方式主要包括光学成像和深层组织成像,笔者总结了近年来溶瘤病毒成像的方式及进展,阐明了各种成像方式的优势及不足。
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编辑人员丨1周前
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ICG荧光显影Laennec膜入路腹腔镜解剖性肝切除的临床研究
编辑人员丨1个月前
目的:探究ICG荧光显影技术在laennec膜入路腹腔镜解剖性肝切除术(LALR)中的应用效果。方法:回顾性分析2019年6月至2022年12月74例肝细胞癌患者资料,所有患者均行Laennec膜入路LALR,根据手术是否应用ICG分为ICG组(n=39)和非ICG组(n=35)。采用SPSS 24.0分析数据。两组患者围手术期指标、肝功能指标等计量资料用()表示,采用独立样本t检验;术后并发症等计数资料用[n(%)]表示,采用χ2检验;生存分析采用Kaplan-Meier法并行Log-Rank检验。P<0.05为差异有统计学意义。结果:ICG组患者手术时间、肝门阻断时间、拔除引流管时间、术后住院时间显著短于非ICG组,切缘距离长于非ICG组,术中出血量少于非ICG组(P<0.05);两组患者术后3d时谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清白蛋白(ALB)水平较术前显著升高,且非ICG组显著高于ICG组(P<0.05);两组患者术后并发症总发生率(10.4% vs. 14.3%)、两组患者累积无病生存率(DFS)、总生存率(OS)比较(74.4% vs. 68.6%,79.5% vs. 71.4%),差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在laennec膜入路LALR中应用ICG荧光显影技术可精确定位肿瘤位置并在肝实质内实时追踪、确定切肝界面,更利于指导手术精确切除,最大限度保护正常肝实质,缩短术中肝门阻断时间和手术时间,减少术中出血量,促进患者术后肝功能恢复。
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编辑人员丨1个月前
