目的:探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9（caspase recruitment domain protein 9，CARD9）基因多态性与脓毒症相关肝损伤风险的相关性。方法:采用病例对照研究方法，招募重症监护室122例脓毒症患者，将其中伴有肝损伤者设为肝损害组（66例），不伴肝损伤者设为对照组（60例）。采用TaqMan法检测患者外周血CARD9基因的6个单核苷酸多态性位点，观察两组患者基线资料，比较两组基因型分布、等位基因频率的差异，计算其优势比（odds ratio， OR）。正态分布检验采用Kolmogorov-Smirnov检验，不符合正态分布的计量资料以 M（ Q1，Q3）表示，两组间比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料组间比较采用χ 2检验和Fisher精确概率法。采用χ 2检验判断基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡检验。 结果:与对照组相比，肝损害组患者CARD9基因rs10781500位点的CC基因型分布明显增加（19与36，χ 2=6.87， P=0.033），携带C等位基因的脓毒症患者诱发肝损伤的概率更大（ OR=1.375，95% CI 1.024~1.846， P=0.023），CC基因型患者诱发肝损伤的风险更高（ OR=2.696，95% CI 1.238~5.869， P=0.012）。肝损害组CC基因型者丙氨酸氨基转移酶、序贯性器官功能衰竭评分明显升高［310（213，648）U/L与187（114，304）U/L， Z=3.32， P=0.001和9（6，14）分与7（5，9）分， Z=2.49， P=0.013］。 结论:CARD9基因rs10781500位点多态性与脓毒症相关肝损伤有关，其C等位基因可能为易感基因。

目的:探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9（CARD9）在C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘气道损伤和炎症中的作用。方法:采用随机数字表法，将6~8周龄无特定病原体（SPF）级C57BL/6雌性小鼠分为A组（对照组）、B组（模型组）和C组（地塞米松治疗组），每组6只，B组及C组利用卵清白蛋白（OVA）/完全弗氏佐剂（CFA）腹部皮下注射，OVA雾化激发构建小鼠模型，C组每次致敏前30 min给予地塞米松，末次激发24 h后检测其病理变化及支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数，进行肺组织炎症浸润情况评分，Western blot检测造模前后CARD9蛋白的变化；然后将雌性6~8周龄C57BL/6野生型小鼠12只和CARD9基因敲除型小鼠12只分为4组，每组6只，其中D组为野生型对照组，E组为野生型模型组，F组为CARD9基因敲除对照组，G组为CARD9基因敲除模型组，造模如上述对照组和模型组。苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化，ELISA法检测BALF中白细胞介素（IL）-4、IL-5和IL-17，RT-PCR法检测CXC趋化因子配体10（CXCL-10）和IL-17 mRNA水平。结果:B组炎症浸润评分［（3.33±0.82）比（0.67±0.52）分］和BALF总细胞计数［（10.13±4.83）×10 5个/ml比（3.76±0.84）×10 5个/ml］均高于A组（均 P<0.05）；C组炎症浸润评分［（2.83±0.75）分］和BALF总细胞计数［（9.80±3.19）×10 5个/ml］与B组差异无统计学意义（ P>0.05）；B组CARD9蛋白表达高于A组（0.245±0.090比0.047±0.014， P=0.004）；肺组织病理结果显示，与E组及F组相比，G组的肺组织炎症细胞浸润及组织结构破坏程度加重。与E组及F组相比，G组炎症细胞总数、中性粒细胞数量和嗜酸粒细胞数量均升高（均 P<0.05）；IL-4、IL-5及IL-17表达水平均升高（均 P<0.05）；支气管肺组织中IL-17及CXCL-10 mRNA表达水平亦均升高（均 P<0.05）。 结论:CARD9基因的缺失可能通过升高IL-17及CXCL-10等中性粒细胞趋化因子，增加中性粒细胞的浸润，从而加重C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘。

目的:总结胱天蛋白酶募集域蛋白9（CARD9）基因相关侵袭性念珠菌病的临床特点、诊断及治疗，并报道该基因的一种新突变。方法:描述1例2018年12月底于首都儿科研究所附属儿童医院收入院的以中枢神经系统感染及腹膜后肿物为主要临床表现的侵袭性念珠菌病患儿的临床特征、辅助检查和治疗经过及随访结果，对患儿及其父母进行全基因外显子组检测及一代测序验证从而明确诊断；并以“CARD9”“invasive candidiasis”“侵袭性念珠菌病”为关键词在PubMed数据库、万方数据库、中国知网数据库检索自建库至2020年5月的相关文献，进行文献复习。结果:患儿男性，10岁，既往健康，亚急性病程，以腹泻症状起病，2个月余后病情进展迅速，相继出现头痛、呕吐、抽搐、意识障碍等神经系统受累症状，脑脊液及血液中多次培养出白色念珠菌，大便中找到类酵母样真菌，头部磁共振成像提示梗阻性脑积水，腹部CT可见腹膜后肿物及肠管壁增厚。对患儿及其父母核心家系采血行全基因外显子组检测及一代测序验证，结果发现患儿CARD9基因存在c.952-12_956delinsAG纯合变异，为未报道的致病变异。经静脉联合抗真菌药物治疗症状无明显缓解，行侧脑室引流手术及侧脑室给予抗真菌药物治疗9周，临床症状及脑脊液常规生化改善，培养转阴，腹膜后肿物缩小出院。出院后继续口服联合抗真菌药物治疗4个月，患儿无特殊不适感，体力稍差，脑脊液白细胞及蛋白仍偏高，头部磁共振成像仍可见脑积水及脑室旁白质异常信号，腹部CT可见腹膜后肿物较前缩小。共检索到文献15篇，全世界共报道了21例CARD9基因相关侵袭性念珠菌病患者（不含本例），中枢神经系统感染常见。结论:CARD9基因缺陷患者选择性地对真菌易感，发生侵袭性念珠菌病常累及中枢神经系统，病情重。应予全身足量、长疗程的抗真菌药物治疗，并发脑积水者则需外科治疗。本次报道的新突变丰富了CARD9基因的变异多样性。对不明原因的侵袭性念珠菌病患者，建议行基因检测，关注CARD9基因缺陷等先天性免疫缺陷病。

目的:探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(Card 9)基因多态性与AP患病风险的相关性。方法:收集2019年6月至2020年2月间上海市松江区中心医院收治的70例AP患者的临床资料，同时选取70例健康体检者作为对照组。采用TaqMan探针法检测所有受试者Card 9基因rs10870077 C>G、rs4077515 A>G、rs10781499 A>G、rs141992399 C>G、rs139265120 A>G突变。应用实时荧光定量PCR检测血清Card 9 mRNA表达，电化学发光法分别检测血清IL-6、降钙素原水平，散色比浊法检测CRP水平。结果:AP患者Card 9基因rs10870077 C>G突变(CG基因型)占比显著高于对照组(50.0%比31.4%)，差异有统计学意义( P<0.05)。rs4077515AG、rs10781499AG基因型占比与对照组差异无统计学意义。rs141992399 C>G、rs139265120 A>G突变率特别低。rs10870077 CG基因型AP患者血清Card 9 mRNA表达量显著高于对照组(6.20±2.82比3.90±1.96)，差异有统计学意义( P<0.05)，而rs4077515AG、rs10781499AG基因型AP患者血清Card 9 mRNA水平与对照组差异无统计学意义。rs10870077 CG基因型AP患者血清IL-6水平较rs10870077 CC、GG基因型显著升高[(614.7±1531.8)ng/L比(372.5±1127.9)、(385.5±598.7)ng/L]，而CRP水平较GG基因型显著降低[(34.84±50.64)mg/L比(55.30±87.02)mg/L]，降钙素原水平较GG基因型显著升高[(1.98±4.70)μg/L比(0.77±1.12)μg/L]，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。 结论:Card 9基因rs10870077 C>G突变可上调Card 9 mRNA表达，增加血清IL-6水平，该突变可能是AP发生的高风险因素。

1例主诉为"腹泻、便血3年"的12岁患儿就诊于西安市儿童医院消化内科，通过肠镜发现肠道黏膜慢性炎症伴糜烂，经病理组织活检确诊为组织胞浆菌病，行胱天蛋白酶募集域蛋白9（CARD9）基因测序提示复合杂合突变。经对症及抗真菌治疗，预后良好。

目的:探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在大鼠急性胰腺炎相关性肺损伤(APALI)中的作用及机制。方法:30只雄性Sprague Dawley大鼠采用随机数字表法分成对照组(6只)、APALI组(12只)、腺病毒干扰组(12只)。通过胰管注射牛磺胆酸钠建立重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型，造模后3、6 h处死动物。苏木精-伊红(HE)染色评估胰腺组织及肺组织的病理改变。采用时聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中CARD9、p65核因子-κB(p65NF-κB)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的转录水平。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平及肺组织中髓过氧化物酶(MPO)水平。蛋白质印迹法(Western blot)检测肺组织中CARD9、p-p65NF-κB、p-p38MAPK蛋白表达水平。组间数据比较采用单因素方差分析，最小显著性差异法(LSD)法或Tamhane’s T2法进行两两比较。结果:APALI组3、6 h肺组织中CARD9 mRNA水平均高于Control组[3 h(5.572±0.722)、6 h(12.588±2.008)比(0.991±0.066)， F＝134.738， t＝15.475、14.139， P值均<0.05]，差异均有统计学意义；腺病毒干扰组3、6 h CARD9 mRNA水平均低于APALI组相同时间点[3 h(3.079±0.348)比(5.572±0.722)、6 h(7.945±1.538)比(12.588±2.008)， F＝55.899， t3 h＝7.618、 t6 h＝4.497， P值均<0.05]，差异均有统计学意义。造模后3、6 h，APALI组肺组织中NF-κB mRNA、p38MAPK mRNA水平均高于对照组[NF-κB 3 h(6.746±0.894)、6 h(15.116±1.939)比(0.973±0.076)，p38MAPK 3 h(4.422±0.369)、6 h(6.405±0.590)比(0.973±0.536)， tNF-κB＝15.766、17.849， tp38MAPK＝22.686、22.469， P值均<0.05]，差异均有统计学意义；造模后3、6 h，腺病毒干扰组的NF-κB mRNA、p38MAPK mRNA水平分别低于APALI组同时间点[NF-κB 3 h(4.002±0.543)比(6.746±0.894)、6 h(8.771±0.805)比(15.116±1.939)，p38MAPK 3 h(2.705±0.232)比(4.422±0.369)、6 h(5.372±0.401)比(6.405±0.590)， tNF-κB＝6.430、7.401， tp38MAPK＝9.969、3.351， P值均<0.05]，差异均有统计学意义。 结论:APALI大鼠肺组织中存在CARD9相关的NF-κB、p38MAPK信号通路，可通过抑制CARD9表达、减轻炎性反应对APALI发挥保护作用。

目的:探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9（caspase recruitment domain protein 9，Card9）基因多态性与急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）及生长抑素临床疗效的关系。方法:选取2019年6月至2020年5月上海市松江区中心医院就诊的86例AP患者为研究对象，同期选择健康志愿者81名为对照组，进行前瞻性队列研究。查阅国家生物技术信息中心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）核苷酸数据库，筛选Card9的10个常见单核苷酸多态性位点。SNapShot微测序法检测Card9单核苷酸多态性位点。AP患者均给予生长抑素治疗，观察Card9单核苷酸多态性与AP患者临床症状、辅助检查指标的关系。正态分布的计量资料两组间比较采用独立样本 t检验；非正态分布计量资料以 M（ Q1，Q3）表示，组间比较应用秩和检验。计数资料组间比较采用 χ2检验。 结果:AP组患者Card9 rs10870077 C>G单核苷酸多态性位点频率较健康对照组显著增加，差异有统计学意义（ OR=1.934，95% CI =1.011~3.700， P=0.046）。与CC基因型相比，Card9 rs10870077 C>G中重症AP患者生长抑素治疗组腹痛腹胀消失时间明显延长［（5.64±2.06）d与（3.76±1.23）d， t=2.98， P=0.006］，Card9 rs10870077 C>G重症AP患者生长抑素治疗组住院时间增加［（13.25±5.31）d与（9.00±3.68）d， t=1.51， P=0.170］。 结论:Card9 rs10870077 C>G是AP的易感因素，与重症AP生长抑素临床疗效的个体差异存在一定相关性。

目的:探讨巨噬细胞胱天蛋白酶募集域蛋白9(card9)在胰腺腺泡细胞导管组织转化中的作用。方法:构建3条靶向card9的小分子干扰RNA(siRNA-card9)，荧光显微镜下观察转染巨噬细胞的荧光强度，采用实时定量PCR法检测巨噬细胞card9 mRNA表达量，筛选巨噬细胞的最佳转染效率。将5×10 5巨噬细胞和100 μg/ml β葡聚糖体外常规培养12、24 h后，分成阳性细胞组(巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9 －/－巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阴性细胞组，采用蛋白质免疫印迹法检测各组巨噬细胞card9蛋白表达水平。取1×10 5巨噬细胞、1×10 5胰腺腺泡细胞加入Transwell小室上下层共培养120 h后，分为阳性细胞组(巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9 －/－巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组，取下室的胰腺腺泡细胞，采用免疫荧光化学染色法检测腺泡细胞导管组织转化标志物CK19蛋白表达。 结果:siRNA-card9转染巨噬细胞24 h荧光强度最强，浓度为200 nmol/L时抑制效率最高。阳性细胞组、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组、β葡聚糖刺激阴性细胞组培养24 h后，巨噬细胞card9蛋白表达量分别为0.81±0.05、1.46±0.05、0.42±0.06、0.46±0.06，β葡聚糖刺激阳性细胞组较阳性细胞组显著升高，差异具有统计学意义( P<0.05)。100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光较阳性细胞组明显增强，且呈β葡聚糖剂量依赖性；而阴性细胞组、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光强度均较阳性细胞组显著降低。 结论:巨噬细胞card9表达水平升高可诱导腺泡细胞导管组织转化，提示可能存在card9介导的胰腺癌发病机制。

目的:研究缺血性脑损伤小鼠脑组织中胱天蛋白酶募集域蛋白9（caspase recruitment domain protein 9,CARD9）与炎症反应的关系。方法:取24只SPF级BALB/c雄性小鼠随机(随机数字法)分成4组，即假手术组、缺血3 h组、缺血6 h组、缺血12 h组，每组6只。缺血组小鼠采用线栓栓塞法构建永久性大脑中动脉阻塞（permanant middle cerebral artery occlusion,pMCAO）模型，各组于术后预定时间点处死小鼠。通过Western blot检测患侧脑组织中CARD9水平和NF-κB的活化，RT-PCR和ELISA分别检测患侧脑组织中炎症因子TNF-ɑ、IL-lβ、IL-6 mRNA及蛋白表达量。采用SPSS 21.0软件进行统计分析，每两组间计量资料比较采用独立样本 t检验，采用Pearson相关分析比较CARD9与炎症因子之间的相关性。 结果:与假手术组相比，缺血3 h、6 h和12 h组脑组织CARD9表达均增加[（0.325±0.011） vs （0.462±0.019）, P=0.036; （0.735±0.036）, P=0.003; （0.903±0.024）, P=0.001]；与假手术组相比，缺血3 h、6 h和12 h组缺血脑组织NF-κB的活化均升高[（0.227±0.016 ) vs (0.316±0.017), P=0.041;( 0.445±0.021), P=0.016; (0.671±0.039), P=0.008]。与假手术组相比，缺血3 h、6 h和12 h组脑组织TNF-ɑ表达均增加[（0.53±0.06) vs (1.06±0.10）, P=0.009; （1.47±0.15）, P=0.004; (2.78±0.18), P=0.001]；与假手术组相比，缺血3 h、6 h和12 h组脑组织IL-lβ表达均增加[（0.55±0.07） vs （1.01±0.11）, P=0.009; （2.13±0.16）, P=0.003; （3.09±0.18）, P=0.001]；与假手术组相比，缺血3 h、6 h和12 h组脑组织IL-6表达均增加[（1.99±0.18） vs （4.10±0.41）, P=0.006; （8.54±0.84）, P=0.002; （11.56±0.96）, P=0.001]。Pearson相关分析显示CARD9与NF-κB活性、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6均存在正相关（ r=0.894, P=0.001; r=0.747, P=0.008; r=0.810, P=0.001, r=0.773, P=0.007）。 结论:小鼠缺血性脑损伤早期脑组织中CARD9与炎症反应存在正相关。

目的 研究牛至挥发油(Origanumvulgare volatile oil,OVO)抗外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,WC)的作用及机制.方法 体外实验评价OVO对白色念珠菌的抑菌效果.建立VVC小鼠模型,给予OVO干预后,检测小鼠阴道灌洗液中炎症因子含量,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色、PAS染色及扫描电镜观察阴道组织的病理变化,Western blotting检测阴道组织Dectin-1信号通路相关蛋白的表达情况.结果 在体外抑菌实验中,OVO对白色念珠菌的抑菌圈直径为(24±2)mm,最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为 1.95 mg/mL;OVO 明显抑制了白色念珠菌的生物膜形成、疏水性及黏附性(P＜0.05、0.01).在动物实验中,与模型组比较,OVO组小鼠阴道冲洗液中菌落数和肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-17、IL-22 含量显著减少(P＜0.05、0.01、0.001),阴道组织上皮角化、炎细胞浸润及真菌负荷量明显减少,阴道组织中树突状细胞相关性C型凝集素-1(dendritic cell-associated C-type lectin 1,Dectin-1)、脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,Syk)、磷脂酶-Cγ2(phospholipase-Cγ2,PLCγ-2)、胱天蛋白酶募集域蛋白 9(caspase-associated recruitment domain-containing protein 9,CARD9)、磷酸化核因子-κB p65(phosphorylated nuclear factor-KB p65,p-NF-κB p65)蛋白表达水平明显降低(P＜0.05、0.01).结论 OVO可能通过抑制小鼠阴道组织中的炎症反应来改善WC,并有望成为治疗WC感染的潜在候选药物.