目的:探讨完全型圆头精子症患者临床表型、精子形态特征及辅助生殖技术治疗的效率。方法:收集2019年11月至2022年5月期间在广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心就诊的完全型圆头精子症患者（完全型圆头精子症组），采集外周血进行遗传学检测，全外显子测序挖掘致病基因，并对精液常规、精子形态及超微结构进行分析；全部患者均接受了卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）联合人工卵子激活（artificial oocyte activation，AOA）治疗。选取同日取卵的行常规ICSI周期患者作为对照组，并采用时差动态监测系统监测发育全程动态参数，分析2组受精及胚胎发育效率、发育动力学参数及临床治疗结局。结果:完全型圆头精子症组4例，对照组9例。完全型圆头精子症患者均合并精子活力低下、精子DNA碎片率升高，精子形态及顶体荧光染色均显示头部呈小圆形伴顶体区缺失；透射电子显微镜下圆头精子头部顶体完全缺失且多见核质松散、空泡化等异常，颈部线粒体鞘数量减少且排列杂乱，鞭毛轴丝“9+2”结构多见异常。4例患者中1例为 DPY19L2基因纯合缺失，1例为 DPY19L2基因新发纯合移码变异。完全型圆头精子症组受精率、双原核受精率、第3天优质胚胎率、第6天囊胚形成率、第6天优质囊胚形成率与对照组差异均无统计学意义（均 P>0.05）；完全型圆头精子症组胚胎发育早期时间参数第二极体释放时间、原核消失时间，2至6-细胞各时期时间显著早于对照组且差异均有统计学意义（均 P<0.05），2组胚胎分裂模式差异无统计学意义（ P>0.05）。4例完全性圆头精子症患者中，2例新鲜胚胎移植各活产健康男婴1名，2例解冻周期移植活产健康男婴、女婴各1名。 结论:完全型圆头精子症患者精子形态学异常表型特征明显，ICSI联合AOA是有效的辅助生殖治疗手段。

圆头精子症是一种罕见的畸形精子症，在男性不育患者中约占0.1%，是诉诸第二代试管婴儿［卵胞质内单精子显微注射（ICSI）］的病症之一。圆头精子症的精子头部呈圆形、顶体缺陷，其特征还包括颈部异常和尾部弯曲，这源于精子发生过程出现了异常（顶体形成异常、线粒体及微管排列紊乱、核染色质浓缩延长异常等）。圆头精子症发病具有家族集中倾向。目前已证实5个人类基因和17个小鼠基因与圆头精子症的发生相关。相比传统ICSI技术，结合人工卵子激活（AOA）的ICSI技术对圆头精子症更有效。本文对圆头精子的发现、认识及定义、形态学特征及超微结构、相关基因及发病机制、辅助生殖结局的相关研究进展进行总结及讨论。

目的:建立一个能够对卵胞质内单精子显微注射（ICSI）卵子受精失败进行早期判断进而实施早期补救性人工激活的技术体系，并探讨其激活效率及应用价值。方法:首先回顾性分析2017年1月至2018年3月期间广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心150个采用时差胚胎动态监测系统（Time-lapse）系统培养的ICSI周期第二极体（Pb2）释放时间分布及其与受精及胚胎发育结局的关系，探讨Pb2释放作为ICSI受精失败早期判断指标的可行性。其次采用随机对照试验，收集2018年3月至2019年6月期间93个ICSI助孕周期的225个受精失败卵子，根据人工激活方式不同分为未激活组（NAOA组）、早期激活组（RAOA组）、晚期激活组（LAOA组），同时将其余ICSI注射卵子作为对照组，比较4组受精及胚胎发育参数，探讨ICSI受精失败早期补救性人工激活的效率和应用价值。结果:Time-lapse监测ICSI注射后卵子有Pb2释放组的受精率（99.91%）、双原核（2PN）受精率（97.76%）显著高于无Pb2释放组（0.03%、0.00%）且差异均具有统计学意义（ P均<0.001）；ICSI注射后卵子Pb2释放时间为（3.04±1.45） h，Pb2释放时间分布及占比分别为0~3 h（58.58%）、3~5 h（36.29%）、5~8 h（3.92%）、>8 h（1.21%）；NAOA组Pb2释放率、受精率、2PN受精率均为0%，LAOA组2PN受精率（36.00%）、第3日（D3）优质胚胎率（8.00%）、第5日（D5）囊胚转化率（0%）、D5优质囊胚转化率（0%）均显著低于RAOA组（60.00%、44.19%、51.16%、25.58%）且差异均有统计学意义（ P=0.005， P=0.002， P<0.001， P=0.005），同时均显著低于对照组（97.63%、48.62%、63.23%、37.94%）且差异均有统计学意义（ P均<0.001）；RAOA组Pb2释放率（84.00%）、受精率（81.33%）、2PN受精率（60.00%）、2PN卵裂率（95.56%）均显著低于对照组（100.00%、99.68%、97.63%、99.51%）且差异均具有统计学意义（ P<0.001， P<0.001， P<0.001， P=0.04），但D3优质胚胎率、D5囊胚转化率、D5优质囊胚转化率2组间差异均无统计学意义（ P均>0.05）。 结论:Time-lapse监测Pb2释放可以作为早期判断ICSI卵子受精失败的指标，在ICSI注射后5 h对受精失败卵子进行早期补救性人工激活可以获得正常受精和理想的胚胎发育结局。

目的:特殊类型畸精子症是男性不育中罕见病和单基因遗传疾病,本文探讨其卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)的治疗结局.方法:回顾性分析 2011 年 1 月至 2021 年 1 月于江苏省人民医院生殖医学中心实施ICSI治疗的特殊类型畸精子症患者,根据精子形态分为三组(圆头精子症、无头精子症和精子鞭毛多发形态异常),三组患者基因检测均发现致病或可能致病的基因突变.比较三组患者间的临床和实验室数据(年龄、BMI、精子参数、成熟卵子数、受精率、优质胚胎率、临床妊娠率、活产率和自然流产率)差异.结果:三组共34 对患者夫妇,三组患者间年龄,BMI,MII卵子数差别无统计学意义(P＞0.05),圆头精子症的精子浓度和精子活力显著高于其他两组(P＜0.01),圆头精子症组的受精率显著低于其他两组(P＜0.01).三组共 34 个取卵周期,其中 4 个取卵周期未形成可移植胚胎,形成可移植胚胎的30 个取卵周期在第一个胚胎移植周期中获得 22 例临床妊娠,最终活产 20例,自然流产2 例.无头精子症和精子鞭毛多发形态异常两组的临床妊娠率和活产率显著高于圆头精子症组(P＜0.01),三组间自然流产率没有统计学差异(P＞0.05).结论:圆头精子症患者实施人工卵母细胞激活依然有部分患者完全不受精或受精率低下.精子鞭毛多发形态异常和无头精子症患者可以通过ICSI取得相对较好的妊娠结局.

目的 探讨卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)后早期观察卵母细胞联合人工辅助激活(AOA)技术对 ICSI受精率的影响.方法 选择接受 ICSI的患者60例共61个ICSI周期作为研究组,观察卵母细胞第二极体释放情况,对未排出第二极体的卵母细胞用离子霉素孵育5 ~10 min行辅助激活,激活时间分别为3 h、5 h、18 h.以同期常规 ICSI 23例23个周期为对照组.观察受精失败率及离子霉素激活时机对卵母细胞的受精率及形成胚胎的发育能力的影响.结果 研究组中前次 ICSI受精失败再次 ICSI受精失败发生率为36.0%(9/25),严重圆头畸形精子症当次 ICSI受精失败或低下(受精率 <30%)发生率为38.9%(7/18),死精2例 ICSI均未受精,15例手术取精 ICSI受精失败发生率为26.7%(4/15).MII卵580个,通过机械法激活受精率为55.2%(320/580);对未排出第二极体中的176个卵子行离子霉素激活,AOA受精率为68.2%(120/176),其中3 h与5 h激活的受精率、优胚率和囊胚形成率比较差异无统计学意义(P均 >0.05),18 h激活效率最低,与3 h、5 h比较差异有统计学意义(P均 <0.05).移植AOA胚胎共14例,获得临床妊娠6例,临床妊娠率为42.9%.结论 通过 ICSI后早期观察卵母细胞联合 AOA技术可以提高 ICSI受精率,是改善 ICSI受精失败的有效措施,具有较好的临床应用价值.

自1978年第一例采用体外受精-胚胎移植助孕技术的婴儿出生以来,在几十年的人类辅助生殖技术助孕治疗中,目前受精方式除了常规体外受精( in vitro fertilization,IVF)外,还有卵胞质内单精子显微注射( intracytoplasmic sperm injection,ICSI) ,并且二者存在不同的适应证. IVF主要用于女方因素引起的不孕症如:卵子运输障碍、排卵障碍以及子宫内膜异位症等.而ICSI主要适用于男方严重少弱精子症、梗阻性无精子症和IVF受精失败等. 通常在采用IVF受精失败的患者再次助孕时,选择ICSI受精方式,能显著提高受精率,并且在临床实际应用中ICSI与IVF相比较,有相对较高的受精率和较低的异常受精率,但是有统计表明仍有1％ ～3％的ICSI周期会发生受精率低下或者完全受精失败,其主要原因是卵母细胞激活失败[1]. 如何避免患者ICSI后卵母细胞激活失败,从而得到更多的受精卵和优质胚胎,最终获得妊娠并出生健康婴儿,同时最大可能减轻其精神心理和经济负担仍是目前ART面临的挑战. 我院生殖科对1 例就诊的首次IVF受精失败后反复ICSI受精失败2 次的患者,采用 ICSI 授精方式并联合使用钙离子载体A23187 进行人工辅助卵母细胞激活( assist oocyte activation,AOA)技术,获得正常受精卵及优质胚胎,移植后获得临床妊娠并分娩一个健康婴儿. 本文对此病例的诊治处理过程进行报道,并结合文献复习,总结ICSI受精卵母细胞激活失败时联合应用A23187进行治疗的经验,以期对AOA的临床应用提供理论支持.

1992年以来,卵母细胞胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)技术广泛应用于临床,在男性不育领域取得革命性成功,尤其是少弱精子症患者[1].部分这类患者ICSI治疗后无可移植胚胎,导致辅助生殖技术(assisted reproductive technology ,ART)助孕反复失败,主要归因于配子激活失败.配子激活是指对因卵子激活障碍及/或精子运动能力低下而引起反复ART失败的夫妇同时给予卵母细胞辅助激活(assisted oocyte activation,AOA)和精子激活技术辅助受精.AOA技术可有效改善前次ICSI受精失败患者的妊娠结局,有望成为治疗男性因素不育夫妇的重要辅助手段[2].无精子症患者行ICSI后很难找到活性精子,会对后期胚胎发育和临床妊娠结局造成不利影响[3].我院生殖医学中心采用ICSI授精并联合配子激活,对1例因男性不育因素患者实施ART,最终获得临床妊娠.现报道如下.

目的 探讨圆头精子症的临床特征及发病机制.方法 对3例圆头精子症患者的助孕结局进行报道并进行文献复习.结果 3例患者均经精子形态学及电镜分析确诊.病例1、2均行ICSI结合人工辅助卵母细胞激活(ICSI-AOA)的授精方式进行助孕治疗,总体受精率为43.5％,均获得临床妊娠,2次分娩共出生2名健康婴儿.病例3第1个周期未施行AOA,卵子均未受精及卵裂,第2个周期使用ICSI-AOA授精,ICSI受精率为20％,受精卵培养到第3天均停止发育.患者全外显子基因分析提示DPY19L2(c.1553_1554 delAT)基因纯合突变.结论 ICSI-AOA可提高圆头精子症患者精子的授精能力;建议相关病例筛查DPY19L2基因突变.

辅助生殖技术是治疗不孕不育症的有效手段,尤其是卵质内单精子注射(ICSI)技术的应用,大大提高了体外受精率,但临床仍不可避免地出现卵子无法激活导致的完全受精失败,基于此,人工卵母细胞激活技术应运而生,且在临床的应用越来越广泛.精卵结合所引发的钙信号标志着个体发育的开始,本文将围绕受精钙信号,从卵母细胞激活受精的分子机制、人工卵母细胞激活技术的分类、人工卵母细胞激活技术的临床应用的现状、安全性和展望等方面进行系统综述.

卵胞浆内单精子注射(ICSI)中发生完全受精失败(TFF)的发生率是1％～4％.发生ICSI-TFF的原因可能是卵母细胞激活失败、卵子质量差、精子异常、ICSI的实验室技术和环境等,临床对策有卵母细胞人工激活、形态学选择性单精子卵胞浆内显微注射、优化促排卵方案、供精或供卵等.本文对ICSI-TFF发生可能的原因及临床对策进行了综述.