目的:观察大鼠多系分化持续应激(Muse)细胞对肠上皮细胞间紧密连接结构的保护作用。方法:贴壁筛选法自大鼠(6只，购自中国食品药品检定院)股骨内分离大骨髓间充质干细胞(BMMSCs)，长时间胰蛋白酶孵育法(LTi)自BMMSCs中分离大鼠Muse细胞，流式细胞术标记如白细胞分化抗原(CD)29、CD34、CD90等及特异阶段胚胎抗原-3(SSEA-3)抗体；免疫组织化学法标记Nanog同框蛋白(NANOG)等抗体，定向诱导分化后标记α-甲胎蛋白(AFP)等鉴定其多能分化能力；重组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)建立体外肠上皮细胞损伤损伤模型；与Muse细胞共培养后检测细胞增殖能力及桥接蛋白-1(ZO-1)的表达水平及形态，组间比较采用 t检验。 结果:LTi后，大鼠BMMSCs中(2.57±0.57)%能够形成特征性的Muse细胞簇；流式细胞术结果表明，Muse细胞保留了BMMSCs表面分子特征，SSEA-3的阳性细胞比例[(73.2±1.4)%]显著高于BMMSCs[(2.3±0.3)%]；免疫荧光实验表明，培养的Muse细胞阳性表达NANOG等多能分化标记，定向诱导分化后分别能够表达AFP等分化标记；Muse细胞与TNF-α炎症损伤的肠上皮细胞共培养后，其增殖细胞比例[(40.06±1.04)%]高于损伤[(23.10±2.05)%]组的细胞( t＝12.79， P<0.05)及ZO-1蛋白的相对表达水平(0.55±0.03、0.27±0.01， t＝13.03， P<0.05)。 结论:大鼠Muse细胞具有更加理想的保护炎症损伤肠上皮细胞紧密连接结构的作用。

目的:探讨伴肠母细胞分化的直肠腺癌的临床病理学特征、免疫表型及遗传学改变。方法:收集2022年1—12月青岛大学附属医院（3例）和山东省烟台业达医院（1例）诊断的4例伴肠母细胞分化的直肠腺癌病例。总结其临床特征，行HE及免疫组织化学染色，并对其进行二代测序以揭示其遗传学改变。结果:4例患者均为男性，中位年龄65.5岁。临床症状表现为大便性状改变、便血及消瘦。4例病例均表现为传统型腺癌与伴肠母细胞分化腺癌相互混合。肿瘤大部分由排列成管状、筛状的腺样结构构成。1例几乎全部由乳头状结构构成。伴肠母细胞分化腺癌成分肿瘤细胞呈柱状，细胞界限相对清晰，具有特征性丰富透明的胞质，形成胎儿肠道样腺体。肿瘤细胞表达SALL4（4/4）、Glypican-3（3/4）、甲胎蛋白（1/4，局灶阳性），2例p53呈异常高表达。二代测序显示2例呈TP53基因突变，1例呈KRAS基因突变。结论:伴肠母细胞分化的直肠腺癌罕见，形态学及免疫组织化学显示胚胎性分化。在临床诊断工作中，需要与普通型结直肠腺癌相区别。

脑类器官是由人类胚胎干细胞或人类诱导多能干细胞产生的自组织3D聚集体，其细胞类型和结构类似于胚胎人脑，是一个研究神经遗传疾病的良好体外模型，已在神经遗传疾病研究中较为广泛应用。文中将探讨脑类器官在神经系统遗传疾病模型构建中的优势与挑战。

目的:探讨人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10，PTEN）对子宫内膜腔上皮细胞极性的调控及对胚胎着床的影响。方法:通过实时荧光定量PCR、Western blotting、细胞免疫荧光实验比较非容受态子宫内膜腔上皮细胞HEC-1A与容受态子宫内膜腔上皮细胞RL95-2之间PTEN的表达及定位差异；PTEN干扰质粒转染HEC-1A细胞，检测紧密连接相关蛋白质表达水平，透射电子显微镜检测紧密连接结构，Transwell实验检测细胞运动能力，与绒毛膜癌细胞JAR共培养检测HEC-1A细胞与JAR细胞之间的黏附水平；向体外培养的HEC-1A细胞分别加入二甲基亚砜、17β-雌二醇、孕酮、17β-雌二醇+孕酮，检测卵巢激素对PTEN表达的影响。结果:相较HEC-1A细胞，RL95-2细胞 PTEN基因及蛋白质表达水平均显著降低（ P均=0.003）；PTEN主要定位于RL95-2细胞核，而在HEC-1A细胞中，PTEN主要定位于细胞质；与质粒载体对照组相比，敲降 PTEN基因后，HEC-1A细胞紧密连接相关蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-4表达水平显著降低（ P<0.001， P=0.038， P<0.001），细胞间紧密连接长度降低（ P=0.046），迁移与侵袭能力增强（ P均<0.001），与JAR细胞之间黏附率增强（ P=0.016）；与空白对照组（二甲基亚砜组）相比，17β-雌二醇组、孕酮组及17β-雌二醇+孕酮组的PTEN蛋白表达水平均显著降低（ P均<0.001），17β-雌二醇+孕酮组的PTEN蛋白表达水平显著低于17β-雌二醇组和孕酮组（ P均=0.001），孕酮组与雌二醇组的PTEN蛋白表达水平差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:不同容受状态的子宫内膜细胞PTEN表达存在差异，雌二醇和孕酮可能通过抑制PTEN在子宫内膜的表达，进一步调控子宫内膜上皮细胞间紧密连接结构及细胞极性，从而增强子宫内膜容受性。

目的:探讨完全型圆头精子症患者临床表型、精子形态特征及辅助生殖技术治疗的效率。方法:收集2019年11月至2022年5月期间在广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心就诊的完全型圆头精子症患者（完全型圆头精子症组），采集外周血进行遗传学检测，全外显子测序挖掘致病基因，并对精液常规、精子形态及超微结构进行分析；全部患者均接受了卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）联合人工卵子激活（artificial oocyte activation，AOA）治疗。选取同日取卵的行常规ICSI周期患者作为对照组，并采用时差动态监测系统监测发育全程动态参数，分析2组受精及胚胎发育效率、发育动力学参数及临床治疗结局。结果:完全型圆头精子症组4例，对照组9例。完全型圆头精子症患者均合并精子活力低下、精子DNA碎片率升高，精子形态及顶体荧光染色均显示头部呈小圆形伴顶体区缺失；透射电子显微镜下圆头精子头部顶体完全缺失且多见核质松散、空泡化等异常，颈部线粒体鞘数量减少且排列杂乱，鞭毛轴丝“9+2”结构多见异常。4例患者中1例为 DPY19L2基因纯合缺失，1例为 DPY19L2基因新发纯合移码变异。完全型圆头精子症组受精率、双原核受精率、第3天优质胚胎率、第6天囊胚形成率、第6天优质囊胚形成率与对照组差异均无统计学意义（均 P>0.05）；完全型圆头精子症组胚胎发育早期时间参数第二极体释放时间、原核消失时间，2至6-细胞各时期时间显著早于对照组且差异均有统计学意义（均 P<0.05），2组胚胎分裂模式差异无统计学意义（ P>0.05）。4例完全性圆头精子症患者中，2例新鲜胚胎移植各活产健康男婴1名，2例解冻周期移植活产健康男婴、女婴各1名。 结论:完全型圆头精子症患者精子形态学异常表型特征明显，ICSI联合AOA是有效的辅助生殖治疗手段。

目的:对自制冷冻片微型载体（Strawtop）法与麦管法冷冻保存人微量精液的冻存效果进行系统评价。方法:采用前瞻性研究分析2018年5月1日至2018年6月30日期间于同济大学附属东方医院生殖医学中心行卵胞质内单精子显微注射（ICSI）助孕治疗的患者捐献的部分精液样本，比较自制Strawtop法与麦管法冷冻人精子复苏后的冷冻复苏率、DNA碎片指数（DNA fragmentation index，DFI）、超显微结构和受精能力与胚胎发育情况。结果:Strawtop法冻存人精子的冷冻复苏率（46.8%±17.1%）显著高于麦管法（23.1%±13.7%， P=0.001）；与冷冻前（18.9%±11.6%）相比，麦管法（33.5%±15.0%）冷冻精子复苏后的DFI显著增加（ P=0.019），而Strawtop法冻融人精子的DFI（23.4%±11.7%）与冷冻前相比差异无统计学意义（ P=0.375）；Strawtop法对冷冻精子超显微结构的损伤低于麦管法；Strawtop法冻融精子、麦管法冻融精子和新鲜精子的正常受精率、卵裂率和受精后48 h（第2日）的优质胚胎率差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:Strawtop法冷冻人微量精液冷冻复苏率高于麦管法，复苏精子的损伤较小，且复苏后无需离心洗涤即可直接用于ICSI，具有较高的临床应用价值。

目的:探讨伴多层菊形团的胚胎性肿瘤（embryonal tumor with multilayered rosettes，ETMR）的临床病理特征。方法:回顾性分析3例ETMR的资料并复习相关文献。结果:3例ETMR患儿，男性2例，女性1例，年龄2岁至4岁2个月，中位年龄2岁9个月，发病部位：1例位于右侧额顶叶，2例位于脑干，临床表现为肢体活动不利或头痛、反复呕吐。大体呈实性，切面灰白灰红色，质软，低倍镜下见肿瘤细胞双相分化，细胞密度疏密不均，高倍镜下见密集区肿瘤细胞围绕血管形成假菊形团结构，并见少量真菊形团，伴灶状坏死，细胞稀疏区肿瘤分化相对较好，富含神经毡结构。免疫表型：肿瘤细胞散在表达LIN28A，也可表达胶质纤维酸性蛋白、Nestin等，p53和INI1未缺失，不表达Olig2，Ki-67阳性指数较高。荧光原位杂交检测显示C19MC基因高水平扩增。术后2例患儿行化疗，其中1例术后复发，3例患儿均死亡。结论:ETMR罕见，高度恶性，其诊断依赖组织学、免疫表型及分子检测综合诊断。ETMR治疗为以手术为主并辅以术后化疗的综合治疗，预后差。

子宫内膜容受性在胚胎着床中起重要作用。子宫内膜损伤所致的宫腔粘连是子宫性不孕的常见原因。对子宫内膜容受性的影响除了引起内膜及宫腔的形态结构改变，还从分子生物学方面影响相关因子的表达。宫腔粘连的治疗采用以手术为主的综合治疗方案，对重塑内膜和宫腔的形态有一定的效果，但患者的妊娠率及活产率仍不理想。近年来，改善子宫内膜容受性进而达到功能性修复子宫内膜越来越成为研究的焦点，并且已有研究取得初步进展。本文从形态学和分子生物学水平阐述宫腔粘连对子宫内膜容受性的影响，并在此基础上对相关治疗进展进行综述。

膜解剖概念一直处在认知的演变过程中。随着腔镜技术的不断发展，许多系膜的亚微结构被不断被认识，最终证实了系膜在消化道器官中的普遍存在性。基于国内外各类膜解剖理论的基础，结合多年临床实践，我们总结并提出了一种新的概念和理论--以血管为导向的胃癌完整系膜切除。其理论基础在于，从消化管的胚胎发育时期来看，消化管以及其所属系膜的旋转始终是以血管为中心进行的。因此，供应血管和消化管以及其所属系膜是天然的一脉相承。系膜是一个包裹血管、神经及淋巴组织的复合结构，以血管作为系膜的边界，保证肿瘤引流的淋巴网络被最大化切除。本文重点探讨胃癌手术中完整系膜切除边缘，即系膜的侧边界是供应血管为导向的切除边界及其系膜、底边界是系膜床。以精细的供应血管导向来界定系膜切除范围，将有助于不同期别胃癌根治术系膜边缘的准确界定。

基于膜解剖的胃肠肿瘤根治术已经大幅降低了术后复发率，提高了手术疗效。但膜解剖在食管癌根治术中并未得到普遍采用。我们的研究发现，作为前肠器官，食管同样具有系膜结构，食管癌系膜内同样存在第五转移，系膜完整性破坏导致的癌泄露和转移，可能是术后高复发率的根本原因。应用纳米碳及吲哚菁绿荧光示踪显示，食管上段的淋巴引流到胃左动脉系膜淋巴结。为此，我们在食管癌根治术中，采用膜解剖理论，将食管癌、食管系膜、胃左动脉及其系膜和系膜内的所有结构一同完整切除，彻底清除癌肿、阻止癌细胞通过血管、淋巴系统和系膜内转移进行的播散、提高了疗效和预后。本文通过阐述食管膜解剖结构的理论基础、胚胎发育、影像学、尸体解剖以及腔镜观察到的结构以及食管膜解剖理论在食管癌根治术中的应用效果，阐明了食管膜解剖结构以及食管癌的淋巴引流特点，揭示食管癌淋巴结转移规律、优化淋巴结清扫策略，从而提高食管癌根治术的疗效。