目的:对自制冷冻片微型载体（Strawtop）法与麦管法冷冻保存人微量精液的冻存效果进行系统评价。方法:采用前瞻性研究分析2018年5月1日至2018年6月30日期间于同济大学附属东方医院生殖医学中心行卵胞质内单精子显微注射（ICSI）助孕治疗的患者捐献的部分精液样本，比较自制Strawtop法与麦管法冷冻人精子复苏后的冷冻复苏率、DNA碎片指数（DNA fragmentation index，DFI）、超显微结构和受精能力与胚胎发育情况。结果:Strawtop法冻存人精子的冷冻复苏率（46.8%±17.1%）显著高于麦管法（23.1%±13.7%， P=0.001）；与冷冻前（18.9%±11.6%）相比，麦管法（33.5%±15.0%）冷冻精子复苏后的DFI显著增加（ P=0.019），而Strawtop法冻融人精子的DFI（23.4%±11.7%）与冷冻前相比差异无统计学意义（ P=0.375）；Strawtop法对冷冻精子超显微结构的损伤低于麦管法；Strawtop法冻融精子、麦管法冻融精子和新鲜精子的正常受精率、卵裂率和受精后48 h（第2日）的优质胚胎率差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:Strawtop法冷冻人微量精液冷冻复苏率高于麦管法，复苏精子的损伤较小，且复苏后无需离心洗涤即可直接用于ICSI，具有较高的临床应用价值。

目的 比较不同冷冻保护剂和不同冷冻载体对人睾丸精子的冷冻保存效果. 方法 选取在兰州大学第一医院生殖医学专科医院进行诊断性睾丸穿刺获得成熟活动精子的患者,以及行睾丸精子ICSI术后的患者,在知情同意下将剩余睾丸组织冷冻保存,共46例.将每例睾丸组织分为4份,随机分成4组进行冷冻:1.8 ml冷冻管+甘油复合冷冻剂(A组,46例);1.8 ml冷冻管+Fasrun冷冻保护剂(B组,46例);0.25 ml麦管+Fasrun冷冻保护剂(C组,46例);超微量冷冻麦管+ Fasrun冷冻保护剂(D组,46例).冷冻标本经液氮熏蒸后投入液氮,比较各组复苏后精子活力和复苏率. 结果 冷冻前各组的活动睾丸精子能够满足ICSI操作所用精子量;冷冻复苏后,C组和D组能够容易找到正常活动精子(≥0.1/200倍视野)的例数显著高于A组、B组(P＜0.05);D组解冻后运动精子复苏率显著高于A组、B组(P＜0.05),C组解冻后运动精子复苏率显著高于A组(P＜0.05). 结论 应用改良的超微量冷冻麦管+ Fasrun冷冻保护剂能够提高睾丸精子的冷冻复苏率.

目的 采用直接覆盖玻璃化冷冻(DCV法)和半麦管法玻璃化冷冻(HS法)处理家兔卵巢组织,探讨两种冷冻方法对卵泡组织形态学及超微结构的影响.方法 将10只健康雌性新西兰家兔的卵巢组织块随机分配组成新鲜对照组、DCV法和HS法玻璃化冷冻组3个实验组,观察和比较各组间卵巢内卵泡的组织形态学和超微结构变化.结果 (1)与对照组卵巢组织中的原始卵泡及初级卵泡的形态正常率(分别为88.11％和72.86％)相比,冷冻复苏后的原始卵泡及初级卵泡形态正常率在DCV法(分别为72.66％和55.08％)和HS法(分别为71.73％和56.18％)均显著降低(P＜0.05),且初级卵泡的形态正常率均显著低于原始卵泡(P＜0.05),但两个冷冻组间无显著差异(P＞0.05);(2)观察卵泡超微结构的改变:两种玻璃化冷冻法主要损伤的是细胞浆中的线粒体,细胞核也会出现核固缩现象.结论 DCV法和HS法玻璃化冷冻均能保存家兔卵巢组织内的卵泡,但冷冻所导致的原始卵泡和初级卵泡损伤仍不可避免,其中初级卵泡损伤更明显.这两种冷冻法处理后的卵泡组织形态学无显著性变化,但在一定程度上会损伤卵泡中各组成部分的细胞超微结构.

目的 采用独创的已获专利授权的灌注针和灌注技术,对常用实验动物(成年兔、豚鼠和大鼠)的带血管蒂全卵巢进行灌注,研究可调节灌注针是否适用于不同体型动物全卵巢的灌注,同时采用经典的冷冻方案进行冷冻及解冻.方法 分别取6只性成熟雌性中国大耳白兔、6只Dunkan-Hartley系豚鼠、6只SD大鼠各12个带血管蒂全卵巢进行实验.结果 计数兔、豚鼠、大鼠3种动物卵巢组织HE染色切片中形态正常的原始卵泡率,结果显示差异均无统计学意义(P＞0.05);血管损伤主要在远卵巢端,3种动物近卵巢端的各组动脉、静脉均未见明显损伤.结论 通过调节麦管针的粗细可用于灌注大小不同的动物卵巢,初步证实了相同的灌注压力(60 mmHg)和灌注速率(1 ml/min)同时适用于不同体积的兔、豚鼠和大鼠卵巢.

目的 探讨睾丸精子混悬液冻融的临床结局及不同冻融载体的应用效果.方法 纳入197例梗阻性无精子症患者,其中43例患者行睾丸冷冻精子卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)治疗(冷冻组),154例行睾丸新鲜精子ICSI治疗(新鲜组).将冷冻组的睾丸冷冻精子分为两等份,分别使用超微量冷冻麦管(麦管组)和超微量冷冻薄片(薄片组)作为载体进行冷冻,复苏后进行ICSI.比较冷冻组和新鲜组受精情况及妊娠结局,并比较两种不同冻融载体的睾丸精子的冻融效果以及胚胎结局.结果 冷冻组和新鲜组的成熟卵子率、正常受精率、优质胚胎率以及种植率、周期临床妊娠率和流产率相比,差异均无统计学意义(均P>0.05).麦管组和薄片组复苏后均能找到活动精子,并能满足卵子受精使用;麦管组和薄片组的正常受精率、卵裂率、胚胎利用率和优质胚胎率差异均无统计学意义(均P>0.05),但薄片组活动精子回收率高于麦管组(P<0.05).结论 采用睾丸冷冻精子行ICSI与睾丸新鲜精子有相似的临床结局;超微量冷冻麦管和超微量冷冻薄片做为冷冻载体的冻融睾丸精子有相似的受精率及胚胎质量,但使用超微量冷冻薄片时活动精子回收率更高.

目的 优化稀少精子冷冻方法,缓解临床治疗无精子症或少、弱精子症患者的不育问题.方法 使用麦管容器和改良甘油-卵黄-枸橼酸钠(GYC)型冷冻保护剂,利用上游法将密度调整至(3～5)×106/ml,以液氨熏蒸方式冷冻.结果 利用麦管液氮熏蒸法,平均精子复苏率为(47.81 ±14.32)％,冷冻复苏后正常形态率为(4.58±2.32)％,冷冻复苏后DNA碎片率为(9.27±5.10)％,高于其他方案,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 应用麦管加保护剂液氮熏蒸冷冻模式冷冻复苏后,稀少精子的各项特征参数均较优,是一种行之有效的方法.