胰腺癌目前总体疗效欠佳，化学治疗、靶向治疗、免疫治疗等系统性治疗是合并远处转移性胰腺癌的主要治疗手段。自吉西他滨、氟尿嘧啶在胰腺癌中奠定基石药物地位后，白蛋白紫杉醇、脂质体伊立替康等新剂型药物的应用提升了胰腺癌的治疗疗效。AG、FOLFIRINOX方案是目前转移性胰腺癌的标准一线治疗。作为FOLFIRINOX方案的优化版，NALIRIFOX方案的高质量证据得到认可，已写入最新发布的NCCN指南的一线方案。靶向治疗方面，PARP抑制剂的确切疗效为BRCA1/2突变胰腺癌患者的维持治疗提供了更优策略，KRAS G12C抑制剂的成功问世为相应突变的晚期胰腺癌患者及KRAS其他突变位点的药物研发带来了曙光和信心。免疫治疗是当前肿瘤研究的重要突破方向，具体方式包括将免疫冷肿瘤变成免疫热肿瘤，扩大免疫检查点抑制剂的适用人群；另一方面则是寻找新兴的免疫疗法，如CAR-T疗法、TCR-T疗法、mRNA疫苗等。诸多的深入探索和创新疗法为晚期胰腺癌患者带来了生存希望，临床医师应和基础医学专家、药物研发科学家密切协作，加速新药或新疗法在胰腺癌这一难治性肿瘤中的开发与应用。

目的:研究突变型RAB39B基因的表达水平及RAB39B对细胞自噬水平和α-突触核蛋白的影响，并初步探索RAB39B基因c.536dupA突变在帕金森病发病机制中的作用。方法:基于前期发现由RAB39B基因新的突变c.536dupA导致青少年型帕金森综合征家系的工作背景，构建含有RAB39B基因c.536dupA突变型的重组表达质粒（pcDNA3.1-HA-RAB39B-536），与RAB39B野生型重组表达质粒（pcDNA3.1-HA-RAB39B），利用脂质体法将重组表达质粒转染至N2a细胞培养作为实验组。对照组为接受pcDNA3.1-HA转染的N2a细胞。利用实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白质印迹、免疫荧光及免疫共沉淀等技术来明确突变型RAB39B的表达水平及RAB39B对自噬功能和α-突触核蛋白的影响。结果:在N2a细胞模型中，突变型RAB39B的转录水平约为野生型RAB39B的2倍，而突变型RAB39B的蛋白水平（0.30±0.00）明显低于野生型（1.50±0.25， t=8.313， P<0.05），加入蛋白酶体抑制剂MG132后突变型RAB39B蛋白水平有所升高（0.70±0.10， t=6.925， P<0.05）；RAB39B基因突变组的微管相关蛋白1轻链3BⅡ/Ⅰ值（3.11±0.30）显著低于野生组（7.03±0.20， t=18.831， P<0.05）；过表达野生型和突变型的RAB39B不影响内源性α-突触核蛋白水平，而过表达野生型的RAB39B会导致外源性的野生型和突变型（p.A53T）α-突触核蛋白水平升高[野生型：由0.60±0.11上升至1.25±0.08， t=8.254， P<0.05；突变型：由0.55±0.08上升至1.15±0.08， t=9.293， P<0.05]。 结论:RAB39B基因c.536dupA突变型蛋白稳定性下降，突变型蛋白可能通过泛素-蛋白酶体通路降解，且该突变可能影响细胞的自噬水平；RAB39B蛋白可能与α-突触核蛋白存在体内相互作用关系，可能参与α-突触核蛋白的稳态水平的维持。

目的:探讨铁死亡在重症急性胰腺炎(SAP)诱发急性肾损伤(AKI)的作用及其机制。方法:胰腺炎建模后24 h，将36只SD大鼠(购自青岛大学医学部实验室动物中心)采用完全随机分组法分为3组( n＝12)：假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1干预组(SAP＋Fer组)。建立SAP模型24 h后，检测血清淀粉酶(AMY)、肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN)水平；检测肾组织中铁含量、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)变化及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)活性；苏木精-伊红(HE)染色观察胰腺和肾脏组织学改变；透射电镜(TEM)观察铁死亡的形态学特征；蛋白质印迹法(Western blot)、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光染色等方法分析长链脂酰CoA合成酶4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和铁蛋白重链1(FTH1)等铁死亡相关蛋白和基因的表达。组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用LSD- t检验。 结果:SAP组大鼠血清AMY[(6 276.5±562.2)比(1 086.6±192.3) U/L]、Cr[(98.0±16.2)比(19.5±5.2) μmol/L]、BUN[(17.1±2.8)比(7.2±1.7) mmol/L]水平明显高于SO组( t＝30.314、15.927、10.375， P值均<0.01)，差异均有统计学意义；肾组织铁[(0.65±0.13)比(0.44±0.12) mg/g]、MDA[(7.25±0.81)比(1.84±0.24) μmol/g]、ROS[(68.54±7.04)比(15.67±5.21)×10 4/mg]高于SO组( t＝3.855、22.167、11.496， P值均<0.01)，GSH[(358.38±41.59)比(518.64±55.72) nmol/g]和GPX4[(7.75±1.09)比(14.72±2.56) U/mg]明显低于SO组( t＝7.984、8.674， P值均<0.01)，差异有统计学意义；胰腺和肾组织病理损伤程度增加；线粒体出现明显萎缩；肾脏ACSL4蛋白(0.84±0.03比0.34±0.02)表达高于SO组( t＝7.876, P<0.01)，GPX4、FTH1蛋白(0.69±0.03比1.04±0.06、0.26±0.02比0.83±0.04)表达低于SO组( t＝5.651、8.134， P值均<0.01)，差异有统计学意义；ACSL4、铁响应元件结合蛋白2(IREB2) mRNA(0.87±0.06比0.24±0.03、1.23±0.05比0.32±0.02)表达高于SO组( t＝12.864、15.163， P均<0.01)，差异有统计学意义。SAP＋Fer组大鼠血清AMY[(5 124.3±483.5)比(6 276.5±562.2) U/L]、Cr[(55.2±13.7)比(98.0±16.2) μmol/L]、BUN[(9.8±2.1)比(17.1±2.8) mmol/L]水平显著低于SAP组( t＝5.287、6.989、7.359， P值均<0.01)，差异有统计学意义；肾组织铁[(0.54±0.07)比(0.65±0.13) mg/g]、MDA[(4.67±0.73)比(7.25±0.81) μmol/g]、ROS[(28.39±6.36)比(68.54±7.04)×10 4/mg]低于SAP组( t＝2.639、7.176、8.247， P值均<0.05)，GSH[(448.21±45.51)比(358.38±41.59) nmol/g]和GPX4[(11.31±1.89)比(7.75±1.09) U/mg]高于SAP组( t＝5.048、5.639， P值均<0.01)，差异有统计学意义；胰腺和肾组织病理损伤程度减轻；线粒体轻度萎缩；肾脏ACSL4蛋白(0.49±0.02比0.84±0.03)表达低于SAP组( t＝2.781， P<0.05)，GPX4、FTH1蛋白(0.69±0.03比1.04±0.06、0.26±0.02比0.83±0.04)表达高于SAP组( t＝2.427、2.876， P值均<0.05)，差异有统计学意义；ACSL4、IREB2 mRNA(0.52±0.04比0.87±0.06、0.74±0.04比1.23±0.05)表达低于SAP组( t＝5.843、6.781， P值均<0.01)，差异均有统计学意义。 结论:铁死亡参与SAP引起的AKI，抑制铁死亡能改善肾功能，减轻肾组织脂质过氧化和病理损伤。

目的:探究BHLHE40能否通过靶向高迁移率族蛋白A2（HMGA2）激活氧化磷酸化（OXPHOS）通路进而影响甲状腺癌细胞对顺铂的敏感性。方法:通过在线数据库TCGA-甲状腺癌和hTFtarget分析HMGA2及上游转录因子BHLHE40在甲状腺癌组织中的mRNA表达情况。采用脂质体转染法将si-HMGA2、oe-HMGA2、oe-BHLHE40以及阴性对照si-NC、oe-NC转染至甲状腺癌细胞K1和SW579中，通过实时荧光定量PCR检测BHLHE40和HMGA2在甲状腺癌细胞SW579、FTC-133、K1和正常甲状腺细胞Nthy ori3-1中的mRNA表达水平，采用MTT法检测细胞活力，CCK-8法计算顺铂半抑制浓度（IC 50）值，流式细胞术检测细胞凋亡水平，蛋白质印迹法检测OXPHOS复合体的表达，Seahorse XFe 96分析细胞的耗氧率。双荧光素酶报告实验和染色质免疫沉淀实验分析BHLHE40与HMGA2的结合关系。 结果:TCGA数据库结果表明，HMGA2和BHLHE40 mRNA在甲状腺癌组织中的表达（10.57±2.58、13.89±1.13）均较甲状腺正常组织高（4.82±1.69、12.28±1.01），差异均具有统计学意义（ t=16.69， P<0.001； t=10.43， P<0.001）。实时荧光定量PCR结果发现，正常甲状腺细胞Nthy ori3-1、甲状腺癌细胞SW579、FTC-133和K1中HMGA2 mRNA相对表达量分别为1.00±0.13、2.94±0.23、4.71±0.41和6.29±0.49，BHLHE40 mRNA相对表达量分别为1.00±0.12、2.60±0.23、3.39±0.35和6.18±0.51，差异均具有统计学意义（ F=130.50， P<0.001； F=125.20， P<0.001）。进一步两两比较发现，与正常甲状腺细胞相比，甲状腺癌细胞中HMGA2和BHLHE40 mRNA的表达水平均显著升高（均 P<0.001）。MTT法检测显示，与si-NC组相比，si-HMGA2处理显著降低了K1细胞的细胞活力（均 P<0.05），oe-HMGA2处理相对于oe-NC组显著增加了SW579细胞的细胞活力（均 P<0.05）；与oe-NC+DMSO组相比，oe-HMGA2+DMSO组SW579细胞的细胞活力增强，而OXPHOS通路抑制剂Gboxin能够逆转过表达HMGA2对细胞活力的影响（均 P<0.05）。流式细胞术和CCK-8实验结果显示，与si-NC组（凋亡水平：6.19%±0.28%；顺铂IC 50值：17.47 μmol/L）相比，敲低HMGA2能增加K1细胞的凋亡水平（11.96%±0.32%； t=19.17， P<0.001）和顺铂敏感性（IC 50值：1.49 μmol/L）；与oe-NC组（凋亡水平：9.98%±0.32%；顺铂IC 50值：8.17 μmol/L）相比，过表达HMGA2显著降低了SW579细胞凋亡水平（4.32%±0.25%； t=19.65， P<0.001）和顺铂敏感性（IC 50值：34.95 μmol/L）。双荧光素酶报告实验结果发现，与si-NC组相比，在人肾上皮细胞293T细胞中敲低BHLHE40的表达显著降低野生型HMGA2的荧光素酶活性（0.31±0.02比1.00±0.11； t=10.69， P=0.004），但对于突变型HMGA2的荧光素酶活性没有显著性影响（1.06±0.11比1.00±0.07； t=0.80， P=0.470）。染色质免疫沉淀实验结果显示，与IgG组（1.00±0.10）相比，anti-BHLHE40组K1细胞的HMGA2 mRNA表达水平显著增加（6.57±0.62； t=15.36， P<0.001）。与oe-NC+DMSO组相比，oe-HMGA2+DMSO组SW579细胞凋亡水平（ P<0.05）和顺铂敏感性均降低，OXPHOS复合体Ⅰ~Ⅴ表达显著增强，细胞耗氧率升高（均 P<0.05），oe-HMGA2+Gboxin处理可逆转过表达HMGA2的影响（均 P<0.05）。回复实验表明，与oe-NC+si-NC组相比，过表达BHLHE40后SW579细胞的细胞活力和OXPHOS复合体Ⅰ~Ⅴ的表达增强，细胞耗氧率和顺铂IC 50值显著增加，细胞凋亡水平下降（均 P<0.05）；而同时敲低HMGA2可逆转过表达BHLHE40的影响（均 P<0.05）。 结论:BHLHE40可通过靶向调控HMGA2的表达激活氧化磷酸化通路，进而影响甲状腺癌细胞对顺铂的敏感性。

目的 探究槲皮素(quercetin,Que)对Erastin诱导的软骨细胞铁死亡模型中铁死亡的影响及可能的机制.方法 使用Erastin诱导C28/I2软骨细胞铁死亡模型.采用不同浓度的Que处理C28/I2软骨细胞,分别用MTT法检测细胞活性,LDH法检测细胞毒性.Western blot检测软骨细胞Prdx6和铁死亡相关蛋白ACSL4、GPX4的表达水平.流式细胞术检测软骨细胞脂质ROS的产生情况.RH123染色法检测软骨细胞线粒体膜电位的变化情况.RT-qPCR检测软骨细胞Prdx6 mRNA表达水平.免疫荧光染色法观察铁死亡相关蛋白ACSL4、GPX4的表达变化情况.结果 与Erastin诱导的铁死亡模型组相比,Que可以明显提高C28/I2软骨细胞活性,降低细胞毒性.降低铁死亡相关蛋白ACSL4的表达,升高GPX4的表达.同时抑制软骨细胞脂质ROS的产生,并增强其线粒体膜电位.此外,与Control组相比,Erastin组Prdx6的表达明显降低,而使用Que可以上调Prdx6的表达.同时,在使用Prdx6的抑制剂MJ33后,Que对软骨细胞铁死亡的抑制作用下降.结论 Que可以抑制Erastin诱导的C28/I2软骨细胞铁死亡,并可能通过上调Prdx6抑制软骨细胞铁死亡,从而发挥保护软骨细胞的作用.

近年研究表明，脂肪酸结合蛋白（fatty acid binding protein，FABP）不仅参与脂质代谢，还具有许多其他生物学功能，包括调控疼痛的产生与发展。FABP参与疼痛调控的机制十分复杂，文章就FABP的结构与功能、对疼痛的影响及相关调控机制以及FABP抑制剂的应用与效果进行总结。不同亚型FABP结构各异，调节疼痛的机制也不尽相同，主要通过激活疼痛相关受体，调节大麻素等疼痛相关分子的代谢影响炎症信号通路，进而影响痛觉的发生与发展。而抑制FABP的功能也成为镇痛药物研发的新靶点，FABP的抑制剂应运而生，并在动物模型中取得了一定的镇痛成效，为开发潜在镇痛靶点提供新方向。

目的:探讨卡格列净对射血分数保留型心力衰竭（HFpEF）大鼠心功能的影响及其对铁死亡机制的调控作用。方法:选取32只7周龄Dahl盐敏感大鼠，随机分为对照组（予低盐饲料）、HFpEF组（予高盐饲料）、卡格列净20组（予高盐饲料+卡格列净20 mg·kg -1·d -1）和卡格列净30组（予高盐饲料+卡格列净30 mg·kg -1·d -1），每组8只，监测各组大鼠体重、血压，于实验第10周行代谢笼检测，于实验第12周行超声心动图检查后处死大鼠，留取血液及左心室标本行HE染色、Masson染色、普鲁士蓝铁染色和活性氧染色，分别在光学显微镜下观察心肌细胞大小和形态、间质纤维化程度、铁染色及活性氧生成情况。另取切片在电子显微镜下观察心肌细胞超微结构，并应用Western blot法及实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测各组大鼠左心室心肌组织中铁死亡相关指标的蛋白及mRNA表达水平。 结果:适应性饲养1周后各组大鼠均全部存活。代谢笼结果示，与对照组相比，HFpEF组、卡格列净20组和卡格列净30组大鼠进食量、进水量及排尿量更多，体重较低（ P均<0.05）；这些变化在卡格列净20组和卡格列净30组比HFpEF组更显著；卡格列净20组与卡格列净30组相比，只有12周体重组间差异有统计学意义（ P<0.05）。HFpEF组大鼠第6、12周血压及第12周全心重量、左心室校正质量较对照组、卡格列净20组和卡格列净30组高，而第12周二尖瓣舒张早期最大峰值速度与舒张晚期最大峰值速度比值较低（ P均<0.05）。HE染色、Masson染色结果示，与对照组比较，HFpEF组大鼠左心室心肌组织心肌纤维排列紊乱、细胞直径大［（0.032±0.004）mm比（0.023±0.003）mm， P<0.05］，且形态欠规则、间质胶原纤维增生明显、胶原容积分数较高（0.168±0.028比0.118±0.013， P<0.05）。与HFpEF组相比，卡格列净20组和卡格列净30组大鼠左心室心肌组织心肌纤维排列较整齐，心肌细胞形态较规则，细胞直径较小，胶原容积分数较低（ P均<0.05）。电镜下观察到，与对照组相比，HFpEF组大鼠心肌组织中大部分横纹肌发生断裂，Z线和M线不能明显区分，出现线粒体部分肿胀、膜增厚、嵴减少甚至消失等变化。卡格列净20组和卡格列净30组大鼠心肌组织横纹肌排列趋于规整，线粒体形态变化较轻。普鲁士蓝铁染色结果示，HFpEF组大鼠心肌组织中铁含量较对照组、卡格列净20组和卡格列净30组高。活性氧染色结果示，HFpEF组大鼠心肌组织中活性氧含量较对照组、卡格列净20组和卡格列净30组高。心肌组织生化示，HFpEF组大鼠心肌组织中Fe 2+含量、丙二醛含量较对照组、卡格列净20组和卡格列净30组高，而谷胱甘肽含量较低（ P均<0.05）。Western blot法和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测结果示，与对照组比较，HFpEF组大鼠心肌组织中转铁蛋白受体1（蛋白相对表达量：1.37±0.16比0.31±0.12）、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（蛋白相对表达量：1.31±0.15比0.63±0.09）蛋白及mRNA表达水平较高，铁蛋白重链1（蛋白相对表达量：0.45±0.08比1.41±0.15）蛋白及mRNA表达水平较低（ P均<0.05）；上述指标在卡格列净20组与卡格列净30组间差异均无统计学意义（ P>0.05）。4组大鼠心肌组织中谷胱甘肽过氧化物酶4蛋白及mRNA表达水平差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:卡格列净通过调控铁死亡机制改善HFpEF大鼠心功能。

目的:探究低剂量柳氮磺吡啶（SAS）对结直肠癌细胞的放疗增敏作用。方法:CCK-8检测不同浓度SAS对结直肠癌细胞的增殖抑制作用，采用凋亡、自噬等抑制剂联合SAS处理结直肠癌细胞，CCK-8法比较细胞活力。采用锥虫蓝染色、平板克隆形成、细胞生长曲线等实验评价低浓度SAS联合放疗对结直肠癌细胞的体外放疗增敏作用。通过检测细胞内脂质过氧化物、铁死亡蛋白标志物（GPX4、PTGS2）等，探究低浓度SAS联合放疗对细胞铁死亡的促进作用。利用小鼠皮下移植瘤模型，明确SAS的体内放疗增敏效应。结果:高浓度SAS可诱导结直肠癌细胞凋亡与铁死亡。低浓度SAS增强结直肠癌细胞放疗敏感性，该效应可被铁死亡抑制剂（Fer-1）阻断。低浓度SAS联合放疗显著增加细胞内脂质过氧化物含量与PTGS2表达，降低GPX4表达。皮下移植瘤模型中SAS亦显示显著的放疗增敏效应。结论:低浓度SAS通过铁死亡途径增强结直肠癌细胞放疗敏感性。

目的:探讨肾移植术后消化道毛霉菌感染继发重症肺炎的临床诊断和治疗。方法:回顾性分析1例肾移植术后侵袭性真菌感染合并肺部感染的临床资料，并复习国内外相关文献。受者因尿毒症接受肾移植术，手术顺利，供肾来自脑死亡后器官捐献。受者于术后1个月余，自觉进食后上腹部疼痛，服用质子泵抑制剂不能自行缓解。入院后行胃镜检查提示：胃体部黏膜病变性质待定。病理检查及PAS染色最终证实为毛霉菌。结果:明确病情后，减少他克莫司＋吗替麦考酚酯＋泼尼松三联免疫抑制方案用量，必要时停用免疫抑制药物，使用两性霉素B脂质体＋泊沙康唑，消化道症状明显缓解，继发胸闷、发热、活动后气促，诊断为肺部感染。根据痰培养药敏结果予以美罗培南＋利奈唑胺抗菌治疗，降阶梯给药，最终于住院后45 d病情明显好转、出院，移植肾功能稳定。结论:肾移植后消化道毛霉菌感染合并肺部感染罕见，应积极寻找病原学证据、寻求多学科会诊明确诊断，同时经验性抗感染治疗；要注意抗感染治疗导致的二重感染，及时调整抗感染治疗策略和基于免疫监测的免疫抑制剂用量。

目的:探讨miR-497通过靶向调节Yes相关蛋白1（Yes-associated protein 1，YAP1）表达对甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）细胞生物学行为的影响。方法:将人PTC细胞株TPC-1细胞分为对照组、miR-497组、si-YAP1组和miR-497+si-YAP1组，采用LipofectamineTM3000脂质体转染，荧光素酶报告实验验证miR-497和YAP1靶向关系。MTT法检测各组细胞增殖活性，流式细胞仪分析细胞凋亡率，Transwell检测侵袭细胞数，划痕实验检测细胞迁移率。Western blot检测细胞周期素D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）和活化的半胱天冬酶3（cleaved Caspase-3）表达。采用SPSS 22.0分析数据，正态分布计量资料以均数±标准差（ ± s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两组间比较采用SNK-q。 结果:与对照组比，miR-497组和si-YAP1组细胞YAP1 mRNA和蛋白表达下降（ q=14.682、14.597，23.743、23.571； P<0.05），细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降（ q=4.724、4.568、3.841，4.216、3.952、3.274； P<0.05），凋亡率升高（ q=3.783、4.336， P<0.05），CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降（ q=5.823、5.981、6.036、6.485，5.934、6.110、6.573、6.614； P<0.05），TIMP-1蛋白表达升高（ q=6.071、6.148， P<0.05）；与si-YAP1组相比，miR-497+si-YAP1组细胞miR-497水平升高（ q=14.726， P<0.05），YAP1 mRNA和蛋白表达下降（ q=3.089、3.126， P<0.05），细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降（ q=2.654、2.537、2.246， P<0.05），凋亡率升高（ q=2.875， P<0.05），CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降（ q=4.371、4.365、4.383、4.368， P<0.05），TIMP-1蛋白表达升高（ q=4.275， P<0.05）。 结论:miR-497可靶向负调控YAP1表达，抑制TPC-1细胞增殖、侵袭和迁移。