[目的]归纳总结国内外对2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)发病中炎症因子作用的认识、T2DM湿热证与炎症的相关性以及从湿热证治疗T2DM的经验,以期为T2DM治疗提供新思路.[方法]查阅T2DM相关资料,阅读相关文献,总结国内外关于炎症因子在T2DM发病中作用的研究结果,总结湿热证与炎症的相关性以及中医从湿热论治T2DM的经验.[结果]T2DM的发病与炎症因子关系密切,T2DM患者血清中炎性因子如肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)等均高于正常水平.炎症因子在T2DM发病中的作用包括阻碍胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS)正常酪氨酸磷酸化,加速IRS与磷脂酸肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinases,PI3K)解离以及IRS的降解,影响下游的PI3K磷酸化,干扰胰岛素信号经此通路下传,引发胰岛素抵抗(insulin resistance,IR);促进核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)活化,通过正反馈机制不断加重炎症状态,导致IR;直接或间接引起胰岛β细胞破坏和胰岛素分泌功能减退.中医辨证T2DM患者多为湿热证,湿热证T2DM的TNF-α、IL-6、超敏C反应蛋白(hypersensitive-C reactive protein,hs-CRP)水平更高,脂代谢紊乱、IR及炎症状态更为严重,提示T2DM湿热证与机体的炎症状态存在较强相关性.中医通过应用各种清热化湿中药复方与单药治疗T2DM湿热证,能够降低机体炎症因子水平.[结论]T2DM、炎症、湿热证之间存在相关性,T2DM多属于湿热证,运用清热化湿中药复方与单方治疗T2DM湿热证有效,从湿热论治T2DM可成为治疗T2DM的新思路.

胰岛素受体酪氨酸激酶底物(IRTKS)是逆向-二重-两性蛋白-RVS超家族成员之一,广泛表达于机体各组织、细胞中.该蛋白能够促进肌动蛋白装配参与板状伪足的形成,并与多种肿瘤相关基因产物相互作用,抑制肿瘤细胞凋亡,促进肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭;IRTKS作为胰岛素受体适配器,参与调控IR-IRS1-PI3 K-AKT信号通路,最终实现对血糖水平的调节;IRTKS还可抑制抗RNA病毒免疫反应,并且与IRSp53共同调节正常的胚胎和胎盘发育;IRTKS在肠出血性大肠杆菌的致病机制中参与形成细菌定植的肌动蛋白底座,促进黏附/脱落损伤.

目的 探讨脂联素对子宫内膜癌HEC-1B细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳类雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)信号通路及胰岛素增敏效应的影响.方法 实验分为4组:脂联素组(Ad组,加入20μg/ml的脂联素作用30 min);抑制剂组(加入10μmol/L的AMPK抑制剂——复合物C作用30 min);脂联素+抑制剂组(Ad+抑制剂组,10μmol/L复合物C预处理30 min后,再加入20μg/ml脂联素作用30 min);对照组(仅加入无血清DMEM培养基).(1)荧光定量PCR技术及蛋白印迹法检测HEC-1B细胞中脂联素受体(AdipoR)1、AdipoR2 mRNA和蛋白的表达水平.(2)以不同浓度(分别为2.5、5、10、20μg/ml)脂联素作用于HEC-1B细胞30 min,增敏实验时再加50 nmol/L胰岛素作用5 min;以20μg/ml脂联素作用于HEC-1B细胞不同时间(分别为15、30、45、60 min),增敏实验时再加50 nmol/L胰岛素作用5 min.蛋白印迹法检测HEC-1B细胞中AMPK、mTOR、S6K1蛋白活化水平以及胰岛素受体底物1(IRS1)酪氨酸磷酸化水平.(3)活细胞计数(CCK-8)法检测4组HEC-1B细胞的增殖能力,体外穿膜实验检测4组HEC-1B细胞的迁移能力.结果 (1)在HEC-1B细胞中,AdipoR1 mRNA及蛋白的表达水平分别为8.50±0.09、0.91±0.03,明显高于AdipoR2 mRNA及蛋白(分别为1.00±0.00、0.69±0.03;P<0.05).(2)脂联素以时间、浓度依赖方式诱导HEC-1B细胞中AMPK蛋白活化水平增高但抑制mTOR、S6K1蛋白活化水平(P<0.05),且脂联素浓度为20μg/ml、作用时间为30 min时,AMPK蛋白的活化水平均达到峰值.脂联素以浓度依赖方式诱导IRS1酪氨酸磷酸化水平增高(P<0.05).(3)Ad组HEC-1B细胞增殖的抑制率为(0.68±0.34)％,Ad+抑制剂组为(0.24±0.04)％,两组比较,差异有统计学意义(t=17.88,P<0.05).Ad组穿膜细胞数为(77±8)个,Ad+抑制剂组为(132±13)个,两组比较,差异有统计学意义(t=-7.34,P<0.05).结论 脂联素通过AMPK/mTOR/S6K1信号通路发挥抑制子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖的效应,并通过调控AMPK/S6K1/IRS1信号通路增加HEC-1B细胞对胰岛素的敏感性.

目的 观察脂肪细胞因子丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)是否通过IRS/PI3K/Akt/Glut信号通路改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗.方法 以棕榈酸(PA)培养3T3-L1脂肪细胞构建胰岛素抵抗模型,分为PA组、PA+ 100 ng/ml Vaspin组、PA+200 ng/ml Vaspin组、PA+400 ng/ml Vaspin组及PA+400 ng/ml Vaspin+Wortmannin(PI3K抑制剂)组.运用2-脱氧-H3-D-葡萄糖掺入法及葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法分别检测细胞葡萄糖摄取和消耗量.以RT-PCR和Westem blot检测胰岛素信号通路中、酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1(p-IRS-1)、Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和Glut-4的mRNA和蛋白表达水平.结果 与PA组相比,随着Vaspin浓度增加,葡萄糖摄取和消耗量逐渐增加(P＜0.05),IRS-1和Akt的mRNA和蛋白磷酸化水平逐渐上升(P＜0.05),p-IRS-1/IRS-l、p-Akt/Akt比值逐渐增加,同时Glut-4的mRNA和蛋白表达也相应上调(P＜0.05).与400 ng/ml Vaspin干预组相比,PA+400 ng/ml Vaspin+Wortmannin组葡萄糖摄取和消耗量降低,IRS-1和Akt的mRNA和蛋白磷酸化水平下降(P＜0.05),p-IRS-1/IRS-1、p-Akt/Akt比值下降,且Glut-4的mRNA和蛋白表达下调(P＜0.05).结论 Vaspin通过激活IRS/PI3K/Akt/Glut胰岛素信号通路,改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗.

miRNA-126作为乳腺癌的抑癌基因,对乳腺癌的转移具有抑制作用.目前被报道得最多的与miRNA-126对乳腺癌转移抑制作用相关的靶点是血管内皮生长因子(VEGF)和磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基β,其他的可能靶点还包括类表皮生长因子7、基质细胞衍生因子1α、解整合素金属蛋白酶、1型芽生性相关络氨酸激酶结构域、CD97、胰岛素受体底物1、胰岛素样生长因子结合蛋白2、磷脂酰肌醇转移蛋白和c-Mer酪氨酸激酶,可为基于miR-NA-126靶向治疗新药的开发提供参考靶点及科学依据.

目的 采用生物信息学方法分析瘦素(Leptin)的结构并预测其功能,探索Leptin在减重手术治疗肥胖症方面的作用.方法 采用Expasy服务器中的工具分析Leptin蛋白的理化性质;Jpred 4预测其二级结构;Swiss-Mode预测其三级结构;STRING预测Leptin与其他蛋白质的交互作用.结果 Leptin蛋白由167个氨基酸组成,等电点为5.88,不稳定指数为47.52,脂肪系数110.84.二级结构预测发现5个α-螺旋和1个β-折叠,其中构成α螺旋的氨基酸数目占总蛋白的50.9％.共模拟出3个可能的三级结构模型,从预测模型来看,该蛋白主要以α-螺旋为主,这与二级结构的预测结果相吻合.从相似波形图的趋势来看,预测模型A最稳定.蛋白质互作网络发现与Leptin发生相互作用的蛋白家族包括瘦素受体(LEPR)、信号传导与转录激活因子3(STAT3)、氧化酶增殖因子活化受体(PPARG)、信号转导抑制因子-3(SOCS3)、胰高血糖素(GCG)、酪氨酸蛋白激酶JAK2、胰岛素受体底物1(IRSl)、C反应蛋白(CRP)、酪氨酸蛋白磷酸酶非受体1型(PTPN1)和胰岛素(INS)等.结论 Leptin蛋白是一种以α-螺旋为主的不稳定亲脂性蛋白,由白色脂肪组织分泌,主要作用于细胞外,通过参与糖、脂肪及能量代谢的调节,抑制脂肪细胞的合成,进而使体重减轻.

瘦素与瘦素受体结合后通过多种信号转导途径作用于阿片-促黑素细胞皮质素原/刺鼠相关蛋白神经元,从而发挥食欲调节的作用,进而预防肥胖等多种代谢性疾病的发生.目前发现的瘦素信号转导途径有酪氨酸激酶2/信号转导及转录激活因子3信号转导途径、促分裂原活化的蛋白激酶/胞外信号调节激酶1/2信号转导途径及胰岛素受体底物/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)信号转导途径三种.其中,PI3K通过蛋白激酶B/叉头状转录因子O1、离子通道及磷酸二酯酶3 B/环腺苷酸三种子通路发挥调节食欲的作用,这些信号转导途径纷繁复杂,涉及多种生理病理反应.此外,各个信号途径中亦存在负反馈调节因子,其可有效地抑制信号途径的过表达,共同为机体的稳定发挥作用.

胰岛素抵抗是2型糖尿病发病的主要环节,贯穿于其发生、发展的整个过程,而胰岛素抵抗与胰岛素受体信号通路有密切关系.胰岛素刺激引起胰岛素受体(IR)自身磷酸化,然后激活胰岛素受体底物(IRS)的酪氨酸磷酸化,IRS磷酸化能诱导并活化磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),随之激活下游的3-磷酸肌醇依赖性蛋白酶1(PDK1)以及Akt/PKB,最后促进葡萄糖转运蛋白4 (GLUT4)的表达和转位,提高胰岛素敏感组织对葡萄糖的摄取,缓解胰岛素抵抗而起到降糖作用.目前,临床上用于治疗2型糖尿病的口服降糖药对人体有着不同程度的副作用,中药不仅来源广泛、种类丰富,而且具有多成分、多环节、多靶点综合作用,在复杂的糖尿病治疗方面有着独特的优势.近年来,从中药中发现具有缓解胰岛素抵抗的活性成分越来越受到国内外研究者的关注.该文概述了胰岛素受体信号通路,总结与之相关的具有缓解胰岛素抵抗作用的中药降糖活性成分,为中药在糖尿病治疗方面的药物开发提供参考.

目的 探讨格列齐特改善2型糖尿病(T2DM)肝脏胰岛素抵抗的作用及机制.方法 采用高脂联合链脲佐菌素构建T2DM小鼠模型,观察格列齐特对T2DM小鼠空腹血糖、血清胰岛素、葡萄糖耐量、胰岛素敏感性及肝脏病理的影响.观察格列齐特对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗,糖原含量的影响;并采用免疫印迹法检测肝组织和HepG2细胞中胰岛素受体、磷脂酰肌醇3-激酶、葡萄糖转运蛋白4的表达以及糖原合成激酶3β、胰岛素受体底物1的磷酸化水平.结果 与T2DM组比较,格列齐特组小鼠空腹血糖下降、血清胰岛素升高、葡萄糖耐量和胰岛素敏感性增加、肝细胞坏死和空泡化现象减轻.格列齐特增加胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗和糖原含量,增加胰岛素受体、磷脂酰肌醇3-激酶和葡萄糖转运蛋白4的表达,促进胰岛素受体底物1酪氨酸磷酸化,抑制糖原合成激酶3β酪氨酸磷酸化.结论 格列齐特可以改善T2DM小鼠糖代谢紊乱和胰岛素抵抗,缓解肝脏损伤,增加HepG2细胞胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗和糖原含量,其作用机制可能与上调胰岛素信号通路有关.

2型糖尿病是常见的内分泌系统疾病之一.据国际糖尿病联盟(IDF)统计,2019年有4.63亿人患有糖尿病.在2019年,超过400万20～79岁的人死于与糖尿病有关的疾病.蛋白酪氨酸磷酸酶1B是胰岛素信号传导的关键负性调节因子[1].它的高表达可以使胰岛素受体(IR)和胰岛素受体底物(IRS)等信号分子的酪氨酸去磷酸化而失活,阻断磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)胰岛素信号传导反应的下传,产生胰岛素抵抗[2].有文献证实,许多单味中药(黄芪[3]、葛根[4])及中药复方等[5-8]发现通过抑制PTP1B的表达,增加PI3K/Akt信号通路中相关因子的表达,改善胰岛素抵抗.